CD8~+细胞对HIV复制的抑制

CD4~+ T淋巴细胞是HIV感染的靶细胞。HIV感染后,体内CD4~+细胞数减少,最后导致免疫系统的全面崩溃。但目前人们发现CD8~+ T 淋巴细胞在抗HIV 复制中有重要作用,主要通过两条途径:①释放细胞因子抑制HIV 在细胞内复制;②通过细胞毒作用杀伤已被HIV 感染的靶细胞。     

CD_8~+T淋巴细胞产生的一种扩散性淋巴因子可抑制HIV复制

已经证实取白健康HIV 感染者末梢血的CD_8~+淋巴细胞可阻止HIV 在培养的末消血单个核细胞(PBMC)内复制,除去CD_8~+细胞便可导致HIV 的复制和释放。本文报导的结果证实,CD_8~+T 细胞的抗病毒活性至少有一部分是由淋巴因子调节的,并证实来自不同个体的CD_8~+细胞产生抗病毒因子的能力不同。     

可溶性CD_4能选择地抑制HIV复制和细胞融合

CD_4(T_4)表达于T细胞亚群,此分子参与Ⅱ类MHC识别,也是HIV包膜糖蛋白(gp120)的受体,为病毒进入宿主细胞并导致膜融合所必须的结构,亦与病毒在各细胞间传播和细胞病变效应(CPE)有关。用重组DNA技术制备并感染Spodoptera frugiperda(SF9)细胞,此细胞分泌的产物经SDS—PAGE后用Coomassie蓝染色,显示50K74exl和51KT4ex2的两种蛋白质,分别测定氨基酸序列,发现这两种蛋白质的氨基酸序列相同于由CD_4cDNA推算的氨基酸序列。     

CD_4影响CD_4~+、CD_8~+胸腺细胞TCR新转译后调节

以往已发现,抗CD_4单抗注入小鼠能使不成熟CD_4~+CD_8~+胸腺细胞表面TCR 数目增加3～4倍。这是因为抗CD_4单抗在体内作用于CD_4~+CD_8~+胸腺细胞后使其表面的各种TCR 亚单位(α、β、γ、δ、ζ2ε、)表达增加。作者为了分析此增加是由于受体总数增加,还是由于细胞内及其表面原有受体重分配的结果,故将对照小鼠及抗-CD_4单抗处理小鼠的CD_4~+CD_8~+细胞先以去污剂溶解,然后用抗-CO_(?)-δ抗体分离TCR,再用免疫印迹法(Immunohoting)测定CD_3-δ总量。结果     

香烟烟雾提取物抑制树突状细胞诱导CD4~+T细胞分化为CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞

目的探讨香烟烟雾提取物(CSE)暴露及抑制CD40-CD40L路径对小鼠髓源性树突状细胞(BMDC)诱导CD4~+T细胞分化为CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞(Treg)的影响。方法使用40 ng/m L重组小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rm GM-CSF)和10 ng/m L重组小鼠白细胞介素4(rm IL-4)联合诱导无特定病原体级健康雄性BALB/c小鼠骨髓来源的单个核细胞分化为树突状细胞(DC),流式细胞术检测小鼠BMDC表面CD40分子的表达,再采用免疫磁珠分选的方法从BALB/c小鼠脾脏细胞分离出CD4~+T细胞。将所培养出的小鼠BMDC与正常对照组小鼠脾脏细胞分选的CD4~+T细胞共培养,加入CSE及拮抗性CD40抗体,作用24 h;流式细胞术观察各组细胞CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg的变化,液相芯片技术检测细胞上清液白细胞介素10(IL-10)、IL-6的水平。结果 BMDC与CD4~+T淋巴细胞共培养可以促进CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg分化,经CSE刺激后,流式细胞术检测显示小鼠BMDC与CD4~+T细胞共培养后分化的CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg数量降低,细胞上清液IL-10降低、IL-6的水平升高;而加入拮抗性CD40抗体细胞共培养组CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg增加,液相芯片检测细胞上清液IL-10上升、IL-6的水平下降。结论 CSE减少CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg数量,体外使用拮抗性抗CD40抗体阻断CD40-CD40L通路可以促进CD4~+T细胞分化为CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg。     

HAART对FAS介导的CD_4~+T细胞凋亡的影响

Fas抗原的表达在 HIV- 1致病过程中起重要作用。随着病情的进展 ,细胞表面 Fas抗原的表达也随之增加。通过 Fas抗原介导的细胞凋亡是 CD+ 4T减少的重要原因。 HAART的应用能使艾滋病患者的预后得到明显的改善 ,激起人们加深对 Fas介导的细胞凋亡的研究。本文就此进行综述。     

CD_4分子介导不成熟CD_4~+CD_8~+双阳性胸腺细胞的TCR表达与功能的抑制作用

本文直接估价了未成熟的CD_4~+CD_8~+双阳性胸腺细胞中CD_4介导的信号对T 细胞抗原受体(TCR)表达与功能的影响。当向体内分别注入交联后IgG 型和多价的IgM 型抗CD_4分子单克隆抗体时,可明显抑制胸腺细胞TCR 的表达量。还观察到,此时的细胞状态与以前证明的当TCR 复合体的亚单位TCR—ζ链磷酸化后TCR 表达是一致的。但未交联的IgG 型抗CD_4单抗则无抑制胸腺细胞TCR 表达的效应。     

中国HIV感染者细胞毒性淋巴细胞与CD4~+CD25~+调节性T细胞相关性研究

目的：对中国HIV感染者NK细胞、CD8^＋T细胞及胞内穿孔素、颗粒酶-B表达与CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞水平的相关性进行研究,探讨调节性T细胞在HIV感染中的作用机制。方法：选取73名HIV/AIDS患者（长期不进展组、无症状HIV组、AIDS组）,应用流式细胞仪胞内染色技术检测NK细胞、CD8^＋T细胞数量及胞内穿孔素、颗粒酶-B表达水平,分析其与CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞水平的相关性。结果：CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞百分率与NK细胞、CD8^＋T淋巴细胞数量呈明显负相关（P〈0.01）,与CD8^＋T细胞内穿孔素、颗粒酶-B表达百分率呈明显正相关（P〈0.05）,与NK细胞内穿孔素、颗粒酶-B表达水平绝对值负相关（P〈0.01）,与CD8＋T细胞内颗粒酶-B表达绝对值呈明显负相关（P〈0.01）,与CD8^＋T细胞内穿孔素表达绝对值无明显相关性（P〉0.05）。CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞绝对值与CD8^＋T细胞内穿孔素、颗粒酶-B表达百分率呈明显负相关（P〈0.05）。结论：中国HIV感染者细胞毒性淋巴细胞数量功能的变化与调节性T细胞显著相关,提示高水平的调节性T细胞可能与细胞毒性淋巴细胞耗竭相关,可能为导致疾病进展的原因之一。     

IL-15通过Bcl-xl抑制CD4~+CD25~+调节性T细胞凋亡

目的探讨IL-15抑制CD4+CD25+调节性T细胞(Tregs)凋亡的作用及机制,为临床应用IL-15提供理论依据。方法采用免疫磁性细胞分离法分离人外周血中的Tregs,流式细胞仪检测该细胞纯度。将Tregs细胞培养液中加入Dynabeads CD3/CD28T cell expander,依据是否加入细胞因子分为三组:对照组(不加入任何细胞因子);IL-2组(100U/ml)和IL-15组(50ng/ml)。流式细胞仪检测细胞凋亡率,3H-TdR掺入法检测细胞因子存在下Tregs抑制CD4+CD25-效应T细胞(Teff)增殖的免疫功能,Western-blot法检测细胞内Bcl-2、Bcl-xl及p-Bad(ser112)的变化。结果分选后Tregs纯度为95.2%,胞内因子染色Foxp3在Tregs中的表达率为94.2%。IL-2组和IL-15组的细胞凋亡率(即凋亡细胞与细胞总数之比)分别为(11.32±0.43)%和(9.89±5.38)%,二者之间无显著性差异,但均显著低于对照组(87.12±1.43)%,P<0.001。在细胞因子存在的情况下,IL-2组活化的Teff增殖较对照组和IL-15组显...     

献血员CD8~+T细胞的增加对CD4~+T细胞的抑制作用

实验发现 6 5 %体检合格的献血员外周血CD8+T细胞数量明显增加 ,并伴随CD16 +淋巴细胞数量的增加。这些异常的淋巴细胞与葡萄球菌肠毒素B (SEB )共同培养 6d ,CD4+T细胞无增殖反应。预先用抗CD8抗体去除CD8+T细胞 (去除率 >90 % )再用SEB刺激淋巴细胞 ,其应答能力恢复正常。增殖的细胞是CD4+T细胞 ,它们由 34 0 4%增加到 99 34%。CD8+T细胞由最初的 9 5 7%降低到 0 12 %。这些结果显示过量的CD8+T细胞有可能是被外原性抗原活化的T细胞。它们直接抑制CD4+T细胞对SEB的免疫应答反应 ,但不破坏CD4+T细胞的TCRVβ结构。     

CD4~+CD25~+T细胞在CD8~+T细胞抗肿瘤免疫中的调节作用

实验旨在研究CD4+CD25+T细胞在CD8+T细胞抗肿瘤免疫中的调节作用。将小鼠脾脏中分离的单个核细胞分为两组,即去除CD4+CD25+T细胞组和未去除CD4+CD25+T细胞组,测定树突状细胞提呈的肿瘤抗原多肽刺激不同T细胞增殖活性、细胞因子IFN-γ分泌,以及多肽特异性CD8+T细胞对同源性胃癌细胞株MFC的杀伤活性。结果显示预先去除未致敏T细胞中的CD4+CD25+T细胞,所诱导的特异性CD8+CTL对肿瘤细胞免疫应答增强,表现为反应性T细胞对树突状细胞提呈的肿瘤抗原多肽增殖反应增强,IFN-γ分泌量提高及CD8+T细胞对MFC杀伤活性增强。这些结果表明,预先去除未致敏T细胞中的CD4+CD25+T细胞,肿瘤抗原多肽修饰的树突状细胞肿瘤疫苗效能可明显增加。CD4+CD25+T细胞在CD8+T细胞抗肿瘤免疫中起下调作用。     

CD4~+T细胞功能的双重性

<正> T细胞受体由 CD3分子与α、β两条异质性的肽链共同组成。已知T细胞分为OD4~+和CD8~+两个亚群。CD4~+细胞亚群并非都是T辅助细胞,因为①CD4~+细胞具有多种功能,只有一部分细胞能够活化抗原特异性B细胞;②CD4分子与识别连结在MHC分子的外来多肽抗原密切相关,它决定着MHCII     

CD4~ T细胞的抗瘤作用

CD4 T细胞在机体抗瘤免疫反应中的作用越来越受到重视,CD4 T细胞不仅可以分泌大量的细胞因子和辅助CD8 T细胞杀伤肿瘤细胞,而且CD4 T细胞在肿瘤免疫中具有免疫记忆和直接杀伤肿瘤细胞的功能,因而在机体的抗瘤免疫反应中起重要作用。过继转输CD4 T细胞是肿瘤过继免疫治疗的一个新方案。     

人体T细胞CD_8~+VV~+亚群在活动性SLE患者中显示反抑制活性

反抑制T 细胞(TCS)借助T 辅助细胞对抗T 抑制细胞的抑制效应,参与免疫调节。小鼠和人体的TCS 都表达长绒毛野豌豆凝集素受体(VV—R)。人体TCS 则主要是CD_8~+VV~+T 亚群,和临床多种疾病免疫功能异常密切相关。本文用抗VV 抗体单色和双色免疫荧光法和流式法细胞术(FCM)测知正常人VV~+T 亚群的比例是16.6±2.9%。用FCM 双色免疫荧光法检测到活动期SLE 患者CD_8VV~+亚群百分比高达23.63%和对照组(8.50%)及稳定期(14.49%)相比差异显著。然而CD_4~+VV~+亚群在三组SLE 中基本不变。进一步深入分析是做有关CD_8VV~+T 细胞亚群的功能测定,证实活动性SLE 患者VV~+T 细胞具有比正常个体高得多的反抑制活性,相对反应值从100%提高到485%和625%。提示CD_(?)VV~+细胞和SLE 免疫调节功能紊乱密切相关。     

HIV Tat蛋白增加CD4+ T淋巴细胞bcl-2表达并抑制TRAIL诱导的细胞凋亡

目的探讨HIV Tat蛋白对CD4^＋ T淋巴细胞bcl-2表达的影响，并探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）与经HIV Tat蛋白刺激后的CD4^＋ T淋巴细胞凋亡的相互关系。方法用Western blot方法测定经HIV Tat蛋白刺激后，CD4＋ T淋巴细胞表达bcl-2的水平，以λ-氨基放线菌素D（7-AAD）和AnnexinV染色方法测定CD4＋ T淋巴细胞的凋亡。结果HIV Tat蛋白能明显增加CD4＋ T淋巴细胞bcl-2的表达，以100ng/ml为最佳浓度；7-AAD染色结果表明100ng/ml重组TRAIL能诱导53．85％±2．63％的CD4^＋ T淋巴细胞发生凋亡，如CD4^＋ T淋巴细胞经HIV Tat蛋白刺激后，则仅有16．04％±5．26％的细胞发生凋亡，此作用能被多克隆抗-Tat蛋白抗体抑制。Annexin V染色取得了同样的结果。结论经HIV Tat蛋白刺激后CD4^＋ T淋巴细胞bcl-2的表达明显增加，并能抑制由重组TRAIL诱导的细胞凋亡，提示HIV Tat蛋白是导致HIV在CD4^＋ T淋巴细胞内持续感染的重要调节蛋白，在HIV感染中起十分重要作用。     

美洲商陆对人胎儿胸腺细胞表型的影响

利用妊娠中期水囊引产的胎儿胸腺细胞，通过直接免疫荧光染色技术，借助流式细胞计，研究了ＰＷＭ，对胎儿胸腺细胞表型的影响。结果表明：ＰＷＭ能诱导胸腺细胞ＣＤ３分子和ＨＬＡ－Ⅰ类抗原表达增加，ＣＤ１分子表达减少，ＣＤ３８分子变化不大。     

CD4~+CD25~+调节性T细胞和肿瘤免疫

近期研究发现一个有独特免疫调节功能的T细胞亚群 :CD4 + CD2 5 + 调节性T细胞 ,不仅能抑制自身免疫性疾病发生 ,还可能参与肿瘤免疫的调节。这群细胞具有免疫无能和免疫抑制特性 ,通过与细胞直接接触发挥作用 ,而不依赖于其分泌的细胞因子。肿瘤环境中CD4 + CD2 5 + 调节性T细胞比例增加 ,导致肿瘤免疫失调 ,去除这群细胞可有效诱导肿瘤免疫 ,为肿瘤治疗提供了一种新的方法。     

HIV感染后CD4~+ T细胞表面NK相关受体表达的变化

目的研究人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染后CD4+T细胞表面NK相关受体表达的变化。方法选取25例未经高效抗逆转录病毒治疗的HIV感染者、11例AIDS患者、15例进行高效抗逆转录病毒治疗(highly activeantiretroviral therapy,HAART)者和13例HIV抗体阴性健康对照,用流式细胞仪检测研究对象外周血CD4+T细胞表面NKG2D、NKG2A和KIR3DL1的表达。结果 AIDS患者CD4+T细胞表面NKG2D表达的百分比显著高于其他各组,且NKG2D表达的百分比与CD4+T细胞的绝对数量呈负相关(R=-0.352,P<0.05),与HIV病毒载量呈正相关(R=0.426,P<0.05)。AIDS患者CD4+T表面NKG2A表达的百分比显著高于其他各组,NKG2A+NKG2D-表达的百分比显著高于其他各组,且NKG2A表达的百分比与CD4+T细胞的绝对数量呈负相关(R=-0.432,P<0.01)。结论 HIV感染机体后,CD4+T细胞NK相关受体表达变化与疾病进展相关。     

小鼠CD4~+ CD25~+ Foxp3~+调节性T细胞体外扩增

目的:本研究旨在探讨CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞体外扩增的方法。方法:采用磁珠分选小鼠CD4+T细胞,αCD3单克隆抗体包被24孔板,加入αCD28单克隆抗体、雷帕霉素、rhIL-2,培养3周后,流式细胞仪测定培养细胞中CD4+CD25+T细胞的含量,实时定量PCR检测CD4+CD25+T细胞Foxp3 mRNA的表达;单向混合淋巴细胞反应和增殖抑制试验测定扩增的CD4+CD25+T细胞的增殖及其抑制功能;ELISA检测培养上清中IL-10和TGF-β1的含量。结果:小鼠CD4+T细胞培养3周后,CD4+CD25+T细胞达(76.05±2.73)%,高于未加雷帕霉素组(52.17±1.36)%(P<0.001),磁珠分选的CD4+CD25+T细胞Foxp3 mRNA的表达是未加雷帕霉素组的5倍(P<0.001),增殖能力是未加雷帕霉素组的0.29倍(P<0.001),对CD4+T细胞增殖抑制能力是未加雷帕霉素组的3.6倍(P<0.001),培养上清中IL-10和TGF-β1分别是对照组的1.8倍和1.6倍(P<0.001)。结论:小鼠CD4+T细胞在含有1μg/ml的αCD28、rhIL-2 100 U/ml和终浓度为10 nmol/L雷帕霉素的培养体系中培养3周后能有效扩增CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞。     

IL-2抑制小鼠CD4~+ CD62L~+ T细胞分化为Th17细胞

目的研究IL-2对小鼠脾脏CD4+CD62L+T细胞在体外向Th17细胞分化的作用。方法免疫磁珠法分选C57BL/6小鼠脾脏CD4+CD62L+T细胞,于抗体包被的培养板中培养3 d,实验分为对照组和IL-2处理组。对照组为经典Th17诱导分化培养基,IL-2处理组在对照组基础上于培养体系中添加IL-2。CFSE染色检测细胞增殖,Annexin V-PI法检测细胞凋亡,ELISA检测培养上清中IL-17A的浓度,荧光定量PCR检测Rorγt mRNA的表达,流式细胞术检测CD4~+IL-17~+Th17的生成比例以及Rorγt的表达。结果磁珠分选的小鼠脾脏CD4+CD62L+nave T细胞纯度高于95%。与对照组相比,IL-2处理组细胞数目明显增多,增殖能力明显增强(P0.05),细胞凋亡比例降低(P0.05);IL-2处理组培养上清中IL-17A的浓度明显降低(P0.05),且CD4+IL-17+细胞比例下降,其特异性转录因子Rorγt的表达水平也显著降低(P0.05)。结论 IL-2在CD4+CD62L+T细胞分化为Th17的过程中,能够促进T细胞的增殖并且抑制Th17的分化。