同种异体骨髓间充质干细胞移植治疗急性肝功能衰竭

背景：对于急性肝功能衰竭的临床治疗,目前尚缺乏特效手段。骨髓间充质干细胞在特定环境下可分化为具有部分肝功能的类肝样细胞,从而参与肝功能的修复和重构,为急性肝功能衰竭的治疗提供了新的手段。目的：评价同种异体骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠急性肝功能衰竭的疗效,为其临床应用提供理论依据。方法：采用全骨髓培养法培养并纯化其骨髓间充质干细胞。30只健康SD大鼠随机均分为3组：正常对照组：不予任何处理;肝衰竭组和移植组：用腹腔注射四氯化碳石蜡油溶液的方法复制鼠急性肝功能衰竭模型后24h分别经其尾静脉注射生理盐水和等量骨髓间充质干细胞。在移植后第1,2,3,7天抽血检测其肝功能,并取肝脏行病理学检查。结果与结论：急性肝功能衰竭鼠经骨髓间充质干细胞移植治疗后生存率为70%,与肝衰竭组大鼠存活率20%相比差异有显著性意义（P〈0.05）;肝功能指标中谷丙转氨酶和谷草转氨酶相比,移植组明显低于肝衰竭组,差异有显著性意义（P〈0.05）。肝脏组织病理学结果显示移植组肝细胞变性及坏死程度以及炎症浸润程度轻于肝衰竭组。因此,经尾静脉移植骨髓间充质干细胞能提高急性肝功能衰竭大鼠的生存率、改善肝功能及减轻肝脏坏死程度,对大鼠急性肝功能衰竭有一定的治疗作用。     

聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖纳米粒子培养的猪肝细胞移植对大鼠急性肝衰竭的治疗作用

目的:探讨胶原凝胶包埋的聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖纳米粒子培养的猪肝细胞腹腔内移植对急性肝衰竭(ALF)大鼠的治疗效果。方法:D-氨基半乳糖腹腔内注射制作大鼠ALF模型。48h后分别将培养24h的猪肝细胞悬液(含5.0×107个肝细胞,Ⅰ组)、Ⅰ型胶原凝胶固定培养24h的猪肝细胞(含5.0×107个肝细胞,Ⅱ组)、Ⅰ型胶原凝胶包埋的PLA-O-CMC纳米粒子培养24h的猪肝细胞(含5.0×107个肝细胞,Ⅲ组)移植到ALF大鼠腹腔内,并以RPMI1640腹腔内注射作为对照(Ⅳ组)。观察移植后大鼠14d存活率,血清白蛋白(ALB)、谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素(TB)、血氨(NH3)的变化和移植肝细胞的病理变化。结果:移植后14d ALF大鼠的存活率:Ⅰ组为56.25%,Ⅱ组为62.5%,Ⅲ组为75%,Ⅳ组为18.75%,各移植组高于对照组(P<0.05)。移植后1~5d,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组各项肝功能指标改善明显优于Ⅳ组,Ⅲ组肝功能恢复好于同时间其它移植组,肝功能恢复从快到慢依次为Ⅲ、Ⅱ、Ⅰ、Ⅳ组。Ⅲ组移植肝细胞存活时间最长,炎症浸润最轻。结论:应用胶原凝胶包埋的聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖纳米粒子培养的猪肝细胞腹腔内移植治疗ALF大鼠能显著改善肝功能、提高生存率,聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖纳米粒子用于异种肝细胞移植具有良好的生物相容性,并能延长移植肝细胞的存活时间。     

骨髓间质干细胞抑制大鼠肝纤维化形成的可能性受体肝内干细胞存活时间、肝星状细胞活化程度及生存分析的7周观察

目的观察在体外培养条件下,具有强大的增殖和分化为肝细胞能力的骨髓间质干细胞输注治疗肝纤维化模型大鼠对其肝纤维化形成的影响及肝功能和生存分析,并对治疗组、空白对照组和病理对照组7周内的相关情况予以对照比较.方法实验于2003-08/2004-10在中山大学基础医学院病理学于病理生理实验室完成.①动物分组选用雄性6周龄Wistar大鼠5只为供体,供分离骨髓间质干细胞;雌性6周龄Wistar大鼠60只,其中50只被造成肝纤维化模型,在首次用二甲基亚硝胺处理后的第10天,将造模大鼠随机分为2组骨髓间质干细胞治疗组10只(为受体),于治疗39 d后结束实验,取材分析病理对照组40只.另10只作为空白对照组(仅静脉注射生理盐水).②肝纤维化模型制作在实验的当天,给予10g/L二甲基亚硝胺溶液(生理盐水配置)1 mL/kg,腹腔注射,每周连续3次,共6周.③骨髓间质干细胞治疗组每只大鼠输注3×106个骨髓间质干细胞;病理对照组使用等体积生理盐水代替骨髓间质干细胞.④动物的一般生活状态每天观察饮食、活动、二便、体质量、皮毛、呼吸情况等.⑤肝脏的组织细胞形态结构将肝组织以苏木精-伊红染色后观察.⑥肝星形细胞及其活化程度检测前者检测肝脏α-平滑肌肌动蛋白含量,用免疫组织化学染色法,后者以德国IBAS2.5图像分析软件半定量分析.⑦肝脏胶原分布的相对含量检测采用Masson三色染色法,从而反映肝纤维化程度.⑧肝脏羟脯氨酸含量测定采用氯胺T法.⑨血清总胆红素和谷丙转氨酶水平检测采用全自动生化分析仪.⑩血清层粘蛋白和透明质酸水平测定采用放射免疫法.11雄性大鼠骨髓间质干细胞在雌性大鼠肝内的Y染色体性别决定区基因的表达检测采用聚合酶链式反应.12统计学分析两组样本均数比较采用t检验;多组样本均数比较采用方差分析,两两比较采用q检验;生存分析采用K,plan-Meier法.结果雌性大鼠60只进入结果分析.①实验动物生存状况造模6周后,骨髓间质干细胞治疗组生存率为80%,而病理对照组生存率为10%,空白对照组生存率为100%,说明骨髓间质干细胞治疗可能通过阻止肝纤维化发展,从改而善大鼠的生存率.②肝脏组织学显示,骨髓间质干细胞治疗组的肝脏结构明显改善,炎症减轻、假小叶结构减少或消散.相反,病理对照组出现广泛的肝脏结构重塑,包括增厚的纤维间隔形成和明显的桥接坏死.半定量分析胶原染色,骨髓间质干细胞治疗组较病理对照组显著减低(8.12±1.98,15.71±2.13,t=6.11,P＜0.05).③肝脏星状细胞活化的标志α-平滑肌激动蛋白的阳性表达空白对照组仅见血管壁有少量α-平滑肌激动蛋白的阳性表达,而病理对照组和骨髓间质干细胞治疗组可见在纤维间隔、肝窦和汇管区内明显表达.半定量分析α-平滑肌激动蛋白的阳性染色,骨髓间质干细胞治疗组较病理对照组显著减低(11.06±2.03,18.50±3.87,t=4.47,P＜0.05).④Y染色体性别决定区基因的表达经雄性Wistar大鼠(供体)骨髓间质干细胞治疗39 d的雌性大鼠,肝脏DNA经聚合酶链式反应检测结果显示,Y染色体性别决定区基因的表达阳性,而空白对照组和病理对照组则无此阳性信号.说明骨髓间质干细胞移植后,能够在受体肝内存活5周以上.⑤反映肝脏纤维化程度的肝脏羟脯氨酸含量及血清层黏蛋白和透明质酸水平骨髓间质干细胞治疗组明显高于空白对照组(P＜0 05)但明显低于病理对照组(P＜0.05),说明骨髓间质干细胞治疗后能够减少肝脏胶原蛋白的含量,从而减少肝纤维化的形成,使肝纤维化得到控制.⑥反映肝功能的血清总胆红素、谷丙转氨酶水平骨髓间质干细胞治疗组明显低于病理对照组(P＜0.05),接近空白对照组.说明了骨髓间质干细胞治疗有助于改善肝功能状态.结论①二甲基亚硝胺能成功诱导大鼠肝纤维化模型的建立.②骨髓间质干细胞可改善肝纤维化大鼠的生存状况和肝功能.③骨髓间质干细胞能够减少肝脏胶原蛋白的产生,抑制肝纤维化形成.④肝纤维化发生发展过程中活化态的肝星状细胞数量减少可能是骨髓间质干细胞抑制肝纤维化形成的原因之一.⑤雌性大鼠肝脏内存在雄性供体Y染色体性别决定区基因的信号说明骨髓间质干细胞能够在受体肝内存活5周以上.     

硫普罗宁对梗阻性黄疸肝功能保护作用的实验研究

目的探讨硫普罗宁对实验性梗阻性黄疸大鼠肝功能的保护作用及作用机理。方法SD大鼠胆总管结扎后分2组,每组20只,分别用1ml硫普罗宁或生理盐水腹腔注射。假手术组20只。分别于术后10d、20d（每小组n=10）心脏取血测定血清超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量,同时测定谷丙转氨酶（AST）、直接胆红素（DB）和总胆汁酸（TBA）浓度,并对肝脏行光镜下病理形态学观察。结果血清MDA浓度在梗阻10d即升高,且随胆道梗阻时间延长进一步升高,SOD在梗阻10d后即下降,同时伴有血清AST、DB和TBA的升高和肝脏病理形态学的进行性改变。硫普罗宁治疗组MDA显著低于对照组而SOD显著高于对照组,并能改善肝组织病理形态。结论大鼠梗阻性黄疸时,氧自由基损害可能是肝损伤的原因,硫普罗宁通过抗氧化作用对梗阻性黄疽大鼠的肝脏起保护作用。     

黄芪注射液对糖尿病动物不同器官病理进程的影响

目的探讨黄芪注射液对糖尿病大鼠心、肾、肝、胰腺器官病理改变进程的影响,寻找出黄芪治疗的敏感器官,有针对性地使用该中药制剂进行糖尿病治疗。方法注射使Wistar大鼠建立糖尿病模型,将糖尿病大鼠分为糖尿病组(DM)和黄芪治疗组(RA),另设一正常组动物。黄芪治疗组动物每天给予黄芪注射液腹腔注射3.3 ml/kg,糖尿病组动物每天给予生理盐水腹腔注射3.3 ml/kg,连续注射30天,观察各组大鼠肝脏、肾脏、心脏和胰腺形态的变化。结果 RA治疗7 d、14 d、30 d和60 d时,RA组和DM组大鼠的肝脏、肾脏和心脏的病理改变没有显著的差异,与正常大鼠的组织结构相似。30 d时,DM组大鼠的胰腺的病理改变明显,胰腺内有较多的炎细胞浸润,并且细胞数目减少。RA治疗60天时,RA组和DM组大鼠肝脏、心脏的病理组织改变不明显,与正常大鼠的组织结构相似。与RA组相比较,60 d时,DM组大鼠肾脏和胰腺的病理改变明显,胰岛内细胞松散明显,细胞数明显减少,细胞核大小不一,半数细胞内可见明显的空泡,可见明显的炎细胞浸润。RA治疗组大鼠的肾脏和胰腺的病理组织改变不明显,与正常大鼠的组织结构相似。结论 RA能够延缓或阻止STZ诱导的糖尿病大鼠组织器官的病理进程。     

同种异体骨髓间充质干细胞移植治疗急性肝功能衰竭

背景:对于急性肝功能衰竭的临床治疗,目前尚缺乏特效手段。骨髓间充质干细胞在特定环境下可分化为具有部分肝功能的类肝样细胞,从而参与肝功能的修复和重构,为急性肝功能衰竭的治疗提供了新的手段。目的:评价同种异体骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠急性肝功能衰竭的疗效,为其临床应用提供理论依据。方法:采用全骨髓培养法培养并纯化其骨髓间充质干细胞。30只健康SD大鼠随机均分为3组:正常对照组:不予任何处理;肝衰竭组和移植组:用腹腔注射四氯化碳石蜡油溶液的方法复制鼠急性肝功能衰竭模型后24h分别经其尾静脉注射生理盐水和等量骨髓间充质干细胞。在移植后第1,2,3,7天抽血检测其肝功能,并取肝脏行病理学检查。结果与结论:急性肝功能衰竭鼠经骨髓间充质干细胞移植治疗后生存率为70%,与肝衰竭组大鼠存活率20%相比差异有显著性意义(P<0.05);肝功能指标中谷丙转氨酶和谷草转氨酶相比,移植组明显低于肝衰竭组,差异有显著性意义(P<0.05)。肝脏组织病理学结果显示移植组肝细胞变性及坏死程度以及炎症浸润程度轻于肝衰竭组。因此,经尾静脉移植骨髓间充质干细胞能提高急性肝功能衰竭大鼠的生存率、改善肝功能及减轻肝脏坏死程度,对大鼠急性肝功能衰竭有一定的治疗作用。     

联合应用骨髓间充质干细胞与促肝细胞生长素治疗大鼠急性肝衰竭

目的 评价骨髓间充质干细胞(MSCs)和促肝细胞生长素(pHGF)联合治疗大鼠急性肝衰竭(ALF)的可行性.方法 将ALF造模成功的37只SD大鼠分为4组:CC14组(A组,9只),CCl4/MSCs(B组,9只),CC14/pHGF组(C组,9只)和CC14/pHGF+ MSCs组(D组,10只).用携带hrGFP基因的慢病毒感染MSCs(hrGFP-MSCs),并以hrGFP示踪.对C、D组大鼠给予CCl4,同时腹腔注射pHGF;B组和D组造模12h后肝内注射hrGFP-MSCs悬液.对各组大鼠分别在造模后24 h、72 h、7天检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)水平,造模后72 h检测血清IL-6、IL-10、TNF-α炎症因子水平,造模后24 h取肝组织行HE染色,造模72 h行PCNA免疫组化染色检测肝细胞增殖情况.造模后72 h后取注射部位肝组织行冰冻切片观察移植hrGFP-MSCs肝内分布情况,对非注射部位肝组织进行实时荧光定量RT-PCR检测hrGFP基因含量.结果 联合治疗后,ALF大鼠外周血ALT水平降低,IL 6、IL-10、TNF-α炎症因子水平下调,肝脏病理组织学损害减轻,肝细胞增殖率增高.造模后72 h,B组与D组注射部位肝组织内可见移植的hrGFP-MSCs,非注射部位肝组织未见hrGFP荧光阳性细胞,但用实时荧光定量RT-PCR技术可在非注射部位肝组织内检测到hrGFP基因,且D组含量高于B组.结论 pHGF与MSCs联合治疗大鼠ALF的疗效优于MSCs或pHGF单独治疗,可能与pHGF促使其肝内定植MSCs增多有关.     

实时二维剪切波弹性成像评价急性肝衰竭大鼠肝脏硬度

目的 探讨实时二维剪切波弹性成像（2D-SWE）对于检测大鼠急性肝衰竭（ALF）和指导预防性用药治疗的应用价值。方法 将28只雄性SD大鼠分为4组，即对照组（8只）、模型组（8只）、乳果糖组（6只）和美常安组（6只）。实验第1~8天，对美常安组予以美常安稀释后灌胃，乳果糖组予以乳果糖灌胃，对照组和模型组予以等量生理盐水。实验第6、7天，对模型组、乳果糖组和美常安组大鼠均腹腔注射硫代乙酰胺，对照组注射生理盐水。实验第8天，采用2D-SWE技术测量4组大鼠肝脏硬度值（LSM）。构建ROC曲线，根据AUC选出准确率最高的LSM进行组间比较。实验第9天，取大鼠肝组织行病理检查。结果 模型组主要病理表现为炎症、坏死；美常安组及乳果糖组炎症坏死程度较模型组减轻；对照组表现为正常肝组织。根据模型组LSM构建的ROC曲线中，平均值诊断效能最佳；以8.44 kPa为截断值，其AUC、敏感度和特异度分别为0.768、100%和62.50%。模型组LSM较其他3组明显升高（P均<0.05）。结论 ALF大鼠LSM增高。2D-SWE对检测ALF及预防性用药后疗效评估具有一定价值。     

骨髓间质干细胞抑制大鼠肝纤维化形成的可能性：受体肝内干细胞存活时间、肝星状细胞活化程度及生存分析的7周观察

目的：观察在体外培养条件下，具有强大的增殖和分化为肝细胞能力的骨髓间质干细胞输注治疗肝纤维化模型大鼠对其肝纤维化形成的影响及肝功能和生存分析，并对治疗组、空白对照组和病理对照组7周内的相关情况予以对照比较。方法：实验于2003-08／2004-10在中山大学基础医学院病理学于病理生理实验室完成。①动物分组：选用雄性6周龄Wistar大鼠5只为供体，供分离骨髓间质干细胞；雌性6周龄Wistar大鼠60只，其中50只被造成肝纤维化模型，在首次用二甲基亚硝胺处理后的第10天，将造模大鼠随机分为2组：骨髓间质干细胞治疗组10只(为受体)，于治疗39d后结束实验，取材分析病理对照组40只。另10只作为空白对照组(仅静脉注射生理盐水)。②肝纤维化模型制作：在实验的当天，给予10g／L二甲基亚硝胺溶液(生理盐水配置)1mL／kg，腹腔注射，每周连续3次，共6周。③骨髓间质干细胞治疗组：每只大鼠输注3&;#215;106个骨髓间质干细胞；病理对照组：使用等体积生理盐水代替骨髓间质干细胞。④动物的一般生活状态：每天观察饮食、活动、二便、体质量、皮毛、呼吸情况等。⑤肝脏的组织细胞形态结构：将肝组织以苏木精-伊红染色后观察。⑥肝星形细胞及其活化程度检测：前者检测肝脏α-平滑肌肌动蛋白含量，用免疫组织化学染色法，后者以德国IBAS2．5图像分析软件半定量分析。⑦肝脏胶原分布的相对含量检测：采用Masson三色染色法，从而反映肝纤维化程度。⑧肝脏羟脯氨酸含量测定：采用氯胺T法。⑨血清总胆红素和谷丙转氨酶水平检测：采用全自动生化分析仪。⑩血清层粘蛋白和透明质酸水平测定：采用放射免疫法。（11）雄性大鼠骨髓间质干细胞在雌性大鼠肝内的Y染色体性别决定区基因的表达检测：采用聚合酶链式反应。（12）统计学分析：两组样本均数比较采用t检验；多组样本均数比较采用方差分析，两两比较采用q检验；生存分析采用Kaplan-Meier法。结果：雌性大鼠60只进入结果分析。①实验动物生存状况：造模6周后，骨髓间质于细胞治疗组生存率为80％，而病理对照组生存率为10％，空白对照组生存率为100％，说明骨髓间质干细胞治疗可能通过阻止肝纤维化发展，从改而善大鼠的生存率。②肝脏组织学显示，骨髓间质干细胞治疗组的肝脏结构明显改善，炎症减轻、假小叶结构减少或消散。相反，病理对照组出现广泛的肝脏结构重塑，包括增厚的纤维间隔形成和明显的桥接坏死。半定量分析胶原染色，骨髓间质干细胞治疗组较病理对照组显著减低(8．12&;#177;1．98．15．71&;#177;2．13，t=6．11，P&;lt;0．05)。③肝脏星状细胞活化的标志α-平滑肌激动蛋白的阳性表达：空白对照组仅见血管壁有少量α-平滑肌激动蛋白的阳性表达，而病理对照组和骨髓间质干细胞治疗组可见在纤维间隔、肝窦和汇管区内明显表达。半定量分析α-平滑肌激动蛋白的阳性染色，骨髓间质干细胞治疗组较病理对照组显著减低(11．06&;#177;2．03，18．50&;#177;3．87，t=4．47，P&;lt;0．05)。④Y染色体性别决定区基因的表达：经雄性Wistar大鼠(供体)骨髓间质干细胞治疗39d的雌性大鼠，肝脏DNA经聚合酶链式反应检测结果显示，Y染色体性别决定区基因的表达阳性，而空白对照组和病理对照组则无此阳性信号。说明骨髓间质干细胞移植后，能够在受体肝内存活5周以上。⑤反映肝脏纤维化程度的肝脏羟脯氨酸含量及血清层黏蛋白和透明质酸水平：骨髓间质干细胞治疗组明显高于空白对照组(P&;lt;0．05)但明显低于病理对照组(P&;lt;0．05)，说明骨髓间质干细胞治疗后能够减少肝脏胶原蛋白的含量，从而减少肝纤维化的形成，使肝纤维化得到控制。⑥反映肝功能的血清总胆红素、谷丙转氨酶水平：骨髓间质干细胞治疗组明显低于病理对照组(P&;lt;0．05)，接近空白对照组。说明了骨髓间质干细胞治疗有助于改善肝功能状态。结论：①二甲基亚硝胺能成功诱导大鼠肝纤维化模型的建立。②骨髓间质干细胞可改善肝纤维化大鼠的生存状况和肝功能。③骨髓间质干细胞能够减少肝脏胶原蛋白的产生，抑制肝纤维化形成。④肝纤维化发生发展过程中活化态的肝星状细胞数量减少可能是骨髓间质干细胞抑制肝纤维化形成的原因之一。⑤雌性大鼠肝脏内存在雄性供体Y染色体性别决定区基因的信号说明骨髓间质干细胞能够在受体肝内存活5周以上。     

用抗癫痫药物建立大鼠肝损伤的动物模型

目的 探讨抗癫痫药苯巴比妥、卡马西平对大鼠肝脏组织学及牛化指标的影响,建市抗癫痫药引起肝损伤的动物模型.方法 将7～8周龄Wistar大鼠随机分为4组,阳性对照组经腹腔注射四氯化碳（CCl4）原液1mL·kg-1.给药组,分别每日1次经口灌胃给予苯巴比妥（52.08mg·kg-1）,卡马西平（125.00mg·kg-1）,阴性对照组给予等体积的蒸馏水.每周采血检测血清生化指标,连续用药5周后,采血检测血清生化指标,应用光镜进行肝脏病理学研究.结果 （1）病理组织学检查,光镜下阳性对照组大鼠可见广泛的水性样变、空泡样变;苯巴比妥组大鼠可见部分水性样变,肝窦轻度水肿;卡马西平组大鼠可见水性样变.（2）与阴性对照组比较,苯巴比妥组、卡马西平组的肝脏指数有非常显著性差异（P〈0.01）.（3）与阴性对照组比较,苯巴比妥组、卡马西平组的血清丙氨酸氨基转移酶有显著性变化.结论 在治疗剂量范围内,连续服用抗癫痫药苯巴比妥、卡马西平5周可引起机体抗氧化能力降低,肝组织病理学检查可见轻微病理改变,引起大鼠肝损伤.     

滤泡辅助性T细胞在急性肝衰竭小鼠模型中的变化及意义

目的:探讨滤泡辅助性T(T follicular helper,Tfh)细胞及相关细胞因子白细胞介素(interleukin,IL)-21在急性肝衰竭(acute liver failure,ALF)小鼠模型中的变化及意义。方法:将20只雌性C57BL/6小鼠随机分成2组,分别予脂多糖/D-氨基半乳糖或磷酸盐缓冲液(phosphate buffer solution,PBS)腹腔注射,6 h后采集血液、肝脏和脾脏组织标本。采用苏木精-伊红染色法分析肝脏病变情况;流式细胞术分析小鼠脾脏单个核细胞中Tfh细胞的频数;酶联免疫吸附试验分析血清中IL-21和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)的水平。结果:ALF小鼠肝脏肿大而呈暗红色,肝细胞大量坏死和炎性细胞浸润,其血清中TNF-α及IL-21的水平均较正常对照组显著增高(P<0.01,P<0.05);而单个核细胞中CD4+CXCR5+、CD4+PD-1+、CD4+CXCR5+PD-1+T细胞频数亦较正常对照组显著升高(P<0.01)。结论:ALF小鼠脾脏单个核细胞中Tfh细胞频数显著增加,血清IL-21水平显著升高,推测Tfh细胞在ALF的发病过程中起重要作用,本研究结果可能为ALF的治疗提供新思路。     

非生物型人工肝治疗儿童急性肝衰竭的疗效分析

目的:探讨非生物型人工肝治疗儿童急性肝衰竭(acute liver failure,ALF)的疗效。方法:回顾分析2008年8月—2013年7月复旦大学附属儿科医院收治的47例儿童ALF患者的临床资料,其中17例患者采用常规内科综合治疗(对照组),30例患者在常规内科综合治疗基础上采用非生物型人工肝治疗(研究组),分析ALF患儿的年龄分布特征及病因情况,比较研究组患儿治疗前后主要生化指标、凝血功能指标的变化以及2组患儿病死率。结果:47例ALF患儿中≤1岁患儿23例、1~3岁10例、≥3岁14例;34.0%患儿病因不明。与治疗前比较,研究组患儿治疗后血清总胆红素(total bilirubin,TBIL)、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)均降低(P0.05),国际化标准比值(international normalized ratio,INR)、凝血酶原活度(prothrombin time activity,PTA)、白蛋白(albumin,ALB)均升高(P0.05)。研究组病死率低于对照组,但差异无统计学意义。结论:非生物型人工肝治疗儿童ALF是有效的,可改善患儿的生化指标、凝血功能及预后。     

腹腔穿刺引流联合亚胺培南注射治疗肝硬化自发性腹膜炎的疗效观察

目的观察腹腔穿刺引流联合亚胺培南注射治疗肝硬化自发性腹膜炎的临床疗效。方法 62例肝硬化自发性腹膜炎患者按各自治疗意愿分成治疗组(32例)和对照组(30例),对照组采用腹腔穿刺引流及静脉注射亚胺培南治疗,治疗组在对照组基础上加用腹腔注射亚胺培南治疗,两组疗程均为7 d。治疗结束后观察两组治疗效果及临床症状体征变化。结果治疗组治疗总有效率(75.0%)和病死率(9.4%)明显优于对照组治疗总有效率(60.0%)和病死率(20.0%)(P<0.05);治疗组患者治疗后临床症状体征缓解较对照组明显(P<0.05)。结论腹腔穿刺引流联合亚胺培南注射治疗肝硬化自发性腹膜炎疗效显著,可明显降低病死率,值得临床推广应用。     

紫杉醇联合顺铂腹腔热灌注化疗治疗晚期卵巢癌的疗效观察

目的观察紫杉醇联合顺铂腹腔热灌注化疗治疗晚期卵巢癌的临床疗效。方法 78例晚期卵巢癌患者随机分为两组,观察组(n=40例)采用紫杉醇联合顺铂腹腔热灌注化疗治疗,对照组(n=38例)采用紫杉醇联合顺铂静脉注射化疗治疗。比较两组临床疗效、无进展生存期、中位生存期、1年生存率、2年生存率、3年生存率及不良反应等。结果观察组腹腔热灌注化疗有效率(80.0%)明显高于对照组静脉滴注化疗有效率(63.2%)(P0.05);观察组无进展生存期、中位生存期、1年生存率、2年生存率和3年生存率均明显高于对照组(P0.05);观察组毒副反应发生率(42.5%)明显低于对照组(60.5%)。结论紫杉醇联合顺铂腹腔热灌注化疗治疗晚期卵巢癌疗效显著,可明显提高患者生存期及生存率,不良反应较少,值得临床推广应用。     

自体骨髓干细胞动员移植与手术移植治疗脊髓损伤的实验研究

目的探讨自体骨髓干细胞（BMSC）动员移植与手术移植治疗脊髓损伤（SCI）的疗效和机制。方法选用SD大鼠90只,建模前注射溴脱氧尿嘧啶核苷（Brdu）50mg·kg-1·d-1×3d后抽取自体骨髓,体外分离自体BMSC;New York University（NYU）Impactor制作SCI模型,随机分为对照组、动员移植组、手术移植组各30只。动员移植组应用G-CSF皮下注射,20mg·kg-1·d-1×7d;手术移植组为损伤局部移植0.3ml（1×107个/ml）BMSC。采用BBB评分检测大鼠后肢的运动功能;SEP和MEP检测脊髓上、下行神经传导通路,判断SCI和恢复程度;脊髓组织病理和免疫组织化学检测Brdu、GFAP、BDNF、NSE和FactorⅧ抗原,TUNEL检测细胞凋亡。结果 BBB评分1周以后动员移植组和手术移植组分别较对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）,SEP、MEP潜伏期和波幅2周后动员移植组和手术移植组较对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）,组织病理学显示动员移植组和手术移植组较对照组有更少的空洞、坏死及GFAP阳性胶质瘢痕组织,较多的Brdu阳性细胞和NSE阳性细胞。BDNF表达和微血管计数均较对照组显著增多（P〈0.05）,动员移植组和手术移植组细胞凋亡数较对照组显著减少（P〈0.05）。结论自体BMSCs动员移植和手术移植两种方法均能使BMSCs向脊髓损伤组织区聚集、增殖、分化,分泌神经营养因子、促进血管生成、减少细胞凋亡,促进神经再生与TBI修复,改善大鼠脊髓功能,促进损伤后的脊髓功能的恢复;二者对比,前者更为方便、无创,实用性强,更有可能抓住有限的治疗时机,因而应用前景可能更好。     

川芎嗪干预长春新碱抑制骨髓基质细胞增殖的研究

目的探讨川芎嗪(LH)促进小鼠骨髓基质细胞(BMSC)生长及干预长春新碱(VCR)抑制小鼠BMSC增殖的作用。方法①LH5、10、20、40μg/mL,以及VCR2.5、5、10、15μg/mL分别与BMC共同培养14d,测定细胞增殖。②LH5、10、20、40μg/mL与BMC预培养1h后再分别加入终浓度为5μg/mLVCR继续培养     

丹参注射液给药时间对预防顺铂耳毒性作用的影响

目的探索丹参注射液给药时间对预防顺铂耳毒性作用的影响。方法健康杂色豚鼠40只。随机均分为4组。1．对照组：腹腔注射顺铂1mg／kg／d。2．实验Ⅰ组：腹腔注射顺铂1mg／kg／d,6h后腹腔注射丹参注射液8mL／kg／d。3．实验Ⅱ组：腹腔同时注射顺铂和丹参注射液,剂量同上。4．空白组：腹腔注射生理盐水0．8mL／kg／d。各组连续6d。各组动物在实验前及结束后各做一次BAEP检测。以ABRⅢ波反应阈为检测听阈。结果对照组与实验组听阈在实验前后同组内相比均有提高,分别为：42．6±4．32dB、33±3dB、36．6±2．16dB,空白组为31．5±2．25dB。但实验Ⅰ组和实验Ⅱ组听阈分别比对照组低,差别显著。实验前后同组内相比听阈增加率：实验Ⅰ组〈实验Ⅱ组〈对照组,分别为：（6±8．4）％、（19．67±4．53）％、（39±17．4）％,差别显著。实验Ⅰ组与空白组相比无显著性差别。结论丹参注射液预防顺铂耳毒性作用与给药时间有关;认为丹参在顺铂使用后6h给药其预防顺铂耳毒性的作用更为显著。     

骨髓间充质干细胞对大鼠到小鼠胰岛移植的保护作用

目的 探讨同种异基因骨髓间充质干细胞(bone mesenchamal stem cells,BMSC)静脉输注对大鼠到小鼠胰岛移植物的功能保护和小鼠糖尿病状态改善.方法 全骨髓培养法获得C57BL/6小鼠BMSC.不连续梯度离心法分离纯化Sprague-Dawley(SD)大鼠胰岛,将300胰岛当量的胰岛单独或与BM...