孕妇血浆中游离胎儿DNA在产前诊断中的研究进展

用妊娠妇女外周血中的胎儿DNA进行产前诊断是目前产前诊断研究的热点，从妊娠妇女外周血中得到胎儿DNA主要有两种途径，一种是从妊娠妇女外周血中富集纯化胎儿细胞，另一种是从孕妇血浆／血清中直接提取游离的胎儿DNA。将对孕妇血浆中的胎儿DNA在非侵入性产前诊断中的应用及存在的问题进行综述。     

孕妇血浆中游离胎儿DNA在产前诊断中的研究进展

用妊娠妇女外周血中的胎儿DNA进行产前诊断是目前产前诊断研究的热点,从妊娠妇女外周血中得到胎儿DNA主要有两种途径,一种是从妊娠妇女外周血中富集纯化胎儿细胞,另一种是从孕妇血浆/血清中直接提取游离的胎儿DNA。将对孕妇血浆中的胎儿DNA在非侵入性产前诊断中的应用及存在的问题进行综述。     

母体血浆胎儿游离DNA Rh D基因型产前诊断检测

目的 运用荧光定量PCR(quantitative realtime PCR, Q-PCR)技术检测Rh D阴性孕妇血浆中游离胎儿DNA进行无创性产前诊断胎儿Rh D基因型。方法 通过微量 DNA 抽提技术,并利用琼脂糖凝胶电泳法富集孕妇血浆游离胎儿 DNA(Cell-free fetal DNA,cff DNA),用Q-PCR技术检测 43例Rh D阴性孕妇血浆cff DNA,测定不同孕期的孕妇全血和血浆中管家基因(β-actin)的含量,比较不同孕期孕妇全血和血浆DNA 含量的变化;并用男性性别决定基因(sex-determining region Y gene,SYR)确定胎儿 DNA 的存在,以未有妊娠史的健康女性和健康男性作为阴性和阳性基因对照;同时对孕男胎的Rh D阴性孕妇血浆cff DNA进行Rh D 基因外显子 7、10 和内含子 4 的特异性扩增,与孕妇产后采集的新生儿脐血Rh D 定型结果对比分析。 结果 (1)孕妇早、中期孕组血浆DNA含量差异无统计学意义(P＞0.05),早、晚期和中、晚期孕组血浆 DNA差异有统计学意义(P＜0.05)。(2)43例Rh D阴性孕妇中26例经产后证实为男胎,母血浆中检测到SYR基因特异性扩增的 25 例,灵敏度为96.15%,特异度为94.44%,准确率为97.67%。(3)26例孕男胎孕妇血浆中胎儿 DNA 的Rh D基因型检测发现,有19例胎儿Rh D血型阳性,5例胎儿Rh D血型阴性,即24例胎儿 DNA 的Rh D基因型与表型相符,准确率为97.6%。 结论 运用Q-PCR技术检测Rh D阴性孕妇血浆中cff DNA进行无创性产前诊断胎儿Rh D基因型,是一种敏感性高、特异性好的无创性产前诊断方法,可用于临床诊断和预防新生儿Rh D溶血病。     

孕妇血浆中游离胎儿DNA在产前诊断中的应用

目的探讨孕妇血浆中游离胎儿DNA在非创伤性产前诊断中的可行性。方法用柱分离法提取46例孕妇血浆中的DNA,用巢式PCR技术扩增其胎儿SRY基因,并引入内参照基因ATL1特异序列。结果28例孕男胎的孕妇血浆中有26例经巢式PCR扩增出SRY基因。18例孕女胎的孕妇血浆中有17例经巢式PCR只扩增出ATL1基因,灵敏度和特异度分别为92.9%(26/28)和94.4%(17/18),总符合率93.5%(43/46)。结论应用孕妇血浆中胎儿DNA作产前诊断灵敏度和特异度较高,是一种非创伤性产前诊断方法,具有广泛的临床应用前景。     

应用表观遗传学标记检测孕妇血浆中的胎儿游离DNA

[目的]探讨应用非性别依赖的表观遗传学标记检测孕妇血浆中胎儿游离DNA的可行性. [方法]随机选择60例孕妇作妊娠组,15例未生育非妊娠女性作对照组1,15例已生育非妊娠女性作对照组2.以甲基化特异性PCR扩增各待检对象血浆DNA中不同甲基化状态的maspin基因,并对结果进行统计学分析.[结果]m-maspin(maspin基因的甲基化序列)在妊娠组和两对照组中均被检测出,其检测阳性率在各组间无差异.u-maspin(maspin基因的非甲基化序列)在妊娠组中有53例被检测出,检出率88.3%,而在两对照组中均未被检测出,其检测阳性率在妊娠组和两对照组间的差异均具有统计学意义. [结论]u-maspin基因可作为非性别依赖的胎儿DNA特异性标志物应用于非侵入性产前诊断.     

孕妇外周血中游离胎儿DNA检测在染色体非整倍体无创产前诊断中的意义

目的探讨孕妇外周血中游离胎儿DNA检测在无创产前诊断染色体非整倍体中的临床意义。方法选取2016年1月1日-2017年1月31日在该院产科接受外周血中游离胎儿DNA检测的5 000名孕妇为研究对象,采集孕妇外周血分离血浆后,提取胎儿游离DNA,采用高通量测序法对孕妇外周血中游离胎儿DNA进行染色体非整倍体检测,得出21-三体综合征、18-三体综合征、13-三体综合征等染色体非整倍体疾病的风险率,对于高风险的孕妇行介入性穿刺并对胎儿染色体核型进行分析,对低风险孕妇进行随访,以了解胎儿出生后情况。结果 5 000名孕妇均成功完成外周血游离胎儿DNA检测,其中有69例出现染色体非整倍体异常,阳性率为1.38%,其中21-三体异常47例、18-三体异常11例、13-三体异常6例、性染色体异常5例,抽取羊水经细胞培养后行染色体核型分析,确定染色体非整倍体异常66例,符合率为95.65%,检查率为100.00%;47例21-三体异常中有46例进行了介入性产前诊断,诊断符合率为97.87%;11例18-三体异常中有10例进行了介入性产前诊断,诊断符合率为90.91%;6例13-三体异常均进行了介入性产前诊断,诊断符合率为100.00%;5例性染色体异常有4例进行了介入性产前诊断,诊断符合率为80.00%。结论孕妇外周血中游离胎儿DNA检测诊断染色体非整倍体安全可靠,灵敏度和准确率较高,可避免侵入性损害,可作为产前诊断染色体非整倍体疾病的辅助手段。     

孕妇血浆中游离胎儿DNA的研究进展

从孕妇血中分离胎儿细胞是无创性产前诊断的一种确定方法，但由于母血中胎儿细胞数量极少，而且从母血中分离和富集胎儿细胞的技术不成熟，使它应用于临床有一定的困难。许多研究者一直致力于探索一种简便有效的无创性产前诊断方法，分子生物学技术的发展为分子分析提供了很多有用的工具。本文对检测母血浆中游离胎儿DNA在遗传病的产前诊     

孕妇外周血中游离胎儿DNA的生物学及其在产前诊断中的应用

孕妇外周立中游离胎儿DNA的存在，为非侵入性产前基因诊断开辟了崭新途径；检测手段的简便、高效及胎儿DNA的稳定性使我们在对性连锁遗传病及单基因遗传病进行产前诊断方面又有了新的进展。同时，血中游离胎儿DNA的浓度改变也与某些妊娠病理息息相关。这些均为今后的产前诊断及研究母胎间关系提供了更多思路。     

母体血浆中游离胎儿DNA研究进展

母血浆中游离胎儿DNA是无创伤性产前诊断中胎儿信息的主要来源之一。近年对游离胎儿DNA的来源、生物学特点以及临床应用的研究倍受关注。现已开展胎儿性别鉴定、RhD基因检测、STR遗传标记检测、胎儿非整倍体检测等应用研究。母血浆中游离胎儿DNA提取方法的发展和高灵敏度检测技术的应用,为母血浆中游离胎儿DNA的研究开辟了新前景。就母血中胎儿DNA来源、生物学特点,分析方法、基础性研究及临床应用的进展情况综述。     

母体血浆中游离胎儿DNA研究进展

母血浆中游离胎儿DNA是无创伤性产前诊断中胎儿信息的主要来源之一.近年对游离胎儿DNA的来源、生物学特点以及临床应用的研究倍受关注.现已开展胎儿性别鉴定、RhD基因检测、STR遗传标记检测、胎儿非整倍体检测等应用研究.母血浆中游离胎儿DNA提取方法的发展和高灵敏度检测技术的应用.为母血浆中游离胎儿DNA的研究开辟了新前景.就母血中胎儿DNA来源、生物学特点,分析方法、基础性研究及临床应用的进展情况综述.     

用妊娠妇女血中胎儿DNA进行产前诊断

近年来非创伤性产前诊断成为研究的热点，孕妇血浆或血清中存在高浓度的胎儿DNA，用PCR方法检测母血中的胎儿DNA有望成为非创伤性产前诊断的方法。     

荧光定量PCR检测血浆游离DNA方法的建立

[目的] 建立TaqMan探针定量PCR 术检测血浆游离DNA的方法.[方法] 构建重组质粒pMD-18-TGAPDH、pMD-18-T-sRY作为标准品,并通过软件设计出TaqMan探针,优化定量PCR体j募≯并对其特异性进行分析.[结果] 建立了1个检测GAPDH和4个检测SRY荧光定量PCR方法,得到上述5个荧光PCR的扩增动力曲线和定量标准曲线,模板起始浓度与阈值循环数(CT值)之间有很好的相关关系(r分别为0.97.0.99.0.98、0.97、0.99).[结论] 成功建立了定量检测血浆游离DNA的方法,其灵敏度高、特异性强,有望成为一种检测孕母血浆游离DNA含.量的快速简便方法.     

利用母体外周血中胎儿DNA行产前诊断研究进展

母体外周血浆中存在一定数量的游离的胎儿DNA已为许多学者所证实，为非侵入性产前诊断提供了个有广泛应用前景的途径。综述胎儿DNA在母体外周血中的特点，检测技术的发展及其在产前诊断中的应用。     

孕妇血浆中胎儿DNA的定量检测

目的: 定量检测孕妇血浆中游离胎儿DNA含量。方法: 以SRY基因序列作为胎儿DNA的基因标志, 应用实时定量PCR技术测定不同孕期的孕妇血浆中胎儿DNA的含量。结果: ①最早检测出孕妇血浆中胎儿DNA的时间为 7-1周; ②早、中、晚孕期孕妇血浆中胎儿DNA浓度平均值分别为 77. 86、95 .43、325 .61copy/ml, 在孕妇血浆总DNA含量中的相对浓度分别为 4 .88%、6 .10%、4. 77%。结论: 在孕妇血浆中可监测到较高浓度胎儿游离DNA, 并且随着孕期的进展, 胎儿DNA含量逐渐增加, 这一结果有助于进一步无创伤性产前基因诊断的研究。     

孕妇外周血中胎儿游离DNA的研究进展

<正>当前,产前诊断越来越受到人们的重视,产前诊断是减少出生缺陷儿的有效措施之一。分为有创与无创性,有创性包括:羊水穿刺、绒毛活检取样(CVS)、胚胎(胎儿)镜、经皮胎儿脐血穿刺等,因为具有创伤性,操作时可能对母亲和胎儿造成一定的风险,因而在临床上限制了其使用。近年来,无创伤性产前诊断越来越受到人们的关注,而孕妇外周血中的胎儿游离DNA的发现为无创伤性产前遗传病诊断提供了重要的研究方法,由于胎儿游离DNA在孕妇外周血中具有     

荧光定量聚合酶链反应技术检测孕妇外周血中游离胎儿DNA的可行性研究

目的:探讨荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术用于孕妇外周血浆中游离胎儿DNA检测的可行性。方法:利用FQ-PCR技术特异性扩增Y基因性别决定区(SRY)并定量分析妊娠中期(18～25周)孕妇血浆中含量。结果:148例男胎孕妇血浆标本中,SRY基因检出率为98.65%。139例女胎孕妇血浆标本中未检测到SRY基因。结论:FQ-PCR技术在孕妇外周血游离胎儿DNA的检测中具有较高的灵敏性和特异性,FQ-PCR技术可应用于非创伤性产前诊断。     

从孕妇外周血分离胎儿细胞行产前诊断的研究进展

近几年，国外产前诊技术的方法学研究下向一种非侵入性的诊断方向发展。该方法是从孕妇外周血中分离出胎儿细胞，再用一些较先进的分子遗传学方法去分析这些细胞，行产前诊断。虽然该方法目前还处于方法学研究阶段，尚有一些问题需要解决，但他的前景比较乐观，预计一但方法稳定后，产前诊断就诊人数会有所提高。     

孕妇外周血胎儿细胞的分析及在产前诊断中的应用

孕妇外周血中存在胎儿细胞共四种“滋养叶细胞、有核红细胞、粒细胞和淋巴细胞，胎儿有核红细胞最适合富集、纯化及用于产前诊断。利用有核红细胞特异性抗原标记ＣＤ７１、ＣＤ３６、及抗ＧＰＡ、抗珠蛋白阳性选择及白细胞抗原ＣＤ４５阴性选择分离胎儿有核红细胞，用ＦＩＳＨ及ＰＣＲ技术进行遗传学分析，已能在产前诊断出胎儿性别，一些染色体异常及血红蛋白等疾病。     

孕妇血浆中游离胎儿DNA的生物学特点及临床应用

已证实胎儿细胞存在于孕妇外周血中，但由于其数量较少，而且存在个体差异，所以很难将其应用于临床形成成熟的非创伤性产前诊断检测方法。1997年，Lo^[1]首次报道在母体血循环中发现了游离胎儿DNA，证实了母体血浆中的DNA是胎儿和母体DNA的嵌和物。随后又有一些学者相继证实了母体血循环游离胎儿DNA的存在。近两年来，随着分子生物学等技术的完善，使得从母血循环中检测胎儿DNA并应用于临床成为可能，并为形成一种易于为广大患者接受、应用范围广的无创性产前诊断技术奠定了基础。     

孕妇外周血中游离胎儿DNA的生物学及其在产前诊断中的应用

孕妇外周血中游离胎儿DNA的存在 ,为非侵入性产前基因诊断开辟了崭新途径 ;检测手段的简便、高效及胎儿DNA的稳定性使我们在对性连锁遗传病及单基因遗传病进行产前诊断方面又有了新的进展。同时 ,血中游离胎儿DNA的浓度改变也与某些妊娠病理息息相关。这些均为今后的产前诊断及研究母胎间关系提供了更多思路。