小檗碱对卵巢癌SKOV3细胞S1P/S1PR1通路调控作用及对血管生成的影响

目的 探讨小檗碱(BBR)对卵巢癌SKOV3细胞血管生成的影响及对鞘氨醇-1-磷酸/鞘氨醇-1-磷酸受体1(S1P/S1PR1)通路调控作用,为临床研究提供理论参考。方法 将卵巢癌SKOV3细胞分为空白对照(Control)组、BBR不同浓度(5、10、25、50、100 mmol/ml)处理干预SKOV3细胞组,用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测各组细胞增殖抑制率;划痕实验及Transwell小室法分别观察各组细胞的迁移及侵袭能力;管腔实验检测各组细胞血管生成情况;Western blot检测各组细胞通路蛋白S1P和S1PR1、血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素-8(IL-8)、金属蛋白酶-9(MMP-9)及金属蛋白酶-2(MMP-2)相对表达水平。结果 与Control组相比,5、10、25、50、100 mmol/ml BBR组人卵巢癌细胞株SKOV3癌细胞增殖抑制率明显增高(P<0.05),侵袭和迁移能力、S1P、S1PR1、MMP-9、MMP-2、VEGF和IL-8蛋白相对表达水平均明显降低(P<0.05),且BBR不同浓度组呈剂量依赖性。结论 BBR可下调S1P/S1PR1通路相关蛋白表达,抑制人卵巢癌SKOV3细胞侵袭、迁移及血管生成。     

血管生成素-1对人绒毛膜外滋养细胞基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶-9表达的调控作用

目的分析血管生成素-1(Ang-1)对人绒毛膜外滋养细胞基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的调控作用。方法将体外培养的人绒毛膜外滋养细胞株HTR8/SVneo分为空白对照组(未转染)、NC-siRNA组(转染阴性对照siRNA)及Ang-1-siRNA组(转染Ang-1 siRNA)。采用实时定量PCR法检测3组细胞中Ang-1 mRNA的表达,采用Western blot法检测Ang-1、MMP-2及MMP-9蛋白的表达,采用Transwell小室法检测细胞侵袭能力。结果转染48 h后,空白对照组Ang-1 mRNA表达水平为(1.36±0.04),NC-siRNA组Ang-1 mRNA表达水平为(0.98±0.07),Ang-1-siRNA组Ang-1 mRNA表达水平为(0.24±0.02),3组比较差异有统计学意义(F=257.128,P<0.001)。空白对照组Ang-1蛋白水平为(0.54±0.03),NC-siRNA组Ang-1蛋白水平为(0.49±0.07),Ang-1-siRNA组Ang-1蛋白水平为(0.12±0.06),3...     

慢病毒介导HMGN5基因沉默对卵巢癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其机制研究

目的观察慢病毒介导的高迁移率族核小体结合域5(HMGN5)基因沉默对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,并对其机制进行初步探讨。方法 RT-qPCR法检测人卵巢上皮细胞株IOSE及4株不同卵巢癌细胞中HMGN5的表达情况,将HMGN5 shRNA慢病毒载体转染至人卵巢癌细胞SKOV3中,RT-qPCR和Western blot检测SKOV3细胞中HMGN5 mRNA和蛋白表达情况,MTT法检测沉默HMGN5基因对细胞增殖能力的影响,划痕实验检测沉默HMGN5基因对细胞迁移能力的影响,Transwell实验检测沉默HMGN5基因对细胞侵袭能力;Western blot检测SKOV3细胞中PCNA、MMP-9、Wnt1和β-连环蛋白(β-catenin)蛋白表达水平。结果与卵巢上皮细胞株IOSE相比,HMGN5在卵巢癌细胞株SKOV3、A2780、HO-8910、Caov3中的表达明显升高(P<0.05)。与Blank组和NC组相比,sh-HMGN5组SKOV3细胞中HMGN5 mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05),SKOV3细胞增殖、迁移和侵袭能力均明显下降(P<0.05),细胞中PCNA、MMP-9、Wnt1和β-catenin蛋白表达水平明显下调(P<0.05)。结论沉默HMGN5可能通过阻碍Wnt/β-catenin信号通路的激活抑制人卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移和侵袭能力。     

SLC4A11通过JAK信号通路对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的：探讨溶质转运家族4成员11蛋白(SLC4A11)在卵巢癌增殖、迁移和侵袭中的生物学作用机制。方法：RT-qPCR检测卵巢癌细胞中SLC4A11表达。将SKOV3细胞分为对照组(转染siRNA-NC序列)、SLC4A11-siRNA组(干扰SLC4A11表达)和SLC4A11-siRNA+JAK组(干扰SLC4A11表达+激活JAK信号通路)。采用CCK-8、伤口愈合实验和Transwell实验检测细胞的增殖、迁移和侵袭能力。RT-qPCR和Western blot检测Janus激酶2(JAK2)和信号传导及转录激活因子3(STAT3)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)表达。结果：SLC4A11在卵巢癌组织中高表达(P<0.05)。SLC4A11-siRNA组SKOV3细胞中p-JAK2/JAK2(0.286±0.048)、p-STAT3/STAT3(0.571±0.042)、Bcl-2(0.335±0.040)均低于对照组(1.001±0.093、1.004±0.089、1.005±0.142),也低于SLC4A11-siRNA+JAK组[p-JAK2/JAK2(1.001±0...     

高迁移率族蛋白B1对卵巢癌Skov3细胞上皮间质转化的影响

目的探讨高迁移率族蛋白B1 (HMGB1)对卵巢癌Skov3细胞上皮间质转化(EMT)的影响及其机制,为卵巢癌以HMGB1为靶点的治疗提供理论依据。方法将体外培养的卵巢癌Skov3细胞随机分为对照组(未转染)、阴性组(转染Control-siRNA序列)和实验组(转染HMGB1-siRNA序列),以脂质体转染48 h后,Transwell小室检测各组细胞的侵袭迁移能力,RT-PCR检测HMGB1 mRNA的表达,Western blot检测HMGB1、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、MMP-2/9、p-NF-κB p65及Snail蛋白的表达。结果 HMGB1-siRNA转染使Skov3细胞的侵袭和迁移能力明显减弱,差异有统计学意义(P0. 05),HMGB1、MMP-2/9、N-cadherin、Vimentin、p-NF-κB p65、Snail蛋白及HMGB1 mRNA表达显著降低,差异有统计学意义(P0. 05),E-cadherin蛋白表达显著升高,差异有统计学意义(P0. 05);而Control-siRNA转染对Skov3细胞的影响不显著,差异无统计学意义(P0. 05)。结论干扰HMGB1表达能够逆转卵巢癌Skov3细胞的EMT,其作用机制可能与抑制Snail/NF-κB信号通路有关。     

整合素α5表达上调促进卵巢癌SKOV3细胞侵袭转移及机制探讨

目的:检测整合素α5(integrinα5,ITGA5)表达上调对卵巢癌SKOV3细胞侵袭转移影响及机制探讨。方法:用pEGFP-ITGA5过表达质粒对卵巢癌SKOV3细胞进行转染,未转染的SKOV3细胞作为对照。RT-PCR方法检测SKOV3细胞中整合素α5的mRNA水平变化,Western Blot方法检测整合素α5蛋白水平的表达。为观察整合素α5表达上调对SKOV3细胞侵袭转移能力的影响,采用Transwell小室检测细胞侵袭及迁移能力。小鼠体内粘附实验观察整合素α5过表达的SKOV3-GFP细胞体内粘附能力变化。Western Blot方法检测EMT相关蛋白EMT相关基因表达情况。结果:与对照组相比,pEGFP-ITGA5转染SKOV3细胞后整合素α5基因表达水平明显增高。细胞侵袭、迁移实验表明,pEGFP-ITGA5转染组较对照组细胞侵袭、迁移力明显增加,对照组和实验组穿膜细胞数分别为(56.32±4.63)个和(135.58±7.94)个,对照组与实验组相比差异有统计学意义(P<0.05)。小鼠体内粘附实验证明,整合素α5过表达的SKOV3-GFP细胞体内粘附能力明显增强。Western Blot结果表明整合素α5过表达的SKOV3中,E-cadherin表达明显下调,同时Vimentin、MMP-9表达明显上调。结论:整合素α5表达上调能促进卵巢癌SKOV3细胞的粘附和侵袭转移,其可能是通过促进上皮间质转化发生进而引起细胞侵袭转移能力的增强。     

正、反义基质金属蛋白酶组织抑制因子-1基因对小鼠成纤维细胞表达细胞外基质的影响

目的　观察正、反义基质金属蛋白酶组织抑制因子 - 1(TIMP- 1)基因对小鼠成纤维细胞生物学行为的影响。方法　应用正、反义人金属蛋白酶组织抑制因子 - 1(TIMP- 1)逆转录病毒表达载体转染 NIH3T3细胞 ,观察其对 NIH3T3细胞增殖的影响 ,Northern blot检测细胞 胶原 (α1)、MMP- 2、MMP- 9、TIMP- 1m RNA的表达 ,酶谱法分析细胞培养液中 MMP- 2、MMP- 9的蛋白表达 ;EL ISA测定细胞培养液中 FN、 、 、 型胶原的含量。结果　正义转染组显示出促细胞生长作用 (P<0 .0 1) ;反义转染组显示抑制细胞生长作用 (P<0 .0 1) ;TIMP- 1m RNA在各组均有表达 ,反义转染组表达明显减弱。正义转染组细胞培养液中 FN及 、 、 型胶原含量明显增高 (P<0 .0 1) ,MMP- 2 ,MMP- 9含量降低 ;而反义转染组 FN及 、 、 型胶原含量明显降低 (P<0 .0 1) ,MMP- 2 ,MMP- 9含量增高。结论　正义 TIMP- 1促进NIH3T3细胞的增殖 ,反义 TIMP- 1则抑制 NIH3T3细胞的增殖 ;反义 TIMP- 1通过抑制细胞 TIMP- 1的表达而促进小鼠成纤维细胞的 FN及 、 、 型胶原降解。     

上皮性卵巢癌中Survivin表达与肿瘤侵袭性的关系

目的用不同浓度的拓扑替康作用于卵巢癌细胞株浆液性卵巢癌细胞系,探讨Survivin蛋白的表达差异及浆液性卵巢癌细胞系侵袭能力的改变。方法用不同浓度的拓扑替康作用于浆液性卵巢癌细胞系细胞,应用免疫组化的方法检测细胞中Survivin蛋白的表达,同时应用体外侵袭系统(Transwell小室),并通过明胶酶谱检测基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9的表达来检测浆液性卵巢癌细胞系细胞的体外侵袭能力。结果随着拓扑替康浓度的增加,浆液性卵巢癌细胞系细胞的侵袭率降低,各组浆液性卵巢癌细胞系细胞的侵袭率比较具有显著性差异(F=385.885,P<0.05),并且各组基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9的表达减少,各组基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9表达的比较具有显著性差异(F分别为263.302、184.378,均P<0.05)。结论拓扑替康可抑制卵巢癌细胞株中Survivin蛋白的表达,从而使细胞侵袭能力下降,这为拓扑替康应用于卵巢癌的治疗提供了一定的理论依据。     

三苯氧胺对雌激素受体阳性乳腺癌细胞侵袭转移能力的影响及其机制

目的探讨三苯氧胺（TAM）对雌激素受体阳性乳腺癌细胞侵袭转移能力的作用及机制。方法用不同浓度（10-7、10-8、10-9mol/L）的TAM作用于人乳腺癌MCF-7细胞株,48h后,用Transwell侵袭小室法检测细胞的侵袭能力,用RT-PCR法检测细胞基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和金属蛋白酶组织抑制物-1（TIMP-1）基因的表达。结果上述浓度的TAM对MCF-7侵袭转移均有一定的抑制作用,均可下调其MMP-9基因表达,上调其TIMP-1基因表达,但组间比较没有显著性差异。结论 TAM可抑制雌激素受体阳性MCF-7乳腺癌细胞的侵袭和转移,在10-9mol/L～10-7mol/L之间,没有明显的剂量依赖关系;其作用机制与影响MMP-9/TIMP-1的平衡有关。     

上皮性卵巢癌中基质金属蛋白酶-2及其抑制剂的表达及意义分析

目的检测上皮性卵巢癌中基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)及金属蛋白酶组织抑制剂-2(tissue inhibitor of metalloproteinase-2,TIMP-2)的表达水平,并分析其临床意义。方法采用免疫组化染色法检测MMP-2、TIMP-2在上皮性卵巢癌、上皮性良性卵巢肿瘤及正常卵巢组织3组对象卵巢组织中的阳性表达率,分析上皮性卵巢癌患者不同临床病理特征下MMP-2及TIMP-2的阳性表达水平。结果上皮性卵巢癌组卵巢组织MMP-2及TIMP-2的阳性表达率明显高于良性上皮性卵巢肿瘤组和正常卵巢组织组(P0.05)。MMP-2及TIMP-2在上皮性卵巢癌Ⅲ期+Ⅳ期患者中的阳性表达率明显高于Ⅰ期+Ⅱ期患者(P0.05);在低分化(G3)患者中的阳性表达率明显高于高、中分化(G1+G2)患者(P0.05);在有淋巴结转移患者中的阳性表达率明显高于无淋巴结转移患者(P0.05)。结论 MMP-2和TIMP-2的检测是否可作为早期诊断上皮性卵巢癌的生物指标,尚需进一步研究,但MMP-2及TIMP-2的表达水平与上皮性卵巢癌的临床分期、分化程度、淋巴结转移有关,可作为判断上皮性卵巢癌预后的辅助指标。     

下调Vav3表达抑制肺癌细胞侵袭能力及机制的研究

目的下调Lewis肺癌细胞中Vav3的表达,观察其对LLC侵袭能力的影响及发挥作用的机制。方法 LLC瞬时转染特异Vav3-siRNA,Western blot检测转染前后细胞中Vav3和JNK的表达。Transwell小室实验观察LLC侵袭能力。结果转染Vav3-siRNA序列后,LLC中Vav3和JNK表达明显下降(P<0.05)。Transwell小室体外侵袭实验中,实验组穿膜细胞数与LLC组和对照组比较明显减少(P<0.05)。结论 Vav3可能通过激活JNK信号通路促进肿瘤细胞的侵袭。     

ERK1/2通路抑制剂PD98059影响卵巢癌细胞SKOV3增殖、侵袭能力的研究

目的:探讨MAPK/ERK信号传导通路抑制剂PD98059对卵巢癌细胞SKOV3的增殖、侵袭能力的影响。初步探讨阻断MAPK/ERK信号传导通路治疗卵巢癌的可能性。方法:体外培养人上皮性卵巢癌细胞SKOV3,采用CCK-8细胞增殖方法检测卵巢癌细胞SKOV3增殖情况,Western blot检测p-ERK蛋白表达,Transwell细胞侵袭实验检测SKOV3细胞的侵袭能力。结果:CCK-8法显示PD98059在一定范围内能够明显抑制卵巢癌细胞SKOV3的增殖,其作用具有时间依赖性及浓度依赖性,PD98059有效浓度为25μmol/L,在此有效浓度作用下有效时间为24h;Western blot法检测结果显示PD98059能够下调pERK1/2,即抑制ERK1/2磷酸化,从而使得ERK1/2信号传导途径失活;Transwell细胞侵袭实验结果显示PD98059在一定浓度范围内能抑制卵巢癌细胞SKOV3的侵袭与转移能力。结论:PD98059可以通过抑制ERK1/2信号途径,抑制人上皮性卵巢癌SKOV3细胞的增殖、侵袭转移。     

沉默ITGA2通过下调ZEB1的表达抑制卵巢癌细胞SKOV3侵袭转移

目的探讨整合素A2(ITGA2)调控卵巢癌细胞系锌指增强子结合蛋白1(ZEB1)的表达对卵巢癌转移侵袭能力的影响。方法分析490例卵巢癌标本中ITGA2与ZEB1 mRNA表达的相关性;应用Western blot比较4种卵巢癌细胞系中ITGA2与ZEB1蛋白水平的相关性;将针对ZEB1的siRNA转染到SKOV3细胞系中,Western blot验证ZEB1蛋白表达变化,Transwell验证其转移侵袭能力的变化;将针对ITGA2的siRNA转染到SKOV3细胞系,Western blot验证其ITGA2及ZEB1的蛋白表达变化,Transwell验证其转移侵袭能力的变化。结果 490例卵巢癌标本中,ZEB1与ITGA2在mRNA水平呈显著正相关(P0.01);卵巢癌细胞系中ZEB1和ITGA2蛋白水平呈正相关;下调ZEB1后,卵巢癌细胞侵袭转移能力降低;下调ITGA2后,ZEB1表达降低,卵巢癌细胞转移侵袭能力也降低。结论 ITGA2正调控ZEB1的表达,促进卵巢癌细胞转移侵袭,提示降低ITGA2和ZEB1的表达可抑制卵巢癌细胞的转移侵袭。     

重度子痫前期患者胎盘中MMP-9和TIMP-1的表达及临床意义

目的 研究基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)和金属蛋白酶组织抑制因子-1(tissue inhibitor of metalloproteinases-1,TIMP-1)在重度子痫前期患者胎盘中的表达及临床意义.方法 选择2010年8月至2011年2月在西京医院妇产科住院分娩的孕妇60例,其中重度子痫前期组30例、正常妊娠(对照)组30例,采用免疫组化法、蛋白印迹法检测重度子痫前期患者和正常妊娠妇女胎盘滋养细胞中MMP-9、TIMP-1的表达.结果 在重度子痫前期组胎盘滋养细胞中,MMP-9的表达比正常胎盘滋养细胞中显著下降(0.04±0.01vs 0.12±0.03,t=5.70,P<0.01),TIMP-1的表达则比正常胎盘滋养细胞中显著升高(0.10±0.01vs 0.02±0.003,t=4.42,P<0.01),且MMP-9 /TIMP-1的比值明显低于在正常妊娠胎盘中的表达(0.40±0.12 vs 8.11±2.88,t=3.30,P<0.01).结论重度子痫前期患者胎盘组织中MMP-9、TIMP-1的异常表达可能与滋养细胞侵入障碍相关.     

miR-627-3p靶向调控CK2β对上皮性卵巢癌细胞增殖凋亡 侵袭的影响及机制研究

目的 探讨miR-627-3p靶向调控CK2β对上皮性卵巢癌细胞增殖、凋亡、侵袭的影响及潜在的作用机制。方法 采用qRT-PCR和Western blot检测正常卵巢上皮细胞HOSE和卵巢癌细胞株SKOV3、ES-2及OVCAR3中miR-627-3p和CK2β的表达；采用双荧光素报告基因实验验证miR-627-3p和CK2β之间的靶向关系；建立miR-627-3p过表达及miR-627-3p和pcDNA-CK2β共转染的SKOV3细胞株，采用CCK-8法检测细胞活性，采用流式细胞术检测细胞凋亡率，采用Transwell法检测细胞侵袭能力。结果 HOSE组、SKOV3组、ES-2组及OVCAR3组miR-627-3p的表达水平分别为(1.00±0.12)、(0.21±0.04)、(0.41±0.07)及(0.32±0.06),差异有统计学意义(F=183.037,P<0.05)。与正常卵巢上皮细胞HOSE相比，卵巢癌细胞株SKOV3、ES-2及OVCAR3中miR-627-3p表达显著降低，CK2β表达显著增加，差异均有统计学意义(均P<0.05);CK2β是miR-627...     

lncRNA SNHG3靶向调控miR-340对卵巢癌细胞上皮间质转化的影响

目的 探究长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因3(lncRNA SNHG3)对卵巢癌细胞恶性生物学行为的调控机制。方法 体外培养人卵巢癌细胞株(SKOV3、A2780、SW626和OVCAR3)和正常卵巢上皮细胞(HOSEpiC),将对数生长期的OVCAR3细胞分为对照组、si-NC组、SNHG3沉默组、miR-NC组、miR-340-5p过表达组、SNHG3沉默+anti-miR-NC组、SNHG3沉默+anti-miR-340-5p组。RT-qPCR检测细胞中lncRNA SNHG3、miR-340-5p表达;双荧光素酶实验验证SNHG3和miR-340-5p的调控作用;CCK-8法、划痕实验和Transwell小室实验检测各组细胞增殖、迁移、侵袭能力;Western blot检测各组细胞中上皮间质转化(epithelial mesenchymal transformation, EMT)相关蛋白[E-钙粘蛋白(E-cadherin)、N-钙粘蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(VIM)]表达。裸鼠成瘤实验检测沉默SNHG3的OVCAR3细胞体内生长情况;免疫组织化学法和RT-...     

基质金属蛋白酶-9及基质金属蛋白酶组织抑制物-1与卵巢上皮性癌血管生成的关系

目的:探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及基质金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)在卵巢上皮性癌血管生成中的作用。方法:采用免疫组织化学SP法检测45例卵巢上皮性癌组织中MMP-9和TIMP-1的表达,并检测其中微血管密度(MVD,CD34标记)。结果:卵巢癌组织和卵巢良性肿瘤中MMP-9阳性表达率明显高于正常卵巢组织(P<0.01),而TIMP-1未见升高(P>0.05),并且TIMP-1在卵巢癌组织中的阳性表达率显著低于MMP-9(P<0.01)。MMP-9在卵巢癌组织中表达与MVD显著正相关(r=0.286,P<0.05),而TIMP-1与MVD无相关性(r=0.194,P>0.05)。卵巢癌中MMP-9表达高于TIMP-1者,其MVD显著高于MMP-9表达低于TIMP-1者(P<0.05)。结论:MMP-9和TIMP-1表达失衡可能在卵巢上皮性癌血管生成中起重要作用,MMP-9表达增强而TIMP-1表达降低,其血管生成能力可能显著增强,但并非唯一决定因素。检测卵巢上皮性癌中MMP-9和TIMP-1表达对进一步了解卵巢上皮性癌局部血管生成情况有一定应用价值。     

GRP78在蛋白酶体抑制剂诱导卵巢癌细胞凋亡中的作用

目的:探讨葡萄糖调节蛋白78(GRP78)在蛋白酶体抑制剂诱导卵巢癌细胞凋亡中的作用。方法:对3种卵巢癌细胞系SKOV3、A2870和CAOV3分别设空白对照组和不同蛋白酶体抑制剂处理组;对SKOV3细胞分别转染GRP78小干扰RNA(siRNA)和随机序列核酸siRNA组。利用蛋白酶体抑制剂MG132(5μmol/L)、PSI(20nmol/L)和EPOX(10nmol/L)作用3种细胞系,实时定量PCR和Western blot检测各组细胞GRP78 mRNA和蛋白表达。MTT和流式细胞术检测细胞活力和凋亡率。结果:各种蛋白酶体抑制剂均增加卵巢癌细胞中GRP78mRNA和蛋白表达水平。当GRP78siRNA靶向沉默GRP78表达后,蛋白酶体抑制剂作用后SKOV3细胞活力明显降低。结论:GRP78诱导表达干扰蛋白酶体抑制剂抗卵巢癌活性;沉默GRP78基因表达可提高蛋白酶体抑制剂对卵巢癌细胞的杀伤作用。     

异丙酚调控miR-212-5p/TRPV6轴对卵巢癌细胞增殖 迁移及侵袭影响的机制研究

目的探讨异丙酚通过调控miR-212-5p/TRPV6轴对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭影响和机制,为临床诊治卵巢癌奠定理论基础。方法不同浓度的异丙酚[(0μM (μmol/L)、0.125μM、0.25μM、0.5μM和1.0μM]作用SKOV3细胞48 h后,MTT实验检测细胞活力,Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力,qRT-PCR和Western blot检测miR-212-5p、TRPV6、Cyclin D1、MMP2和MMP9蛋白的表达变化。同时,构建抑制miR-212-5p表达的SKOV3细胞株,进行上述实验检测相应指标。双荧光素酶实验和Western blot验证miR-212-5p和TRPV6的靶向关系。结果异丙酚呈浓度依赖性地抑制SKOV3细胞的增殖、迁移和侵袭,抑制TRPV6、Cyclin D1、MMP2和MMP9蛋白的表达,促进miR-212-5p的表达。抑制miR-212-5p表达可减轻异丙酚处理对SKOV3细胞的增殖、迁移和侵袭的抑制作用。TRPV6是miR-212-5p的靶基因,miR-212-5p可负性调控TRPV6的表达。沉默TRPV6可部分逆转抑制miR-212-5p表达对异丙酚处理的卵巢癌细胞SKOV3增殖、迁移和侵袭的影响。结论异丙酚通过上调miR-212-5p表达,抑制TRPV6表达,从而抑制卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭。     

SDF-1和PI3K/Akt通路对卵巢癌CAOV3细胞增殖和侵袭能力的影响研究

目的:探讨基质细胞衍生因子-1(SDF-1)通过磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号传导通路对卵巢癌CAOV3细胞增殖和侵袭能力的影响及其作用机制.方法:将卵巢癌CAOV3细胞分为对照组(未给药),实验组1(100 ng/ml SDF-1),实验组2(50 μmol/L PI3K/Akt信号传导通路抑制剂LY294002)和实验组3(50 μmol/L LY294002,作用0.5h后加入100 ng/ml SDF-1).采用MTT法检测卵巢癌CAOV3细胞经不同药物处理后24、48和72 h的细胞增殖能力.采用Transwell体外细胞侵袭实验和Western Blot法检测经不同药物处理48h后卵巢癌CAOV3细胞的侵袭能力、Akt磷酸化程度和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平.结果:SDF-1可以明显促进卵巢癌CAOV3细胞的增殖和侵袭(P＜0.05),LY294002可以抑制卵巢癌CAOV3细胞的增殖和侵袭(P＜0.05);实验组3卵巢癌CAOV3细胞的增殖和侵袭能力与实验组2比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论:SDF-1能够通过PI3K/Akt信号传导通路诱导MMP-9蛋白表达上调,增强卵巢癌细胞的增殖和侵袭能力;应用LY294002阻断PI3 K/Akt信号传导通路可显著抑制SDF-1对人卵巢癌CAOV3细胞增殖和侵袭的促进作用.