应用PCR-SSCP银染检测膀胱癌中H-ras基因突变

目的 :了解膀胱癌中H ras基因突变情况。方法 :应用PCR SSCP银染和DNA测序技术对 31例膀胱癌组织进行检测。结果 :H ras基因突变发生率为 38 7% ,突变位点在H ras基因的第 1外显子的第 12位密码子 ,由GGC变为GTC。结论 :H ras基因突变与膀胱癌的发生发展存在着一定的联系 ,H ras基因突变可望作为膀胱癌早期临床诊断有价值的指标。     

维甲酸对胃癌裸鼠移植瘤中p53、H—ras和C—myc基因表达的影响

目的：探讨全反式维甲酸（ATRA）对胃癌裸鼠移植瘤中p53、H-ras和C－myc表达的影响。方法：采用免疫组化ABC法测定p53、H－ras,C-myc基因蛋白产物在胃癌裸鼠移植瘤中的表达水平。结果：MKN28和SGC7901胃癌裸鼠移植瘤经ATRA治疗后,突变型p53、C－myc基因表达水平降低,H－ras基因表达水平提高,但MKN45胃癌移植瘤细胞中p53、H－ras、C－myc基因表达与ATRA治疗无关。结论：ATRA抑制胃癌细胞增殖及诱导胃癌细胞分化的分子机制之一可能是通过调控P^53、H－ras、C－myc 的表达实现的。     

膀胱癌H—ras基因突变和P21蛋白表达的研究

目的 了解膀胱癌中H—ras基因突变和P21蛋白表达情况。方法 应用PCR—SSCP银染和免疫组化方法对31例膀胱癌组织分别进行检测。结果 发现H—ras基因突变发生率为38.7％,P21蛋白阳性率为71.0％。结论 二者存在一定的关联,并与临床分期、病理分级有密切联系。H—ras基因突变和P21蛋白表达可望作为膀胱癌诊断和判断预后有价值的指标。     

猪苓多糖对膀胱癌细胞癌基因蛋白表达的影响

目的：分析猪苓多糖对体外培养T24膀胱癌细胞癌基因蛋白表达的影响。方法：应用免疫荧光法、激光共聚焦显徽镜对p53、H—ras基因蛋白表达进行定位、定量观察．结果：猪苓多糖显著增加p53蛋白表达，24小时表达最高，呈弥漫性分布，随后逐渐下降；对照组在24小时表达很弱，48小时表达最强。猪苓多糖对H—ras基因蛋白表达无明显影响。结论：猪苓多糖对T24细胞p53基因蛋白表达有一定的调节作用，对H-ras基因蛋白表达无明显影响。     

大肠癌Ki-ras基因突变与肿瘤复发死亡

在大肠腺癌演变为大肠癌的进程中早期就发生了Ki－ras基因的突变。为了研究Ki-ras基因突变与肿瘤的特点及与病人预后的关系，英国的H.J．N．Andreyev等研究人员对13个国家和地区、22家医院的2721名大肠癌患者进行了研究。结果发现在37．7％的肿瘤中检出Ki－ras基因12密码子或13密码子的突变。N－ras基因突变80．8％发生在第12密码子。未发现Ki－ras基因突变与性别、年龄、肿瘤部位及DubS分期之间存在着联系。分化差的肿瘤较少发生突变。多变量分析表明：有m－＿基因突变的大肠癌病人其疾病复发的危险性增加以及死亡的危险性增加。尤其…     

纤维支气管镜脱落细胞H—ras基因突变对肺癌的诊断

为探讨纤维文气管镜直视下毛刷脱落细胞中H－ras基因突变在肺癌中的诊断价值。采用在纤维支气管镜直视下毛刷脱落细胞中应用PCR－RFLP方法（polymerasechainreactionrestrictionfragmentlengthpolymorphisms）检测H－ras基因点突变。对14例肺部疾病患者进行了检测。结果显示有7例首先在纤维文气管镜刷检的脱落细胞中发现H－ras基因点突变。而同时的细胞学检查为阴性，追踪观察1～8个月，病理诊断为肺癌。提示该方法是对可疑肺癌患者动态观察协助确诊的新手段。     

3-氯-4-二氯甲基-5-羟基-2(5氢)-呋喃酮诱导人胚胎肝细胞ras基因突变

背景与目的:研究饮水氯化消毒副产物3-氯-4-二氯甲基-5-羟基-2(5氢)-呋喃酮(3-chloro-4-(dichloromethyl)-5-hydroxy-2[5H]-furanone,MX)对体外培养的人胚胎肝细胞(L-02细胞)ras基因突变的诱导。材料与方法:MX染毒剂量为300μmol/L,以二甲基亚砜(DMSO)做溶剂对照,将L-02细胞连续染毒培养12d后,收获细胞提取基因组DNA,应用PCR-克隆测序法检测ras基因(K-ras、H-ras、N-ras)12、13、61密码子是否存在突变。结果:MX染毒组H-ras基因57密码子的GAT置换成GGT,未检测到K-ras、N-ras及H-ras12、13、61密码子突变,DMSO溶剂对照组相应的ras基因目的片段均未检测到突变。结论:MX可能诱导L-02细胞ras基因突变。     

K—ras基因在胰腺癌早期诊断中的研究进展

目前胰腺癌的手术切除率和 5年生存率仍然很低 ,关键在于早期诊断十分困难。近年来分子生物学研究发现 ,胰腺癌 K- ras基因第 1 2密码子点突变率很高 ,与胰腺癌发生早期关系密切 ,有望弥补目前临床诊断方法的不足 ,成为胰腺癌早期诊断的基因标志物。本文就近年来 K- ras基因在胰腺癌早期诊断中的研究进展作一综述。1　临床标本的 K- ras基因突变检测及意义1 .1　手术切除标本的 K- ras基因突变　 1 988年Almoguera等 [1]首次报道采用 Rnase A错配切割法检测手术切除标本中 K- ras基因突变 ,结果 2 2例胰腺癌中 2 1例检出突变 ,突变率为 …     

直肠癌K—ras基因突变和细胞动力学异常

采用扩增片段限制性长度多态性分析（Amp－RFLP）和流式细胞分析技术（FCM）对直肠癌切除标本、癌旁远端肉眼观察“正常”的肠组织及正常肠粘膜，结合病理资料，比较其细胞DNA倍体性、S期百分比和增殖指数，检测K－ras基因12位密码子点突变，结果表明：直肠癌是进展迅速的恶性肿瘤，细胞增殖活性异常升高；K－ras基因突变是伴随直肠癌的一种基因异常表现，癌旁组织出现基因水平的异常发生在组织形态学和细胞动力学改变之前，是癌变发生的早期行为。     

C—Ha—ras—1癌基因研究进展

1980年美国MIT的Weinberg等人,用人膀胱癌EJ细胞株DNA,转染NIH 3T3细胞,成功地分离鉴定出具有点突变的C-Ha-ras癌基因。随后又发现,C-Ha-ras-1隶属于ras癌基因家族。ras基因广泛存在真核生物中,迄今为止,人们已从哺乳动物、禽类、节肢动物,软体动物、植物、真菌及酵母中分离出ras基因,且在所有生物中ras基因及其产物都具有极高同源性。它们不仅在细胞增殖、分化等生物过程中起着十分重要的作用,而且ras结构及表达的改变,与肿瘤的发生及其恶性程度密切相关。因此,对它的研究越来越受到人们的关注。本文将对ras癌基因族中C-Ha-ras-1基因的     

PCR-SSCP分析法检测宫颈癌中H-ras、p53基因突变与HPV感染

 我们对40例宫颈癌活检组织同时进行HPV、H－ras、p53基因的检测，应用GP－PCR技术检测了多型HPV的感染，发现阳性率为85％（34／40）。HPV16转化基因E7占61．8％（21／34）。此外，利用PCR－SSCP（单纯DNA构象多态性）分析方法，对宫颈癌中H－ras、p53基因点突变进行了检测，H－ras突变占22．5％（9／40），p⁵³占2．5％（1／40），而H－ras突变在HPV感染阳性组织中占14．7％（5／34），其中3例的病程分期为Ⅲ期以上。结果表明：HPV16E7转化基因在宫颈癌的致癌过程中为关键基因，H－ras突变很可能与有关报道相一致，属于“迟发”事件，与肿瘤的恶性程度及浸润有关。而p⁵³5—6外显子基因突变在HPV感染的宫颈癌中发生率很低。     

膀胱癌中Ha—ras癌基因点突变和rasP21表达的研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术和寡聚核甘酸探针杂交法检测膀胱癌中Ｈａ－ｒａｓ癌基因第１２位密码于Ｇ→Ｔ突变，同时应用免疫组织化学方法检测了ｒａｓＰ２１在膀胱癌中的表达，在２９例膀胱癌中有１０例存Ｈａ－ｒａｓ癌基因第１２位密码子点突变，突变率为３４．５％，有１８例ｒａｓＰ２１表达为阳性，阳性率为６２．１％，结果提示Ｈａ－ｒａｓ癌基因第１２位密码子点突变和ｒａｓＰ２１的表达与膀胱癌病理分级，临床分期和     

泌尿系移行细胞癌c—erbB—2基因蛋白和表皮生长因子受体的表达及意义

探讨原部基因ｃ－ｅｒｂＢ－２基因蛋白和表皮生长因子受体在泌尿系移行细胞癌发生发展中作用。方法：应用免疫组织化学方法研究ｃ－ｅｒｂＢ－２和表皮生长因子受体在６５例泌尿系移行细胞癌的表达。结果：ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白在膀胱癌和肾盂癌的表达率分别为４０．４％和３８．９％；ＥＧＦＲ的表达率分别为膀胱癌４６．８％，肾盂癌４４．４％，ｃ－ｅｒｂＢ－２和ＥＧＦＲ表达均与膀胱癌和肾盂癌的分级和分期有关，ｃ－ｅｒｂＢ     

膀胱癌中nm23-H1基因突变及表达的意义

目的：探讨ｎｍ２３－Ｈ１基因在膀胱癌中突变及表达的意义。方法：应用半定量逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和银染单链构象多态性（ＳＳＣＰ）方法检测ｎｍ２３－Ｈ１基因在２５例膀胱癌组织及１５例对照组织中突变和表达情况。结果：对照粘膜中未检测出ｎｍ２３－Ｈ１基因突变,而在２５例膀胱癌组织中发现６例出现ＰＣＲ产物单链泳动状态异常,异常率为２４％。癌组织和对照组织均有ｎｍ２３－Ｈ１基因ｍＲＮＡ的表达,８８     

人膀胱移行细胞癌中癌基因C-myc、Ha-ras表达及意义

应用Dig标记的cDNA探针对5l例膀胱移行细胞癌石蜡切片进行C－myc、Ha－ras癌基因mRNA的原位杂交检测。结果显示，C－mycmRNA阳性率为62．75％（32／51），Ha－ras为70．6％（36／51）。两者的阳性率和阳性强度随肿瘤恶性程度的升高而增加。在临床分期较高的肿瘤中两者的阳性率亦明显增高。上述结果揭示，C－myc、Ha－ras癌基因在人膀胱移行细胞癌中的表达增强与膀胱癌的恶性程度及其肿瘤生物学行为有关，两者是判定膀胱癌恶性程度及预后有价值的指标，对制定合理的治疗方案可提供有意义的帮助。     

妊娠滋养细胞疾病c—Ha—ras基因突变及ras p21蛋白表达的研究

目的：探讨ｃ－Ｈａ－ｒａｓ基因突变及ｐ２１蛋白表达与妊娠滋养细胞疾病（ＧＴＤ）发生发展的关系。寻找具有特异性的可预测ＰＴＤ的诊断标记。方法：采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ法及ＳＰ免疫组化法,对９０例ＧＴＤ组织中ｃ－Ｈａ－ｒａｓ基因第１外显子点突变及其产物ｐ２１表达进行检测,以正常足月新鲜胎盘３０例为对照。结果：所有正常胎盘组织ｒａｓ突变及ｐ２１表达均为阴性。     

nm23—H1基因与乳腺癌转移和预后的关系及其突变的研究

采用免疫组化染色分析100例乳腺癌组织的nm23－H1基因表达与腋窝淋巴结转移和预后的关系，发现阳性表达者的5年无瘤生存率为84．8％（39／46），明显高于阴性表达者的52．9％（18／34），P＜0．01。进一步对20例采用RNA提取、PT－PCR、PCR－SSCP等方法检测乳腺癌组织中nm23－H1基因mRNA表达和突变情况，发现有突变的乳腺癌其基因表达均为阴性，胶窝淋巴结转移均为阳性（P＝0．036）。研究结果提示：nm23－H1基因突变可能易发生于晚期乳腺癌，同时检测nm23－H1基因mRNA表达水平和突变情况可作为判断乳腺癌（尤其是无淋巴结转移乳腺癌）的一项指标。     

对92例胃癌c—K—ras癌基因表达的观察

对９２例胃癌ｃ－Ｋ－ｒａｓ癌基因表达的观察么景满张振忠薄爱华①夏苓①张林西①张家口医学院第一附属医院外科（河北省张家口市０７５０００）有学者报告［１，２］ｃ－Ｋ－ｒａｓ基因突变在胰腺癌中占９０％，日本胰腺癌患者ｃ－Ｋ－ｒａｓ基因突变者达１００％，说...     

膀胱癌中Ha－ras癌基因点突变和ras P21表达的研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术和寡聚核甘酸探针杂交法检测膀胱癌中Ｈａ－ｒａｓ癌基因第１２位密码子Ｇ→Ｔ突变，同时应用免疫组织化学方法检测了ｒａｓＰＺＩ在膀胱癌中的表达。在２９例膀胱癌中有１０例存在Ｈａ－ｒａｓ癌基因第１２位密码子点突变，突变率为３４．５％，有１８例ｒａｓＰ２１表达为阳性，阳性率为６２．１％。结果提示Ｈａ－ｒａｓ癌基因第１２位密码子点突变和ｒａｓＰ２１的表达与膀胱癌病理分级、临床分期和膀胱癌的复发密切相关。Ｈａ－ｒａｓ癌基因第１２位密码子点突变与ｒａｓＰ２１的表达是一致的。     

膀胱癌组织CD15和c—erbB—2的表达及相关性研究

目的：研究ＣＤ１５和ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白产物在义癌组织中的表达与病理分级,临床分期,复发和转移的关系,并探讨ＣＤ１５与癌基因蛋白表达的相关性。方法：应用微波－ＬＳＡＢ免疫组化法,检测５２例膀胱癌组织中ＣＤ１５和ｃ－ｅｒｂＢ－２的表达水平。结果;在膀胱癌中ＣＤ１５和ｃ－ｅｒｂＢ－２阳性表达率分别为６９．２％和３８．１％。