白头翁总皂苷调控CXCR4/CXCL12信号通路抑制小鼠结肠癌肝转移的机制研究

目的 观察白头翁总皂苷对小鼠结肠癌肝转移的抑制作用,并探讨其通过调节趋化因子受体4(CXCR4)/趋化因子12(CXCL12)通路发挥作用的机制.方法 将50只BALB/c裸小鼠随机分为假手术组、模型组、阳性对照组、白头翁总皂苷低剂量、高剂量组(100、200 mg/kg),每组10只.以希罗达组(267 mg/kg)...     

基于HIF-1α/CXCL12/CXCR4/VEGF信号通路探索中药复方调控CIA大鼠滑膜血管新生的机制

目的 探究清热活血方调控胶原诱导关节炎大鼠缺氧诱导的滑膜血管新生作用机制。方法 24只清洁级SD雌性大鼠随机分为正常组、模型组、清热活血方组、甲氨蝶呤组。注射牛Ⅱ型胶原乳剂造模,造模成功后各组大鼠分别给予相应药物灌胃,治疗过程中间隔测量大鼠体质量、足趾容积,进行关节炎指数评分,用ELISA法检测血清白细胞介素(interleukin,IL)-18、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、趋化因子配体[chemokine (C-X-C motif) ligand,CXCL]12水平,Western blot法检测滑膜组织低氧诱导因子(hypoxia inducible factor,HIF)-1α、趋化因子受体[chemokine (C-X-C motif) receptor,CXCR]4、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白表达量。结果 与正常组相比,模型组大鼠关节红肿变形明显,关节炎指数明显增加;同时血清中TNF-α、IL-18和CXCL12水平升高(P<0.01),滑膜组织HIF...     

黄芪甲苷经CXCL12/CXCR4信号轴及TXNIP/NLRP3炎性体路径抗肝纤维化的机制研究

目的 研究黄芪甲苷（astragaloside Ⅳ,AS-Ⅳ）抗肝纤维化的疗效及分子机制。方法 采用sc 40%四氯化碳花生油联合10%乙醇饲喂的方式构建大鼠肝纤维化模型,判断造模成功后,随机分为空白组、模型组和AS-Ⅳ低、高剂量（20、40 mg/kg）组,各给药组ig相应药物,空白组和模型组ig等体积生理盐水,给药6周后采用苏木素-伊红（HE）染色、Masson染色观察肝组织病理学变化;通过检测血清中丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase,ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase,AST）活性及肝纤维化标志物水平以评价AS-Ⅳ抗肝纤维化的疗效;采用免疫组化、Western blotting、qRT-PCR检测肝星状细胞（hepatic stellate cells,HSCs）活化标志物α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）及Ⅰ型胶原（CollagenⅠ）的表达;采用Western blotting及qRT-PCR检测影响HSCs活化的CXC基序趋化因子配体12(C-X-C m...     

青海地区汉族、藏族、回族乳腺癌患者中CXCL12和CXCR4的表达及意义

目的探讨青海地区汉族、藏族、回族乳腺癌患者中趋化因子CXCL12及其受体CXCR4表达情况及其意义。方法收集青海大学附属医院乳腺甲状腺外科收治的汉族、藏族、回族各30例乳腺癌患者的组织标本,应用免疫组化SP法检测癌组织和癌旁正常组织中CXCL12和CXCR4表达情况,结合术后Ki-67、EGFR结果,分析CXCL12和CXCR4表达与患者Ki-67、EGFR、TNM分期、病理分级、淋巴结转移情况的关系。结果癌组织中CXCL12、CXCR4表达水平均明显高于癌旁正常乳腺组织(P均0. 05),但汉、藏、回族乳腺癌患者癌组织中CXCL12、CXCR4表达阳性情况比较差异均无统计学意义(P均0. 05); CXCL12、CXCR4表达与Ki-67、EGFR阳性表达、TNM分期和腋窝淋巴结转移有关(P均0. 05),与病理学分级无关(P均 0. 05)。结论青海地区汉族、藏族、回族乳腺癌患者间CXCL12、CXCR4表达情况无明显差异,而CXCL12、CXCR4表达情况与乳腺癌发展和转移密切相关,可作为合理预测乳腺癌浸润、转移等生物学行为的标记物。     

从CXCL12/CXCR4生物学轴探讨乳移平配伍引经药抗乳腺癌肺转移机理体外研究

目的:探讨"乳移平"配伍肺经引经药"桔梗"对人乳腺癌肺高转移细胞株MDA-MB-231HM的增殖、趋化、迁移能力的影响及作用机制。方法:乳移平组、乳移平配伍桔梗组、乳移平配伍川牛膝组、阿霉素组和对照组SD大鼠含药血清的制备,MTT法测不同组含药血清对细胞增殖能力的影响,Transwell小室测细胞趋化活性的影响,实时定量PCR法测细胞CXCL12、CXCR4、PI3K的表达。结果:与乳移平单方比,乳移平配伍桔梗后可进一步抑制MDA-MB-231HM的增殖能力(P0.01)和趋化活性(P0.01)。实时定量PCR结果提示,与乳移平单方比,乳移平配伍桔梗后能进一步下调MDA-MB-231HM细胞株CXCL12、CXCR4基因(P0.05)。结论:乳移平配伍桔梗通过进一步下调CXCL12/CXCR4生物学轴及其介导的PI3K信号转导通路,发挥进一步的抑制乳腺癌肺高转移细胞株增殖能力和趋化活性的作用。     

干蟾皮提取物对胃癌肝转移裸鼠CXCL12-CXCR4轴的影响

目的:观察干蟾皮提取物(华蟾素注射液)对裸鼠胃癌肝转移及CXCL12-CXCR4生物轴的影响。方法:MTT法测定华蟾素注射液对人胃癌BGC-823细胞体外增殖的抑制作用;经小鼠脾脏下极包膜注入BGC-823细胞建立胃癌肝转移模型;32只小鼠随机分为模型组、华蟾素低剂量组[CINO(低)]、华蟾素中剂量组[CINO(中)]、华蟾素高剂量组[CINO(高)];给予相应药物干预,观察不同浓度的华蟾素注射液对BGC-823细胞的抑制作用及对胃癌肝转移裸鼠生存时间、肿瘤抑制率,肿瘤组织中CXCL12、CXCR4的影响。结果:华蟾素对BGC-823细胞的增殖具有抑制作用;CINO高剂量组较模型组肝转移率明显下降(P<0.05);华蟾素注射液对胃癌肝转移组织中CXCL12和CXCR4蛋白的表达均有一定的抑制作用(P<0.05)。结论:华蟾素注射液可抑制BGC-823细胞的增殖,降低胃癌肝转移率,抑制肿瘤生长;其机理可能与其下调胃癌肝转移灶中CXCL12、CXCR4蛋白表达有关。     

基于CXCR12/CXCR4/CXCR7轴研究熊果酸诱导人甲状腺乳头状癌细胞线粒体凋亡的作用机制

目的 考察熊果酸对人甲状腺乳头状癌TPC-1细胞凋亡的影响及其作用机制。方法 TPC-1细胞分别加入不同浓度（0.8、1.6、3.2、3.6、4.0 μmol/L）的熊果酸处理,采用CCK-8试剂盒检测细胞增殖;采用克隆形成实验检测细胞克隆形成能力;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;采用Fura-3/AM、JC-1探针分别检测细胞内Ca²⁺水平和线粒体膜电位;采用Western blotting和PCR检测线粒体凋亡相关蛋白和趋化因子受体12（C-X-C chemokine receptor type 12,CXCR12）/CXCR4/CXCR7轴相关基因表达。结果 熊果酸显著降低TPC-1细胞增殖和克隆形成能力（P<0.01）,显著降低线粒体膜电位（P<0.05、0.01）,显著升高细胞内Ca²⁺水平和细胞凋亡率（P<0.01）,显著下调B淋巴细胞瘤-2（B-cell lymphoma-2,Bcl-2）蛋白表达和CXCR12/CXCR4/CXCR7轴相关基因表达（P<0.01）,显著上调细胞色素C（cytochrome-C,Cyt-C）、Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2 associated X protein,Bax）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9（cystein-asparate protease-9,Caspase-9）和Caspase-3蛋白表达（P<0.05、0.01）。结论 熊果酸可能通过抑制CXCR12/CXCR4/CXCR7轴活化进而诱导TPC-1细胞线粒体凋亡,从而发挥抗甲状腺乳头状癌的作用。     

普萘洛尔对婴幼儿增殖期血管瘤患儿血VEGF及CXCL12、CXCR4水平影响

目的观察普萘洛尔治疗方案对婴幼儿增殖期血管瘤患儿血清CXCL12、CXCR4及血管内皮生长因子(VEGF)水平的影响。方法将50例婴幼儿增殖期血管瘤患儿作为观察组,以50例同期健康体检的婴幼儿作为对照组。观察组给予普萘洛尔口服(3个月以下0.5 mg/kg,3~6个月1 mg/kg,6个月以上2 mg/kg,2次/d,以4~6个月为1个疗程)。记录对照组与观察组治疗前及治疗4周、12周静脉血CXCL12、CXCR4与VEGF水平,以超声测量观察组治疗前及治疗12周后肿瘤体积并进行疗效评价。结果观察组治疗12周后血管瘤体积明显减小(P<0.05),疗效优良率为62.0%。观察组治疗前的VEGF及CXCL12、CXCR4水平与对照组比较明显升高(P均<0.05),治疗4周与12周后均比治疗前明显降低(P均<0.05)。结论普萘洛尔治疗增殖期血管瘤患儿效果较好,其机制可能与抑制血管上皮细胞增殖相关。     

抽提透刺法对脑梗死模型大鼠脑的保护机制及对CXCL12-CXCR4信号通路的作用研究

目的:探讨抽提透刺法对脑梗死模型大鼠的脑保护机制及对CXC趋化因子配体12-CXC趋化因子受体4(CXCL12-CXCR4)信号通路的作用。方法:选取清洁级健康雄性SD大鼠56只,随机分为对照组14只及造模组42只。造模组采用线栓法建立脑梗死模型,对照组予以假手术。将造模成功的大鼠随机分为模型组、针刺组及药物注射组,各14只。模型组及对照组分别给予生理盐水10 ml/kg,腹腔注射,1次/d;针刺组采用抽提透刺法针刺头部穴位,幅度为0.1～0.2 cm,行针30 s,留针30 min,1次/d;药物注射组给予脑蛋白水解物注射液10 ml/kg,腹腔注射,1次/d。各组大鼠均给药14 d。检测比较各组神经功能评分、脑组织微血管密度(MVD),血清血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平以及大脑皮质CXCL12、CXCR4蛋白相对表达水平。结果:与模型组比较,针刺组、药物注射组大鼠神经功能评分较低,且针刺组小于药物注射组,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,针刺组、药物注射组大鼠脑组织MVD较高,血清VEGF、MMP-9水平较高,大脑皮质CXC...     

荆芥方对痔术后疼痛大鼠背根神经节CXCL12/CXCR4表达的影响

目的：本研究通过建立大鼠疼痛模型,从分子水平研究复方荆芥熏洗剂参与术后止痛的作用机制,完善对复方荆芥方止痛原理的认识,充分发挥中医药外治的优势,为临床治疗提供更多的实验理论依据,拓展临床应用前景。方法：实验室SPF级SD大鼠60只,雌雄各半,随机分为5组,分别为荆芥方组、抑制剂组、生理盐水组、模型组、空白组,每组12只。建立大鼠痔术后切口痛模型,荆芥方组给予荆芥方坐浴（1 000 mL,每天2次,每次10 min）,生理盐水组予0.9%氯化钠溶液坐浴,等量,每次10 min,抑制剂组予特异性拮抗剂普乐沙福（AMD3100）(1μg/10μL)外用。于给药的第3天取大鼠背根神经节,采用酶联免疫吸附法检测组织中炎性因子肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6表达水平变化;免疫荧光法检测大鼠背根神经节中CXCL12和CXCR4的表达水平,使用荧光显微镜观察复方荆芥熏洗剂对信号通路表达的影响。结果：与空白组相比,生理盐水组、模型组样本炎性因子肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6及信号通路CXCL12/CXCR4表达增高（P <0.05）。荆芥方组样本中炎性因子肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6及信号通...     

鹿红方对缺血缺氧心肌细胞SDF-1/CXCR4信号通路的影响

目的 研究鹿红方对缺血缺氧心肌细胞（CMs）抗凋亡能力的影响,并从SDF-1/CXCR4信号通路探讨其作用机制。方法 CMs分至对照组,缺血缺氧模型组以及鹿红方各剂量组。采用CCK-8法测定CMs凋亡情况以考查鹿红方对CMs抗凋亡能力的影响及量效果关系。后将CMs分至对照组、模型组、AMD3100组、鹿红方200μg/mL组以及鹿红方+AMD3100组。各组予相应干预措施后采用Western blotting检测Bax、Bcl-2、SDF-1和CXCR4蛋白表达。结果 CCK-8结果显示,鹿红方提高CMs抗凋亡能力具有量效关系。Western blotting结果显示：鹿红方200组与模型组比较,SDF-1和CXCR4的表达显著升高（P <0.001）,Bax表达显著降低,Bcl-2表达显著升高,Bax/Bcl-2值显著降低（P <0.001）;鹿红方+AMD3100组与鹿红方200组比较,Bax表达显著升高,Bcl-2表达显著降低,Bax/Bcl-2值显著升高（P <0.001）。结论 鹿红方可提高缺血缺氧状态下CMs的抗凋亡能力,其机制与上调SDF-1/CXCR4...     

大黄蛰虫丸调控ROS介导的PI3K/Akt/FoxO4信号通路改善大鼠肝脏衰老的作用和机制北大核心CSCD

近年来的研究显示,非酒精性脂肪性肝病、肝硬化以及肝癌等常见肝病的发生和发展都与肝脏衰老(liver aging,LA)有关。基于此,为了探究传统经方——大黄蛰虫丸(Dahuang Zhechong Pills,DHZCP)多靶点地改善LA的作用和机制,笔者将24只大鼠随机均分为4组,即正常组、衰老模型组(模型组)、衰老模型+DHZCP组(DHZCP组)和衰老模型+维生素E(vitamin E,VE)组(VE组)。通过D-半乳糖(D-galactose,D-gal)连续腹腔注射建立大鼠LA模型。对于LA模型鼠,采用衰老表型和体质量来评估其一般情况;采用肝细胞衰老病理学特征、肝功能指标、肝脏磷酸化组蛋白H2A变异体(phosphorylated histone family 2A variant,γ-H2AX)染色特征、肝脏细胞周期阻滞蛋白(P21、P53、P16)表达水平以及肝脏衰老相关分泌表型(senescence-associated secretory phenotypes,SASP)因子蛋白表达水平来评估其LA;采用肝脏活性氧产物(reactive oxygen species,ROS)表达特征以及肝组织磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol-3 kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)/叉头盒蛋白O4(forkhead box protein O4,FoxO4)信号通路关键信号分子蛋白表达水平来评估ROS介导的PI3K/Akt/FoxO4信号通路活性。结果显示,经DHZCP或VE干预12周后,对于DHZCP组和VE组大鼠,其特征性衰老表型和体质量,肝细胞衰老病理学特征和肝功能指标,肝脏ROS相对表达量,肝组织磷酸化PI3K(phosphorylated PI3K,p-PI3K)、磷酸化Akt(phosphorylated Akt,p-Akt)、FoxO4等关键信号分子的蛋白表达水平,肝脏γ-H2AX染色的特征以及肝组织P16、P21、P53和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的蛋白表达水平均得到相应改善,且两者的作用相似。总之,借助D-gal诱导的LA模型鼠,该研究阐明,DHZCP在体内能多靶点地改善LA,其作用和机制与调控肝组织ROS介导的PI3K/Akt/FoxO4信号通路活性有关。这些发现为DHZCP治疗衰老相关肝病提供了新的药理学证据。     

肠胃清介导CXCR4/CXCL12信号转导通路干预小鼠结肠癌肝转移

目的:观察中药复方肠胃清对小鼠结肠癌肝转移的抑制作用,从趋化因子受体4(CXCR4)/趋化因子12(CXCL12)信号转导通路及基质金属蛋白酶9(MMP9)的表达探讨肠胃清抑制结肠癌肝转移的作用机制。方法:采用原位瘤块接种法建立小鼠结肠腺癌细胞CT26肝转移模型,实验共分为4组,即假手术组、模型组、肠胃清低剂量组和高剂量组。假手术组和模型组均给予生理盐水,肠胃清低、高剂量组小鼠每日给药量分别为10.37,20.74 g·kg-1。HE染色法判断肝转移;免疫组织化学和实时荧光定量PCR实验方法检测CXCR4,CXCL12和MMP9的表达。结果:肠胃清低、高剂量组小鼠结肠癌原位瘤的质量抑制率分别为24.73%,45.91%;体积抑制率分别为27.93%,63.48%。模型组与肠胃清低、高剂量组肝转移率分别为75%,37.5%,12.5%。模型组结肠癌组织中CXCR4,CXCL12,MMP9的蛋白和mRNA表达显著高于假手术组(P<0.05);与模型组比较,肠胃清低剂量组和高剂量组CXCR4的蛋白和mRNA表达显著减低(P<0.05);肠胃清低剂量组和高剂量组CXCL12的蛋白表达显著降低(P<0.05);肠胃清高剂量组CXCL12的mRNA表达显著降低(P<0.05);肠胃清高剂量组MMP9的蛋白和mRNA表达显著降低(P<0.05)。结论:肠胃清抑制小鼠结肠癌原位瘤的生长和肝转移的发生率,肠胃清抑制结肠癌肝转移可能与其下调小鼠结肠癌原位瘤组织中CXCR4,CXCL12,MMP9的表达有关。     

右归丸通过调节CXCL8/CXCR1/2信号通路及Ang-1，Ang-2表达促进大鼠卵巢血管生成的作用

目的:研究补肾中药复方右归丸对自然衰老致卵巢功能低下的大鼠血管生成的影响与CXC趋化因子8(CXCL8)/趋化因子受体1/2(CXCR1/2)信号通路及血管生成素-1(Ang-1),血管生成素-2(Ang-2)的关系,探讨其改善卵巢功能的作用机制。方法:将56只雌性SD大鼠随机分为青年组8只、自然衰老致卵巢功能低下的雌性大鼠模型组48只,青年组大鼠常规饲养,48只模型组大鼠常规饲养过程中做5~7 d阴道脱落细胞学涂片,将连续4个动情周期阴道细胞学表现为动情周期长、之后持续动情、反复假妊娠的大鼠作为初老大鼠,连续10 d表现为角化细胞指数高于50%的青年大鼠作为青年组。模型建立后,将存活造模大鼠随机分为初老空白组,结合雌激素组(65μg·kg^-1·d^-1),左归丸组(33 g·kg^-1·d^-1),右归丸低、中、高剂量组(1.2,2.4,4.8 g·kg^-1d^-1),青年组和初老空白组以等体积生理盐水灌胃,持续30 d。实验结束后,苏木素-伊红(HE)染色法观察大鼠卵巢组织形态学变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠卵巢组织中趋化因子CXCL8,CXCR1,CXCR2,Ang-1,Ang-2的蛋白表达水平;免疫组化标记大鼠卵巢组织中趋化因子CXCL8,CXCR1,CXCR2,Ang-1,Ang-2蛋白的表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠卵巢组织中趋化因子CXCL8,CXCR1,CXCR2,Ang-1,Ang-2 mRNA表达。结果:与青年组比较,初老空白组各级生长卵泡数、黄体数、血管数目数量少且闭锁卵泡多(P<0.01),卵巢组织CXCL8,CXCR1及CXCR2水平蛋白和mRNA水平显著上升(P<0.01),卵巢组织中Ang-1及Ang-2蛋白和mRNA水平明显下降(P<0.05);与初老空白组相比,各用药组初老大鼠的各级生长卵泡数、黄体数、血管数目明显增加(P<0.05),而闭锁卵泡数明显减少(P<0.05),卵巢组织CXCL8,CXCR1及CXCR2水平蛋白和mRNA水平明显下降(P<0.05),卵巢组织中Ang-1及Ang-2蛋白和mRNA水平明显上升(P<0.05)。结论:右归丸可以通过下调大鼠卵巢组织中CXCL8,CXCR1及CXCR2水平,上调Ang-1和Ang-2水平,促进卵巢血管生成,改善大鼠的卵巢功能。     

升降散调控TLR-4/NF-κB信号通路对脂多糖诱导脓毒症大鼠心肌损伤的影响

目的研究升降散调控TLR-4/NF-κB信号通路对LPS诱导脓毒症大鼠心肌损伤的影响。方法采用腹腔注射LPS法构建急性脓毒血症大鼠模型,大鼠随机分为正常组(n=6),脓毒症模型组(n=6),中药组(n=6),抑制剂组(n=6),除正常组外,各组均腹腔注射注射脂多糖,miR-146a抑制剂组心肌内注射miR-146a抑制剂(0.2μl/g),中药组升降散灌胃。48 h后采集大鼠心肌组织,观察心肌组织切片病理改变,测定白介素-1(IL-1)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等因子的水平,及miRNA-146a、NF-κB mRNA、TNF-αmRNA、IL-6 mRNA、IL-1βmRNA活性水平。结果与正常组相比,各组IL-1、IL-6、TLR4及NF-κB蛋白水平升高(P0.05),模型组及抑制组TNF-α高于对照组(P0.05);模型组miR-146a、NF-κB、TNF-α、IL-6及IL-1基因表达增高(P0.01),中药组miR-146a及NF-κB表达增高(P0.05);抑制剂组NF-κB、TNF-α、IL-6及IL-1表达增高(P0.01)。与模型组相比,中药组、TNF-α、TLR4及NF-κB蛋白水平降低(P0.05),中药组miR-146a表达增高,而NF-κB、TNF-α、IL-1及IL-6基因表达降低(P0.05);抑制剂组IL-6、TNF-α、TLR4及NF-κB活性升高(P0.01),抑制剂组miR-146a表达降低(P0.01),NF-κB、TNF-α、IL-6及IL-1表达增高。与抑制剂组相比,中药组IL-1、IL-6、TNF-α、TLR4及NF-κB蛋白水平降低(P0.01),miR-146a基因表达增高,而NF-κB、TNF-α、IL-6及IL-1表达降低(P0.01)。结论升降散能减轻脓毒症大鼠心肌损害,其机制可能与其促进miRNA-146a表达,负反馈调节TLR-4/NF-κB信号通路,减轻抑制炎症反应有关。     

喘可治注射液对COPD大鼠IL-12/IL-12R /STAT4信号通路的影响

目的观察喘可治注射液(CKZ)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺组织IL-12/IL-12R/STAT4信号通路的影响。方法 50只SD大鼠随机分为正常组,模型组,CKZ高、中、低剂量(CKZ-H、CHZ-M、CKZ-L)组。除正常组外,各组复制COPD大鼠模型,并给予相应药物治疗,观察CKZ对COPD大鼠血清和肺泡灌洗液(BALF)中γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素12(IL-12)、白细胞介素12受体(IL-12R)以及肺组织信号转导子和转录激活子4(STAT4)m RNA表达的影响。结果喘可治注射液各剂量组肺组织病理形态均有不同程度的改善,且降低COPD大鼠血清和BALF中IFN-γ、IL-12、IL-12R(除CKZ-L组BALF中IL-12R外)水平(P0.05,P0.01),可抑制大鼠肺组织STAT4 m RNA的表达(P0.01,P0.05)。结论喘可治注射液能一定程度改善COPD大鼠肺组织病理损害,其作用机制可能与其抑制IFN-γ、IL-12、IL-12R表达,干扰IL-12/IL-12R/STAT4信号通路对靶基因的激活,下调STAT4 m RNA表达,进而调节Th1/Th2分化失衡有关。     

独活寄生汤治疗肝肾亏虚型膝骨关节炎患者疗效及对血清、关节液中SDF-1/CXCR4信号通路的影响

目的:观察独活寄生汤治疗肝肾亏虚型膝骨关节炎(KOA)患者血清、关节液中基质细胞衍生因子-1(SDF-1)/C-X-C趋化因子受体4型(CXCR4)信号通路的影响。方法:将71例KOA患者随机分为观察组(n=36)及对照组(n=35),观察组给予独活寄生汤150 ml/次,2次/d口服,对照组给予硫酸氨基葡萄糖胶囊0.5 g/次,3次/d口服,两组患者均治疗4周,以膝关节视觉模拟评分法(VAS)、压痛值评定治疗前后疼痛变化情况;检测患者治疗前后血清、关节液中SDF-1 mRNA、CXCR4 mRNA表达及基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)的含量。结果:与同组治疗前相比,治疗后对照组、观察组患者VAS评分升高,压痛值明显降低;治疗后与对照组相比,观察组VAS评分升高,压痛值明显降低;SDF-1 mRNA、CXCR4 mRNA表达及MMP-3、MMP-13含量均明显降低。结论:独活寄生汤治疗肝肾亏虚型KOA疗效明显,可能与抑制SDF-1/CXCR4信号通路,减轻软骨组织炎症反应有关。     

大黄酚调控AMPK/mTOR自噬信号通路改善Wilson病铜负荷大鼠认知功能

目的 研究大黄酚（chrysophanol,CHR）对Wilson病（WD）铜负荷大鼠模型的神经保护作用，并探讨其作用机制。方法 SD大鼠随机分为4组：对照组（Control组）、模型组（Model组）、CHR低剂量组（CHR-L组）、CHR高剂量组（CHR-H组），每组10只。通过含铜（1 g/kg）饲料、含铜（0.185%）水喂养12周构建WD铜负荷大鼠模型，铜离子（Cu）测定试剂盒检测肝铜、24 h尿铜水平；Y迷宫实验评估大鼠空间探索和记忆能力；HE染色法观察海马组织CA1区神经元形态学改变；透射电镜观察海马组织CA1区超微结构；免疫荧光法检测自噬标志蛋白LC3A/B的表达情况；Western Blot检测自噬相关蛋白LC3A/B、Beclin-1、p62以及p-AMPK、p-mTOR的表达量。结果 与Control组比较，Model组中肝铜及24 h尿铜水平增加（P<0.01）；空间探索和记忆能力明显减弱（P<0.01）;CA1区海马神经元出现损伤；自噬小体数量增多；LC3A/B荧光表达增高；LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1及p-AMPK表达量升高（P<0.01...     

Klf4抑制Wnt/β-catenin信号通路调控软骨细胞增殖的研究

目的探讨Klf4基因对大鼠软骨细胞增殖影响及相关机制。方法从出生24 h SD幼鼠的股骨头提取软骨细胞,细胞免疫荧光鉴定Col2a1和Sox9基因的表达。转染慢病毒载体PCDH-GFP-Klf4和辅助质粒PSPAX2及PMD2.0G至293ft细胞中产生慢病毒,48 h后收集病毒上清,用其感染大鼠软骨细胞作为Klf4组,用PCDH-GFP慢病毒感染细胞作为对照组。采用CCK8法检测2组细胞生长增殖变化;采用Western blot方法,分别检测2组细胞中Klf4基因表达、增殖相关基因PCNA和CyclinD1蛋白表达、Wnt/β-catenin信号通路上下游基因表达情况。结果原代培养软骨细胞均强表达Col2a1和Sox9基因。慢病毒PCDH-GFP-Klf4和PCDH-GFP成功感染软骨细胞,Klf4基因在软骨细胞过表达。Klf4组软骨细胞生长明显受到抑制,PCNA和CyclinD1蛋白表达和Wnt/β-catenin信号通路相关基因表达均明显下调。结论过表达Klf4基因可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路相关分子的表达而抑制软骨细胞增殖。     

当归多糖对衰老模型小鼠造血干细胞Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的探讨当归多糖(ASP)对衰老小鼠造血十细胞(HSCs) Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法 6~8周雄性C57BL/6J小鼠30只,随机分为对照组、模型组和ASP组,每组10只。小鼠scD-半乳糖(D-Gal,120 mg/kg),每天1次,连续42 d,复制衰老小鼠模型;ASP(200 mg/kg)组ip给药,连续35 d。给药结束后第2天,免疫磁珠分离HSCs,衰老β半乳糖昔酶(SA-β-Gal)染色观察衰老HSCs百分率;造血祖细胞混介集落(CFU-Mix)培养检测HSCs形成集落能力;流式细胞术和激光共聚焦检测HSCs中活性氧(ROS)水平;Western blotting检测HSCs胞质β-catenin、胞核β-catenin. GSK-3β、Phospho-GSK-邓和TCF-4蛋自表达。结果与对照组比较,模型组HSCs的SA-β-Gal染色阳性百分率和ROS水平显著增加;胞质β-catenin、胞核p-catenin、Phospho-GSK-3β和TCF-4蛋自表达上调;CFU-Mix形成能力降低;GSK-3β蛋自表达下调。与模型组比较,ASP能显著降低衰老HSCs的SA-β-Gal染色阳性百分率和ROS水平;下调胞质β-catenin、胞核β-catenin、Phospho-GSK-邓和TCF-4蛋自表达;提高CFU-Mix形成能力;上调GSK-邓蛋自表达。结论 ASP能延缓或拮抗D-Gal致小鼠HSCs衰老,其机制可能与 ASP抑制Wnt/β-catenin信号通路过度激活有关。