白花丹血清指纹图谱的初步研究

目的对民族药材白花丹进行血清指纹图谱的初步研究,为确定白花丹的药效成分奠定基础。方法建立白花丹醇提取物、口服白花丹后大鼠含药血清和空白血清的HPLC指纹图谱的分析方法,确定白花丹中的入血成分。结果在白花丹含药血清中发现了1个入血成分。结论1个入血成分可能成为白花丹的体内直接作用物质。     

基于中医药整合药理学和转录组学探究丹栀逍遥散防治焦虑肝郁化火证的作用机制

目的 基于中医药整合药理学和转录组学探究丹栀逍遥散防治焦虑肝郁化火证的作用机制。方法 采用中医药整合药理学研究平台v2.0,检索并获取丹栀逍遥散的活性成分及靶标、焦虑肝郁化火证靶标信息,构建中药-成分-靶点-通路网络。将交集基因导入String数据库,构建交集靶点的蛋白互作网络,以确定最终需要验证的靶标。利用GEO数据库转录组学验证整合网络药理学结果,同时采用动物实验进行验证。结果 共筛选出与焦虑肝郁化火证相关的靶标13个,丹栀逍遥散活性成分430种。整合药理学结果显示,丹栀逍遥散防治焦虑肝郁化火证主要通过调控α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异噁唑丙酸受体（α-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazole propionic acid receptor,AMPAR）、蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)、N-甲基-D-天冬氨酸（N-methyl-D-aspartic acid,NMDA）受体的激活及磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositide 3-kinases,PI3K）/蛋白激酶B(protein kinase B,...     

丹栀逍遥胶囊与溴隐亭联用治疗高泌乳素血症30例临床观察

目的:观察丹栀逍遥胶囊与溴隐亭联合治疗高泌乳素血症的临床疗效。方法:将高泌乳素血症患者90例分为丹栀逍遥胶囊组、溴隐亭组、丹栀逍遥胶囊+溴隐亭组,每组30例,各组采用相应药物治疗,观察比较3组临床疗效。结果:3组血清催乳素、促卵泡刺激素、黄体生成素水平均较治疗前改善(P0.05),丹栀逍遥胶囊+溴隐亭组较丹栀逍遥胶囊组和溴隐亭组效果更加明显(P0.01)。丹栀逍遥胶囊+溴隐亭组较其余两组更为明显(P0.01)。丹栀逍遥胶囊+溴隐亭组治疗后的总有效率(90.00%)明显优于丹栀逍遥胶囊组(60.00%)和溴隐亭组(56.67%),组间比较,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:采用丹栀逍遥胶囊联合溴隐亭治疗高泌乳素血症有较好疗效。     

基于UPLC-Q-TOF/MS分析止痛化徵胶囊的入血成分

研究止痛化癥胶囊(ZTHZC)灌胃给予大鼠后的入血成分,为其药效物质基础研究提供参考。选取雌性Wistar大鼠为实验对象,灌胃给予ZTHZC,给药剂量为1.5 g·kg-1,收集血清样品,采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用(UPLC-Q-TOF/MS)技术与多元统计分析相结合的方法快速分析并鉴定吸收入血的原型成分。结果表明,在大鼠含药血清中共鉴定出15种入血成分,均为原型成分,分别为丹参素、丹酚酸A、B、C、D、9, 12-二羟基-15-十九碳酸、亚油酸、棕榈油酸乙酯、延胡索乙素、延胡索甲素,黄芪甲苷、黄芪皂苷Ⅱ、芒柄花黄素、刺芒柄花苷、木犀草素。该实验说明15种入血成分可能是ZTHZC在体内直接作用物质,为其药效物质基础研究提供科学依据。     

疏肝法对围绝经期综合征肝郁证模型大鼠雌激素受体mRNA表达的影响

目的：观察疏肝法对围绝经期综合征(perimenopausal syndrome, PMS)肝郁证模型大鼠行为学及其卵巢雌激素受体(Estrogen receptor, ER)mRNA表达的影响,探讨其作用机制。方法将围绝经期大鼠按随机数字表法分为模型组、柴胡疏肝散组、丹栀逍遥散组,每组8只。采用孤养法联合慢性束缚法制备PMS肝郁证大鼠模型。另将8只3月龄SD健康大鼠作为正常对照组。柴胡疏肝散组大鼠灌胃柴胡疏肝散水煎剂4.0 g/kg,丹栀逍遥散组灌胃丹栀逍遥散水煎剂4.9 g/kg,模型组及正常对照组灌胃等体积生理盐水,1次/d,连续给药21 d。采用旷场实验观察各组大鼠行为学变化;采用放射性免疫技术检测大鼠血清雌二醇、卵泡刺激素及促黄体生成素水平;采用实时荧光定量PCR法检测大鼠卵巢组织ERα、ERβ mRNA表达变化。结果给药后21 d,与模型组比较,柴胡疏肝散组、丹栀逍遥散组大鼠水平运动得分[(49.6±6.0)分、(51.6±5.8)分比(40.0±4.6)分]、垂直运动得分[(14.1±0.7)分、(14.6±2.3)分比(10.9±1.8)分]提高(P＜0.05及P＜0.01);柴胡疏肝散组大鼠卵巢ERα mRNA[(7.42±2.54)比(3.80±1.36)]表达水平升高(P＜0.01),血清卵泡刺激素[(3.96±0.48)mIU/ml比(5.31±0.41)mIU/ml]水平降低(P＜0.01);丹栀逍遥散组大鼠血清促黄体生成素[(6.65±0.46)mIU/ml 比(8.10±0.62)mIU/ml]水平降低(P＜0.01)。结论疏肝法可改善 PMS 肝郁证大鼠的行为学,其治疗机制可能与调节内分泌及提高卵巢雌激素受体基因表达相关。     

基于MAPK通路研究五味甘露药浴散加减方治疗类风湿关节炎的药效机制

研究发现五味甘露药浴散加减方药浴有良好的抗炎活性,可以明显改善关节炎症程度,对类风湿性关节炎具有一定的治疗作用,推测其可能与调控滑膜细胞MAPK通路有关。该实验通过建立佐剂关节炎大鼠(AA)模型,进一步探讨其调控滑膜细胞MAPK通路的机制。采用酶联免疫法测定给药2周AA大鼠血清中TNF-α的水平,免疫组化法测定给药4周踝关节滑膜组织蛋白激酶ERK1/2,p38的含量,采用荧光定量PCR(RT-PCR)法检测膝关节滑膜组织中JNK1,ERK1,p38的mRNA表达。结果显示,与模型组比较,给药2周,可明显降低AA大鼠血清中TNF-α的水平(P0.05);给药4周,降低踝关节滑膜组织中p38,ERK1/2的蛋白表达(P0.05或P0.01),降低膝关节滑膜组织JNK1,p38,ERK1的基因表达(P0.05或P0.01)。综上可见,五味甘露药浴散加减方有效治疗类风湿关节炎的作用机制可能与其降低血清中TNF-α的水平和滑膜组织中p38,ERK1/2的表达以及JNK1,p38,ERK1的基因表达,调控MAPK通路有关。     

泽漆水提物对LPS诱导的急性肺损伤的影响

目的 探讨泽漆水提物对LPS诱导的急性肺损伤(ALI)炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6及蛋白JNK、p38、ERK1/2的影响.方法 采用血清药理学的方法,给予SD大鼠连续灌胃给药3 d,取血制备空白血清和含药血清.采用RAW264.7细胞进行细胞实验,用含药血清预给药1 h后,加入LPS刺激细胞,共孵育18 ...     

加味小柴胡汤抗胃溃疡有效物质部位的血清药物化学研究

该文应用色谱-质谱技术对加味小柴胡汤抗胃溃疡有效物质部位进行血清药物化学研究。通过小鼠无水乙醇致胃溃疡模型考察了全方和有效部位组方抗胃溃疡的药效作用,两者均能明显降低无水乙醇致小鼠溃疡;通过气相-质谱法,检测挥发性部位的化学成分和灌胃给药无水乙醇诱导的大鼠胃溃疡模型后的入血成分,共分析鉴定了63个化合物,约占挥发油总量的93%以上。其中α-姜黄烯23.51%,姜烯11.96%,莪术呋喃烯9.56%,β-倍半水芹烯6.54%,莰烯4.77%,为加味小柴胡汤挥发性物质部位的主要成分,在抗胃溃疡的含药血清中检测到6个原形成分;通过液相-质谱法,正负离子模式同时检测生物碱物质部位提取物化学成分和灌胃给药无水乙醇诱导的大鼠胃溃疡模型后的入血成分,共分析鉴定出17个化合物,在抗胃溃疡的含药血清中检测到6个原形成分,及3,5-O-feruloylquinic acid,巴马汀2个代谢成分。该研究明确了加味小柴胡汤抗胃溃疡的主要有效化学成分,阐明了其药效物质基础,为该经典方剂治疗胃溃疡的创新性临床应用提供科学实验依据,并为进一步的中药新药研制提供基础。     

通塞脉微丸血清药物化学的初步研究(Ⅰ)

目的 研究通塞脉微丸复方大鼠给药后血清中移行成分的归属.方法 建立通塞脉微丸及大鼠ig通塞脉微丸后血清的HPLC色谱分析方法;比较全方制剂、金银花、当归、甘草、玄参、黄芪和石斛各单方制剂分别给药后所得的血清样品,分析口服通塞脉微丸后大鼠血中移行成分、来源生药及其代谢产物.结果 大鼠ig通塞脉微丸后从血清中发现了15种入血成分,其中10种成分为复方所含成分的原型,其中绿原酸、阿魏酸、甘草素和肉桂酸为已知确定结构的化合物,另外5种成分分别来源于金银花、当归、甘草、玄参和石斛,其具体结构还有待进一步检测分析;1种为复方给药后新产生的代谢物质;3种为给药后产生的未知化合物.结论 血中移行成分及其代谢产物是通塞脉微丸的体内直接作用物质,对其深入研究将有助于阐明复方效应的物质基础.     

丹栀逍遥散含药血清逆转乳腺癌MDA-MB-231细胞能量代谢重编程

目的:观察丹栀逍遥散含药血清对乳腺癌MDA-MB-231细胞的影响,探讨其作用机制是否与干预能量代谢相关.方法:6周龄SD雄性大鼠30只,随机分为空白组、丹栀逍遥散水煎剂组(8.99g·kg-1)、西黄丸组(0.55g·kg-1),药物干预7d,分离血清.噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期,An...     

抗纤灵方对体外培养肾成纤维化细胞TGF-β1/p38MAPK信号通路干预的实验研究

目的:观察抗纤灵含药血清对大鼠成纤维细胞TGF-β1和p38MAPK、α-SMA、Ⅰ型胶原的抑制作用。方法:将抗纤灵方煎至含原药材2g/ml,氯沙坦钾配成含药0.33mg/ml,给大鼠灌胃(正常组给予蒸馏水灌胃),制备抗纤灵血清、氯沙坦钾血清和正常血清。用DMEM培养基稀释血清,将其分为正常血清组、TGF-β1组、抗纤灵组、抗纤灵组+TGF-β1、氯沙坦钾组和氯沙坦钾+TGF-β1组。以大鼠的成纤维细胞为材料,采用Westernblot法检测大鼠成纤维细胞p38MAPK、α-SMA、Ⅰ型胶原和TGF-β1的表达。结果:加入TGF-β1刺激因子的细胞表达TGF-β1和p38MAPK、α-SMA、Ⅰ型胶原较正常大鼠血清组明显增强,抗纤灵及氯沙坦钾含药血清可明显抑制其表达。结论:抗纤灵含药血清可以通过抑制大鼠的成纤维细胞TGF-β1的表达,减少细胞外基质p38MAPK、α-SMA、Ⅰ型胶原的沉积,从而延缓肾纤维化的进程。     

苍术麸炒前后入血成分比较研究

目的:观察比较大鼠灌胃给药生苍术和麸炒苍术后的血清成分。方法:分别建立生苍术和麸炒苍术饮片中化学成分及灌胃给药生苍术和麸炒苍术大鼠血清中化学成分的HPLC色谱图;比较分析苍术饮片中化学成分的入血情况及灌胃给药生苍术与麸炒苍术后大鼠血清中化学成分的异同。结果:从灌胃给药麸炒苍术大鼠血清中确定18种入血移行成分,其中9种为原形成分,其他9种为代谢产物,且与灌胃给药生苍术的含药血清相近。结论:该实验初步明确了生苍术和麸炒苍术入血成分的异同,为苍术麸炒的临床应用提供参考。     

茵栀黄联合罗格列酮对非酒精性脂肪肝大鼠的保护作用

目的:探讨茵栀黄联合罗格列酮对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠的保护作用及作用机制。方法:将56只大鼠随机均分为正常对照组、模型对照组、茵栀黄9 g/kg组、罗格列酮2 mg/kg组、茵栀黄联合罗格列酮(4.5 g/kg+1 mg/kg)组,除正常对照组和模型对照组各13只外,其余每组10只。正常对照给予普通饲料,其余各组给予高糖高脂饲料(10 g/只)持续13 w,从第5 w开始给药,按5 ml/kg灌胃给药8 w。末次给药后禁食不禁水16 h,摘取眼球取血,取出肝脏,采用苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠肝脏组织病理学改变,用生化法测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量或活性,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测肝脏中白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量和血清空腹胰岛素(FINS)含量,生化法测定血清中总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-c)、高密度脂蛋白(HDL-c)、甘油三酯(TG)的含量,血糖仪测定大鼠空腹血糖(FBG)含量;根据FINS和FBG计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。结果:与正常对照组比较,模型对照组大鼠肝脏切片观察到明显的脂肪变性和弥漫性脂滴空泡,血清中ALT、AST和MDA的活性或含量显著升高,SOD和GSH-Px的活性显著降低,肝组织中TNF-α、IL-1β和IL-6含量显著升高,血清中TC、TG显著增加,胰岛素抵抗指数(IRI)显著升高(P<0.01);与模型对照组比较,茵栀黄9 g/kg组、罗格列酮2 mg/kg组及茵栀黄联合罗格列酮(4.5 g/kg+1 mg/kg)组大鼠肝组织脂肪变、肝内脂肪空泡和炎性损伤、炎症细胞浸润都有不同程度改善,其中茵栀黄联合罗格列酮(4.5 g/kg+1 mg/kg)组改善程度最为明显,ALT、AST、MDA、TNF-α、IL-1β、IL-6、TC、TG和LDL-c的活性或含量均有不同程度的下降;HDL-c、SOD和GSH-Px的含量活性均升高;FBG、FINS和IRI均显著下降(P<0.05或P<0.01)。结论:在剂量减半情况下,茵栀黄联合罗格列酮可以改善高脂饮食诱导的NAFLD,其机制与抑制氧化应激、炎症反应和调控脂质代谢有关。     

龙胆苦苷对佐剂性关节炎大鼠的抗炎作用

目的:通过研究龙胆苦苷(GPS)对佐剂性关节炎大鼠(AA)的治疗作用,探讨其对于大鼠炎症反应的影响。方法:36只雄性SD大鼠随机分为6组,每组6只,分别为正常组,模型组,GPS低、中、高剂量组、甲氨蝶呤(MTX)组。除正常组,其余大鼠建立AA模型,在大鼠右后趾足垫内皮内注射0. 1 m L完全弗氏佐剂(CFA)。造模成功后,各组连续给药7 d,1次/d,GPS低、中、高剂量组灌胃给药剂量为30,60,120 mg·kg~(-1),MTX组腹腔注射给药剂量为0. 2 mg·kg~(-1),正常组与模型组灌胃给予等量的生理盐水。开始给药后每天使用数字游标卡尺及足趾容积测量仪记录各组大鼠的足厚度、足体积,第7天使用小动物活体成像以及苏木素-伊红染色的方法对大鼠的踝关节进行X射线检查和病理组织学检查。实验结束后大鼠腹主动脉取血,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒测定血清中白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)测定滑膜组织中IL-6,TNF-αm RNA水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠大鼠足体积及足厚度,血清IL-6,TNF-α水平和滑膜组织中IL-6,TNF-αm RNA水平显著升高(P 0. 01)。与模型组比较,各给药组大鼠足体积及足厚度结果显著下降(P 0. 01);血清TNF-α水平显著下降(P 0. 01);滑膜组织中IL-6,TNF-αm RNA水平明显下降(P 0. 05,P 0. 01)。此外,X射线检查及病理组织学检查结果发现GPS对于AA大鼠的踝关节也有保护作用。结论:龙胆苦苷通过抑制血清IL-6,TNF-α水平及滑膜组织中IL-6,TNF-αm RNA水平发挥对AA大鼠的保护作用。     

龟羚帕安丸对帕金森病大鼠血清IL-6、IL-1β、TNF-α、Hcy、UA及APN水平的影响

目的 观察龟羚帕安丸对帕金森病(Parkinson’s disease, PD)大鼠血清白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、同型半胱氨酸(homocysteine, Hcy)、尿酸(uric acid, UA)及脂联素(adiponectin, APN)水平的影响。方法 PD大鼠模型采用6-羟基多巴胺(6-OHDA)注射法制作,造模成功的PD大鼠随机分为模型组,西药组,中药高、中、低剂量组,中西药合用组,每组15只,另设15只假手术组。模型组及假手术组给予等容积生理盐水灌胃,其余组给予相应药物灌胃,连续给药4周。大鼠腹主动脉取血,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清IL-6、IL-1β、TNF-α、Hcy、UA及APN水平。结果 模型组大鼠血清IL-6、IL-1β、TNF-α及Hcy水平均明显升高,UA、APN水平均明显降低;假手术组、中药各剂量组、中西药合用组、西药组血清IL-6、IL-1β、TNF-α及Hcy水平均明显...     

丹栀龙胆逍遥汤成分复配物的抗炎作用

目的 研究丹栀龙胆逍遥汤中抗炎成分獐牙菜苦苷、京尼平苷酸、没食子酸复配物对脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞炎症以及2,4-二硝基氯苯(DNCB)诱导小鼠特应性皮炎的保护作用.方法 采用MTT法检测细胞活力,Griess法检测NO水平,ELISA法检测IL-6、TNF-α、PGE2、iNOS、COX-2水平,We...     

生、熟大黄对湿热泄泻大鼠炎性细胞因子、胃肠激素与肠道菌群的影响

目的 探究大黄“通因通用”治疗泄泻的作用机制。方法 采用高温+高湿+高糖高脂饮食+致病因子方式造模,分为生理组(不造模)、模型组(给予生理盐水),生大黄组(生药0.05 g·kg^-1),熟大黄组(生药0.05 g·kg^-1)4组,每组早晚两次给药,共给药5 d。每日最后一次给药3 h后检测各组泻下指数,最后一次给药3 h后用ELISA法检测大鼠血清中白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β (interleukin-1β, IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)、大鼠血清和结肠胃动素(motilin, MTL)、大鼠血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide, VIP)、大鼠生长抑素(somatostatin, SS)、大鼠胃泌素(gastrin, Gas)和大鼠血清P物质(substance P,SP)含量,用...     

蒙药治疗慢性胰腺炎模型大鼠的实验研究

目的:以蒙医整体观为指导,以辨证治疗为原则,验证阿木日-6、茹达-6、巴特尔-7等3剂蒙药对慢性胰腺炎(CP)模型大鼠的治疗作用,筛选治疗CP的有效药物。方法:大鼠随机分为六组,除对照组外其余各组大鼠尾静脉注射二氯二丁基锡(DBTC)溶液,对照组注射同等体积DBTC溶解液。造模第2天起开始给药。造模14 d后验证模型。造模28 d后处死大鼠,行血清淀粉酶(AMS)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量检测、HE染色组织学观察。结果:对照组及各给药组大鼠一般情况明显好于模型组,AMS、TNF-α含量明显低于模型组(P0.05);各给药组大鼠胰腺炎性细胞与纤维组织明显少于模型组。结论:大鼠尾静脉注射DBTC可成功制造CP模型。阿木日-6、茹达-6、巴特尔-7等3剂蒙药可有效降低血清AMS、TNF-α含量,减少胰腺损伤,对CP模型大鼠有良好的治疗作用。     

丹栀逍遥散含药血清对乳腺癌MCF-7细胞自噬的影响

目的:观察丹栀逍遥散含药血清通过诱导自噬对乳腺癌细胞MCF-7的影响。方法:大鼠ig 8.99 g·kg^-1丹栀逍遥散,制备含药血清,取对数生长期MCF-7细胞,以1×10⁵个/mL密度接种于96孔板,每孔100μL,分为空白血清组和含药血清组,每组设3个复孔,分别作用12,24,48,72 h,噻唑蓝(MTT)法测定其对MCF-7细胞生长的抑制作用,单丹磺酰戊二胺(MDC)荧光染色观察细胞自噬泡的形成情况,免疫印迹法(Western blotting)检测自噬蛋白(Beclin1)的表达。结果:与空白血清组比较,15%丹栀逍遥散含药血清具有显著抑制MCF-7细胞生长的作用,确定其最佳作用时间为48 h。丹栀逍遥散含药血清作用细胞48 h后能够增强MDC染色荧光强度,增加自噬泡的形成并显著上调Beclin1的表达。结论:丹栀逍遥散含药血清能够显著抑制MCF-7的细胞生长,诱导细胞自噬性死亡可能是其抗乳腺癌的机制之一。     

丹栀逍遥散加减治疗乙型肝炎896例小结

丹栀逍遥散加减治疗乙型肝炎８９６例小结怀化市中医药学会门诊部（４１８０００）邓玉龙主题词乙型肝炎／中医药疗法，丹栀逍遥散／治疗应用乙型肝炎为临床常见、多发传染病。对人体健康危害性极大，一再失治或误治均能造成不良后果。笔者在近几年的临床工作中以丹栀逍遥...