上皮细胞钠离子通道在子痫前期患者胎盘组织中的表达及其与子痫前期发病的关系

目的上皮细胞钠离子通道(ENaC)在子痫前期患者胎盘中的表达及其与子痫前期(PE)发病的关系。 方法选择2009年3月至2011年3月在四川大学华西第二医院行剖宫产分娩的92例产妇的胎盘组织为研究对象,根据孕妇是否患有重度子痫前期,将其分别纳入重度PE组(n＝48,重度PE患者)和对照组(n＝44,正常妊娠者)。此外,选择于早孕期(孕龄为8～11孕周)因计划外妊娠等因素要求行人工终止妊娠孕妇的胎盘组织纳入早孕期组(n＝36)。早孕期组的胎盘组织取自选择性负压吸引人工终止妊娠术者。重度PE组和对照组产妇行剖宫产分娩待胎盘娩出后,立即取胎盘母体面的中央绒毛区组织。3组受试者的住院时间等比较,差异无统计学意义(P>0.05)。体外实验在正常人滋养层细胞株HTR-8/Svneo上进行。采用免疫组化技术(SP法)检测ENaC在孕妇胎盘组织的定位。实时荧光定量逆转录聚合酶链反应法(qPCR)及Western blotting法检测胎盘组织ENaC mRNA及蛋白的表达水平。此外,观察雌、孕激素对滋养细胞HTR-8/SVneo ENaC表达的调节作用。再利用小干扰RNA(SiRNA/ENaC)干预ENaC的表达后,通过划痕实验及侵袭实验观察HTR-8/Svneo细胞迁移及侵袭能力的变化。本研究遵循的程序符合四川大学华西第二医院人体试验委员会所制定的伦理学标准,得到该委员会批准,标本的采集过程均征得受试对象同意,并与受试对象签署临床研究知情同意书。 结果①重度PE组和正常妊娠组孕妇孕前体质指数(BMI)、孕期体重增加、基础收缩压、晚孕期收缩压、孕期收缩压增加、基础舒张压、晚孕期舒张压、孕期舒张压增加、新生儿出生体重等一般临床资料比较,差异均有统计学意义(t＝2.586、2.16、2.139、15.817、13.078、4.896、16.600、11.119、8.456,P<0.05)。②免疫组化法结果显示,ENaCα亚基主要表达于早孕期胎盘合体滋养细胞及绒毛滋养细胞的细胞膜上。③ qPCR结果表示：ENaC各亚基在不同妊娠时期的胎盘组织中均有表达,但其表达水平存在差异,其中ENaC α亚基主要在早孕期表达,而ENaC β亚基主要在对照组表达。ENaC β亚基在重度PE组的相对表达水平为0.48±0.17,显著低于ENaC β亚基在正常妊娠组中的相对表达水平为0.89±0.20,并且差异有统计学意义(t＝2.465,P<0.05)。④雌激素(1 μmol/L)、孕激素(5 μmol/L)可下调ENaC mRNA在滋养细胞HTR-8/SVneo上的表达水平,孕激素(5 μmol/L)可下调ENaC在蛋白水平的表达水平。⑤ ENaC蛋白水平的表达被ENaC α亚基特异性小干扰RNA(siRNA/ENaC)下调后,HTR-8/SVneo细胞的迁移及侵袭能力减弱。 结论晚孕期胎盘组织中以ENaCβ亚基表达为主,重度PE患者ENaC β亚基表达水平较正常妊娠者降低;下调ENaC的表达滋养层细胞侵袭与细胞迁移的能力减弱,推测ENaC可能通过影响滋养细胞的迁移及侵袭参与PE发病。     

水通道蛋白9 mRNA在子痫前期患者胎盘中的表达及其意义

目的:检测水通道蛋白9(Aquaporin 9,AQP9)mRNA在子痫前期患者胎盘中的表达,以探讨AQP9在子痫前期发病机制中的意义。方法:用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测正常妊娠(10例)、子痫前期(22例)剖宫产后胎盘中AQP9基因在转录水平的表达。结果:子痫前期组胎盘中AQP9 mRNA表达量较正常妊娠组显著升高(P<0.01)。结论:AQP9在子痫前期的发病中起着重要作用,可能与AQP9表达增加有关。     

白血病抑制因子在子痫前期患者胎盘组织中的表达

目的:测定白血病抑制因子(LIF)在子痫前期患者胎盘组织中的表达,探讨其在妊娠高血压发病中的作用。方法:采用免疫组化技术-链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶连接(SP)法对在正常妊娠(正常妊娠组)、子痫前期(轻度子痫前期组和重度子痫前期组)孕妇胎盘组织中LIF的表达进行组织学定位和半定量分析。结果:3组孕妇胎盘组织中LIF均呈现阳性表达,阳性染色主要位于滋养细胞胞质中,胞核无明显着色。轻度子痫前期组和重度子痫前期组分别与正常妊娠组比较,胎盘组织的染色强度及范围显著减弱,差异有统计学意义(P<0.01),而轻度子痫前期组和重度子痫前期组的胎盘组织染色范围和强度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:LIF对维持正常妊娠有一定的保护作用,LIF分泌或调控异常,影响了滋养细胞的浸润能力,导致病理妊娠,在胎盘组织中的低表达,参与了子痫前期发病机制。     

Survivin、Caspase-3在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的:探讨凋亡相关蛋白Survivin(生存素)和Caspase-3(半胱氨酸蛋白酶-3)在子痫前期患者与正常妊娠妇女胎盘组织中的表达规律及其在子痫前期发病过程中可能的机制。方法:随机选取子痫前期患者60例(轻度组25例,重度组35例)和正常妊娠孕妇30例作为病例组和对照组,应用免疫组织化学(SABC)法对3组胎盘的Survivin、Caspase-3进行标记,通过彩色病理图像分析系统对染色结果进行定量检测并分析。结果:①Survivin在子痫前期重度组表达低于轻度组及对照组,差异有统计学意义(P<0.01);轻度组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);②Caspase-3在子痫前期重度组表达高于轻度组及对照组,轻度组表达高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01);③Survivin与Caspase-3在3组胎盘组织中表达呈负相关(r=-0.370,P<0.05)。结论:子痫前期患者胎盘组织中凋亡相关蛋白Survivin表达下调、Caspase-3表达上调,Survivin及Caspase-3的表达变化可能与子痫前期的发病机制有关。     

REDD1蛋白在子痫前期患者胎盘的表达及意义

目的探讨子痫前期患者胎盘中REDD1蛋白的表达情况。方法选择2011年12月至2012年4月四川大学华西第二医院收治的确诊为子痫前期,年龄为(31.4±1.4)岁的单胎妊娠孕妇29例为研究对象。按照妊娠中子痫前期发生的时间,将其分为早发型子痫前期组(n=15)和晚发型子痫前期组(n=14)。同时按入院顺序号随机选择孕期在本院产前检查,年龄为(32.0±2.8)岁的单胎妊娠健康孕妇20例纳入对照组(本研究遵循的程序符合四川大学华西第二医院人体试验委员会制定的伦理学标准,得到该委员会批准,分组征得受试对象知情同意,并与之签署临床研究知情同意书)。采用SP免疫组织化学染色技术,Western bloting杂交及实时荧光定量PCR检测受试者REDD1蛋白及其mRNA在胎盘组织中的表达,并采用相关统计学方法分析早发型子痫前期组、晚发型子痫前期组及对照组胎盘组织中REDD1蛋白表达差异。早发型子痫前期组及晚发型子痫前期组患者的一般临床资料(年龄、孕周及产次)分别与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结果 REDD1蛋白表达于胎盘滋养细胞的细胞质。早发型子痫前期组及晚发型子痫前期组胎盘组织中REDD1蛋白水平均较对照组显著增高,差异有统计学意义(P<0.05)。早发型子痫前期组REDD1mRNA表达水平较对照组明显增高,差异亦有统计学意义(P<0.05);但晚发型子痫前期组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 REDD1蛋白可能在子痫前期发病机制中起重要作用。     

MicroRNAs标志物在子痫前期胎盘组织中的表达

目的 探讨血清MicroRNAs标志物在子痫前期胎盘组织中的表达及变化的意义.方法 选择2019年7月-020年7月在河源市和平县人民医院就诊的60例确诊为子痫前期孕妇为子痈前期组,另选60例同期排除子痫前期的孕妇为对照组,测量两组患者血压,24h尿蛋白定量,采用real-time PCR检测两组患者的胎盘组织中的mi...     

子痫前期患者胎盘组织中caspase-3,8,9的表达及临床意义

目的 研究半胱天冬氨酸蛋白酶-3,8,9(caspase-3,8,9)在子痫前期患者胎盘中的表达及临床意义.方法 选择2010年8月至2011年2月在西京医院妇产科住院分娩的孕妇40例,分为子痫前期组20例、正常妊娠对照组20例,采用免疫组化法、蛋白印迹法检测子痫前期患者和正常妊娠妇女胎盘中caspase-3,8,9的表达.结果 caspase-3,8,9在子痫前期胎盘和正常妊娠胎盘中均有表达;在子痫前期患者胎盘中,caspase-3,8,9表达与正常胎盘相比显著升高(t值分别为25.09、14.65、8.10,均P<0.01).结论 子痫前期患者胎盘组织中caspase-3,8,9的异常表达与滋养细胞凋亡增加有关,可能是导致子痫前期发生发展的重要病理因素.     

SIRT1与NLRP3在子痫前期患者胎盘组织中的表达及临床意义

目的：探讨沉默信息调节因子1(SIRT1)和Nod样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体在子痫前期(PE)胎盘中的表达及临床意义。方法：采用免疫组化SABC法检测SIRT1和NLRP3在胎盘石蜡切片中的表达情况,其中早发型PE 40例,晚发型PE 40例,另有正常孕妇40例作为对照组。结果：SIRT1在早发型PE组、晚发型PE组和对照组中的阳性表达率分别为12.5%、35%、92.5%,差异有统计学意义(χ²=54.71,P<0.05)。NLRP3在早发型PE组、晚发型PE组和对照组中的阳性表达率分别为95%、72.5%、30%,差异有统计学意义(χ²=38.75,P<0.05)。在PE胎盘组织中,SIRT1与NLRP3之间的表达水平呈负相关(r=-0.60,P<0.05)。结论：低表达的SIRT1、高表达的NLRP3可能推动了PE的发生发展。     

子痫前期胎盘组织中差异蛋白质表达的研究

目的筛查子痫前期胎盘组织中差异表达的蛋白,寻找与子痫前期发生发展相关的蛋白。方法通过蛋白质芯片技术(PPA),针对64个磷酸化或非磷酸化抗体,检测2011年7月-2012年6月就诊的101例子痫前期患者(子痫前期组)及65例健康孕妇(对照组)的胎盘蛋白质表达水平。结果子痫前期组和对照组中有36个蛋白差异表达,19个表达上调,17个表达下调。多因素回归分析发现,Endoglin、PAI-1和Flt-1与子痫前期的不良结局发生相关;Endoglin与早发型子痫前期密切相关;PAI-1与子痫前期胎儿生长受限相关。结论本研究发现胎盘中与早发型子痫前期、不良结局、胎儿生长受限的相关蛋白,这些蛋白可能参与子痫前期的发生发展,是子痫前期预测及病情严重程度分级的潜在指标。     

子痫前期患者胎盘组织瘦素的表达与病情的相关性研究

目的 探讨子痫前期患者胎盘组织瘦素的表达水平与病情的关系.方法 选择妊娠期高血压疾病患者10例、子痫前期轻度患者10例、子痫前期重度患者10例,采用RT-PCR技术检测患者胎盘组织瘦素mRNA的表达水平,并与15例正常孕妇(对照者)进行比较.同时检测子痫前期患者24 h尿蛋白定量及平均动脉压.结果 胎盘组织瘦素mRNA表达水平子痫前期重度患者(0.507±0.036)及子痫前期轻度患者(0.476±0.023)均高于对照者(0.441±0.030)(P＜0.01),子痫前期重度患者高于子痫前期轻度患者(P＜0.05);妊娠期高血压疾病患者瘦素mRNA表达水平(0.463±0.024)与对照者比较,差异无统计学意义(P＞0.05).子痫前期患者胎盘组织瘦素mRNA表达水平与24 h尿蛋白定量、平均动脉压呈正相关(P＜0.05).结论 子痫前期患者胎盘组织瘦素表达水平明显升高,且表达水平与病情有关.     

子痫前期患者胎盘组织Fas／FasL的表达异常及意义

目的 比较子痫前期患者与正常孕妇胎盘组织中Fas/FasL的表达.探讨Fas/FasL系统的表达与子痫前期的关系.方法 采用免疫组化法检测30例正常妊娠晚期及60例子痈前期患者(其中轻度30例,重度30例)胎盘组织中Fas和FasL表达强度.结果 Fas/FasL主要表达于胎盘绒毛滋养细胞的胞浆及胞膜内,与正常对照组比较,Fas在重度子痫前期组胎盘绒毛滋养细胞的表达水平显著增加(x2=23.25,P＜0.05),差异有显著性;而FasL在重度子痫前期组的表达强度明显降低(x2=6.67,P＜0.05),差异有显著性.结论 Fas和FasL的改变与子痫前期相关,Fas/FasL的异常表达导致妊娠免疫耐受机制破坏可能是子痫前期发病的重要机制之一.     

子痫前期患者胎盘组织p-p38与caspase-3、8的表达及临床意义

目的 研究p-p38、caspase-3、caspase-8在子痫前期患者胎盘中的表达及临床意义.方法 选择2016年 6月至2017年 2月在西京医院妇产科住院分娩的孕妇80例,分为子痫前期组40例,正常妊娠组40例,采用免疫组化法及蛋白印迹法检测子痫前期患者和正常妊娠妇女胎盘滋养细胞中p-p38、caspase-3、caspase-8的表达.结果 p-p38、caspase3、caspase8在子痫前期胎盘和正常妊娠胎盘中均有表达;在子痫前期患者胎盘中p-p38、caspase-3、caspase-8表达与正常胎盘相比显著升高(2.08±0.04vs 1.44±0.04、1.72±0.03 vs 1.12±0.06、1.59±0.04 vs 1.18±0.01,t值分别为71、60、61,均P<0.01).结论 胎盘组织中p-p38、caspase-3、caspase-8的异常表达可能促进滋养细胞凋亡增加,推进子痫前期的发生发展.     

子痫前期患者胎盘组织中KiSS-1与IGF-Ⅱ的表达

目的:探讨KiSS-1与IGF-Ⅱ在子痫前期患者胎盘组织中的表达。方法:采用SP法对轻、重度子痫前期组40例和正常妊娠组25例的胎盘组织进行KiSS-1和IGF-Ⅱ的免疫组化染色,观察各组KiSS-1和IGF-Ⅱ的定位、分布和表达量的差异。结果:KiSS-1在轻度子痫前期组及重度子痫前期组胎盘中的表达量均高于正常妊娠组,P值分别为P<0.05(P=0.019)和P<0.01。IGF-II在轻度子痫前期组及重度子痫前期组中的表达量均低于正常妊娠组,P值分别为P<0.05(P=0.022)和P<0.01。KiSS-1在胎盘的表达量与新生儿体重呈负相关,r为-0.902(P<0.01);IGF-Ⅱ在胎盘的表达量与新生儿体重呈正相关,r为0.870(P<0.01)。结论:KiSS-1和IGF-Ⅱ在子痫前期患者胎盘组织中表达异常,可能与子痫前期的发病及发展有关。     

子痫前期患者血清与胎盘组织中一氧化氮的表达及其意义

目的探讨子痫前期(PE)患者血清与胎盘组织中一氧化氮(NO)的表达及其意义。方法选取轻度、重度PE患者各20例,分别作为B组和A组,另选同期行剖宫产的单胎初产健康妊娠妇女20例作为对照组(N组)。比较3组患者的平均动脉压(MAP)、24h尿蛋白量,在入院时(T0)、产前(T1)及产后6h(T2)的血清NO水平,以及胎盘组织的NO和环磷酸鸟苷(cGMP)水平。结果 A组、B组患者MAP在T0、T1、T2时点均明显高于N组,差异有统计学意义(A组MAP在T0、T1、T2时点与N组比较t=4.126、3.659、2.922;B组MAP在各时点与N组比较t=3.326、2.685、2.227,均P0.05),A组和B组T2时点MAP均较T0有明显降低,差异有统计学意义(t=3.243、2.826,均P0.05)。A组、B组24h尿蛋白定量值显著高于N组,差异有统计学意义(t=13.462、9.698,均P0.05)。A组、B组血清NO水平在T0、T1、T2时点均显著低于N组,差异有统计学意义(A组血清NO水平在T0、T1、T2时点与N组比较t=5.686、3.452、2.706;B组血清NO水平在T0、T1、T2时点与N组比较t=3.012、2.842、2.361,均P0.05),且A组比B组降低更明显,差异有统计学意义(A组血清NO水平在各时点与B组比较,t=2.546、2.318、2.109,均P0.05)。A组、B组血清NO水平在T0、T1、T2时点逐渐增加,差异有统计学意义(A组血清NO水平在T2时点与T1比较,T1时点与T0比较,t=3.090、2.142;B组血清NO水平在T2时点与T1比较,T1时点与T0比较,t=3.106、2.329,均P0.05)。3组患者血清NO水平与MAP(r=-0.681,P0.05)和24h尿蛋白定量(r=-0.358,P0.05)均呈负相关关系。A组、B组胎盘组织NO水平和cGMP浓度均显著低于N组,差异有统计学意义(B组、A组NO水平与N组比较,t=2.633、3.857,B组、A组cGMP浓度与N组比较t=2.846、3.824,均P0.05)。3组患者胎盘组织中cGMP浓度与NO水平呈正相关关系(r=0.572,P0.05)。结论孕妇血清与胎盘组织中NO水平与PE发病及病情轻重密切相关。     

重度子痫前期患者胎盘组织中miR-21的表达及其临床意义

目的:检测miR-21在重度子痫前期患者与正常孕妇胎盘组织中的表达差异。方法:收集2011年1月～2011年8月在江西省妇幼保健院产科行剖宫产的16例重度子痫前期患者和16例正常妊娠妇女的胎盘组织,通过实时荧光定量PCR技术检测胎盘组织中miR-21的表达水平。结果:miR-21在重度子痫前期患者胎盘组织中表达水平明显升高,为正常对照组表达水平的2.02倍(P<0.05)。结论:miR-21在胎盘组织中的表达水平可能与子痫前期的发生发展病理过程存在一定相关性。     

子痫前期患者血清和胎盘组织中IL-24、HLA-G蛋白的表达及意义

目的:通过检测IL-24和HLA-G蛋白在孕妇血清及胎盘中的表达,探讨IL-24与HLA-G蛋白在子痫前期中的表达意义。方法:采用ELISA法和免疫组化SP法,对30例正常孕妇和35例子痫前期患者的血清和胎盘组织中IL-24、HLA-G蛋白表达水平进行检测,并分析两者的相关性。结果:1与对照组相比,子痫前期组血清中IL-24表达显著升高(P<0.01),HLA-G表达显著降低(P<0.01)。2血清中IL-24、HLA-G的表达呈负相关(r=-0.976,P<0.05)。3子痫前期组胎盘组织中IL-24的阳性表达率高于对照组(P<0.05),HLA-G蛋白的阳性表达率低于对照组(P<0.05)。结论:IL-24、HLA-G可能参与了子痫前期的发生和病理生理过程。     

白血病抑制因子在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的:测定白血病抑制因子(LIF)在子痫前期患者胎盘组织中的表达变化,探讨其在子痫前期发病过程中的作用。方法:选取子痫前期(子痫前期轻度组和重度组)和正常妊娠孕妇作为研究组和对照组,采用免疫组化法测定其胎盘组织中LIF的表达,并通过BI2000医学图像分析系统对染色结果进行定量检测并作比较。结果:LIF在3组中均有表达,且主要表达于滋养细胞胞质中;子痫前期轻度组及重度组与正常妊娠组相比,胎盘组织中LIF的表达明显减弱,差异有统计学意义(P<0.01);子痫前期轻度组与重度组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:LIF对正常妊娠的维持起到了一定的保护作用;LIF在胎盘组织中的低表达影响了滋养细胞的浸润能力,可能是子痫前期发病的病因之一。     

子痫前期和子痫患者胎盘和血浆PDGF-A表达及意义

目的比较正常妊娠和子痫前期、子痫患者胎盘组织血小板源性生长因子(PDGF)-A mRNA、PDGF-AA的表达和血浆PDGF-AA蛋白水平,探讨PDGF-A与子痫前期发病的关系。方法对子痫前期和子痫患者43例、正常妊娠20例,分别用RT-PCR检测胎盘绒毛组织PDGF-A mRNA表达水平,用免疫组化SABC法结合计算机显微图像分析软件,检测胎盘绒毛组织PDGF-AA蛋白的表达水平,用ELISA检测血浆中PDGF-AA蛋白表达水平。结果子痫前期、子痫组及正常妊娠组胎盘组织的PDGF-A mRNA和PDGF-AA蛋白表达,病例组均高于正常组,且与病情轻重呈正相关;病例组血清PDGF-AA蛋白水平均高于正常组,也与病情轻重呈正相关。结论子痫前期和子痫患者胎盘组织及血浆高度表达的PDGF-A可促进动脉粥样硬化形成,可能在子痫前期患者的胎盘血管病变中起重要作用,并参与子痫前期的发生和发展。     

NPY和NT在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的检测子痫前期患者胎盘组织中神经肽Y（NPY）及神经降压素（NT）表达的变化。探讨妊娠期高血压疾病的发病机制。方法采用亲合免疫细胞化学技术链霉素-生物素-过氧化物酶复合物技术（SABC法）对30例正常妊娠妇女（正常妊娠组）,30例轻度子痫前期组,30例重度子痫前期组患者胎盘组织中的NPY及NT进行测定。结果各组胎盘组织中均有NPY和NT的表达。随着妊娠高血压疾病病情的加重,胎盘组织中NPY的表达逐渐升高。轻度子痫前期NPY表达强度显著高于正常妊娠组,差异有统计学意义（X^2=2．06,P〈0．05）,重度子痫前期组NPY表达强度显著高于轻度子痫前期组,差异有统计学意义（X^2=2．25,P〈0．05）;重度子痫前期组NT的表达弱于正常妊娠组,差异有统计学意义（X2=2．34,P〈0．05）,重度子痫前期NT的表达弱于轻度子痫前期组,差异有统计学意义（X^2=2．10,P〈0．05）,轻度子痫前期与正常妊娠组NT表达强度比较差异无统计学意义（X^2=1．16,P〉0．05）。结论NPY与NT在胎盘组织中的表达情况与妊娠高血压疾病的轻重程度密切相关。