三氧化二砷与化疗药物联合对急性白血病原代细胞的抑制作用研究

目的为扩展三氧化二砷（As2O3）临床适应证提供实验依据。方法应用MTT法检测As2O3及As2O3。分别与柔红霉素（DNR）、阿糖胞苷（Ara-C）、三尖杉酯碱（H）和长春新碱（VCR）联合对12例初发急性早幼粒细胞白血病（APL）、23例初发急性非早幼粒细胞白血病（ANPL）和16例难治复发ANPL病人原代细胞的抑制作用。结果（1）0．5～6．0μmol／L的As2O3对初发及难治复发ANPL细胞具有明显抑制作用，且该抑制作用在两组间差异无显著性（P〉0．05）。（2）As2O3与Ara-C、H和VCR的抑制作用无相关性，r分别为0．279、0．276和0．204（P值均〉0.05）；与DNR有相关性，r=0．432（P〈0．05）。（3）As2O3分别与DNR、Ara-C、H和VCR联用，对多数患者的抑制作用呈协同及相加作用，当As2O3分别与DNR、VCR联用时，其抑制作用明显大于单用化疗药物（P〈0.05）。结论临床可达到浓度的As2O3对ANPL原代细胞具有明显的抑制作用；As2O3与Ara-C、H及VCR无交叉耐药性，与DNR有部分交叉耐药性；As2O3与DNR、VCR等组成新的化疗方案，治疗初发及难治复发ANPL患者具有一定的实验基础。     

阿霉素化疗与热化疗对兔毛细胞白血病VX—2细胞体外作用的比较

目的 观察比较热疗,化疗,热职对体外兔ＶＸ－２细胞的生长抑制规律的影响。为临床介入性热化疗提供实验数据。方法 以体外长期培养的兔ＶＸ－２细胞为靶细胞,采用水浴加温法,进行体外细胞毒试验（ＭＴＴ法）观察单纯热疗,单纯化疗及热疗与化疗结合对兔ＶＸ－２细胞的生长抑制规律的影响及差别。结果 （１）温热和阿霉素对ＶＸ－２均有一定的抑制和杀伤作用,两者一定方式的联合具有协同或相加作用;（２）热化疗加热温度以４     

化疗药物与STI571联合应用对bcr-abl和mdrl共同阳性白血病细胞的抑制作用

目的 研究治疗bcr-abl和mdrl共同阳性的白血病的新方法。方法：采用MTT法检测酪氨酸激酶抑制剂STI571(1μmol／L)分别与浓度为10^(-4)、10^(-5)、10^(-6)、10^(-7)、10^(-8)mol／L的长春新碱(VCR)、柔红霉素(DNR)、高三尖杉酯碱(HHT)及DNR 阿糖胞苷(Ara-C)(浓度为1 mmol／L)联合应用对bcr-abl和mdrl共同阳性的裸鼠高致瘤性人白血病细胞系K562-n／VCR的作用。结果：不同浓度的VCR单独应用及与STI571联合应用IC50分别为127．28μmol／L、1．37μmol／L，协同倍数为93．04倍；不同浓度的DNR单独应用及与STI571联合应用IC50。分别为6.96μmol／L、0．30μmol／L，协同倍数为23．25倍；不同浓度的HHT单独应用及与STI571联合应用IC50分别为156．70μmol／L、7．916μmol／L，协同倍数为19．80倍；不同浓度的DNR Ara-C单独应用及与STl571联合应用IC50。分别为0．10μmol／L、0．015μmol／L，协同倍数为464倍，化疗药物与STI571联合应用细胞毒作用明显增强：结论：化疗药物VCR、DNR、DNR Am-C与STl571等联合应用对于bcr-abl与mdrl共同阳性的白血病细胞较单独应用有更强的抑制作用。     

吲哚美辛对干扰素α-2b联合小剂量阿糖胞苷治疗慢性粒细胞白血病的影响

 【摘要】　目的　探讨吲哚美辛对干扰素α-2b（IFNα-2b）联合小剂量阿糖胞苷（LD-Ara-C）治疗慢性粒细胞白血病慢性期（CML-CP）患者的影响。方法　22例CML-CP患者按随机数字表法分为 2组：对照组10例,用IFNα-2b 300万U,皮下注射,隔日1次,连用3～18个月,Ara-C 30 mg／d缓慢静脉滴注,10 d为1个疗程,间歇2周,WBC≥20×109／L时,用羟基脲控制;WBC＜20×109／L时停用。治疗组12例,在IFN使用当天增加吲哚美辛25 mg 3次／d,其他治疗与对照组相同。两组均以血液学完全缓解为观察终点,比较两组WBC开始下降时间、WBC降至正常所需时间、外周血幼稚细胞达正常所需时间、达血液学完全缓解所需时间和注射IFN前３d最高体温。结果　治疗组和对照组WBC开始下降时间分别为（4.2±2.7）d和（5.0±2.5）d（t＝0.714,P＞0.05）,WBC降至正常所需时间分别为（10.0±4.5）d和（12.0±4.5）d（t＝1.036,P＞0.05）;治疗组和对照组外周血幼稚细胞达正常所需时间分别为（14.2±4.8）d和（19.0±3.6）d,差异有统计学意义（t＝2.609,P＜0.02）;治疗组和对照组达血液学完全缓解所需时间分别为（45.8±5.6）d和（53.9±10.5）d,治疗组优于对照组（t＝2.314,P＜0.05）。两组注射IFN后发热程度治疗组改善显著优于对照组（χ2＝12.041,P＜0.005）。结论　吲哚美辛与IFNα-2b联合LD-Ara-C治疗CML-CP,不仅能缓解IFN流感样不良反应而且有协同抗白血病作用。     

Hyper-CVAD／MA方案联合晚期强化治疗对年轻成年人费城染色体阴性急性淋巴细胞白血病的疗效

目的评估Hyper-CVAD／MA方案联合晚期强化治疗对年轻成年人费城染色体阴性（Ph-）急性淋巴细胞白血病的疗效。方法回顾性分析2010年6月至2013年1月25例年轻成年的Ph-急性淋巴细胞白血病患者的临床资料,所有患者均采用Hyper-CVAD／MA方案治疗,在维持化疗期间行晚期强化治疗,第4、8、12、18、24个月分别为DVLD方案、EAL方案、大剂量甲氨蝶呤、DVLD方案、EAL方案,随访并评估患者的长期疗效。结果23例（92％）达到完全缓解（CR）,其中15例维持CR,8例复发,6例死亡,34个月无病生存率为67．7％,34个月总生存率为72．2％,晚期强化治疗过程中无治疗相关死亡。结论Hyper-CVAD／MA方案联合晚期强化治疗对年轻成年人Ph-急性淋巴细胞白血病有较好的疗效。     

三氧化二砷对人白血病细胞株NB4和K562及MOLt4的增殖、周期及凋亡的影响

目的：观察三氧化二砷(As2O3)对人白血病细胞株NB4、K562、MOLt4的增殖，周期及凋亡的影响。方法：采用台盼蓝拒染法计数活细胞数．并计算细胞生长率；细胞涂片经Wright-Giemsa染色，光镜下观察细胞的形态；流式细胞仪解析细胞周期。结果：1)As2O3能够抑制NB4、K562、MOLt4细胞的增殖。2)4μmol/L As2O3能够使K562细胞发生M期阻滞。但NB4、MOLt4细胞未见明显改变。3)2、4μmol/L的As2O3处理NB4、MOLt4和K562细胞48h．NB4、MOLt4细胞株的凋亡细胞明显增多。但是．K561细胞未见明显改变。结论：As2O3不但对NB4细胞具有抑制增殖．诱导细胞凋亡的作用．而且对非，t(15：17)的K562、MOLt4细胞也具有抑制增殖的作用．同时诱导MOLt4细胞凋亡．使K562细胞发生M期阻滞。     

奈达铂联合顺铂对人食管癌细胞株（Eca-109）抑制作用机制的研究

目的研究奈达铂（NDP）联合顺铂（DDP）对人食管癌细胞株Eca-109的增殖及凋亡的影响,并探讨其机制。方法采用MTT法检测NDP联合DDP对Eca-109细胞的增殖抑制率,中效原理法判断联合用药的相互作用;采用RT-PCR和蛋白印迹法分析Ki-67及Bax表达的变化。结果NDP、DDP均明显抑制Eca-109细胞的生长,且呈剂量依赖性;两者联合使用低浓度时呈拮抗效应,高浓度时呈协同效应;IC50浓度的NDP、DDP和1/2IC50（NDP）＋1/2IC50（DDP）对Eca-109细胞的抑制率分别为（41.9±4.1）%、（47.4±2.9）%和（52.5±0.9）%;与单独用药组比较,联合用药组Ki-67基因（蛋白）表达显著降低,而Bax基因（蛋白）表达显著增高。结论1/2IC50浓度NDP和DDP联合应用与两药IC50浓度单独应用相比,对Eca-109细胞增殖的抑制作用和诱导凋亡能力均有明显增强。     

应用ACNU与Me—CCNU联合化疗治疗进展期胃癌的随机研究

作者比较了亚硝酸脲类药物盐酸嘧啶亚硝脲（ＡＣＮＵ）和甲环亚硝脲（Ｍｅ－ＣＣＮＵ）联合化疗对进展期胃癌的疗效。１０３例进展期胃癌分为Ａ组（Ｍｅ－ＣＣＮＵ，５－Ｆｕ和ＡＤＭ）和Ｂ组（ＡＣＮＵ，５－Ｆｕ和ＡＤＭ）进行随机研究，结果，Ａ组无ＣＲ和ＰＲ者，Ｂ组无ＣＲ，但ＰＲ者８／４６（１７．４％），Ｂ组有效率为１７．４％，Ａ组有疗效为０％，中位生存期Ｂ组为１１２天，Ａ组为１０８天，在疗程中，两组均未发生严重     

bcl—2反义核酸提高白血病HL60细胞对米托蒽醌的敏感性

目的 探讨下调HL60细胞bcl-2基因表达对米托蒽醌（MIT）细胞毒作用的影响。方法 将针对bcl-2基因编码区141-147密码子的反义寡核苷酸（ASODN）作用于HL60细胞,测定其mRNA表达,细胞生长。细胞凋亡。结果 12.5umol/LASODN作用于HL60细胞48h可以下调bcl-2mRNA表达40%。0.5umol/LMIT作用于经ASODN预处理48h的HL60细胞5h,50.9%的细胞发生凋亡,明显高于MIT单独作用诱导的细胞凋亡（25.6%);当ASODN与0.7nmol/LMIT共同作用时,细胞存活率（48h)由MIT单独作用时的73.7%降至25.6%。结论 bcl-2ASODN可下调bcl-2基因表达,促进细胞凋亡而增加MIT抗肿瘤作用。     

姜黄素与阿霉素联合应用对人白血病耐药细胞株HL-60/ADR的生长抑制影响

目的：研究姜黄素与阿霉素联合应用对人白血病多药耐药细胞株HL-60／ADR的生长抑制作用。方法：采用MTT法测定药物的体外杀伤作用，应用金氏公式进行联合用药效果分析。应用流式细胞术分析细胞周期和测定细胞内药物浓度。结果：姜黄素2～16μmol／L，阿霉素0．8～6．4μmol／L同时给药对HL-60／ADR细胞可产生单纯相加至增强的协同杀伤效果，对HL-60／ADR细胞周期的影响也有协同作用。序贯给药法中，先给姜黄素后给阿霉素结果为协同作用，先给阿霉素后给姜黄素实验结果为拮抗作用。结论：姜黄素与阿霉素同时用药可产生协同作用，可有效逆转多药耐药，HL-60／ADR细胞内ADR积聚增加可能是其原因之一；序贯联合用药仅产生单向协同作用。     

Genistein联合5-FU对人结肠癌细胞株SW480增殖与凋亡的影响

目的:研究金雀异黄素(genistein)与5-FU对人结肠癌细胞株SW480增殖、凋亡的影响.方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度genistein和5-FU单用或联用对结肠癌细胞株SW480的抑制作用;脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡情况,并在透射电镜下观察凋亡细胞超微结构的改变;流式细胞术(FCM)分析药物作用后细胞周期的改变.结果:1)genistein与5-FU单用均能抑制SW480细胞的增殖,存在浓度依赖性和时间依赖性.2)genistein与5-FU联合作用时对抑制SW480细胞增殖有协同相加效应,在两者联合作用48 h,浓度分别为80 μmol/L和30 μg/mL时协同作用最明显(CI=0.51).3)TUNEL技术观察到genistein与5-FU单用或双用均可引起SW480细胞凋亡,且以双药效果为著.4)电镜观察到凋亡细胞核电子密度增加,核碎裂,可见凋亡小体,以双药联用最为显著.5)FCM分析SW480细胞经genistein处理后细胞生长阻断于G2期,与5-FU作用机制不同.结论:genistein可通过诱导细胞凋亡协同5-FU对大肠癌细胞株SW480的杀伤作用,为提高化疗药对结肠癌的治疗疗效提供新思路.     

三氧化二砷对人白血病细胞株NB4和K562及MOLt4的增殖、周期及凋亡的影响

目的 :观察三氧化二砷 (As2 O3 )对人白血病细胞株NB4、K5 62、MOLt4的增殖 ,周期及凋亡的影响。方法 :采用台盼蓝拒染法计数活细胞数 ,并计算细胞生长率 ;细胞涂片经Wright Giemsa染色 ,光镜下观察细胞的形态 ;流式细胞仪解析细胞周期。结果 :1)As2 O3 能够抑制NB4、K5 62、MOLt4细胞的增殖。 2 ) 4μmol/LAs2 O3 能够使K5 62细胞发生M期阻滞。但NB4、MOLt4细胞未见明显改变。 3 ) 2、4μmol/L的As2 O3 处理NB4、MOLt4和K5 62细胞 48h ,NB4、MOLt4细胞株的凋亡细胞明显增多。但是 ,K5 62细胞未见明显改变。结论 :As2 O3 不但对NB4细胞具有抑制增殖 ,诱导细胞凋亡的作用 ,而且对非t( 15 ;17)的K5 62、MOLt4细胞也具有抑制增殖的作用 ,同时诱导MOLt4细胞凋亡 ,使K5 62细胞发生M期阻滞。     

丝裂霉素C联合C2-神经酰胺对人膀胱癌T24细胞生长的抑制作用

目的探讨丝裂霉素C(mitomycinC,MMC)与C2-神经酰胺(C2-ceramide,C2-cer)联合应用对人膀胱癌T24细胞生长的抑制作用。方法采用四甲基偶氮唑蓝[3-(4,5-dimethylthiazole-2yl)-2,5-diphenylte-trazoliumbromid,MTT]比色法测定MMC和C2-cer单独或联合应用对人膀胱癌T24细胞生长的抑制作用,并应用Chou-Tala-lay联合指数法定量分析药物之间相互作用的效果。结果MMC、C2-cer单独应用时,随药物浓度增加对T24细胞生长的抑制作用也增加,中效浓度分别为153.426、27.797μmol/L。MMC与C2-cer联合应用时,相互作用的效果表现为在低浓度(01),中效浓度为89.536μmol/L(其中MMC74.048μmol/L,C2-cer15.488μmol/L)。结论MMC和C2-cer相互作用的效果与药物浓度相关,低浓度时呈协同作用,高浓度时呈拮抗作用。     

多西紫杉醇联合曲格列酮对人前列腺癌裸鼠移植瘤的抑制作用

目的:探讨多西紫杉醇联合曲格列酮(troglitazone,TGZ)对人前列腺癌裸鼠移植瘤的抑制作用,并初步探索其作用机制.方法:建立人前列腺癌裸鼠移植瘤模型,观察多西紫杉醇联合TGZ对移植瘤生长的抑制作用,FCM法检测移植瘤细胞的凋亡率,免疫组织化学法检测移植瘤组织中bcl-2和bax蛋白的表达情况.结果:与对照组比较, 多西紫杉醇联合TGZ可明显抑制人前列腺癌裸鼠移植瘤的生长,肿瘤体积和质量明显下降,细胞凋亡率明显上升;免疫组织化学法检测结果显示,移植瘤组织中bax蛋白的表达明显增强,bcl-2蛋白的表达明显减弱.结论:多西紫杉醇联合TGZ对前列腺癌有一定的抑制作用,其作用机制可能是通过上调促凋亡蛋白bax的表达及下调抗凋亡蛋白bcl-2的表达,导致肿瘤细胞加速凋亡而实现的.     

顺铂联合HMME介导的光动力疗法对人鼻咽癌CNE-2细胞杀伤作用的观察

目的:探讨顺铂(DDP)联合血卟淋单甲醚HMME介导的光动力学疗法(HMME-PDT)对人鼻咽癌细胞(CNE-2)的杀伤作用.方法:实验分对照组、单独DDP组、单独PDT组和联合组.所用的DDP浓度为0.8和1.6 mg/L;光敏剂为HMME,剂量5 mg/L,光能量密度为1.2、2.4和4.8 J/cm2.联合组为不同剂量单独作用的组合.MTT法检测DDP和HMME-PDT单独或联合作用下24 h的细胞抑制率,并用金氏公式分析联合效应.HE染色光镜下观察处理前后细胞的形态学变化,Hoechst染色荧光显微镜观察细胞核.结果:金氏公式分析显示,0.8和1.6 mg/L的DDP与5 mg/L HMME,1.2、2.4和4.8 J/cm2能量密度的PDT,两者联合处理观察到协同或相加效应.HE和Hoechst染色均可见,联合组比单独处理组细胞形态学改变现象更明显.结论:DDP与HMME-PDT联合处理在一定剂量范围内可以协同杀伤CNE-2细胞.     

顺铂与足叶乙甙对白血病细胞K562的协同杀伤作用及其机制

背景与目的:足叶乙甙(etoposide,VP鄄16)为白血病化疗最常用的化疗药之一,其临床应用日益受到天然与继发耐药的影响。对一些实体瘤的研究发现顺铂(cisplatin,DDP)与VP鄄16联合应用具有协同效应。本研究通过DDP与VP鄄16联合作用杀伤白血病细胞K562,探讨其增强VP鄄16疗效的作用机制。方法:采用VP鄄16(0,5μg/ml)与不同浓度DDP(0,0.3,3,15,30μg/ml)联合对K562细胞进行处理。应用噻唑蓝(MTT)法检测用药后细胞的存活相对数量,计算VP鄄16和DDP应用对K562细胞的抑制作用;AO/EB双荧光法定量分析细胞凋亡率。半定量RT鄄PCR法和Westernblot检测拓扑异构酶(topoisomerase,TOPO)Ⅱα、Ⅱβ、Sp1、Sp3基因的mRNA和蛋白水平。结果:VP鄄16与DDP合用具有明显的协同效应。两药合用后,细胞凋亡率明显增加。单独应用DDP可以明显上调TOPOⅡ和Sp1表达(呈浓度依赖,TOPOⅡα、Ⅱβ、Sp1在30μg/mlDDP时比正常对照分别上调36%,25%和75%),并使Sp3的表达降低49%;单用5μg/mlVP鄄16时TOPOⅡ则下调(TOPOⅡα下降72%),TOPOⅡβ和Sp1的表达未受影响,Sp3的表达上调14%。5μg/mlVP鄄16与DDP联合应用具有协同效应,使TOPOⅡ和Sp1表达水平升高。TOPOⅡα、Ⅱβ、Sp1在5μg/mlVP鄄16与30μg/mlDDP联合应用时比单用VP鄄16分别上升83%,11%,58%,但低于单独应用DDP的表达水平;而Sp3的表达水平与单独应用DDP比较下调61.3%。Western印迹检测结果与RT鄄PCR结果相符。结论:DDP在化疗中与VP鄄16发挥协同作用,通过上调拓扑异构酶Ⅱ的表达水平,为VP鄄16提供更多的靶酶,使VP鄄16杀伤K562细胞效果明显提高。     

苯巴比妥钠或利血平与丝裂霉素联合应用对人肝癌BEL-7402细胞株协同杀伤作用的研究

 本实验在人肝癌 BEL—7402细胞株上研究了苯巴比妥钠或利血平与丝裂霉素等药物的协同杀伤作用。实验结果表明,苯巴比妥钠或利血平能明显提高丝裂霉素对 BEL—7402细胞的杀伤作用。本实验为临床综合应用苯巴比妥钠或利血平与丝裂霉素治疗肝癌病人提供了依据。     

神经递质与Bcl-2、耐药P糖蛋白对肺腺癌细胞株A549作用的实验观察

目的 观察肾上腺素、去甲肾上腺素对肺腺癌细胞生长及与化疗作用的影响并探讨其与凋亡相关基因Bcl-2及耐药P糖蛋白表达的相关性.方法 ①将不同浓度的肾上腺素、去甲肾上腺素单独或与长春新碱(VCR)联合作用于肺腺癌细胞株A-549.四唑盐(MTT)试验测定药物对肺腺癌细胞A549的抑制率,筛选出药物的IC50浓度.②免疫组化法测定IC50浓度各药物应用对Bcl-2、P糖蛋白(P-gp)表达的影响,比较两者的相关性.结果 ①不同浓度的肾上腺素、去甲肾上腺素对肿瘤的生长及化疗有影响,且上述药物与IC50浓度的VCR联合应用时能增加VCR的抑制率,②用药后各组Bcl-2、P-gp表达均减少(P＜0.01),且两者表达呈正相关.结论 肾上腺素、去甲肾上腺素对A549细胞的生长及化疗有影响,其机制可能与凋亡相关基因Bcl-2及P-gp介导的肺癌耐药机制有关.