机械拍打小鼠腿部组织诱导耐损伤改变的实验研究

[目的]采用机械拍打小鼠腿部组织诱导机体的耐损伤变化,初步探讨其发生机制。[方法]60只健康小鼠,雌雄各半,随机分为A、B、C、D、E组。A组不进行机械拍打,其余各组每天以50HZ·min-1的频率、1N的强度机械拍打小鼠右腿10min。B组拍打4d,C组拍打8d,D组拍打16d,E组拍打32d。各组达到拍打时间后,取拍打部位组织做组织学检查和免疫组织化学分析。[结果](1)打拍部位肉眼改变:A组小鼠皮肤、皮下及肌肉组织颜色正常。B组皮肤红肿,皮下淤血明显。C组皮肤严重损伤,明显肿胀,表皮破溃,出血,肌肉萎缩。D组皮肤损伤逐渐修复,破损处开始结痂,皮肤变粗糙,变肌肉粗壮。E组皮肤损伤完全修复,皮肤更粗糙,角质层明显增厚,肌肉更粗壮。(2)普通显微镜下观察:A组皮肤组织结构、肌纤维正常;B组皮肤组织结构不完整,肌纤维断裂,部分萎缩;C组皮肤组织结构破坏,肌纤维明显萎缩;D组皮肤组织结构完整,肌纤维萎缩逐渐减少,部分肌纤维增粗;E组皮肤组织结构完整,肌纤维明显增粗,肌束间隙变窄或消失。(3)免疫组织化学结果显示:D组、E组拍打部位皮肤和肌肉组织的HSP70表达较A组明显增高。[结论](1)用一定频率,一定强度机械拍打小鼠腿部组织能诱导其产生耐损伤改变,雌雄鼠比较此变化无明显差异。(2)机械拍打可致小鼠受拍打部位皮肤肌肉组织中的HSP70表达上调。(3)机械拍打诱导小鼠产生耐损伤变化可能与局部组织重构、HSP70表达上调有关。     

模拟产伤法构建小鼠肛提肌损伤模型及效果评价

目的探索有效的小鼠肛提肌损伤模型构建方法。方法于2018年8～11月,选取40只SPF级雌性未孕未生育C57BL/6小鼠为研究对象。随机将小鼠分为假手术对照组、单纯阴道扩张组、阴道扩张+远端牵引10 g组、阴道扩张+远端牵引30 g组、阴道扩张+远端牵引60 g组,每组8只,共5组。在损伤24 h后固定小鼠肛提肌,通过HE染色及透射电镜扫描技术分析比较各处理条件下的损伤情况。结果 HE染色结果显示:与对照组相比,单纯阴道扩张小鼠肛提肌组织未见明显损伤;阴道扩张+10 g砝码牵引1 h组肛提肌肌间隙略增大,组织间少量炎性细胞浸润;阴道扩张+30 g牵引1 h组,肛提肌肌束紊乱,肌间隙明显增大,肌纤维小灶性坏死;阴道扩张+60 g牵引1 h后能够造成明显的肛提肌损伤,肌纤维大量坏死,炎性细胞浸润,增生肌纤维中见核内移。透射电镜结果显示:阴道扩张+30 g牵引1 h组小鼠肛提肌灶性坏死、溶解,坏死部位线粒体扩张、空泡化,肌小节结构不完整,肌纤维宽窄不一、排列不规则。结论阴道扩张+机械牵引对小鼠肛提肌造成的损伤程度明显大于单纯阴道扩张,且呈现随牵引力递增趋势,阴道扩张+30 g机械牵引1 h已能造成较明显的损伤。     

压力性尿失禁大鼠耻尾肌及泌尿生殖道结构和神经分布的变化

目的:观察压力性尿失禁大鼠耻尾肌和泌尿生殖道结构变化,并通过探寻蛋白基因产物9.5(PGP9.5)及神经肽Y(NPY)的分布变化为压力性尿失禁盆底失神经支配学说寻找进一步证据。方法:取SUI模型大鼠及正常大鼠的耻尾肌、阴道前壁及尿道标本光镜下观察其组织学、形态学差异,并用免疫组化的方法检测标本中PGP9.5、NPY表达情况。结果:①通过模拟产伤和绝经可以获得压力性尿失禁的动物模型。对该模型进行尿动力学检查,最大膀胱容量和漏点压均小于正常对照组(P<0.05)。②HE染色显示,模型组耻尾肌、阴道前壁及尿道形态与对照组存在相似的改变,即肌肉含量减少、肌纤维萎缩变性、神经数量下降。③免疫组化染色显示,PGP9.5和NPY存在于耻尾肌及泌尿生殖道结构中,且与对照组比较,模型组中PGP9.5和NPY染色强度显著降低(P<0.05)。结论:盆底肌肉及泌尿生殖道结构改变和神经源性损伤与SUI发生有关。     

Herpud1在盆底肌萎缩模型中的表达研究

目的 探讨内质网膜蛋白Herpud1在盆底肌萎缩模型中的表达与作用。方法 分别各取10只4月龄未生产过的野生型C57BL/6J小鼠(WT组)和盆底肌萎缩模型基因小鼠(T型钙离子通道编码基因CACNA1H敲除小鼠：Cacna1h-/-mice/TH-null组),异氟烷麻醉小鼠后,电生理记录仪对小鼠进行尿动力学指标的检测;处死小鼠后取盆底肌行免疫组化染色和Western-blot实验,分析Herpud1蛋白和mRNA水平的表达变化。选择鼠源C2C12成肌细胞分化4 d形成肌管后,予以T型钙离子通道抑制剂NNC 55-0396水合物(NNC)处理24 h和48 h,构建肌管萎缩细胞模型,Western-blot法检测Herpud1蛋白表达。结果 小鼠尿动力学检测结果显示,与WT组小鼠相比,TH-null组小鼠膀胱漏尿点压(bladder leak point pressures, BLPP)值[(46.54±1.102)cmH₂O vs (31.55±2.177)cmH₂O]、最大膀胱容量值(0.1145±0.003023 vs 0.0691±0...     

羊膜干细胞用于修复损伤子宫内膜的动物实验研究

目的通过使用羊膜干细胞修复损伤的小鼠子宫内膜实验,了解羊膜干细胞是否有助于子宫内膜的修复,为将来进一步应用于临床提供依据。方法参照人羊膜干细胞方法先制备小鼠羊膜干细胞,再建立小鼠子宫内膜损伤模型,然后根据方法不同分为3组(造模组50只,假手术组20只,对照组20只)。造模术后10 d取造模组10只,假手术组10只,对照组10只处死,肉眼观察宫腔改变,取出各组小鼠子宫置入中性甲醛固定,HE及Masson染色,对其进行纤维化半定量评分。各组再取10只小鼠与雄性小鼠合笼饲养,妊娠10 d开腹记数着床胚胎数作为评价生育能力指标。另外30只造模组行粘连分离后分别给予宫腔内注射羊膜干细胞、口服雌激素及空白。结果模型组在造模后宫腔纤维化面积比例增加,腺体数量减少,妊娠能力明显下降,而假手术组及对照组无明显变化,造模组与假手术组及对照组相比,3项指标都有显著性差异(P<0.05),对造模成功组采用不同治疗方案,结果显示,干细胞宫腔内注射可以改善宫腔纤维化面积及腺体数量,而雌激素无明显作用,3组治疗相比,干细胞组比其他组作用更明显,差异有显著性((P<0.05)。结论宫腔粘连分离后注入羊膜干细胞有利于子宫内膜的修复。     

槲皮素促进小鼠脊髓损伤后轴突生长及功能恢复研究

目的 评价槲皮素对小鼠脊髓损伤后轴突生长及功能恢复的影响。方法 C57BL/6雌性小鼠24只,随机分为2组,各12只。将2组小鼠T10节段施以完全性脊髓钳夹伤,治疗组分别于损伤前30 min、损伤后即刻、损伤后1-10 d每天1次腹腔注射槲皮素(50 mg/kg),对照组则腹腔注射等量0.9%氯化钠溶液。于损伤后14 d将BDA神经示踪剂注入小鼠皮层感觉运动区,示踪皮质脊髓束,组织切片复染GFAP标记损伤边界。通过荧光显微镜观察损伤区近段皮质脊髓束轴突退缩及再生情况。在术后当日及1、3、7、14、28 d,采用BMS(Basso mouse scale)量表评价小鼠后肢及躯干运动功能。结果 损伤后第28天,与对照组相比,槲皮素治疗组轴突出芽量化比值上升;神经轴缩球量化比值下降;传导束到损伤边缘距离下降,差异均有统计学意义(P0.01)。行为学评估表明槲皮素显著提高小鼠BMS评分(P0.01),第28天治疗组BMS显著高于对照组(P0.01)。结论 槲皮素可明显促进脊髓损伤后轴突出芽,减少回缩,促进运动功能恢复。     

盆底生物反馈联合民刺激及盆低功能锻炼治疗女性压力性尿失禁

目的：探讨联合保守治疗女性压力性尿失禁（SUI）的临床效果以及盆底肌表面肌电压作为疗效评价的应用价值。方法：对79例SUI女性进行盆底生物反馈联合电刺激及盆底肌锻炼治疗。比较治疗前后盆底肌表面肌电检测、SUI症状变化情况。结果：轻、中度SUI患者组内治疗前后盆底肌电值比较差异均有统计学意义（P＜0.01）,但2组患者治疗前后盆底肌肉肌电值差值比较差异无统计学意义（P＞0.05）。3个月后随访总有效率81.0%,轻度和中度SUI组有效率差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：盆底生物反馈联合电刺激及盆底肌锻炼治疗女性SUI无创、有效。盆底肌表面肌电压检测作为疗效评价指标有一定的应用价值。     

压力性尿失禁小鼠模型的建立及效果评价

目的探讨阴道扩张(VD)法构建压力性尿失禁(SUI)小鼠模型的可行性。 方法于2015年10～12月,选择135只无特定病原体(SPF)级雌性未育C57BL/6小鼠为研究对象,按照VD法构建SUI模型的时间,将其随机分为VD 1、3、7、14、28 d组(各组为15只小鼠)和对照组(60只小鼠)。分别于VD法进行SUI建模后的第1、3、7、14及28天,检测小鼠膀胱最大容量(MBC)、膀胱漏尿点压(BLPP)及腹压漏尿点压(ALPP)等尿动力学指标。对照组小鼠未进行处理,直接检测MBC、BLPP及ALPP。以±1.96 s估计对照组小鼠MBC、BLPP及ALPP的正常参考值范围,分析VD各组小鼠SUI建模成功率和SUI模型耐久度。使用明胶酶谱法检测各组小鼠阴道前壁组织基质金属蛋白酶(MMP)-2与-9表达。对VD各组与对照组MBC、BLPP、ALPP、MMP-2与-9进行统计学分析。实验过程中对动物的处置符合动物伦理学要求。各组小鼠周龄及体重等比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。 结果①VD 1、3、7、14、28 d组MBC、BLPP、ALPP分别与对照组比较,差异均有统计学意义(F＝11.060,P＝0.000;F＝71.670,P＝0.000;F＝61.120,P＝0.000)。VD 1、3及7 d组MBC、BLPP和ALPP,均分别较对照组显著降低,差异均有统计学意义(MBC：t_D＝7.115、4.528、3.909,均为P＝0.000;BLPP：t_D＝18.461、15.949、14.294,均为P＝0.000;ALPP：t_D＝16.198、12.895、12.700,均为P＝0.000)。VD 14和28 d组BLPP、ALPP分别与对照组比较,均显著降低,差异均有统计学意义(BLPP：t_D＝7.494、3.104,P＝0.000、0.003;ALPP：t_D＝6.356、2.031,P＝0.000、0.046),但VD 14和28 d组MBC分别与对照组比较,差异均无统计学意义(t_D＝1.086、0.469,P＝0.293、0.640)。②对照组C57BL/6小鼠MBC、BLPP及ALPP的正常参考值范围分别为0.06～0.15 mL、34.55～53.81 cmH₂O (1 cmH₂O＝0.098 kPa)及33.88～58.96 cmH₂O。③VD 1、3 d组SUI建模成功率均>93%,VD 7 d组约为90%,VD 14 d组约为60%,VD 28 d组仅约为30%。C57BL/6小鼠SUI模型耐久度为2～4周。④VD 1、3、7、14、28 d组小鼠阴道前壁组织MMP-2与-9表达水平分别与对照组比较,差异均有统计学意义(F＝55.130,P＝0.000;F＝18.850,P＝0.000);而VD 3、7和14 d组分别较对照组显著增加,并且差异均有统计学意义(MMP-2：t＝5.257、17.280、11.620,均为P＝0.000;MMP-9：t＝2.953、9.538、5.450,P＝0.042、0.001、0.006);VD 1、28 d组分别与对照组比较,差异均无统计学意义(MMP-2：t＝0.004、2.360,P＝0.997、0.078;MMP-9：t＝0.245、2.156,P＝0.818、0.097);VD 7 d组二者均最高,与VD 3和14 d组分别比较,差异均有统计学意义(MMP-2：t＝7.733、6.526,P＝0.002、0.003。MMP-9：t＝5.468、6.257,P＝0.005、0.003)。 结论VD法构建的SUI小鼠模型耐久度为2～4周,VD法建模后第3～7天的SUI小鼠模型最为稳定,最适宜用于SUI发病机制及其治疗等研究。综合比较尿动力学指标和SUI建模成功率,对SUI小鼠模型建模效果进行分析,较单纯比较尿动力学指标更为可靠。由于本研究纳入样本量较小,以及膀胱置管时不同操作者技术水平不同等因素的影响,小鼠尿动力学指标的正常参考值范围及VD法构建的SUI小鼠模型耐久度,仍有待进一步研究证实。     

GnRH激动剂在子宫腺肌病治疗中自噬现象与作用机制研究

目的子宫腺肌病是生育期女性的常见疾病,GnRH-a是治疗腺肌病的主要药物,但其作用机制尚不十分清楚,本文通过研究GnRH-a与小鼠子宫内膜细胞自噬作用的关系,探索GnRH-a的作用机制。方法 ICR健康孕鼠(上海斯莱克实验动物有限责任公司)5只,整个孕期孕鼠均独笼饲养,出生的雌性小鼠用于后续研究。随机选取16只雌性新生小鼠造模,8只作为正常对照组。建模小鼠于出生后第2～5日滴喂2.7μmol/kg他莫昔芬,正常对照使用生理盐水。鼠龄75 d,将模型鼠分为腺肌病模型组、腺肌病GnRH-a治疗组。根据不同干预措施将小鼠分为正常对照组(生理盐水+生理盐水)、腺肌病模型组(他莫昔芬+生理盐水)、腺肌病GnRH-a治疗组(他莫昔芬+GnRH-a)3组。腺肌病GnRH-a治疗组采用单次长效GnRH-a 8 mg腹腔注射,腺肌病模型组使用等量生理盐水。4周后,雌雄鼠交配,取见栓第4天子宫内膜,通过透射电镜测试自噬小体数量、Western-blot检测自噬相关蛋白Beclin-1及LC-3的表达。结果腺肌病模型组较对照组,自噬小体数量显著减少,而腺肌病GnRH-a给药组较模型组自噬小体数量明显增多(P0.05);Beclin-1、LC-3模型组表达水平低于正常对照组,而GnRH-a治疗组Beclin-1、LC-3蛋白表达水平显著高于模型组(P0.05)。结论腺肌病小鼠经GnRH-a治疗后,在位内膜的自噬水平显著提高,揭示GnRH-a可通过病灶部位的自噬降解,改善子宫内膜容受性,从而可提高腺肌病患者妊娠结局。     

电刺激对压力性尿失禁鼠模型阴道前壁Calpain 2和胶原的影响

目的通过模拟临床盆底电刺激(electrical stimulation,ES)治疗压力性尿失禁(stress urinary incontinence,SUI)的方法,分析ES对小鼠阴道前壁中Calpain 2和胶原的代谢影响。方法实验分为对照组(CON组)、SUI组、SUI+ES 50 Hz组,每组20只小鼠。构建小鼠SUI模型并进行造模评价,ES后取阴道前壁组织,应用Western Blot和RT-PCR方法比较3组组织中Calpain 2和胶原的表达变化,并在蛋白水平分析各组中Calpain 2与胶原Ⅰ、胶原Ⅲ相关性。结果 SUI+ES 50 Hz组小鼠阴道前壁Calpain 2的蛋白表达含量及mRNA均较SUI组显著升高(P0.05),SUI组胶原Ⅰ、Ⅲ的蛋白表达、mRNA水平与CON组相比较显著降低(P0.05),SUI+ES 50 Hz组经ES治疗后胶原Ⅰ、Ⅲ蛋白、mRNA表达水平有所升高(P0.05)。且在蛋白水平SUI+ES 50 Hz组中Calpain 2与胶原Ⅰ、胶原Ⅲ呈明显正相关(r=0.7251,P=0.0003;r=0.6869,P=0.0008)。结论 ES治疗可激活SUI盆底组织中Calpain 2蛋白,增加胶原含量;且在ES治疗SUI中,Calpain 2的变化与胶原变化密切相关,可能参与其治疗机制。     

对医院护理管理队伍建设的几点思考

文章分析了当前医院护理管理队伍存在的主要问题：知识结构不合理；专业思想不纯正；接受继续教育不足：工作效能低下。提出了建设高素质护理管理人才队伍的思路：严格标准，搞好选才；加强思想教育和引导；加大培养力度；建立科学考评和激励机制；完善人才合理流动措施；合理编制，突出效率。     

医学科技成果信息资源网络开放利用的原则探析

医学科技成果信息资源网络开放利用，为资源的开放共享创造了良好条件，它使医学科技信息得到了高效传播和最大利用。网络开放利用医学科技成果信息资源，利用的主体和核心是其信息内容。信息内容是网络用户从中提取知识和所需资料的主要来源，同时也是信息破坏者发动攻击的主要目标之一，因而，信息内容的安全是信息安全的基本问题，主要包括信息内容的规范性、完整性与真实性、知识产权保护与利用的合理性等。要做好这些工作，应该遵循相应的原则和要求。     

政府公共财政支出分配公平性研究进展

政府公共财政支出是社会再分配的一种形式，其目的是促进社会公平。因此，政府的公共财政支出应该具有较强的目标针对性，应该向社会贫困人群倾斜，使其从中受益。本文通过查阅国内外政府公共财政支出分配公平性的相关文献资料。阐述了相关研究的进展情况，井着重探讨了政府公共财政支出分配公平性的内涵、研究范围、测算方法和研究意义。以及实际研究中存在的问题，最后提出我国政府公共财政支出分配公平性的研究方向和需要进一步完善的地方。     

长春新碱过量引起严重毒副反应1例的护理体会

报道1例霍奇金淋巴瘤患者因误用长春新碱（VCR）10mg一次性静脉推注后治疗护理情况。其出现间断性神志恍惚、眼睑闭合不全、言语不清、口腔黏膜糜烂、全身疼痛、麻痹性肠梗阻、尿潴留、手足麻木等症状,经积极解救,禁食,持续胃肠减压、胃管内注入麻油、开塞露、生理盐水灌肠,合理应用肠外营养,注重疼痛、心理护理,做好口腔、肛周护理,预防感染加重,患者病情得到控制好转出院。