软骨寡聚基质蛋白对膝骨关节炎的诊断价值研究

目的 测定膝骨关节炎（OA）患者血清和关节液中软骨寡聚基质蛋白（COMP）水平,探讨是否对OA有诊断价值及是否与临床及影像学的表现相符合.方法 选取40例患有原发性膝OA伴有关节积液（男16,女24）的患者作为OA组,20例（男6,女14）患有创伤后关节积液的患者作为对照组.所有患者均进行充分的临床和放射学评估,COMP通过ELISA法测定.结果 OA组血清及关节液中COMP水平明显高于对照组,OA患者血清中和关节液中COMP水平与年龄、体重指数、疾病持续时间、平片及MR积分呈正相关,但与临床疾病参数关系不大.结论 COMP在OA诊断中有重要价值,有可能对监测软骨损害和不同治疗反应有用.     

疏肝祛瘀方对兔膝早期骨关节炎软骨组织形态学影响的研究

目的:探讨疏肝祛瘀方对兔膝早期骨关节炎软骨组织形态学的影响.方法:成年健康日本大耳白兔18只,体重2.5～3.0Kg,随机分为正常组、对照组、治疗组各6只,对照组、治疗组通过结扎股静脉造成兔膝骨关节炎早期模型,分笼饲养;8周后,正常组和对照组以生理盐水灌胃4周,治疗组以疏肝祛瘀方(“膝舒汤”)汤药灌胃4周,然后同时处死各组兔子,取材,观察正常组、对照组和治疗组各层软骨细胞排列及细胞形态、细胞核、细胞质等情况并进行软骨各层厚度测定.结果:正常组与对照组之间,对照组与治疗组之间软骨各层厚度比较P＜0.01,说明两者之间有显著性差异.正常组与治疗组之间软骨各层厚度比较P＞0.05,说明两者之间无显著性差异.结论:疏肝祛瘀方汤药对兔膝早期骨关节炎软骨的厚度改变影响明显,能改善软骨基质,促进软骨细胞的增殖,从而使损伤的软骨面得以修复.     

益气化瘀方对膝骨关节炎大鼠关节软骨退变的防治作用

目的：研究益气化瘀方对膝骨关节炎大鼠模型关节软骨退变的防治作用及其机制。 方法：1月龄SD大鼠90只,随机分为正常对照组、模型组和益气化瘀方组,每组各30只。模型组,益气化瘀方组大鼠通过肩关节离断术＋直立位诱导法建立大鼠膝骨关节炎模型。益气化瘀方组大鼠分别于5、7、9月龄（即造模术后4、6、8月）开始用药,连续用药1个月。3组大鼠分别于6、8、10月龄（即造模术后5、7、9月）处死,每次10只。处死后取大鼠膝关节,行番红O／固绿染色观察关节形态学变化,实时荧光定量聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）检测各组关节软骨内Ⅱ型胶原基因（type Ⅱ collagen gene,Col2A1）、聚集蛋白聚糖（aggrecan-1,Agc1）、基质金属蛋白酶-13（matrix metalloproteinase-13,MMP-13）以及金属蛋白酶组织抑制剂-1（tissue inhibitor of matrix metalloproteinase-1,TIMP-1）mRNA表达的情况。 结果：模型组关节软骨结构破坏严重,而益气化瘀方组大鼠关节软骨退变较模型组明显减轻。实时荧光定量PCR结果显示,益气化瘀方组6和10月龄大鼠膝关节软骨Col2A1、Agc1以及TIMP-1 mRNA表达量高于模型组（P〈0．01,P〈0．05）,MMP-13 mRNA表达与模型组比较差异无统计学意义;益气化瘀方组8月龄大鼠Agcl mRNA表达明显高于模型组（P〈0。01）,MMP-13 mRNA表达明显低于模型组（P〈0．01）。 结论：益气化瘀方可通过促进软骨合成聚集蛋白聚糖与Ⅱ型胶原,延缓膝骨关节炎大鼠关节软骨的退变。     

兔膝骨关节炎软骨组织损伤及发病机制的探讨

目的：观察兔膝骨关节炎(KOA)的组织病理变化并探讨其发病机制。方法：健康雄性新西兰兔膝关节强迫伸直位制动建立KOA模型,实验设对照组和模型组。4周后造模结束,取膝关节进行组织HE染色和免疫组织化学检测,观察并分析膝骨关节损伤及相关蛋白因子白细胞介素-1β(IL-1β)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、带有血小板凝血酶敏感蛋白样模体的解整链蛋白金属蛋白酶-4(ADAMTS-4)的表达情况。结果：HE染色显示,模型组膝骨关节滑膜组织均存在不同程度增生、纤维化、淤血和炎性细胞浸润;软骨增生、有裂隙,软骨细胞排列紊乱、簇集,细胞形态多样,表层细胞纤维化等。IL-1β、MMP-13、ADAMTS-4在对照组、模型组软骨细胞均有表达,而模型组表达明显高于对照组。结论：关节软骨的退变、滑膜组织的炎症是KOA的病理学特征,其发病机制与软骨细胞IL-1β、MMP-13、ADAMTS-4蛋白表达异常有关。     

膝骨关节炎中医证型与关节软骨损伤相关性分析

目的:探讨膝骨关节炎(KOA)的不同中医证型与关节镜下关节软骨损伤表现的相关性。方法:选取80例膝骨关节炎患者,由2名高级职称医师对患者进行中医辨证分型。所有患者均行关节镜手术治疗,对不同中医证型膝骨关节炎的关节镜下关节软骨损伤程度进行Outerbridge分级,并对数据进行统计学分析处理。结果:4种证型间软骨损伤分级比较用非参数秩和检验,差异有统计学意义(P<0.05);用LSD多重比较检验发现,气滞血瘀型的软骨损伤分级较肝肾阴虚型、脾肾阳虚型、风寒湿痹型均高,且差异有统计学意义(均P<0.05)。结论:关节镜下软骨损伤Outerbridge分级作为诊断膝骨关节炎的一项重要指标,可在一定程度上为膝骨关节炎的辨证施治提供客观依据。     

35例膝骨关节炎患者软骨厚度的超声检查

目的本文探讨了超声波在膝骨关节炎的诊断中价值和意义,用超声波检测膝骨关节炎患者软骨的厚度。方法对70个患骨关节炎的膝关节不同部位软骨厚度,包括滑车中央沟,股骨髁前方、负重区、后方7个部位进行超声波测量。并取10例20个正常膝关节软骨厚度作对照。结论高频超声波能够较准确地评价膝骨关节炎软骨厚度的变化。     

低强度不同频率全身震动治疗对兔膝骨关节炎的影响

目的研究不同频率低强度全身震动治疗（WBV）对于兔膝骨关节炎软骨下骨微结构、软骨降解、骨/软骨转换以及关节功能的影响。方法成年新西兰兔96只,随机分为膝关节前交叉韧带切断术组（ACLT组,16只）和WBV＋ACLT组（80只）。各组行左侧ACLT,制备膝骨关节炎模型。术后2个月,ACLT组不行WBV治疗,WBV＋ACLT组分别以频率5 Hz、10 Hz、20 Hz、30 Hz、40 Hz进行WBV治疗（每亚组16只）,震动幅度2~4 mm,40 min/d,5 d/周,持续治疗8周。治疗8周后采用负重不对称法检测关节疼痛度;尾静脉血液及尿液采集检测骨/软管转换标记物血清软骨寡聚基质蛋白（COMP）,骨转换标记物1型/2型胶原羧基末端肽（CTX-Ⅰ、CTX-Ⅱ）,运用Micro-CT仪扫描各组模型左侧膝关节,并分析软骨体积和骨微结构;关节软骨采用大体形态学和组织学评分分析。结果治疗8周,与ACLT组相比, 10 Hz （P<0.05）和20 Hz （P<0.01）亚组疼痛改善明显,而40 Hz （P<0.05）亚组则疼痛加重;大体评分和组织学评分,仅40 Hz亚组内侧髁与ACLT组相比评分增加（P<0.05）,病变更重;Micro-CT结果显示,关节软骨体积随着频率的改变呈现先增加后减少的变化趋势,以20 Hz亚组与ACLT组相比增加最为明显（P<0.05）;骨小梁厚度、骨小梁数量和骨体积分数随频率的增加而增加（P<0.05);CTX-Ⅰ随频率上升表达下降（P<0.05）,而COMP和CTX-Ⅱ的表达随频率增加先降低后升高,以20 Hz亚组最低（P<0.05）。结论较低频率（20 Hz）WBV可有效改善关节功能和软骨下骨微结构,增加骨转换,延缓软骨降解,为较优治疗参数。     

PGA/PLA支架材料对膝骨关节炎组织工程软骨重建的影响

目的:探究PGA/PLA支架材料对膝骨关节炎组织工程软骨重建的影响。方法:将30只日本大耳白兔平均分为3组,健康组(H组):正常日本大耳白兔,未患膝骨关节炎;膝骨关节炎组(K组):通过模型制备使正常日本大耳白兔患有膝骨关节炎;组织工程组(T组):对膝骨关节炎日本大耳白兔进行组织工程软骨重建。每组10只白兔。通过软骨组织学评分、HE染色法、免疫组化法、Westernblot法、qRT-PCR法分析H组,K组,T组之间软骨组织学评分、软骨组织病理学及形态学变化、软骨组织中Col-Ⅱ蛋白含量及Col-ⅡmRNA的含量的差异性来探究PGA/PLA支架材料对膝骨关节炎组织工程软骨重建的影响。结果:按照国际组织学评分标准对软骨组织进行评分。K组软骨组织纤维化严重,关节表面不规则,腔内积液多,缺损凹陷现象严重。T组纤维化现象减轻,表面规律,腔内积液面积减少,未出现凹陷,关节表面规律。T组和K组相比较关节炎症状、软骨组织评分均有明显好转现象(P<0.05)。H组软骨细胞分布较密集,K组分布杂乱且稀疏;H组膝关节软骨层较厚,K组软骨层薄且有破损现象;H组软骨细胞位于基质内的陷窝中,有软骨囊,K组缺损明显,没有软骨囊结构(P<0.05)。T组和K组相比较膝关节处软骨层较厚,细胞分布密集,可以看见部分细胞的软骨囊(P<0.05)。H组动物膝关节基质胶原阳性细胞较多。K组细胞数最少,软骨基质破损最严重,软骨细胞与骨基质疏松。T组和K组相比较阳性软骨基质破损减轻,细胞数量明显增多(P<0.05)。在×400的视野下,每组随机取5个视野进行计数,对比结果得出K组和T组有显著性差异(P<0.05)。通过Western blot法,对H组,K组,T组软骨组织中Col-Ⅱ蛋白含量进行免疫印迹,根据灰度分析显示,H组的Col-Ⅱ蛋白含量最高,K组最低,T组和K组相比较Col-Ⅱ蛋白含量明显升高(P<0.05)。H组日本大耳白兔软骨组织中的Col-ⅡmRNA表达量最高,K组的Col-ⅡmRNA表达量最低,T组和K组相比较Col-ⅡmRNA表达量明显升高(P<0.05)。结论:用PGA/PLA作为支架材料通过组织工程方法重建膝骨软骨,对膝骨关节炎有明显的治疗作用。     

灯盏花素对大鼠膝骨关节炎膝关节软骨的影响

目的 探讨灯盏花素(breviscapine，BE)对膝骨关节炎(osteoarthritis，OA)模型大鼠关节软骨的影响。方法 通过内侧半月板失稳(destabilization of the medial meniscus，DMM)诱导OA大鼠模型，BE和塞来昔布(celecoxib，Cel)分别通过灌胃向大鼠给药。通过苏木精-伊红(hematoxylin & eosin，HE)染色观察大鼠骨关节炎软骨损伤和细胞浸润情况，番红O-固绿染色观察软骨损伤情况，甲苯胺蓝染色观察软骨损伤，免疫组织化学(Immunohistochemistry，IHC)染色观察软骨组织中collagen-Ⅱ和p-JNK阳性细胞比例，酶联免疫吸附(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)试剂盒检测大鼠血清中炎性细胞因子IL-1β、TNF-α和IL-6的浓度。结果 OA组大鼠膝骨组织中软骨细胞层厚度较sham组变薄(P<0.0001)，软骨细胞损伤加重(P<0.001)，促炎细胞因子IL-1β(P<0.001)、TNF-α(P<0.001)和IL-6(P<0.001)水平与sham组相比明显升高，p-JNK阳性率升高。相比较于OA组，BE灌胃给药可缓解DMM诱导的大鼠膝骨关节的软骨损伤(P<0.05)，抑制促炎细胞因子的水平(P<0.01)以及p-JNK的阳性率。结论 BE可缓解DMM诱导的OA大鼠软骨损伤，抑制炎性细胞因子的生成。BE可能通过调节JNK信号通路参与OA软骨细胞损伤的调控。     

TRPV4受体对血管紧张素Ⅱ诱导的小鼠肾损害的影响

目的通过利用瞬时受体电位香草酸亚型4(transient receptor potential vanilloid type 4,TRPV4)基因敲除(TRPV4-/-)小鼠,探讨TRPV4受体在血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)所诱导的肾损害中的作用。方法实验小鼠分为假手术组和Ang Ⅱ处理组。在野生型和TRPV4-/-小鼠中通过皮下灌注Ang Ⅱ建立Ang Ⅱ依赖型高血压模型,而假手术组小鼠皮下只灌注生理盐水。处理4周后,分别检测小鼠的尾动脉收缩压、24 h尿白蛋白排泄量及8-异构前列腺素、血清肌酐的改变,并且同时对肾组织病理学的变化进行分析。结果与相应的假手术组比较,Ang Ⅱ处理组小鼠血压升高、尿白蛋白及8-异构前列腺素排泄量增加,并同时伴有血清肌酐升高(P0.05);肾小球纤维样硬化及肾小管间质损伤程度均出现明显加重,并伴有肾胶原蛋白水平的增高(P0.05)。除血压外,TRPV4基因敲除能显著抑制上述所有病理变化,从而缓解Ang Ⅱ所诱导的肾损害(P0.05)。结论在Ang Ⅱ所诱导高血压的过程中,TRPV4基因敲除能够明显减弱由上述过程所诱发的肾损害。因此,上述研究结果提示TRPV4受体在促进Ang Ⅱ所诱导的肾损害中发挥重要的病理生理学作用。     

TRPV4在小鼠脑血管内皮细胞中的表达及对血管张力调节作用研究

目的 比较瞬时受体电位(TRP)通道家族中香草素受体亚家族(TRPV)和经典瞬时感受器电位亚家族(TRPC)在小鼠脑、心和肝微血管内皮细胞表达差异,寻找脑微血管中具有特异性高表达亚型,阐明其对脑动脉血管舒张的调节作用.方法 挖掘GEO数据库中芯片表达谱数据,分析各个通道亚型差异表达情况,再采用免疫组化检测TRPV4、TRPP2和TRPC1在脑基底动脉中表达情况,血管张力实验检测TRPV4通道在调节小鼠脑基底动脉舒张中的效应.结果 通过分析表达谱数据显示,在小鼠脑、心和肝三种微血管内皮中,TRPV4通道在脑微血管内皮细胞显著高表达,而TRPC3通道显著低表达.TRPV4、TRPP2和TRPC1在脑基底动脉内皮和平滑肌层也显著表达.TRPV4通道激动剂GSK1016790A能浓度依赖地舒张苯肾上腺素引起的脑基底动脉收缩,而且其舒张效应可以被TRPV4通道阻断剂HC067047所阻断.结论 与心和肝血管内皮细胞相比,TR-PV4通道在小鼠脑血管内皮细胞中显著高表达,可能在调节脑血管内皮功能中具有重要意义.     

丹紫康膝冲剂对大鼠膝骨陛关节炎软骨细胞凋亡的影响

目的探讨丹紫康膝冲剂对大鼠膝骨性关节炎软骨细胞凋亡的影响。方法将健康Wistar大鼠80只随机分为4组,分别为丹紫康膝组,西药组,模型组,正常组。除正常组外,其他组予以改良Hultll造模法造成大鼠膝骨性关节炎模型,于造模6周后对各组进行干预,干预4周后肉眼观察大鼠膝关节大体形态,抽取关节液检测一氧化氮（NO）含量,TUNEL法检测关节软骨细胞凋亡率。结果肉眼观察下见模型组造模膝关节软骨明显退变,局部溃疡,关节边缘增生,正常组膝关节软骨光滑润泽,丹紫康膝组和西药组可见造模膝关节有新生软骨生成;膝关节滑膜液NO含量正常组较其余3组低（P〈0．05）,丹紫康膝组和西药组NO含量较模型组低（火0．05）;丹紫康膝组和西药组细胞凋亡率明显低于模型组（P〈0．05）,丹紫康膝组、西药组、模型组细胞凋亡率均较正常组高（P〈0．05）。结论丹紫康膝冲剂能降低大鼠膝关节关节液NO含量．从而抑制由N0介导的关节软骨细胞凋亡。     

超微肿痛贴对兔膝骨关节炎模型的软骨中JNK/p38 MAPK信号通路的影响

目的 观察超微肿痛贴对兔膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)模型的JNK/p38 MAPK信号通路的mRNA及蛋白表达的影响.方法 将50只3月龄新西兰兔随机分为空白组、模型组、氟比洛芬凝胶贴膏组、超微肿痛贴组,每组各12只,除空白组外,其他3组均采用木瓜蛋白酶膝关节腔注射方式造模.造模成功后,...     

盘龙七片对膝骨关节炎大鼠关节软骨的保护作用及对Wnt通路的调控机制

目的 探讨盘龙七片对膝骨关节炎（KOA）大鼠关节软骨的保护作用及对Wnt通路的调控机制。方法 选用96只SPF级8周龄雄性SD大鼠构建膝骨关节炎大鼠模型,观察大鼠活动状态,并经CT验证。实验分为假手术组、模型组、塞来昔布组和低、中、高剂量盘龙七片组6组,每组16只。按照实验分组给药,观察各组大鼠软骨形态并进行大体评分,行HE染色,酶联免疫吸附（ELISA）法测定大鼠滑膜中TNF α、IL 1β及MMP-13水平,蛋白印迹（WB）法测定软骨中Wnt-4、β-catenin水平。结果 手术后,大鼠出现膝骨关节炎症状并经CT验证。与假手术组相比,模型组大鼠膝骨关节可见裂纹,表面呈毛刺状、暗黄色,软骨可见增生、赘生物;HE染色可见软骨细胞数减少,骨赘、血管增生,结构混乱不清,表面凹陷,深层结缔组织可见明显裂隙,潮线消失;大体评分、TNF α、IL-1β、MMP-13、Wnt-4及β-catenin水平显著升高（均P＜0.05）。与模型组相比,经低、中、高剂量盘龙七片治疗后,大鼠膝骨关节软骨表面趋向光滑,色泽逐渐明亮,增生、赘生物减少;HE染色可见软骨细胞数逐渐增多,结构趋向分明,裂隙减少,伴有少量炎症细胞浸润;大体评分、TNF α、IL-1β、MMP-13、Wnt-4及β-catenin水平明显降低（均P＜0.05）。结论 盘龙七片可缓解KOA大鼠症状,具有一定的临床应用价值,这提示盘龙七片可能成为治疗KOA的候选药物。     

红外线及磁场对兔膝骨关节炎软骨损伤的影响

目的探讨红外线及磁场联合作用对兔膝关节骨性关节炎软骨损伤的治疗效果。方法采用管型石膏伸直位固定右后肢的方法将24只健康雄性新西兰成年白兔复制出膝骨关节炎模型。6周后将24只兔子全部解除石膏固定．并随机分为4组进行实验处理,即模型组、红外线治疗组（红外组）、磁疗组及红外线和磁场联合治疗组（联合组）。分别于治疗开始后1、2、3周处死白兔,每组每周处死2只,观察软骨的大体改变,并切取其造模肢体股骨内髁及胫骨内侧平台关节面软骨行组织病理学（HE染色、免疫组化及原位杂交等）检测,光镜所见依据Mankin’s评分标准评分,并作统计学处理。结果联合组的软骨病变程度（包括软骨面的损伤及软骨细胞的增生、紊乱）有显著减轻,联合治疗比单因子治疗有显著性差异（P〈0．05）,两个单因子治疗组之间没有显著差异（P〉0．1）。结论联合应用红外线和磁场能有效减轻骨关节炎的软骨破坏．并可缩短病程．提高疗效,起到相互协同作用。     

低强度脉冲超声缓解膝骨关节炎疼痛与修复关节软骨损伤研究

目的探讨低强度脉冲超声缓解膝骨关节炎疼痛与修复关节软骨损伤的效果。方法选择我院2018年1月～2019年1月收治的104例膝骨关节炎患者,按照数字表法随机分为两组,各52例,研究组采取低强度脉冲超声,对照组采取常规治疗,对比两组的总有效率、临床症状积分、不良反应发生率、VAS、Lysholm、ADL及Noyes评分。结果研究组总有效率为90.38%,明显高于对照组的76.92%(P0.05)。治疗前两组的VAS、Lysholm、ADL及Noyes评分相比,差异无统计学意义(P0.05),治疗后两组相关评分均明显改善,但研究组各项评分优于对照组(P0.05)。治疗前两组的膝关节肿痛、上下楼痛及积液评分相比,差异无统计学意义(P0.05),治疗后两组各项评分均明显改善,但研究组各项评分均低于对照组(P0.05)。研究组不良反应发生率为5.77%,与对照组7.69%相比,差异无统计学意义(P0.05)。结论低强度脉冲超声用于膝骨关节炎效果显著,可有效减轻疼痛,缓解相关症状,促进关节软骨损伤修复,提高日常生活能力。     

丹紫康膝冲剂对兔膝骨性关节炎软骨含水率及羟脯氨酸影响的研究

目的 探讨丹紫康膝冲剂兔膝关节骨性关节炎软骨含水率及羟脯氨酸的影响.方法 将兔随机分成6组,除正常组外,丹紫康膝冲剂高剂量组、中剂量组、低剂量组(简称丹紫高、中、低剂量组)、壮骨关节丸组(简称壮骨组)、模型组共5组分别在兔左膝关节1、4、7d注射0.5 mL 4％木瓜蛋白酶造模及药物干预后,光镜下观察关节软骨并检测关节软骨含水率和羟脯氨酸含量.结果 模型组发生明显膝关节软骨退行性改变.丹紫高、中、低剂量组与模型组比软骨含水率差异有统计学意义(P＜0.05),丹紫高、中、低剂量组与模型组软骨羟脯氨酸含量比较差异有统计学意义(P＜0.05);丹紫高、中剂量组软骨含水率比较两组间差异无统计学意义(P＞0.05),高、中剂量组软骨含水率与丹紫低剂量组比较差异有统计学意义(P＜0.05);丹紫高、中剂量组软骨羟脯氨酸含量比较两组间差异无统计学意义(P＞0.05),高、中剂量组软骨羟脯氨酸含量与丹紫低剂量组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 丹紫康膝冲剂能改善兔膝关节骨性关节炎软骨中含水率和羟脯氨酸含量,且高、中剂量效果为佳.     

脊神经后根切断对大鼠膝关节软骨退变的影响

目的：观察脊神经后根切断大鼠不同时期关节软骨的变化特点及规律,进一步验证部分感觉障碍可以引起关节软骨损伤。方法10周龄SPF级雄性Wistar大鼠33只随机分为实验组（18只）和对照组（15只）。切断实验组大鼠右侧L3、L4脊神经后根。对照组只切开皮肤及椎旁肌。观察大鼠行为学改变。于术后2周、6周和10周三个时间点取右后肢股骨下端,制作组织石蜡切片。常规HE染色、番红O／固绿染色观察关节软骨的组织学改变及特点。结果术后随时间推移,实验组大鼠右侧后肢经历一过性瘫痪、协调运动障碍及主动运动的变化过程。右后肢股骨髌面逐渐变浅变宽。关节软骨依次出现表面粗糙、细胞排列紊乱、细胞减少、潮线复制、漂移和中断等变化。实验组关节软骨ACC／TAC值随时间推移呈逐渐增大（t＝5.25～8.13,P ＜0.05）。结论脊神经后根切断可引起关节软骨损伤及退行性改变。