TRAIL对3AO裸鼠移植瘤治疗作用的实验研究

目的 :探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (TRAIL)对 3AO裸鼠皮下及腹腔移植瘤的治疗作用。方法 :将 5× 10 6 和 2× 10 7对数生长期的 3AO分别接种于BALB/C裸鼠右下肢皮下和腹腔内 ;待皮下组移植瘤长至 0 .2 5cm3,腹腔移植瘤组移植后 96h ,随机分为 5组。裸鼠皮下和腹腔移植瘤A、B组为TRAIL组 ,剂量分别为 0 .5 μg/ml和 1μg/ml;C组为TRAIL0 .5 μg/ml加cDDP 1.5mg/kg ,D组为cDDP 3mg/kg ;E组为对照组 (将生理盐水分别注射于瘤周和腹腔 ) ,观察移植瘤成瘤率、裸鼠生存期和生存期延长率。同时观察停药后 1d、1周、2周裸鼠移植瘤细胞的细胞凋亡率及CD95、Apo2 .7、P5 3、Bcl 2基因表达的变化。结果 :(1)A、B、C和D组裸鼠皮下移植瘤的抑制率分别为 2 3%、4 9.1%、6 2 .3%和 5 2 .6 % ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;(2 )腹腔移植瘤组 :A、B、C、D组裸鼠移植瘤的成瘤率分别为 89.1%、72 .3%、5 1.7%和 6 1.5 % ;差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;(3)TRAIL作用裸鼠移植瘤后CD95与Apo2 .7的表达均升高 ,P5 3基因表达稍升高 ,Bcl 2基因表达降低。结论 :(1)TRAIL对人卵巢癌裸鼠移植瘤有明显的抑制作用 ,TRAIL能明显降低裸鼠的成瘤率及死亡率 ,延长生存期 ;(2 )其机制可能与基因CD95、Apo2 .7、Bcl 2的调节有关     

米非司酮抑制人卵巢癌3AO细胞裸鼠移植瘤生长的研究

目的 :研究抗孕激素米非司酮 (mifepristone ,MIF)对人卵巢癌 3AO细胞株裸鼠移植瘤生长的抑制作用并探讨其作用机制。方法 :随机将 14只人卵巢癌细胞 3AO移植瘤荷瘤裸鼠分为两组 ,MIF组皮下注射MIF 0 .2mg/d ,对照组注射等量溶剂。观察治疗前后移植瘤的体积和重量。应用末端转移酶介导的生物素标记脱氧尿苷三磷酸缺口标记法 (TUNEL)和流式细胞术 (FCM)检测细胞凋亡率和肿瘤细胞周期时相的变化 ;免疫组织化学染色法检测移植瘤组织增殖细胞核抗原 (PCNA)和孕激素受体 (PR)的表达。光镜和电镜观察移植瘤细胞凋亡的超微结构变化。结果 :治疗 4周后 ,MIF组和对照组裸鼠移植瘤体积和重量分别为 1186 .14± 4 96 .14mm3和 1.30± 0 .4 3g ,2 199.85± 5 41.4 9mm3和 2 .30± 0 .31g(P <0 .0 1)。TUNEL测定显示 ,MIF组细胞凋亡率为 (11.33± 1.5 3) % ,对照组为(2 .6 7± 0 .5 8) % ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。FCM测定 ,MIF组凋亡率为 (15 .6 2±3.87) % ,也明显高于对照组的 (7.5 9± 1.4 7) % (P <0 .0 5 ) ,肿瘤细胞出现典型的细胞凋亡形态变化 ,并阻滞于G0 ～G1期 ,S期细胞显著减少 (P <0 .0 5 )。MIF组肿瘤细胞PCNA及PR表达率分别为 2 0 .5 %和 8.0 % ,明显低于对照组的 4 8.0 %和 2 2 .0 % (P <0 .0 5 )     

白细胞介素24对裸鼠人宫颈癌Hela细胞移植瘤抑制作用的探讨

目的：探讨基因重组质粒pDC316-hIL-24对裸鼠人宫颈癌模型的肿瘤生长及凋亡的作用。方法：于5周龄裸鼠腋窝外侧皮下注射1×10 7个／mLHela细胞悬液100uL,将15只构建成功的人宫颈癌Hela细胞裸鼠模型随机分为3组,分别于瘤体内注射转染试剂Lipofectamine2000与基因重组质粒pDC316-hIL-24（A组）、空质粒pDC316（B组）以及磷酸盐缓冲液（C组）,比较干预后各组移植瘤的体积及抑瘤率。应用RT-PCR法测定移植瘤中h／L-24的表达．HE染色观察各组肿瘤组织形态学变化。免疫组化方法研究肿瘤细胞凋亡情况。结果：①IL-24基因成功转染人肿瘤细胞并在其中成功表达,至实验结束时,B组和C组移植瘤体积大于A组（F=63．395,P〈0．05）;A组的平均抑瘤率高于B组（t=130．920,P〈0．01）。②病理学观察见A组宫颈癌细胞有局灶性坏死,细胞变大,胞质疏松,核深染,可见核固缩、核溶解、核碎裂,染色质成团状。⑧免疫组化结果显示,A组BCL-2蛋白表达低于其他2组（F=6．164,P〈0．05）,而其同源蛋白BAX表达高于其他2组（F=58．426,P〈0．05）。结论：基因重组质粒pDC316-hIL-24对宫颈癌裸鼠模型肿瘤生长具有明显的抑制作用,其可能通过激活细胞凋亡通路而诱导肿瘤细胞凋亡。     

白细胞介素24对裸鼠人宫颈癌Hela细胞移植瘤抑制作用的探讨

目的：探讨基因重组质粒pDC316-hIL-24对裸鼠人宫颈癌模型的肿瘤生长及凋亡的作用。方法：于5周龄裸鼠腋窝外侧皮下注射1×107个/mL Hela细胞悬液100 μL,将15只构建成功的人宫颈癌Hela细胞裸鼠模型随机分为3组,分别于瘤体内注射转染试剂Lipofectamine 2000与基因重组质粒pDC316-hIL -24（A组）、空质粒pDC316（B组）以及磷酸盐缓冲液（C组）,比较干预后各组移植瘤的体积及抑瘤率。应用RT-PCR法测定移植瘤中hIL-24的表达,HE染色观察各组肿瘤组织形态学变化,免疫组化方法研究肿瘤细胞凋亡情况。结果：①IL-24基因成功转染入肿瘤细胞并在其中成功表达,至实验结束时,B组和C组移植瘤体积大于A组（F=63.395,P ＜0.05）;A组的平均抑瘤率高于B组（t=130.920,P ＜0.01）。②病理学观察见A组宫颈癌细胞有局灶性坏死,细胞变大,胞质疏松,核深染,可见核固缩、核溶解、核碎裂,染色质成团状。③免疫组化结果显示,A组BCL-2蛋白表达低于其他2组（F=6.164,P ＜0.05）,而其同源蛋白BAX表达高于其他2组（F=58.426,P ＜0.05）。结论：基因重组质粒pDC316-hIL-24对宫颈癌裸鼠模型肿瘤生长具有明显的抑制作用,其可能通过激活细胞凋亡通路而诱导肿瘤细胞凋亡。     

人侵蚀性葡萄胎裸鼠皮下移植瘤模型的建立及生物学特性的研究

目的 :建立人侵蚀性葡萄胎裸鼠皮下移植瘤模型 ,探讨其生物学特性。方法 :将人侵蚀性葡萄胎的新鲜组织块种植于裸鼠背部皮下 ,在无特殊病原菌 (SPF)条件下饲养裸鼠 ,原代生长后鼠间传代 ,观察移植瘤的生长特点 ,观察其组织形态学和超微结构 ,检测血中人绒毛膜促性腺激素 ( β -hCG)水平 ,利用流式细胞仪 (FCM)测定DNA含量 ,分析染色体核型。结果 :经 19个月建成人侵蚀性葡萄胎裸鼠皮下移植模型HIM - 980 1,瘤株生长稳定 ,已传代 54代。自第 2代起 ,移植成瘤率均为 10 0 % ,移植瘤潜伏期及传代间期短 ,生长速率快 ,向周围组织浸润 ,光镜和电镜下的形态学特征与患者肿瘤组织一致 ,DNA检测和染色体核型分析为非整倍体。结论 :HIM -980 1是首次建立成功的人侵蚀性葡萄胎裸鼠皮下移植瘤模型 ,为深入研究此病提供了理想的材料和动物体内瘤株。     

人子宫内膜癌裸鼠原位移植模型的建立及生物学观察

目的 :建立人子宫内膜癌的原位移植模型 ,观察其生物学特性。方法 :利用子宫内膜癌细胞株AN3CN制备裸鼠皮下移植瘤模型 ,然后 ,将瘤组织条植入裸鼠子宫腔内 ,建立人子宫内膜癌的原位移植模型 ,用组织病理学检查、电镜观察和流式细胞仪DNA含量及染色体核型分析鉴定模型。结果 :原位移植模型的瘤细胞与AN3CN在形态和结构上一致。结论 :小鼠肿瘤的生长和转移完全模拟人子宫内膜癌的临床过程 ,为研究子宫内膜癌转移的理论和药物治疗提供了较客观的模型     

卵巢癌裸鼠皮下移植瘤和腹水瘤模型导向治疗的研究

采用抗卵巢癌单克隆抗体（单抗）－脂质体－阿霉素交联物（ＭＬＡ）、阿霉素、ＣＯＣ１６６－９单抗、正常鼠ＩｇＧ脂质体阿霉素交联物（ＮＭＬＡ）及生理盐水，对卵巢癌细胞系ＳＫＯＶ＿３接种的２４只裸鼠皮下移植瘤模型及１６只腹水瘤模型分别进行导向及非导向治疗，观察对比疗效。皮下移植瘤模型以肿瘤生长大小、腹水瘤模型以裸鼠死亡时间为观察指标，判断治疗效果。结果：各治疗药物对肿瘤生长均有抑制作用，以ＭＬＡ导向治疗的效果最好。说明导向治疗是有价值和发展前景的疗法。     

三种人卵巢癌动物模型的生物学特性比较

目的:建立人卵巢癌裸小鼠皮下移植瘤,腹水瘤和原位移植瘤模型,观察比较其生物学特性,为卵巢癌的理论研究和选择临床模型选择提供参考。方法:利用卵巢癌细胞株SW626先制备裸小鼠皮下移植瘤模型,再将瘤组织条植入裸小鼠一侧卵巢内,建立人卵巢癌的原位移植模型,将该细胞悬液注入小鼠腹腔建立腹水瘤模型。用组织病理学,电镜和流式细胞仪DNA含量及染色体核型分析鉴定模型,并比较3种模型在生物学特性上的差异。结果:3种模型的瘤细胞与细胞株在形态和结构上一致,腹水瘤模型自然生存率明显短于其它两种模型,后两者无明显差异。在生物学特性上各具特点,其中原位移植瘤模型中肿瘤的生长和转移完全模拟人卵巢癌的临床过程。结论:3种模型从不同层面展现了人卵巢癌的生物学特点,其中原位移植瘤模型是研究卵巢癌的转移基础和评定抗癌药物药效更客现的模型。     

生酮饮食对人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响

目的:建立人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型,通过中链甘油三酯(MCT)生酮饮食诱导裸鼠产生酮症,观察生酮饮食对裸鼠肿瘤生长的影响。方法:3~4周龄雌性裸鼠18只,随机分为正常饲料组(SD)、生酮饮食组(KD)和无碳水化合物生酮饮食组(NCKD)3组;裸鼠右侧腋窝皮下注射子宫内膜癌细胞悬液,接种后予以不同饮食饲养;观察期间肿瘤生长情况,测量肿瘤径线并计算体积,于第30天处死裸鼠取瘤称重。结果:7天后观察,与SD组比较,KD组及NCKD组血糖约降低40%,血酮体升高3~5倍;3组裸鼠成瘤率100%;30天后KD组和NCKD组肿瘤体积及重量均小于SD组,差异有统计学意义(P<0.05),KD组与NCKD组无明显差异(P>0.05)。结论:中链甘油三酯生酮饮食能抑制肿瘤的生长速度,虽然不能替代传统抗肿瘤治疗方法,但其临床应用价值值得进一步研究。     

建立去势雌性裸小鼠人子宫内膜癌皮下移植瘤动物模型的探讨

目的:探讨全身外照射对建立切除卵巢后雌性裸小鼠子宫内膜癌皮下移植瘤模型成瘤率的影响。方法:将切除卵巢后1周的裸小鼠随机分为两组,一组全身外照射(4 Gy)3 h后皮下注射子宫内膜癌细胞悬液,另一组未予照射同时间皮下注射子宫内膜癌细胞悬液,观察裸小鼠体质量变化、存活情况和肿瘤的生长情况,测量肿瘤径线并计算体积。结果:2组成瘤率100%;各组肿瘤体积差异无统计学意义(P>0.05),但存活率差异有统计学意义(P<0.05)。结论:全身外照射不影响切除卵巢的裸小鼠的成瘤率,但增加裸小鼠的死亡率。     

慢性心理应激对SKOV3荷瘤裸鼠血清NE、IL-10和CA125的影响

目的:探讨心理应激对肿瘤生长及荷瘤裸鼠血清去甲肾上腺素(NE)、白介素-10(IL-10)和糖链抗原125(CA125)含量的影响。方法:随机将裸鼠分为4组:正常生长组(A组),单纯应激组(B组),荷瘤组(C组)及荷瘤应激组(D组),每组6只。于C、D组裸鼠的腋窝皮下注射SKOV3细胞(2×106cells/只),注射前B、D组先行束缚应激7天,接种后再连续应激35天(每天6h),A、C组不予应激,结束后处死全部裸鼠,剥取肿瘤,做病理检查;取血清测NE、IL-10和CA125含量。结果:成功建立人卵巢癌荷瘤裸鼠慢性心理应激模型。心理应激明显增加荷瘤裸鼠的瘤重(P0.05),肿瘤增长率58.46%;各组血清NE、IL-10水平依次为ACD,ABD,差异均有统计学意义(P0.05);各组CA125水平比较,AB(P0.05),ACD(P0.01),BD(P0.01)。结论:慢性心理应激能干扰下丘脑-垂体-肾上腺轴的功能并导致免疫系统防御功能减弱,对致病因素处于易感状态。当应激发生在肿瘤患者时,可促进肿瘤的发生发展并影响其预后。     

酞胺哌啶酮对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长及血管生成的作用

目的 :观察酞胺哌啶酮对人卵巢上皮癌裸鼠皮下移植瘤生长及血管生成的抑制作用。方法 :于裸鼠背部右侧皮下接种SKOV3 瘤源 ,随机分为 4组 :治疗组 - 1和对照组 - 1,皮下移植后次日开始分别给予酞胺哌啶酮 2 0 0mg kg .d-1、等体积 0 .5%羧甲基纤维素钠腹腔内注射 ,共 4周。治疗组 - 2和对照组 - 2 ,皮下移植第 15天开始分别给予酞胺哌啶酮 2 0 0mg kg .d-1和等体积 0 .5%羧甲基纤维素钠 ,共 2周。定期检测皮下瘤体积和裸鼠体重。用免疫组化方法检测肿瘤组织微血管内皮细胞的表达情况 ,在光学显微镜高倍视野下 (2 0 0× )分别计数肿瘤组织的微血管密度 (MVD)。结果 :治疗组裸鼠皮下瘤体积较对照组明显减小 :治疗结束时 ,治疗组 - 1抑瘤率为 4 0 .2 % (P <0 .0 1) ;治疗组 - 2抑瘤率为 2 8.5% (P <0 .0 5)。治疗组裸鼠体重与对照组无明显差异 (P >0 .0 5)。两治疗组皮下瘤的MVD明显降低 ,治疗组 - 1的抑制率为 4 3.7% (P <0 .0 1) ,治疗组 - 2的抑制率为4 2 .1% (P <0 .0 5)。结论 :酞胺哌啶酮能抑制人卵巢上皮癌裸鼠皮下移植瘤生长及微血管生成 ,其生长抑制作用以早期应用效果显著 ,且其副作用不明显     

脂质体-C-erbB2反义脱氧寡核苷酸对人卵巢癌裸鼠网膜移植瘤生长及化疗药物敏感性的影响

目的探讨脂质体ＣｅｒｂＢ２反义脱氧寡核苷酸（ＣｅｒｂＢ２ＳＯＤＮｓ）对人卵巢癌裸鼠网膜移植瘤生长及顺铂（ＤＤＰ）敏感性的影响。方法对２０只裸鼠建立人卵巢癌裸鼠网膜移植瘤模型,分为对照组（腹腔注射无菌水）、观察组（腹腔注射脂质体ＣｅｒｂＢ２ＳＯＤＮｓ）、化疗组（腹腔注射无菌水及ＤＤＰ）、观察＋化疗组（腹腔注射脂质体ＣｅｒｂＢ２ＳＯＤＮｓ及ＤＤＰ）。治疗期间观测裸鼠体重变化,治疗结束后取瘤体称重进行电镜观察。结果观察组抑瘤率为３７％,电镜下可见细胞异染色质增多,线粒体退化。观察＋化疗组抑瘤率可达５０％。观察组裸鼠体重无明显改变。结论ＣｅｒｂＢ２反义基因治疗在卵巢癌基因治疗中有一定作用,与化疗联合应用可以取得更好的治疗效果。     

卵巢癌淋巴结定向转移裸鼠动物模型的建立

目的:在裸鼠体内建立人卵巢癌定向淋巴道转移动物模型。方法:将卵巢癌细胞株SKOV3移植于裸鼠爪垫下,待裸鼠卵巢癌发生转移时,取其淋巴结转移灶癌细胞再次移植裸鼠爪垫下传代,反复传3代。结果:SKOV3卵巢癌细胞在裸鼠体内传3代后,各代裸鼠的淋巴结转移率一直稳定,且转移途径较为单一;各代癌细胞的体内外增殖能力不断增强。结论:成功建立了人卵巢癌定向高淋巴道转移模型。     

沙立度胺对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤血管生成的影响

目的　探讨沙立度胺(Thd;商品名:反应停)对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长及血管生成的影响。方法　建立 15只人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分成 3组: (1)Thd组:腹腔内注射Thd(200mg·kg-1·d-1,浓度为 62 5mg/L); (2 )Thd+环磷酰胺 (CTX)组:按上述Thd剂量,加入浓度为 100mg/L的CTX(100mg·kg-1·d-1 ),腹腔内注射; (3)生理盐水组:腹腔内注射 0 2ml生理盐水。观察各组裸鼠皮下移植瘤生长情况、裸鼠体重的变化,并采用RT PCR、酶联免疫吸附法、及Picture二步免疫组化法检测各组瘤组织中血管内皮生长因子 (VEGF)mRNA、外周血中VEGF含量及瘤组织中微血管密度(MVD)。结果　 ( 1 )Thd组、Thd+CTX组皮下移植瘤体积明显小于生理盐水组,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)Thd组瘤组织中VEGFmRNA为 55±9,血中VEGF含量为(29±10)pg/ml;Thd+CTX组瘤组织中VEGFmRNA为 26±7,血中VEGF含量为(12 ±6)pg/ml;生理盐水组瘤组织中VEGFmRNA为 79±7,血中VEGF含量为(71±16)pg/ml。Thd组、Thd+CTX组瘤组织中VEGFmRNA和血中VEGF含量分别与生理盐水组比较,差异均有统计学意义 (P<0.01)。(3)Thd组MVD计数为 (12.6±3.3)条,Thd+CTX组为 (10.6±1.9)条,均明显低于生理盐水组的(19 3±2 8)条(P<0 01)。结论　Thd有抗卵巢癌皮下移植瘤血