壳聚糖复合共混膜培养兔角膜缘上皮及其移植

目的 探讨壳聚糖、胶原、透明质酸钠复合共混膜作为兔角膜缘上皮细胞体外培养载体及其自体移植的可行性。方法 活体取兔左眼角膜缘浅层小块，置此共混膜上，常规培养8天。将兔右眼角膜浅层基质分离成囊袋，用3mm环钻去除角膜中央浅表层，将含培养角膜缘上皮细胞的共混膜植入自体角膜囊袋内(6只兔)，对照组则植入不含细胞的共混膜(6只兔)。术后观察1月。结果 角膜缘小块在共混膜上培养生长良好，移植手术后40h，实验组5／6角膜植片荧光素染色阴性；对照组术后4天角膜植片荧光素染色仍为部分阳性。实验组组织学检查显示材料表层上皮完整，AE1／AE3免疫组化染色阳性，材料部分降解。结论 壳聚糖胶原透明质酸钠共混膜可作为培养角膜缘上皮细胞及其移植的载体。     

不同壳聚糖膜片兔眼前房生物相容性的实验研究

目的观察不同壳聚糖膜片在兔眼前房的相容性,评价其用作角膜内皮细胞移植载体的可行性。设计实验研究。研究对象新西兰大白兔33只。方法33只兔中30只随机分为三组,分别将脱乙酰度为63％（A组）、74％（B组）、95％（C组）的壳聚糖生物膜植入到兔的左眼前房内,右眼不做操作作为空白组;另3只兔左眼仅做前房穿刺作为对照组。使用裂隙灯显微镜观察并记录植入后3、5、7、10、14天各组兔眼前房反应。1、2,4、8周测量角膜厚度。2、4周行术眼角膜内皮镜观察。1、3个月时病理切片,苏木精一伊红染色,观察术眼的炎症反应情况。主要指标角膜厚度、内皮细胞密度、六角形细胞率、平均细胞大小。结果术后1周内,三组兔眼均出现不同程度的角膜水肿、前房渗出、虹膜充血;术后第2周,A、B组出现前房积脓、虹膜新生血管,且膜片透明度下降,至术后2个月前房积脓、虹膜新生血管基本消失。C组第2周后未出现前房积脓及虹膜新生血管,且膜透明性好。角膜测厚显示,仅术后2周时c组角膜厚度较A、B两组的角膜厚度薄（F=13．425,P=0．000）,其余时间点均未见角膜厚度的差异。术后2周各膜片组术眼内皮细胞密度、六角形细胞率和细胞大小与空白组正常兔眼问均无显著性差异（P均〉0．05）;术后1个月,A、B组HE染色示膜片周围大量炎性细胞聚集,术后3个月形成炎性肉芽肿,膜片被包裹。C组术后1个月,膜片周围未发现炎症细胞的包绕,只在膜片与角膜或虹膜组织接触点上有少量的炎性细胞,3个月后膜片周围无炎症反映。结论脱乙酰度为95％的壳聚糖生物膜较脱乙酰度63％、74％者具有更好的前房生物相容性。     

组织工程角膜治疗兔无菌性角膜溃疡

目的:探讨利用组织工程技术制备角膜基质进行板层角膜移植治疗无菌性角膜溃疡的可行性和疗效。方法:用去垢剂联合胰酶、DNA-RNA酶去除猪角膜基质细胞后制备成组织工程角膜基质;将16只兔的角膜基质内植入壳聚糖膜使之形成角膜溃疡,随机从16只兔中选8只行组织工程角膜基质板层移植;另外8只作为对照组,行新鲜的同种异体板层角膜移植。术后对角膜进行裂隙灯、HE染色光学显微镜检查。结果:组织工程角膜基质移植后无免疫排斥发生,术后8～10wk角膜溃疡完全修复,角膜恢复透明性,与对照组疗效相同。结论:组织工程角膜基质具有良好的生物相容性和治疗作用。     

异种脱细胞角膜基质材料的生物相容性研究

目的：研究脱细胞猪角膜基质材料在角膜组织中的生物相容性,为组织工程角膜的构建寻找一种良好的支架材料。方法：将用去垢剂联合酶的方法脱细胞处理的猪角膜基质材料植入兔角膜基质囊袋中,进行裂隙灯观察并照相。不同时间取材HE染色,进行光镜检查。结果：脱细胞猪角膜基质材料植入兔角膜基质囊袋,观察4mo,生物相容性良好,材料逐渐降解吸收。结论：脱细胞猪角膜基质材料植入兔角膜中无炎症、无免疫排斥反应,生物相容性好,可作为组织工程角膜的支架材料。     

组织工程角膜基质的体外构建及移植的实验研究

目的探讨利用组织工程技术体外构建角膜基质进行板层角膜移植的可行性和有效性。方法将猪角膜基质去细胞处理后制备成组织工程角膜基质载体;取幼兔角膜基质细胞体外培养,将其种植在载体上,体外构建成组织工程角膜基质,用PKH26荧光标记兔角膜基质细胞示踪角膜基质的构建;将16只兔的角膜基质内植入壳聚糖膜使之形成无菌性角膜溃疡,随机从16只兔中选8只,进行组织工程角膜基质移植;另外8只作为对照组,进行新鲜的同种异体兔板层角膜移植。术后对角膜进行裂隙灯、光学显微镜、透射电镜观察。结果体外构建的组织工程角膜的基质细胞具有活性,其结构与正常角膜基质相近。移植治疗无菌性角膜溃疡术后,1~2周有新生血管侵入组织工程角膜基质植片边缘,植片为灰白色半透明状;3~4周随着新生血管减退,组织工程角膜基质植片局部开始透明变薄;术后8~10周角膜溃疡完全修复,角膜恢复透明性,角膜神经可再生;观察最长达10月,角膜仍保持透明,无免疫排斥发生,与对照组疗效相同。结论体外构建的组织工程角膜基质无免疫原性、具有良好的生物相容性,可作为临床治疗角膜溃疡的移植材料。     

人工角膜载体的体外构建及生物相容性研究

目的　应用壳聚糖（chitosan，CS）和蚕丝蛋白（silk fibroin，SF）构建组织工程角膜基质，探讨不同比例的CS和 SF共混膜的生物特性，为以后的角膜移植奠定基础。方法　将SF和CS按体积比3∶1和4∶1混合，体外构建具有相应器官特征的角膜基质层；体外培养原代兔角膜基质及上皮细胞，检测细胞分布情况和载体膜片的物理特性；免疫组织化学法测定细胞表型和分布情况,CCK-8试剂盒测定载体膜片毒性，电镜下观察细胞结构形态和附着情况，将构建的膜片植入兔板层角膜中检测组织生物相容性。结果　载体膜片的吸水率均在90%左右，明显强于天然角膜，抗拉力SF/CS 3∶1组为 0.90±0.02，SF/CS 4∶1组为 1.30±0.05，透光率均大于60%，且抗拉力和透光率随着CS含量增加而增强，但与天然角膜组织间仍存在差异。与载体膜片共培养的细胞在培养2周后，电镜下可见膜片上形成致密的细胞层，重构的板层角膜结构与天然角膜相似。CCK-8法检测结果显示，合成膜无明显毒性。免疫组织化学染色结果显示，培养出的基质细胞形态与天然角膜相似。动物板层移植术后，裂隙灯观察载体膜片组术后半个月内充血消失，无明显的前房炎症反应，术后1个月拆线时无明显新生血管。免疫组织化学法检测术后病理组织未发现CD4+、CD8+、CD31+T细胞浸润。结论　CS-SF可以用于组织工程角膜基质的构建，这为重建角膜基质提供了方向。     

新型可降解支架材料植入角膜的生物学反应研究

目的　探讨可降解交联剂交联乙烯基吡咯烷酮对兔角膜组织的生物学反应的影响。方法　将乙烯基吡咯烷酮植入兔角膜囊袋内 3个月 ,观察生物材料在角膜内生物学反应。结果　可降解交联剂交联乙烯基吡咯烷酮合成材料植入兔角膜囊袋 3个月 ,生物相容性良好 ,材料逐渐降解 ,材料内有胶原和角膜基质细胞长入。结论　新型可降解交联剂交联乙烯基吡咯烷酮合成材料植入后未见兔角膜有明显的炎症反应 ,材料的组织相容性好 ,可作为组织工程角膜的支架材料。     

聚酯纤维网的角膜生物相容性实验研究

目的探讨聚酯纤维网植入兔角膜板层后与角膜组织的生物相容性及其与角膜的生物愈合特性。方法选择20只健康新西兰兔,体重2.0～2.5 kg,右眼均行手术作为实验组,左眼作为正常对照组。实验组中15只右眼角膜板层植入聚酯纤维网,并分为术后2周、1个月、3个月、5个月、8个月亚组,作为不同时段的取材期,每亚组3只右眼;其余5只右眼角膜仅制备囊带而不植入材料,作为手术对照亚组;术后定期观察角膜水肿和新生血管生长情况,并取角膜行光镜检查。结果术后早期实验组兔眼不同程度地出现角膜水肿和新生毛细血管的长入,经术后恢复或拆线后均呈自行性消退和闭锁。在最长为8个月的观察期中,植入物在角膜组织中稳定。与植入材料相贴的角膜板层上下界面,成纤维细胞数量明显增加,网孔部位尤其明显,并最终形成胶原纤维紧密的连接。所有植入材料的兔眼均未见角膜坏死、溃疡及植入物脱出。结论聚酯纤维网在兔角膜组织中具有良好的生物相容性。     

新型可降解支架材料植人角膜的生物学反应研究

目的 探讨可降解交联剂交联乙烯基吡咯烷酮对兔角膜组织的生物学反应的影响。方法 将乙烯基吡咯烷酮植入兔角膜囊袋内3个月，观察生物材料在角膜内生物学反应。结果 可降解交联剂交联乙烯基吡咯烷酮合成材料植入兔角膜囊袋3个月，生物相容性良好，材料逐渐降解，材料内有胶原和角膜基质细胞长入。结论 新型可降解交联剂交联乙烯基吡咯烷酮合成材料植入后未见兔角膜有明显的炎症反应，材料的组织相容性好，可作为组织工程角膜的支架材料。     

Argon—Plasma对人工角膜支架材料组织相容性的影响

目的 探讨3种人工角膜支架材料经Argon-Plasma处理后植入兔膜对兔角膜组织的影响。方法 选用3种支架材料：材料1：聚丙烯和聚丁烯（80:20）化合而成的多孔材料;材料2：Polyester多孔材料;材料 3:Expended polytetrafluoroethglene。上述3种材料切成直径6mm的圆盘状,每种材料分为处理组和非处理组。处理组材料经Argon-Plasma处理。选用63只新西兰大白兔,共分为7组,每组9只,6组为实验组及对照组（3组为处理组,3组为非处理组）,1组为手术对照组。以显微手术的方法,将盘状支架材料植入囊袋内,手术对照组仅制备囊袋不植入材料。术后定期观察角膜水肿及新生血管的生长情况。术后28、42、84d取角膜进行角膜组织学及免疫组织化学分析。结果 当材料经处理后角膜水肿较未处理明显减轻,8周后3种材料中角膜水肿均消失。材料1、2植入时新生血管出现延迟,范围也较小,同时炎细胞浸润明显减少。术后6周纤维细胞迁徒入材料内,术后12周空腔填充大量纤维细胞。材料处理与否不影响胶原蛋白的沉积。结论 Argon-Plasma处理可明显减轻兔角膜炎症反应,增加材料的组织相容性。     

Treatment of retinal detachment of the course of retinopathy of prematurity

Cryo- and laser therapy of stage 3 have reduced, but not eliminated the occurrence of retinal detachment in stages 4a, 4b and 5 of ROP. In this disease the treatment of these stages is still the greatest challenge to the ophthalmologist. Therefore, the aim of this paper is to present our up-to-date possibilities of treatment of different kinds of retinal detachments in ROP, including segmental scleral buckling, encircling scleral buckling, scleral resection, vitrectomy and its modifications in ROP. Guidelines of surgery of retinal detachment in active stage 4 and 5 of retinopathy of prematurity have been described.     

亟待新型早产儿视网膜病变动物模型的问世

早产儿视网膜病变（ROP）病因和发病机制尚不完全清楚,制约了其有效防治和相关研究的深入开展。尽管氧诱导视网膜病变动物模型为探索ROP复杂的病因和发病机制发挥了重要作用,但特异性较差,与人类ROP临床本质存在一定差异。因此,有必要对现有动物模型进行改良或建立新动物模型。通过更新观念、在多学科交叉中寻求突破,融合更多ROP危险因素,并结合新兴的转基因技术以及完善模型评价系统,建立科学的实验研究平台,为更好地开展ROP防治研究奠定基础。     

Analysis of some of the possible neonatal risk factors of development of retinopathy of prematurity

PURPOSE: The aim of the study was to evaluate some of the possible risk factors for retinopathy of prematurity (ROP) treated with laser photocoagulation or cryocoagulation. MATERIAL AND METHODS: The study comprised 71 preterm infants with ROP needing treatment and 118 prematures without ROP or with ROP requiring no treatment, as a control group. All infants were born with gestational age < or = 32 weeks and birth weight < or = 1500g. The perinatal variables, including some of clinical data, the length of mechanical ventilation as well as continous positive airway pressure (CPAP), duration of total parenteral nutrition and some of laboratory data were analyzed, to evaluate their correlation with the development of ROP. RESULTS: Gestational age before 28 weeks (OR = 5.11), episodes of convulsiones (OR = 2.15), mechanical ventilation for more than 20 days (OR = 5.86) and > 30 days (OR = 7.47), CPAP for more than 5 days (OR = 4.15) and > 10 days (OR = 2.84), total parenteral nutrition for more than 10 days (OR = 7.84) and > 20 days (OR = 9.02) and elevated peak of alanine aminotransferase (AIAT) levels (OR = 3.17) were significant risk factors for ROP requiring treatment. CONCLUSIONS: The opthalmic examination for retinopathy of prematurity requiring laser photocoagulation or cryocoagulation should be obligatory for prematures born < or = 32 weeks of gestational age, with birth weight < or = 1500 g.The frequency of the consecutive ophthalmic examinations depends on the severity of prematurity and on the presence and intensification of the risk factors for ROP.     

角膜曲率的分析

目的：探讨我国人角膜曲率半径的正常值及不同性别、不同年龄的角膜曲率半径差异。方法：对10998只眼的角膜曲率进行检测，并按男、女10岁一组进行统计分析。结果：（1）K1为7.65mm,K2为7.71mm，平均K值为7.67mm。较眼科学正常值K:7.77mm短0.1mm。（2）K的平均值男性较女性的长0.1155mm。且女性各年龄段角膜曲率半径均男性的有不同程度的减短。（3）男女均随年龄的增长，角膜曲率半径大致呈递减趋势，即：角膜曲率半径与年龄成反比关系。（４）男女K1,K2之比，均随年龄增长而增长，即K1逐渐增长而增长，即　K1值逐渐增长，K2逐渐减短。结论：本文测定的角膜曲率较眼科文献中的提供的正常值短0.1mm，并且存在着年龄、性别上的差异。     

玻璃体内注射康柏西普治疗早产儿视网膜病变的血管化过程

目的：评价玻璃体内注射康柏西普在治疗I型(阈值期和阈值前期)和A-ROP(急进性ROP)的早产儿视网膜病变(ROP)的一系列病例中引起的视网膜血管化过程。方法：回顾性研究2017-07/2020-03在厦门市儿童医院眼科通过玻璃体腔注射康柏西普(IVC)治疗的ROP患者34例67眼。再活化是指急性期特征的复发，发生在疾病的任何阶段，无论是否存在其他疾病。结果：患儿34例的平均胎龄为28.82±2.32wk。平均出生体质量为1155.18±398.22g。19例37眼的病变区域为Ⅰ区。10例20眼的病变位于Ⅱ区，5例10眼的病变位于Ⅱ区后部。一次IVC治疗的ROP患儿疾病控制总有效率为73.1%(49/67)，且Ⅱ区血管化均完成。患者在Ⅲ区的血管化完成率出现差异。在接受过一次治疗且未再复发的患者中，Ⅰ型ROP血管化时间平均为9.11±2.49wk，A-ROP为13.40±4.04wk。A-ROP的血管化完成时间明显比Ⅰ型ROP的时间长，且结果有统计学差异。结论：IVC治疗后的病变为Ⅱ区的患儿均具有较高的血管完成率。