交叉听力对豚鼠听性脑干反应测试的影响

报告对８只听觉正常的及鼠，观察交叉听力对其耳蜗动作电位和听怀脑干反应测试结果的影响。先手术造成其左耳全聋，然后用四种方法分别记录ＡＢＲ反应阈和Ⅰ波潜伏期。结果发现，术耳虽已全聋，但该侧给声强度达１０ｄＢＨＬ以上时仍可记录到ＡＢＲ，而ＡＰ未能引出，代之出现的却是清晰的ＡＢＲ波形。     

苯巴比妥对豚鼠听觉间隔响应的影响

目的 探讨苯巴比妥(pentobarbital,PB)对豚鼠下丘(inferior colliculus,IC)和听皮层(auditory cortex,AC)间隔响应阈值、幅值及潜伏期的影响.方法 在豚鼠IC和AC分别埋植慢性电极,比较清醒和两种剂量(20 mg/kg和40 mg/kg)PB麻醉状态下的间隔响应阈值、幅值和潜伏期.结果 PB使间隔响应阈值升高,其中对AC的影响大于IC.在IC,只有大剂量PB使间隔响应阈值升高;而在AC,两种剂量PB均使间隔响应阈值升高.PB还对豚鼠IC和AC阈上间隔响应的潜伏期和幅值产生不同的影响.结论 PB可降低豚鼠以间隔响应阈值为代表的时间分辨率.     

神经营养素-3对豚鼠耳蜗传入神经元兴奋毒性损伤的保护作用

目的 观察谷氨酸（glutamate，Glu）致豚鼠耳蜗Ⅰ型螺旋神经节细胞兴奋毒性损伤后，耳蜗局部应用神经营养素-3（neurotrophin-3，NT-3）对Ⅰ型螺旋神经节细胞的保护作用及对复合动作电位（CAP）反应阈的影响。方法 28只豚鼠左耳安置圆窗电极检测CAP的变化。然后分为NT-3组（实验组5只）、Glu组（实验对照组8只）、Hank’s液组（HBSS组）（正常对照组5只）、Blank组（空白对照组10只），前三组分别在药物灌注术后1天及4周测CAP反应阈，术后4周处死，Blank组术后1天测CAP反应阈后处死，观察Ⅰ型螺旋神经节细胞和神经纤维的显微和超微结构变化。结果 NT-3组、Glu组术后1天CAP反应阈明显增高，NT-3组术后4周CAP反应阈明显降低，与HBSS组及Blank组比较均有显著性差异（P〈0．01）；术后4周NT-3组Ⅰ型螺旋神经节细胞数目的减少幅度明显小于Glu组（P〈0．01），NT-3组与HBSS组和Blank组相比细胞数有显著差异（P〈0．01）。HBSS组与Blank组相比，细胞数、CAP反应阈和组织学改变均无显著差异（P〉0．05）。结论 经外淋巴腔灌注谷氨酸能导致豚鼠耳蜗CAP反应阈提高和Ⅰ型螺旋神经节细胞死亡。耳蜗兴奋性损伤发生后60分钟，局部应用NT-3（15μg／ml）可减轻谷氨酸对耳蜗螺旋神经节细胞兴奋性毒性损伤，提示NT-3可用于神经性耳聋的治疗。     

HO-1在顺铂诱导豚鼠螺旋神经元损伤中的作用

目的检测血红素加氧酶-1在豚鼠耳蜗螺旋神经节顺铂损伤后的表达变化。方法通过免疫组织化学及Western Blot技术,观察耳蜗螺旋神经元损伤后HO-1在不同组间的表达变化。将32只健康豚鼠随机分为4组,每组8只。A组对照组:按体重以0.9%生理盐水12ml/kg腹腔注射,早晚各一次,持续3天。B组顺铂组:按体重12mg/kg顺铂腹腔注射(IP),早晚各一次,持续3天。C组阿魏酸(FA)+顺铂组:先150mg/kg FA腹腔注射预处理1h,再以12mg/kg顺铂IP,早晚各一次,持续三天。D组FA+锌原卟啉Ⅸ(ZnppⅨ)+顺铂组:同时给予150mg/kg FA+ZnppⅨ15umol/kg IP预处理1h,再以12mg/kg顺铂IP,早晚各一次,持续三天。采用免疫组织化学及Wstern Blot技术检测不同组间螺旋神经元HO-1蛋白表达变化。结果在不同的分组中,HO-1在耳蜗螺旋神经节中表达量不同。空白组中,螺旋神经节组织存在微弱的HO-1表达,其蛋白表达量为0.48±0.07;A组蛋白表达量为0.81±0.07,B组蛋白表达量为0.9±0.05,C组蛋白表达量为0.61±0.07。4个组两两间差异均有统计学意义(p<0.0001)。结论 HO-1在C组中表达量最多,B组次之,D组最少,表明HO-1可能参与顺铂损伤螺旋神经元后的修复过程。     

急性缺氧对豚鼠40Hz听觉相关电位的影响

目的：探讨急性缺氧条件下豚鼠40Hz听觉相关电位的改变。方法：利用气管持管辅助呼吸并给予不同浓度低氧气体建立动物模型,观察在不同程度的急性缺氧条件下,豚鼠40Hz听觉相关电位的改变,结果轻度缺氧条件下40Hz听觉相关电位各项参数无明显改变,加重缺氧则其阈值升高,各波平均振幅降低,P1波潜伏期延长,结论：40Hz听觉相关电位在轻度缺氧条件下比较稳定,这可能与40Hz听觉相关电位本身的特性有关,严重缺氧则表现为抑制。     

谷氨酸-天冬氨酸转运体在豚鼠耳蜗的分布

目的研究谷氨酸-天冬氨酸转运体(glutamate—aspartate transporters，GLAST)在正常豚鼠耳蜗内的分布，为探讨GLAST在防止耳蜗谷氨酸(Glu)神经毒性中的作用提供形态学基础。方法选取健康红目豚鼠6只，采用免疫组织化学方法，以山羊抗GLAST抗体为标记物，观察正常豚鼠耳蜗中GLAST的表达及分布。结果在正常豚鼠耳蜗的内、外毛细胞，内、外毛细胞周围的支持细胞，螺旋神经节细胞，血管纹边缘细胞和螺旋缘上皮，均有GLAST阳性表达。结论GLAST在正常豚鼠耳蜗内主要分布于内、外毛细胞，内、外毛细胞周围的支持细胞，螺旋神经节细胞、血管纹边缘细胞和螺旋缘上皮，其功能尚需进一步的研究。     

葛根对老年豚鼠听功能的保护作用

目的 观察葛根是否对老年豚鼠听功能具有保护作用.方法 选取16只28～30月龄豚鼠,随机分为用药组和对照组,每组8只.用药组豚鼠皮下注射葛根提取液2 g·kg~(-1)·d~(-1),对照组使用等量生理盐水注射,共8周.观察两组豚鼠用药前及用药结束后ABR反应阈的变化;应用基底膜荧光染色铺片比较两组动物基底膜的变化.结果 注射葛根后用药组ABR反应阈提高4.84±3.28 dB,较对照组(11.12±3.72 dB)明显减少(P<0.05),基底膜荧光染色铺片显示用药组毛细胞缺失数目较对照组减少.结论 葛根对老年豚鼠听功能具有保护作用.     

急性高胆红素血症对豚鼠周围听觉系统影响的形态学研究

目的 探讨急性高胆红素血症豚鼠周围听觉系统损伤的形态学特征.方法 选择正常幼年豚鼠30只,随机分成对照组、低剂量组和高剂量组,每组10只.低剂量组和高剂量组分别腹腔给予胆红素100μg/g和200μg/g,建立急性高胆红素血症豚鼠动物模型,对照组腹腔注射等量生理盐水,观察各组实验动物的行为改变及毛细胞和螺旋神经节等结构的形态学变化.结果 高剂量组的豚鼠行为明显异常,出现严重运动障碍,本能运动缺乏,翻正反射明显减弱.甚至出现角弓反张和濒死呼吸;低剂量组豚鼠同样有类似的异常表现,但程度稍轻.各组的耳蜗毛细胞无明显变化,螺旋神经节细胞结构基本正常,其间穿行神经纤维髓鞘致密完整,轴索未见明显异常.结论 急性高胆红素血症对耳蜗毛细胞、螺旋神经节等周围听觉系统损害轻微,提示可能主要损伤蜗后结构.     

电针耳穴对年龄相关性听力损失豚鼠听觉中枢β－catenin表达的影响

目的：探讨电针耳穴对D －半乳糖所致的年龄相关性听力损失豚鼠模型听觉中枢β－链蛋白（β－catenin）表达的影响。方法取3月龄豚鼠30只,随机分成三组：D －半乳糖模型组、D －半乳糖＋电针组和对照组,每组各10只;18月龄豚鼠10只作为自然老化组。D－半乳糖模型组给予D －半乳糖（300 mg · kg －1· d－1）颈背部皮下注射,每天1次,连续6周;对照组给予等量生理盐水注射相同部位、相同频次、持续相同时间;D －半乳糖＋电针组给予相同剂量的D －半乳糖颈背部皮下注射,30 min后给予电针听宫穴和翳风穴治疗15分钟,每日1次,共6周。自然老化组豚鼠常规饲养。上述实验结束后采用蛋白质印迹（Western blot）方法检测四组豚鼠下丘和听皮层β－catenin蛋白的表达变化。结果①与对照组相比,D－半乳糖模型组和自然老化组豚鼠下丘β－catenin蛋白表达量下降;与D－半乳糖模型组相比,D －半乳糖＋电针组下丘β－catenin蛋白表达量增加;②D －半乳糖模型和自然老化组豚鼠听皮层β－catenin蛋白表达量下降,D－半乳糖＋电针组其表达量增加。结论β－catenin蛋白可能通过Wnt／β－catenin信号通路,调控细胞生长、分化及凋亡,参与下丘和听皮层的老化过程;电针听宫穴和翳风穴可能通过增加下丘和听皮层β－catenin蛋白表达,经Wnt／β－catenin信号通路延缓豚鼠年龄相关性听力损失的发生。     

P0蛋白免疫豚鼠的听力学研究

目的:探讨内耳纯化PO蛋白免疫豚鼠的听力学变化.方法:制备纯化内耳PO蛋白.分析20只经内耳纯化PO蛋白免疫后豚鼠的ABR、听神经动作电位(CAP)、畸变产物耳声发射(DPOAE)的检查结果.结果:20只动物经PO蛋白免疫后死亡4只,余16只(32耳)动物中,7耳(22%,7/32)出现ABR反应阈升高,波Ⅰ、Ⅲ潜伏期及Ⅰ-Ⅲ、Ⅰ-Ⅳ波间期明显延长(P<0.01),但Ⅲ-Ⅳ间期无明显变化;CAP(N1)幅值均有不同程度的下降,潜伏期延长(P<0.01));POAE各频率的幅值无明显改变,对侧白噪声抑制效应存在,有减弱的趋势,但与对照组无明显差异(P>0.05).结论:纯化的内耳P0蛋白是内耳重要的自身抗原之一,可导致部分豚鼠的听神经和内耳出现自身免疫性疾病.     

间隔标记信号带宽和强度对豚鼠下丘间隔反应的影响

目的探讨间隔检测中间隔标记信号的带宽和强度对豚鼠下丘间隔反应阈值的影响。方法经豚鼠下丘埋植金属电极，记录4种带宽间隔标记信号和3个强度下的间隔反应，得出间隔阈值。结果与以往行为实验结果类似，相同声音强度下，豚鼠下丘的间隔反应阈值随着间隔标记信号带宽的增加而下降。例如在85dBSPL时，0．5～8kHz，0．5～16kHz及0．5～32kHz带宽下的间隔反应阈值分别为1．35±0．32ms，1．33±0．33ms及1．17±0．44ms。但是在最高频段（16～32kHz）和线性等带宽低频段（0．5～16kHz），间隔反应阈值未见显著差异，提示高频段的时间分辨可能与低频段相当。相同间隔标记带宽下，声音强度愈低，间隔反应阈值愈大；但仅在最低频段（0．5～8kHz）声音强度效应具有显著性意义。结论豚鼠下丘的间隔反应阈值主要决定于间隔标记信号的总带宽而非频带位置；信号强度也对该阈值有一定影响。     

Immunocytochemical detection of peptides in the guinea pig cochlea

Summary The cochleae of juvenile guinea pigs were investigated for the presence of several neuropeptides. Glucagon, insulin, CCK and -endorphin immunoreactive neurons and nerve fibers as well as hair cells were demonstrated by the peroxidase antiperoxidase technique. Small amounts of substance P were also found in different sites in the inner ear. In contrast, prolactin-like material could not be found at all. These findings have significance with regard to the putative role of neuropeptides in neuromodulation.     

Math1基因内耳导入后噪声性聋豚鼠听功能改变观察

目的观察Math1基因内耳导入对噪声性聋豚鼠听功能的影响,探讨Math1基因过表达对噪声损伤耳蜗的生物学效应,为内耳基因治疗提供实验基础和理论依据。方法经脉冲噪声致聋的豚鼠45只（各频率ABR阈值均≥95dB SPL）,雌雄不限,实验开始时体草250～300g。随机分为3组：Ad—Math1-EGFP组（30只）;Ad—EGFP组（5只）;空白组（10只）。各组豚鼠在基因转导后4周、8周分别测试双耳ABR。测试完毕后处死动物,观察听泡及耳蜗尤炎性病变者记录听阈结果。结果Math1导入后4周,导入耳各频率ABR阈值低于对照耳（右耳）,也低于Ad—EGFP组及空内组,平均达到85dBSPL。Math1导入后8周,导入耳各频率ABR阂值低于对照耳（右耳）,也低于Ad—EGFP组及空白组,与4周时比较,进一步好转,平均达到75dB SPL。结论Math1基因内耳导入可使噪声导致全聋的豚鼠听功能部分恢复,为噪声性聋的治疗打开了新的思路和手段。     

An anionic charge barrier in the guinea pig cochlea

Summary A charge barrier has been found in the the glomerular basement membrane of the kidney and plays an important role in the filtration of solutes. In the present study, we used electron microscopy to localize anionic sites of a similar charge barrier in the guinea pig cochlea. Polyethyleneimine (PEI) was used as a cationic marker to detect anionic sites. Our results showed a localization of PEI with regular interspaces, indicating the anionic sites to the charge in the capillary basement membrane of the stria vascularis and the spiral ligament, and in the basal lamina of Reissner's membrane and the spiral prominence. This charge barrier, as well as structural size barrier, may play an important role in the maintenance of normal inner ear functions.     

A comparative study on the effect of pure-tone exposure of the guinea pig cochlea

Electrophysiological methods were applied to 160 healthy adult male guinea pigs in order to investigate the effects of pure-tone exposure for 24 h on the inner ear. A reduction in cochlear microphonics (CM), action potential (AP) and endocochlear potential was observed following exposure to 110 dB at 100 Hz, 100 dB at 200 and 600 Hz and 95 dB at 2 kHz. The observed K⁺ endolymphatic concentration during 40 min anoxia remained unchanged. In contrast K+ decreased in control animals and following exposure to pure tones varying from 110 dB at 60 Hz to 85 dB at 2 kHz. These findings indicate that high frequency tones have a greater effect on inner ear functions than those of lower frequency, decreasing the maximum output voltage of CM and AP but not changing K⁺ endolymphatic concentration.     

钙蛋白酶在卡那霉素致毒豚鼠耳蜗中的表达

目的探讨钙蛋白酶(calpain)在卡那霉素(kanamycin,KM)致耳中毒豚鼠耳蜗的表达。方法将豚鼠随机分成对照组、KM 3d组、KM 7d组和KM1 4d组,应用免疫组织化学SABC(streptavidin-biotin peroxidae complex,链霉亲合素-生物素过氧化物酶复合物)法和显微图像分析技术检测耳蜗中钙蛋白酶的表达,用药前后给予短纯音刺激检测听性脑干反应阈值,观察豚鼠听力的变化。结果对照组calpain 1阳性免疫反应主要见于耳蜗毛细胞、螺旋神经节、血管纹和螺旋韧带,以螺旋神经节的染色较深,而其它部位均呈阴性。肌肉注射KM后,calpain 1在耳蜗中的阳性反应部位与对照组大致相同,显微图像分析结果表明,随着给药天数的增加,calpain 1在耳蜗上述部位的阳性反应逐渐减弱。Calpain 2在各组豚鼠耳蜗中的表达部位与calpain 1的相同,显微图像分析结果提示,随着给药天数的增加,calpain 2在耳蜗上述部位的阳性反应逐渐增强。结论正常豚鼠耳蜗中有calpain 1和calpain 2的表达。注射KM后,随着给药天数的增加,calpain 1在耳蜗的表达逐渐减弱,而calpain 2的表达则逐渐增强,提示calpain 2可能参与了卡那霉素致耳中毒的过程。     

豚鼠耳蜗一氧化氮合酶异型体的定位

目的研究一氧化氮合酶(NOS)的异型体在豚鼠耳蜗的定位分布,以探讨一氧化氮(NO)在内耳听觉生理和病理生理机制中的作用。方法使用特异性NOS异型体抗体,采用ABC免疫组化染色法,观察NOS异型体在正常豚鼠耳蜗的定位表达。结果NOS Ⅰ主要分布在内骨膜、螺旋神经节的核周体、螺旋韧带和Corti's器的细胞。NOSⅢ是耳蜗的主要NOS异型体免疫染色,其主要免疫染色分布于耳蜗神经、螺旋神经节核周体、螺旋韧带和耳蜗毛细血管球的内皮细胞,也见于Corti's器的细胞和神经纤维。NOS Ⅱ在正常豚鼠耳蜗内不表达。 结论结构型NOS(cNOS)表达在耳蜗的多个部位,表明NO参与内耳的正常生理功能,包括神经突触的神经传导、耳蜗血流的调节和耳蜗的骨代谢。     

一种豚鼠耳蜗内铅含量的检测方法

摘要：目的介绍一种豚鼠耳蜗内铅含量的检测方法。方法将10只成年豚鼠按数字随机法分成实验组及对照组(每组5只动物),实验组用含浓度为2 mmol/L醋酸铅的纯净水喂养1个月,对照组用不含醋酸铅的纯净水喂养1个月。实验结束时用10%水含氯醛溶液麻醉豚鼠后采血2 ml送检,并在显微镜下解剖出耳蜗基底膜及螺旋韧带并用65%~68%浓硝酸溶解,在原子吸收光谱仪中分别检测血铅及耳蜗组织中铅含量,然后对两组结果进行对比分析。结果实验组与对照组的血铅浓度分别为（73.26±12.06）、（5.53±1.25）μg/dL,实验组血铅浓度明显增高,与对照组比较其差异具有统计学意义(t=12.49,P<0.001);实验组与对照组耳蜗内铅含量分别为（25.87±14.60）、（29.31±11.70）μg/g,两组之间比较差异无统计学意义（t=0.74,P>0.05）。结论通过原子吸收光谱法检测豚鼠耳蜗内铅含量是一种简单有效的定量检测耳蜗内铅含量的方法。