消皮素家族介导细胞焦亡在结直肠癌中的研究进展

细胞焦亡是由Gasdermines(GSDMs)介导的一种程序性细胞死亡。GSDMs的N端结构域在质膜上形成孔隙, 使细胞膜破裂和胞内容物释放导致炎性反应, 介导细胞焦亡。细胞焦亡在炎症性疾病及恶性肿瘤中都起着重要作用。随着细胞焦亡的深入研究, 越来越多的研究结果显示细胞焦亡途径能够调控结直肠癌的肿瘤微环境和抗肿瘤免疫, 与结直肠癌的发生发展、治疗预后有着密切的关系。本文通过介绍焦亡的分子机制, 探讨细胞焦亡在结直肠癌发生发展、免疫微环境以及治疗方面的作用, 以期为结直肠癌临床诊疗提供新的见解, 为开发基于细胞焦亡途径的抗结直肠癌治疗靶点提供理论依据。     

免疫原性死亡在结直肠癌中的应用进展

结直肠癌(CRC)是最常见的消化系统恶性肿瘤, 复发与转移是导致患者死亡的主要原因。近年来, 以免疫检查点抑制剂为代表的免疫疗法在改善晚期CRC的预后中取得突破性进展, 同时展现出动员机体自身免疫力在肿瘤治疗中的有效性。然而如何克服CRC的免疫抑制性微环境, 激活机体固有的抗肿瘤免疫, 仍需要进一步探索研究。某些治疗CRC的药物在杀伤肿瘤细胞的同时可以诱导肿瘤细胞产生免疫原性细胞死亡(ICD), 特征性地高表达损伤相关分子模式(DAMPs), 促进树突状细胞(DCs)的活化、成熟及抗原递呈功能, 激活CD8+ T细胞对肿瘤细胞的攻击, 同时促进免疫记忆的形成, 在抗CRC复发与转移中表现出更好的治疗潜力。本文主要对CRC的免疫抑制性微环境、ICD的标志事件与检测方法、研究进展及其在抗CRC中的优势进行述评。旨在深入了解诱导CRC发生ICD的有效措施及其分子机制, 为晚期CRC开发更加精准有效的治疗提供新策略。     

细胞焦亡在非酒精性脂肪性肝炎中的研究进展

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)对人类健康造成了巨大威胁。大约25%的NAFLD患者发展为非酒精性脂肪性肝炎(NASH), 对我国造成了十分严重的卫生经济负担。研究人员致力于研究NASH发病的潜在分子机制, 提出新的治疗方法。近期研究表明, 炎症小体和gasdermin-D(GSDMD)介导的炎症性程序性细胞死亡与NASH的发生发展有关。本文就NASH发病机制中细胞焦亡及其相关分子的研究进展作一综述。     

鸢尾素对呼吸机相关性肺损伤大鼠细胞焦亡的影响

目的探讨鸢尾素对呼吸机相关性肺损伤大鼠细胞焦亡的影响。方法健康清洁级雄性SD大鼠36只, 体重200～250 g, 6～8周龄, 采用随机数字表法分为3组(n=12):对照组(C组)、呼吸机相关性肺损伤组(V组)和呼吸机相关性肺损伤+鸢尾素组(V+I组)。V+I组机械通气前尾静脉注射鸢尾素1 μg/kg。机械通气(潮气量40 ml/kg, 通气频率60次/min, 吸呼比设为1∶2, PEEP 0, FiO2 21%)4 h后采集股动脉血样, 进行动脉血气分析, 记录PaO2, 计算氧合指数(OI);收集支气管肺泡灌洗液(BALF), 测定总蛋白浓度, 采用ELISA法测定BALF和血清IL-1β、IL-18浓度。取肺组织, HE染色后行肺损伤评分, 测定肺组织湿重/干重(W/D)比值;分别采用Western blot法和RT-PCR法检测焦亡相关蛋白消皮素D-N端(GSDMD-N)、caspase-1及其mRNA的表达水平。结果与C组比较, V组肺损伤评分和W/D比值升高, PaO2和OI降低, BALF总蛋白浓度、BALF和血清IL-1β、IL-18浓度升高, 肺组织caspase...     

GSDME启动子甲基化通过细胞焦亡调控乳腺癌细胞化疗敏感性

目的探讨GSDME启动子甲基化通过细胞焦亡调控乳腺癌(breast cancer, BC)细胞化疗敏感性的机制。方法收集经过化疗治疗的54例BC患者组织, 分为化疗耐受组与敏感组。使用多西他赛(docetaxel, DTX)处理BC细胞以建立耐药BC细胞。CCK8检测细胞耐药性。qRT-PCR检测组织与细胞中GSDME的表达。亚硫酸盐测序法检测GSDME启动子甲基化位点的甲基化水平。干预DTX处理的BC细胞中的GSDME的表达水平, qRT-PCR检测细胞中Caspase-1、Caspase-4、IL-1β、IL-18水平, 评估细胞焦亡程度。结果相对于化疗敏感组, GSDME在化疗耐受组中的表达下调(t=6.54,P<0.001)。与MCF-10A细胞相比, MCF-10A/DTX细胞中Caspase-1(t=9.14,P<0.001)、Caspase-4(t=9.35,P<0.001)、IL-1β(t=6.13,P=0.004)、IL-18(t=5.49,P=0.005)水平均下降, 但在MCF-10A/DTX细胞中过表达GSDME后以上指标上调。GSDME启动子...     

焦亡在泌尿系肿瘤中的作用及进展

细胞焦亡被认为是一种新型的促进炎症细胞死亡程序, 其特征是快速形成膜孔、膜破裂、细胞肿胀, 并释放促炎因子。最近的研究表明, 焦亡在肿瘤的发展中起着重要作用。它可能会改变肿瘤的免疫微环境, 促进肿瘤局部坏死。本文综述了基于焦亡的分子机制、作用以及在泌尿系肿瘤中的潜在治疗意义。     

电针对脓毒症相关性脑病小鼠海马神经元焦亡的影响

目的评价电针对脓毒症相关性脑病(SAE)小鼠海马神经元焦亡的影响。方法雄性C57BL/6小鼠90只, 8～12周龄, 体重22～25 g。采用随机数字表法分为3组(n=30):假手术组(Sham组)、SAE组和电针治疗组(EA组)。采用盲肠结扎穿孔术建立脓毒症模型。EA组于术后2、24、48和72 h时电针双侧足三里穴。于术后7 d观察小鼠生存情况, 术后第8～12天行Morris水迷宫实验, 之后处死, 取海马组织, 采用Western blot法检测核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白1(NLRP1)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(caspase-1)、消皮素D(GSDMD)的表达水平。采用ELISA法检测海马活化的caspase-1含量。结果与Sham组比较, SAE组生存率降低, 术后逃避潜伏期延长, 目标象限活动时间缩短, 穿越原平台次数减少, 海马NLRP1、caspase-1、GSDMD表达上调, 活化的caspase-1含量升高(P<0.05);与SAE组比较, EA组生存率升高, 术后逃避潜伏期缩短, 目标象限活动时间延长, 穿越原平台次数增多, 海马NLRP1...     

氢对重度烧伤大鼠肺损伤时细胞焦亡的影响

目的评价氢对重度烧伤大鼠肺损伤时细胞焦亡的影响。方法清洁级健康成年雄性SD大鼠48只, 体质量200～230 g, 6～7周龄, 采用随机数字表法分为4组(n=12):假手术组(SH组)、假手术+氢气组(SH+H2组)、烧伤组(B组)和烧伤+氢气组(B+H2组)。B组和B+H2组制备大鼠背部(约40%全身体表面积)Ⅲ度烧伤模型, SH组和SH+H2组大鼠仅背部脱毛用烫头以皮温接触。于烧伤后1和6 h时, SH+H2组和B+H2组大鼠分别在此环境中吸入2%氢气1 h。于烧伤后12和24 h时处死大鼠取肺组织, HE染色并评估肺损伤病理学评分, 采用ELISA法测定肺组织IL-1和IL-18含量, 采用Western blot法检测肺组织NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、caspase-1和Gasdermin D蛋白(GSDMD)的表达。结果与SH组比较, B组烧伤后12和24 h时肺损伤病理学评分升高(P<0.05);与B组比较, B+H2组烧伤后12和24 h时肺损伤病理学评分降低(P<0.05);与SH组比较, B组和B+H2组烧伤后12和24 h时肺组织...     

椎间盘退变相关细胞焦亡基因的生物信息分析与功能鉴定

目的通过生物信息技术筛选与椎间盘退变相关的细胞焦亡基因, 确定其生物学功能和信号通路。方法首先, 从基因表达谱(GEO)数据库中下载GSE147383数据集, 将细胞焦亡基因与该数据集差异表达基因作交集分析, 筛选细胞焦亡差异表达基因。再者, 对获得的细胞焦亡差异表达基因进行基因本体论(GO)及京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析。同时, 绘制蛋白质-蛋白质相互作用网络, 筛选获得椎间盘退变细胞焦亡关键基因。其次, 通过受试者工作特征(ROC)曲线来评估关键基因的诊断价值并绘制关键基因线性预测模型。最后, 采用实时荧光定量聚合酶联反应(qRT-PCR)检测椎间盘退变髓核组织中的细胞焦亡相关基因表达水平。组间比较采用t检验。结果本研究共筛选获得8个椎间盘退变相关细胞焦亡基因, 即SR相关和CTD相关因子11(SCAF11)、富含亮氨酸重复结构域蛋白6(NLRP6)、肿瘤蛋白p53(TP53)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶4(CASP4)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、中性粒细胞弹性蛋白酶(ELANE)、常染色体隐形遗传性耳聋59蛋白(DFNB59)和常染色体显性遗传耳聋5蛋白(DFNA...     

LINC01600在结直肠癌临床诊断中的应用价值

目的分析长链非编码RNA LINC01600在结直肠癌组织中的表达以及在临床结直肠癌诊断过程中的价值。方法选取2020年1月至2023年12月新乡医学院第一附属医院收治的37例结直肠癌患者的临床标本作为研究标本, 选择对应的癌旁组织作为对照样本。提取癌旁组织和结直肠癌组织的总RNA, 采用转录组学技术分析癌组织和癌旁组织差异表达的长链非编码RNA。选取差异最为显著的长链非编码RNA LINC01600作为研究对象。采用荧光定量聚合酶链反应技术检测结直肠癌组织和癌旁组织中LINC01600的表达水平。制作受试者工作特征曲线分析LINC01600对结直肠癌的临床诊断效能。采用单因素方差分析不同临床分期, 不同分化程度患者LINC01600表达水平。并分析LINC01600和患者预后的关系。结果结直肠癌和癌旁组织共检出39 123个长链非编码RNA, 其中包括2 018个新的长链非编码RNA。差异分析显示, 其中有1 626个差异表达的长链非编码RNA, 其中1 019个上调基因, 607个下调基因。长链非编码RNA主要富集于核糖体通路、柠檬酸循环通路和RNA剪接相关通路。本研究选取差异最为...     

大鼠机械通气相关性肺损伤时蛋白激酶Cδ与细胞焦亡的关系

目的评价大鼠机械通气相关性肺损伤时蛋白激酶Cδ(PKCδ)与细胞焦亡的关系。方法清洁级健康成年雄性SD大鼠36只,体重200～250 g,采用随机数字表法分为3组(n=12):对照组(C组)、机械通气相关性肺损伤组(VILI组)和PKCδ特异性抑制剂KAI 9803组(K组)。气管插管术后VILI组气管内注射200 μl磷酸缓冲盐溶液,K组气管内注射KAI 9803 200 μg/kg,行机械通气4 h(潮气量40 ml/kg、通气频率60次/min,吸呼比1∶1,吸入氧浓度21%,呼气末正压为0)。于机械通气结束时采集股动脉血样,进行动脉血气分析,记录PaO2。通气结束后麻醉处死大鼠,取肺组织,制备支气管肺泡灌洗液(BALF),光镜下观察肺组织病理学结果并行肺损伤评分,计算肺组织湿重/干重(W/D)比值,采用考马斯亮蓝法测定BALF总蛋白浓度,采用ELISA法测定BALF IL-18和IL-1β浓度,分别采用Western blot法和qRT-PCR法测定肺组织PKCδ、gasdermin D N端片段(GSDMD-N)及其mRNA的表达。结果与C组比较,VILI组和K组肺损伤评分和...     

结直肠癌免疫检查点治疗现状与展望

免疫检查点抑制剂(ICIs)的出现, 开启了肿瘤免疫治疗的新时代。对于高度微卫星不稳定(MSI-H)结直肠癌患者, ICIs往往有较好疗效, 其临床应用也逐渐从晚期后线移至一线治疗;然而对于微卫星稳定(MSS)结直肠癌患者, ICIs单药并无明显作用。近年来, 随着ICIs联合放化疗等治疗方案的应用, ICIs治疗MSS型结直肠癌患者效果得到改善。本文拟对近年来免疫检查点治疗在结直肠癌上的应用进行总结与展望。     

竞争内源性RNA在结直肠癌中的研究现状及展望

竞争内源性RNA(ceRNAs)是基于共享微小RNA(miRNA,miR)反应元件构建的转录调控体系,长链非编码RNA(lncRNA)、环状RNA(circRNAs)及假基因均被证明可作为ceRNAs参与ceRNA网络的构建,上述ncRNAs可竞争结合miRNA,影响靶基因的翻译或稳定性,从而实现转录水平的基因调节。结肠直肠癌(CRC)是全球第三常见及第二位肿瘤致死疾病,越来越多的证据表明,ceRNAs、miRNAs的异常表达与CRC的发生、发展密切相关。本文综述了lncRNA、circRNA及假基因分别作为ceRNAs在ceRNA网络中同miRNA及mRNA之间的相互作用,并参与CRC增殖、上皮-间充质转化(EMT)、迁移、侵袭及放化疗抵抗等过程,以更好地了解ceRNA网络在CRC发病机制中的作用。讨论了目前关于ceRNA研究的不足及其作为CRC治疗靶点的可能性。     

体外循环下心脏瓣膜置换术患者术后谵妄与外周血单个核细胞焦亡的关系

目的评价体外循环(CPB)下心脏瓣膜置换术患者术后谵妄(POD)与外周血单个核细胞(PBMCs)焦亡的关系。方法择期行CPB下心脏瓣膜置换术患者60例, 性别不限, 年龄45～64岁, BMI 18～25 kg/m2, ASA分级Ⅱ或Ⅲ级, NYHA心功能分级Ⅱ或Ⅲ级。术后3 d内采用ICU意识障碍评估法(CAM-ICU)进行POD的评估, 按照是否发生POD分为2组:POD组(n=45)和无POD组(NPOD组, n=15)。于麻醉诱导后切皮前(T1)、CPB开始后30 min (T2)、CPB停止即刻(T3)和停止后24 h (T4)时采集颈内静脉血样, 采用ELISA法测定血浆S100β和神经元特异性烯醇化酶(NSE)的浓度, 测定血浆IL-18和IL-1β的浓度。采用Western blot法检测PBMCs核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3 (NLRP3)、caspase-1及消皮素-D (GSDMD)的表达。记录术后机械通气时间及ICU停留时间。结果与NPOD组比较, POD组T2～4时血浆S100β、NSE、IL-18、IL-1β浓度、PBMCs NLRP3、caspase...     

妊娠糖尿病患者外周血细胞焦亡相关因子的表达及与胰岛素抵抗的关系

目的探讨妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus, GDM)患者血清细胞焦亡相关因子半胱氨酸蛋白酶-1(caspase-1)、白介素-18(IL-18)水平及其与胰岛素抵抗(IR)的关系。方法选取2019年4月至2021年3月开封市中医院收治的GDM患者102例为GDM组, 纳入同期产检健康孕妇102例为正常组。比较GDM组与正常组孕妇年龄、孕周、空腹胰岛素(FINS)、孕前体重指数(BMI)、甘油三酯(TG)、空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)等资料;酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清caspase-1、IL-18水平;Pearson法分析GDM患者血清caspase-1、IL-18水平与HOMA-IR的相关性;Logistic回归法分析GDM发生的影响因素。结果 GDM组患者TG [(2.94±0.99)mmol/L vs(2.09±0.70)mmol/L]、FBG [(5.87±1.94)mmol/L vs(4.90±1.67)mmol/L]、TC [(5.72±1.92)mmol/L vs(5.03±...     

单细胞测序技术及其在结直肠癌中的研究进展

结肠直肠癌(CRC)是全球第三常见及第二位肿瘤致死癌症疾病, 由于基因突变的发生及肿瘤转移等事件造成CRC的预后不良。单细胞测序技术可以在单细胞水平上进行基因组、转录组、表观遗传学的高通量测序分析, 在肿瘤免疫微环境分析、肿瘤异质性检测、肿瘤转移机制探究及循环肿瘤细胞(CTCs)监测等有着特殊的技术优势。本文简要介绍了单细胞测序的技术流程及数据处理并回顾目前单细胞测序在CRC应用进展, 从而为了解CRC发生及肿瘤进展过程中的肿瘤内异质性、深入理解CTCs的应用与寻找新的药物作用靶点提供参考。     

右美托咪定对心脏瓣膜置换术患者外周血单核细胞焦亡的影响

目的评价右美托咪定对心脏瓣膜置换术患者外周血单核细胞焦亡的影响。方法择期心脏瓣膜置换术患者44例, 性别不限, 年龄45～64岁, BMI 18～25 kg/m2, ASA分级Ⅱ或Ⅲ级, NYHA心功能分级Ⅱ或Ⅲ级, 采用随机数字表法分为2组(n=22):右美托咪定组(Dex组)和生理盐水组(NS组)。Dex组于常规麻醉诱导后经10 min静脉输注右美托咪定0.5 μg/kg, 继之以0.5 μg·kg-1·h-1的速率输注至术毕;NS组以等容量生理盐水替代。于麻醉诱导后切皮前(T1)、CPB开始后30 min(T2)、CPB停止即刻(T3)及停止后24 h(T4)时采集颈内静脉血样, 采用ELISA法测定血浆IL-18和IL-1β浓度, 采用Western blot法检测单核细胞NOD样受体蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1(caspase-1)及消皮素-D(GSDMD)的表达。记录术中丙泊酚、舒芬太尼、去甲肾上腺素的用量、术后机械通气时间及ICU停留时间。结果与T1时比较, 2组T2～4时血浆IL-18和IL-1β浓度升高, 单核细胞NLRP3、...     

右美托咪定对大鼠内毒素性急性肺损伤时细胞焦亡的影响

目的评价右美托咪定对大鼠内毒素性急性肺损伤(ALI)时细胞焦亡的影响。方法 SPF级雄性SD大鼠60只, 6周龄, 体重200～220 g, 采用随机数字表法分为5组(n=10):对照组(C组)、ALI组和不同剂量右美托咪定组(D1～3组)。ALI组和D1～3组腹腔注射LPS 5 mg/kg制备大鼠内毒素性ALI模型。造模后即刻, D1～3组分别腹腔注射右美托咪定12.5、25.0和50.0 μg/kg, C组腹腔注射等容量生理盐水, 1次/d, 连续14 d。给药结束后, 处死大鼠, 行肺泡灌洗, 收集左支气管肺泡灌洗液, 采用ELISA法测定IL-1β、IL-6和TNF-α的浓度;取肺组织, 测定湿重/干重(W/D)比值;行HE染色, 光镜下观察肺组织病理学结果;采用Western blot法测定肺组织cleaved-caspase-1、消皮素剪切体N端(GSDMD-N)、IL-18和IL-1β的表达水平。结果与C组相比, ALI组和D1～3组肺组织W/D比值升高, 肺泡灌洗液IL-1β、IL-6和TNF-α浓度升高, 肺组织cleaved-caspase-1、GSDMD-N、IL...     

肝移植治疗不可切除性直肠癌肝转移1例

本例不可切除性直肠癌肝转移患者确诊直肠癌时已合并肝内不可切除多发转移, 切除原发病灶后采用FOLFOX方案化疗+贝伐珠单抗靶向治疗。2年后患者肝内转移灶增多增大, 未见肝外转移灶及原位复发, 实施肝移植手术, 术后采用他克莫司+西罗莫司免疫抑制方案, 雷替曲塞化疗。肝移植3年后, 本例患者肿瘤复发, 总生存期为6年。本例提示, 对于不可切除性结直肠癌肝转移患者, 在未发现原位复发及其他远隔转移的情况下实施肝移植手术可以提高患者的生活质量并获得较好的预后。     

人源性类器官在结直肠癌中的应用及研究进展

类器官是一种新兴的三维培养模型, 具有培养简单、稳定性好、能高度重现来源组织的特征和异质性等优点。它既可作为临床预测模型, 在体外对患者进行抗癌药物筛选和敏感性测试, 从而制定个性化的治疗方案;亦可以作为基础研究的工具, 通过进行自身基因编辑和修饰研究, 或结合气-液界面培养法和微流控技术研究, 探索结直肠癌发生发展分子机制及寻找潜在治疗靶点。本文就结直肠癌类器官在临床应用和基础研究中的现状和进展作一综述。