自体骨髓干细胞移植在心肌再生中的应用

心肌细胞移植的目的在于经病变的心肌重新注入细胞,使其恢复收缩能力。动物实验证实,心肌细胞、心脏成纤维细胞和平滑肌细胞能存活并     

无病毒可回复性肝细胞永生化载体的构建和结构鉴定

目的构建不携带病毒基因且可回复的肝细胞永生化载体,优化目前的肝细胞永生化方法。方法构建含人端粒酶逆转录酶（hTERT）基因的无病毒可回复性肝细胞永生化载体,PCR扩增attBl-Kozak—hTERT（前端）-attB2和attBl-hTERT（后端）／E2AJeGFP／F2A／neo—attB2．对相应大小条带切胶回收后,通过Gamway重组克隆技术BR反应和LR反应,以及酶切连接,构建最终目的载体PB-hTERT／E2A/eGFP／F2A／neo。结果PCR及酶切和测序鉴定均证实成功构建了肝细胞永生化载体PB-hTERT／E2A／eGFP／F2A／neo,目的基因序列与GenBank报道一致。结论成功构建不携带病毒基因且可实现回复的肝细胞永生化载体,有望提高永生化肝细胞临床应用的安全性。     

心肌细胞移植的现状与发展前景

干细胞技术治疗心脏疾病是当前心血管疾病研究领域中十项最具有影响力的项目之一。干细胞原来是指人体胚胎时期的一种特殊细胞 ,可以不断分裂 ,具有极强的生命力 ,同时 ,它可以根据需要转变成为人体内各种各样器官和组织的细胞。人们把这种胚胎时期的干细胞称为全能干细胞。近年来 ,人们又发现 ,在人体骨髓中也存在着多种干细胞 ,主要转变为血液内不同的血液细胞 (如红细胞、白细胞等 ) ,也可以转变为血液细胞之外的其他组织细胞 ,所以称之为多能干细胞。在研究中 ,人们还注意到 ,人体一些组织中 ,存在着一类细胞 ,在一定情况下 ,会向专一细…     

细胞移植--一种治疗缺血性心脏病的新方法

目前临床对缺血性心脏病的治疗主要包括药物治疗，介入治疗和手术治疗。这些方法虽能改善心肌缺血和心衰的症状．却不能阻止严重心肌缺血所致的心肌细胞死亡。近年来，随着细胞体外培养，扩增技术日益成熟。通过细胞的体外培养、扩增，然后将这些细胞植入到损伤的心肌组织中，替代坏死心肌细胞，增加有收缩功能的肌细胞的数量．阻止心室扩大．提高心功能，从而为缺血性心脏病治疗提供一种新方法。     

自体造血干细胞移植治疗小细胞肺癌

小细胞肺癌（ＳＣＬＣ）对化疗有较高的敏感性，常规化疗有效率为７０％～８０％，但几乎没有被治愈者。现已证明，强烈的化疗可有更高的疗效。自体造血干细胞移植能有效地克服化疗药物所致的造血系统毒性，使ＳＣＬＣ的超大剂量化疗成为可能。１　移植时机与类型为了减少耐药的产生，ＳＣＬＣ患者在化疗（或放疗）获完全缓解（ＣＲ）或部分缓解（ＰＲ）后，应尽早进行干细胞移植治疗。因为此时除了肿瘤细胞易被杀灭外，而且造血干细胞受损伤小，质量佳，移植后造血恢复快，而且患者的一般情况和重要脏器功能好、耐受性强，更易度过造血干细…     

自体骨髓干细胞移植治疗终末期肝病15例疗效观察

目的探讨自体骨髓干细胞移植对终末期肝病患者肝功能的改善作用。方法选择终末期肝病患者30例,随机按1∶1的比例分为2组,一组行保肝保守治疗,另一组在保肝保守治疗的基础上行自体骨髓干细胞移植治疗。于移植后1、2、4、8周动态检测肝功能、凝血机制、血常规、腹部B型超声等,同时观察移植后患者临床症状改善情况,对比两组间疗效有无差异。结果移植后1周全部患者临床乏力、纳差症状明显改善,而对照组只有9例(60%)患者乏力、纳差症状有改善;移植后2周内腹水消退7例(45%),腹胀减轻8例(55%),而对照组分别为4例(26%)和7例(47%);移植后82周,治疗组PTA有不同程度升高,由治疗前平均(31.21±15.90)%上升至(48.54±16.80)%,而对照组则由治疗前平均(30.45±17.20)%上升至(39.45±14.70)%(P<0.05);治疗组患者ALB逐渐升高,由平均(25.12±12.50)g/L升至(31.21±13.50)g/L,而对照组由平均(24.34±13.54)g/L升至(27.05±14.26)g/L(P>0.05);治疗组患者ALT有下降,由平均(113.20±11.80)U/L降至(51.31±15.48)U/L,而对照组由平均(109.34±15.28)U/L降至(75.35±14.56)U/L(P<0.05);治疗组患者TBil逐渐下降,由平均(169.45±34.32)μmol/L降至(41.21±21.56)μmol/L;而对照组由平均(163.54±23.12)μmol/L降至(62.34±23.89)μmol/L(P<0.05);治疗组患者有2例脾脏发生回缩,脾门处厚度平均缩小0.9cm;白细胞和血小板无明显变化。移植患者中除2例移植后第2天出现低热外,未发现严重不良反应及并发症。结论自体骨髓干细胞移植治疗终末期肝病患者有良好的疗效。     

骨髓干细胞移植与心肌修复

骨髓干细胞具有分化与修复心肌组织的潜力，与其它类型干细胞比较具有很多优势。骨髓Lin^-c—kit^POS细胞及间叶干细胞移植动物模型已成功修复心肌并改善心脏功能，并已应用于临床病人。自体骨髓干细胞动员修复损伤心肌具有更多优点。骨髓干细胞移植修复损伤心肌有望成为心脏修复的新手段。     

干细胞移植用于心脏起搏的研究进展

电子起搏器治疗窦房结功能障碍及其它心脏传导系统疾病已获得较好的效果,但也伴随一些负面效应:高费用、有限的电池寿命及缺乏对神经激素生理性反应等。细胞移植是一项快速发展的治疗方法,其中干细胞移植在心脏起搏方面的基础研究获得了突破性的进展,现就此作一综述。     

自体骨髓干细胞移植治疗肝硬化的系统评价

目的探讨自体骨髓干细胞(BMSCs)移植技术对肝硬化的临床疗效。方法计算机检索中国知网、万方、重庆维普、Pub Med、Cochrance Library五大数据库,由两名研究者分别纳入符合标准的自体骨髓干细胞治疗肝硬化的随机对照试验(RCT)试验,提取资料并进行方法学评级,采用Rev Man5.3软件进行meta分析。结果共纳入10个随机对照试验(RCT)试验,566例患者。系统评价结果结果显示:ALB、TBIL、PT、PTA均有明显改善,临床症状均明显减轻(P<0.05)。结论自体BMSCs移植治疗肝硬化是有效的,但仍需要基础研究和大样本的随机对照试验。     

自体骨髓单个核细胞移植治疗风湿性心脏病可行性研究

目的观察自体骨髓单个核细胞（BMMNCs）心肌内移植对风湿性心脏病患者心功能的影响,探讨其临床实用性。方法选取以左室扩大为主的风湿性心脏病患者5例,瓣膜置换手术当日采取髂骨骨髓20ml,同上法获得自体BMMNCs悬液备用。瓣膜置换完毕,于特定局部心肌内注入上述细胞悬液,分别于术前、术后1周及术后3个月行门控核素心血池显像（MGBP）检查,评价患者心功能及局部心肌舒缩能力,同时监测围手术期心电图及各项实验室指标。结果患者围手术期均未发现明显不良反应,术后3＋71反映左室收缩功能的各项指标显著升高,左室8个分区局部射血分数（rEF）亦明显升高,尤以S3～S6为著。结论自体BMMNCs心肌内移植方法简便、可靠,进一步的严格对照、多中心、随机双盲的大样本临床实验可以进行。     

自体干细胞移植治疗糖尿病足的进展

治疗性血管生成是近年来国内外广泛开展的一项新技术。包括自体骨髓干细胞移植和自体外周血干细胞移植及自体骨髓和外周血干细胞联合移植^[1]。     

自体干细胞移植治疗糖尿病足的进展

治疗性血管生成是近年来国内外广泛开展的一项新技术。包括自体骨髓干细胞移植和自体外周血干细胞移植及自体骨髓和外周血干细胞联合移植^[1]。     

自体骨髓干细胞移植治疗失代偿期肝硬化

目的 分析自体骨髓干细胞移植对肝硬化患者的治疗作用.方法 选择失代偿期肝硬化患者78例,其中肝炎肝硬化56例、酒精性肝病21例、血吸虫性肝硬化1例,年龄26～67岁.从患者髂后上棘抽取骨髓,体外分离纯化骨髓源性干细胞,通过肝动脉置管移植入肝脏,在移植后2、4、8周复查肝脏功能,观察实验室指标改善、Child-Turcotte-Pugh分数变化及不良反应情况.结果 移植后第4周,患者血浆白蛋白由(32.91±5.58)g/L升至(38.324±6.45)g/L,丙氨酸转氨酶由术前(96.92±83.91)U/L降至(73.48±18.46)U/L(P<0.01).凝血酶原时间从移植前的(16.66±3.91)s逐渐下降至移植后的(15.52±3.35)s,纤维蛋白原从(2.22±0.88)g/L逐渐升高至(2.58±0.88)g/L.干细胞移植术后患者临床症状明显改善,其中食欲改善、体力好转72例(92.3%),腹水减少或消失及下肢浮肿减轻70例(89.7%),腹胀减轻68例(87.2%).近期未发生与干细胞移植相关的并发症.结论 骨髓干细胞移植是治疗失代偿期肝硬化患者安全、有效的方法.     

干细胞与心脏细胞移植治疗的几个热点问题

干细胞已成为当前心肌细胞移植的主要对象。免疫排斥反应、致畸胎瘤可能以及社会、伦理问题使胚胎干细胞移植的发展受到严重制约。成熟组织来源干细胞即成体干细胞的研究及应用可能解决上述问题,但也存在许多问题。1.成体干细胞可塑性质疑:许多研究报道,骨髓间质干细胞可分化为骨骼肌细胞、心肌细胞和内皮细胞。这种跨系谱(或跨胚层)分化特性被称为成体干细胞的“可塑性”或“横向分化”。Science杂志2 0 0 2年发表了在干细胞基础研究领域最具权威Weissman研究小组的工作报告,观察移植绿色荧光蛋白标记的骨髓造血干细胞大鼠4～9个月,未发现…     

二次自体骨髓干细胞移植治疗失代偿期肝硬化与首次移植对比研究

目的 比较失代偿期肝硬化患者行自体骨髓干细胞二次移植与首次移植对肝功能的影响。方法2007年5月至2009年12月在沈阳军区总医院住院治疗的45例失代偿期肝硬化患者,分为首次移植组和二次移植组。首次移植组23例患者均经内科治疗,症状平稳后行经股动脉自体骨髓干细胞移植术。二次移植组的22例患者则在首次移植后4～12个月行第二次干细胞移植。所有患者均于每次自体干细胞移植后第4、8周复查血常规、凝血指标及肝功能生物化学指标。结果 二次自体骨髓干细胞移植8周后,肝功能多项指标明显改善,血浆白蛋白(Alb)由移植前的(37.26±5.90) g/L升至(42.49±4.80) g/L(P＜0.01),丙氨酸转氨酶(ALT)由（57.05±45.51）U/L降至（44.86±29.19）U/L(P＜0.05),天冬氨酸转氨酶(AST)由（53.73±24.98）U/L降至(39.14±15.07) U/L(P＞0.05);凝血功能各项指标明显好转,凝血酶原时间由（16.15±3.01）s降至(14.63±2.32) s(P＜0.01),纤维蛋白原(Fib)由(2.44±0.61) g/L升至（3.00±0.81）g/L(P＜0.01)。与首次移植组患者同期相比,二次移植组移植8周后血浆Alb水平进一步升高,由（38.00±6.33）g/L升至(42.49±4.80) g/L(P＜0.05),AST、ALT也明显改善,两组间差异有统计学意义,同时Child-Pugh B级患者的评分由(7.22±0.67)分降至（6.67±0.71）分(P＜0.05)。二次干细胞移植后,部分凝血指标及胆红素与首次移植组相比差异无统计学意义,但与干细胞移植前相比仍有改善。结论失代偿期肝硬化患者行二次自体骨髓干细胞移植可进一步改善肝功能,维持肝硬化症状的缓解期。     

非小细胞肺癌hTERT与p16基因甲基化的表达

目的 探讨端粒酶逆转录酶(hTERT)和p16基因甲基化在非小细胞肺癌(NSCLC)发病中的作用.方法 应用实时荧光定量RT-PCR法和甲基化特异性PCR法检测45例NSCLC组织、21例肺正常组织hTERT和p16基因甲基化的表达.结果 NSCLC、正常肺组织hTERT mRNA的表达分别为2.854±0.728、2.042±0.378,组间比较差异有统计学意义(P<0.01);NSCLC组织、肺正常组织p16基因甲基化阳性率分别为57.8%、14.3%(P<0.01).hTERT mRNA与NSCLC病理类型相关,p16基因甲基化与NSCLC细胞分化程度及淋巴结转移相关(P均<0. 05).结论 hTERT与p16基因甲基化存在相关性,hTERT和p16基因甲基化的表达与NSCLC的发生、发展有关.     

自体造血干细胞移植治疗难治性白血病疗效观察

目的观察自体外周血造血干细胞移植（Auto-PBSCT）对难治性白血病的疗效。方法15例难治性白血病患者均为髓性白血病,行Auto-PBSCT。预处理方案：BU／CY（马利兰＋环磷酰胺）（10例）或联合IA（去甲氧柔红霉素）（2例）或联合HD-Ara—C（大剂量阿糖胞苷）（3例）。移植后治疗：常规方案巩固化疗维持1a。结果15例患者Auto-PBSCT后全部获完全缓解,除1例移植后死于肺部真菌感染外,其余14例均好转出院,1例半年后复发,其余13例无病存活至今。结论Auto-PBSCT是治疗难治性白血病安全、有效的方法,可延长患者的生存期。     

大鼠自体平滑肌细胞移植治疗心肌缺血的长期效果观察

目的　通过大鼠自体平滑肌细胞移植 ,观察其在心肌缺血区的存活情况 ,探讨对心功能的作用。　方法　用酶消化法从SD大鼠的输精管组织中分离、提取平滑肌细胞 ,进行体外培养、扩增 4周。细胞移植组 (10只 )将BrdU标记的自体平滑肌细胞直接注射移植到冠状动脉结扎后 4周形成的心肌瘢痕组织中 ;对照组 (10只 )注射同等剂量的DMEM培养基。多普勒超声检查 ,评估对比移植前和移植后 12周的心室形态以及心功能状况。心脏病理标本用抗平滑肌特异性的α SMA及抗细胞标记物BrdU的单克隆抗体作免疫组化染色 ,检测植入的平滑肌细胞在梗死区的存活情况。　结果　植入的平滑肌细胞 12周后仍存活于心肌梗死区 ,并形成肌样组织。移植组与对照组比较 ,其左室前壁厚度增加〔分别为 (2 36± 0 31)及 (1 0 3± 0 11)mm ,P <0 0 1〕 ,收缩舒张运动协调 ,心室舒张末容积减少〔分别为 (0 94± 0 16 )及 (1 39± 0 17)ml,P <0 0 1〕 ,射血分数提高〔分别为 (4 8 6± 7 2 )及 (2 5 3± 4 1) % ,P <0 0 1〕。　结论　移植的自体平滑肌细胞能长期存活于心肌梗死区中 ,并通过增厚加固心室壁 ,阻止心肌梗死后的心腔扩大和心室重构 ,增加心脏射血 ,有效地提高心功能。     

40例自体干细胞移植治疗失代偿期肝硬化的临床研究

目的评估自体干细胞移植治疗失代偿期肝硬化的临床效果。方法自体干细胞移植治疗,其中骨髓干细胞移植26例和外周血干细胞移植14例,均接受内科综合治疗。结果患者肝脏的合成功能指标（Alb和PT）、肝功能改善（Alb的增高和CTP评分的减少）,从12周始较治疗前有明显变化（P〈0.05）。所有患者未出现并发症和不良反应。有1例患者术后32个月死于肝硬化并发症上消化道大出血。结论自体干细胞移植治疗晚期肝硬化是一种安全、有效的治疗方法。