转线粒体细胞系的构建及其在老年性痴呆研究中的应用

线粒体是一种独特的细胞器 ,它具有自己的DNA ,其DNA由 16 5 6 9碱基对组成。线粒体DNA可编码 13条与细胞氧化磷酸化呼吸链有关的多肽〔1〕。核基因 (nDNA)编码其他大多数线粒体蛋白以及各种线粒体基质。很可能nDNA和线粒体DNA(mtDNA)突变共同导致线粒体功能缺陷 ,因此很难区分其线粒体功能障碍是源于nDNA还是mtDNA。King〔2〕首先建立了转线粒体DNA技术 ,为进一步研究提供了新的方法。所谓转线粒体细胞系 ,是指细胞中全部线粒体DNA被外源的线粒体DNA所替换 ,而其核基因仍保持不变的细胞系。这种细胞系因为其核背景稳定、并…     

线粒体电压依赖阴离子通道对携带线粒体DNAA4263G突变的细胞株线粒体钙循环的影响

目的 研究线粒体外膜电压依赖阴离子通道(voltage-dependent anion channel,VDAC)在携带线粒体DNA (mitochondrial DNA, mtDNA) A4263G突变的细胞株线粒体钙循环中的作用. 方法 对该家系的4个母系成员(3个血压异常和1个血压正常者)和3名遗传背景相同的对照者建立了传代淋巴细胞系,利用共聚焦显微镜评价VDAC在携带mtDNA A4263G突变的高血压患者细胞线粒体钙循环中的作用. 结果 与正常对照者淋巴细胞比较,突变细胞株线粒体内钙荧光强度及线粒体膜电势(Δψm)降低,加入苍术苷(线粒体通道蛋白开放剂)后正常者线粒体内钙荧光强度增加,而突变携带者没有明显改变,但两者Δψm均降低,加入环孢素A(CsA)后可以抑制苍术苷作用. 结论 线粒体VDAC功能异常导致mtDNA A4263G突变携带者细胞线粒体对钙通透性增加,Δψm降低,加入苍术苷进一步导致Δψm降低,加入CsA后可以抑制苍术苷作用.     

线粒体疾病及其对心血管系统的影响

1963年Nass和Nasa~([1])首次发现线粒体DNA(mitochonddal DNA,mtDNA).1981年Anderson等~([2])完成人类mtDNA测序,提出线粒体母系遗传的概念.1988年Holt等~([3])发现mtDNA缺失可导致线粒体肌病;同年Wallace等~([4])在Leber遗传性视神经病(LHON)患者中发现有mtDNA突变.至此,mtDNA突变及线粒体疾病受到广泛关注.     

线粒体DNA拷贝数与疾病

线粒体是人体中的重要细胞器,参与生物体的新陈代谢,线粒体DNA(mtDNA)拷贝数更是与糖尿病、心血管疾病、神经系统疾病和肿瘤等多种疾病密切相关。mtDNA突变常常导致多器官功能障碍,从而产生一系列的临床综合征。本文回顾近年来有关mtDNA拷贝数的文献,对mtDNA拷贝数及其调控机制、以及mtDNA与临床疾病的相关性等方面进行阐述。     

线粒体DNA变异与肥厚型心肌病

目的肥厚型心肌病（hypertrophiccardiomyopathy,HCM）是指未伴心室扩张的不明原因左室肥厚,以室间隔非对称性肥厚常见。HCM多由编码肌小节蛋白的基因突变所致;有少部分患者由线粒体DNA突变引起,呈母系遗传。线粒体DNA变异导致HCM的分子机制可能与引起的线粒体结构功能改变,造成氧化磷酸化缺陷,ATP合成不足。本文着重对与HCM相关的mtDNA变异位点作一综述。     

线粒体DNA突变与原发性高血压相关性的研究进展

原发性高血压（EH）作为心脑血管疾病的主要危险因素,严重危害人类健康。前期研究发现,EH在许多家系中都存在母系遗传特性;因此,线粒体DNA（mtDNA）突变成为了探索EH发病机制的新目标。目前已发现多个与EH相关的mtDNA突变位点,这些突变被证实能够导致线粒体氧化磷酸化缺陷,ATP 合成降低,反应活性氧（ROS）增加和诱导线粒体介导的细胞死亡。据此推断,对线粒体功能障碍的深入研究将有望诠释母系遗传性高血压的分子发病机制,而且EH相关的mtDNA突变将有望成为母系遗传性EH诊断的遗传学标志物。鉴于此,本文将对EH相关的mtDNA突变和功能机制进行全面综述。     

线粒体突变和心血管疾病等的关系研究进展

线粒体是使细胞能量生成的场所,线粒体基因组(mitochondrial DNA,mtDNA)编码参与线粒体呼吸链的13个蛋白亚基,2个rRNA和22个tRNA。mtDNA突变是引起多因素疾病和部分遗传疾病的重要原因之一,本文介绍线粒体基因组学、mtDNA疾病模型,mtDNA突变导致心血管疾病等的临床特征及其治疗和预防的研究进展。     

线粒体转运RNA基因突变与原发性高血压的相关研究

目的探究线粒体转运RNA(tRNA)基因突变与母系遗传原发性高血压(EH)的关联性。方法依据EH诊断和母系遗传判别标准,筛选2015年1月至2018年12月解放军总医院心血管内科收治的母系遗传EH患者17例(A组)、非母系遗传EH患者65例(B组)。选取同期来院进行健康体检的正常对照人群33名(C组)。对全线粒体DNA(mtDNA)进行测序并与线粒体基因文库MitoMap的修正剑桥序列进行比对,分析3组受试者线粒体tRNA基因突变率差异及其与母系遗传EH发生的关系。应用SPSS 19.0软件对数据进行分析。结果纳入人群中母系遗传EH占总EH 20.7%(17/82)。mtDNA序列对比分析发现,与C组(0.04%)比较,A组(0.28%,P=0.024)及B组(0.12%,P=0.046)患者线粒体tRNA基因总变异率明显升高,但A与B组间比较差异无统计学意义(P=0.076)。对A组患者进一步分析显示,仅有1个线粒体tRNA基因位点突变的先证者A06、A11和A13所在3个家系分别发生mtDNA A5823G、mtDNA T4386C与mtDNA C15910T突变,三个家系母系成员EH发病率分别为53.8%(7/13)、87.5%(7/8)和75.0%(9/12),发病率均较高,提示这3个位点突变可能与母系遗传EH发生密切关联。另外,mtDNA 5597缺失在A组(4例,23.5%)、B组(14例,21.5%)和C组(1例,3.0%)均出现。与C组比较,A组(P=0.002)与B组(P=0.002)患者mtDNA 5597缺失率均显著升高,但A组与B组间比较差异无统计学意义(P=0.127)。结论 mtDNA A5823G、mtDNA T4386C与mtDNA C15910T突变与母系遗传EH有较好的关联性,但mtDNA 5597缺失与母系遗传EH关系不大。     

线粒体DNA与心肌病的关系

人类线粒体DNA（mtDNA）是细胞内唯一存在于细胞核外的遗传物质,参与了转录、编码2个rRNA,22个tRNA及线粒体呼吸链中的13种蛋白多肽亚单位。人类某些疾病与线粒体DNA缺陷有关。心肌病是一类原因不明的伴随心脏功能障碍的心肌疾病。研究显示,线粒体产生的大量活性氧可导致mtDNA缺失或突变,tRNA基因保守序列突变影响肌肉收缩蛋白合成,造成氧化磷酸化缺陷,影响能量代谢。因此,线粒体的功能缺陷可能在心肌病的发生发展中起一定的作用。本文探讨了mtDNA突变与心肌病的关系,对mtDNA的深入研究将为临床寻找病因以及预防、诊断、治疗心肌病提供新思路。     

线粒体DNA突变与衰老及冠心病的关系

近年来,线粒体DNA(mtDNA)与衰老和某些心脏疾病的研究发展较快,mtDNA突变不仅可导致器官老化,而且可引发多种心血管疾病,其结果可能是mtDNA突变造成线粒体氧化磷酸化(OXPHOS)功能障碍、ATP产生不足所致.本文就此作一综述.     

线粒体基因突变与心血管疾病

线粒体(mitochondrion)为细胞的氧化中心和能源供应站.1963年Nass等[1]首次发现线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA),Anderson等[2]在1981年首次测定了人类mtDNA全长核苷酸序列(剑桥序列).     

动物线粒体DNA的研究现状及其在啮齿动物遗传结构中的应用

自 1963年Nass通过电镜证实了线粒体DNA的存在以来 ,国内外许多学者对一些高等动植物尤其是动物线粒体DNA(MitochondrialDNA ,mtDNA)进行了多种研究 ,在mtDNA的结构、组成、复制、转录、基因表达的调控及mtDNA突变与线粒体病之间的关系 ,以及在分子基础上揭示或重新认定了许多动物的起源和分类 ,为动物的亲缘关系的认定以及遗传育种提供了大量的背景资料[1～ 3 ] 。近年来 ,随着限制性片段长度多态性 (Restrictionfregmentlengthpolymorphism ,RFLP)分析技术及PCR技术的发展和应用 ,mtDNA进化遗传学研究成为目前分子进化研究领…     

线粒体脑肌病二例临床分析

线粒体脑肌病（Mitochondrial encephalomyopathy）是由于线粒体DNA（mtDNA）或核DNA突变引起线粒体功能异常、能量来源不足而导致的一组异质性疾病,属于母系遗传病。其中线粒体脑肌病伴高乳酸血症和卒中样发作（MELAS）是最常见的线粒体病之一,且具有高度临床变异性和遗传异质性。该病临床症状复杂,极易误诊。本研究报告我院收治的2例MELAS患者如下。     

线粒体DNA T16189C变异与老年人2型糖尿病的相关分析

研究表明，线粒体DNA （mtDNA）突变引起的代谢异常参与了2型糖尿病的发生，而胰岛素抵抗（IR）和胰岛素分泌不足是致病的关键因素。近年来，有学者相继报道了mtDNA控制区T16189C变异与2型糖尿病IR相关。     

阿尔茨海默病转线粒体DNA细胞系的病理特征及应用

研究表明Alzheimer病 (AD)患者多种组织中存在线粒体缺陷〔1 3〕,由于线粒体电子传递链 (ETC)是由核DNA与线粒体DNA共同编码的 ,所以当功能检测中发现ETC缺陷时 ,很难确定是核DNA缺陷所致 ,还是线粒体DNA缺陷所致 ,给深入研究这类疾病的发病机制造成障碍。为解决这一困扰 ,人们提出了转线粒体DNA的设想 ,将来自患者的线粒体DNA转入一种正常核DNA ,但缺乏线粒体DNA的细胞中 (ρ0 cells) ,形成转线粒体DNA细胞系 (mtDNA transferredcells) ,或称作细胞浆线粒体融合细胞(cytoplasmichybrids ,cybrids) 〔4〕,在这一细胞模型中…     

松花粉对衰老成纤维细胞线粒体DNA缺失突变的影响

目的 通过研究松花粉对衰老细胞线粒体(mt) DNA4977缺失突变的影响,探讨松花粉抗衰老的作用机制.方法 将细胞分为青年组、衰老细胞组、含240 mg/dl松花粉的衰老细胞处理组,三组细胞分别用不同培养基培养后,抽提线粒体DNA,进行PCR检测mtDNA4977缺失突变,以线粒体DNA中保守序列PCR扩增结果作为内参,比较各组mtDNA4977缺失突变在总线粒体DNA中的比例;同时对各组细胞进行β-半乳糖苷酶染色;并测定各组细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量.结果 松花粉能够改善衰老成纤维细胞的衰老变化,并能降低衰老细胞mtDNA4977的缺失突变,提高细胞SOD活性及降低其MDA含量(P＜0.05).结论 松花粉可能通过减轻成纤维细胞的氧化损伤,从而保护细胞mtDNA延缓成纤维细胞的衰老.     

线粒体DNA在非小细胞肺癌中的研究进展

<正>研究认为肿瘤的生物学特性不仅与细胞核内遗传物质有关,而且与细胞核外的遗传物质即线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)有关。越来越多的研究发现多种恶性肿瘤中存在mtDNA的变异,包括非小细胞肺癌(nonsmall cell lung cancer,NSCLC)、膀胱癌、乳腺癌、甲状腺癌、前列腺癌等,并且发现mtDNA的变异与这些肿瘤的发生发展密切相关。本文对mtDNA在非小细胞肺癌中的研究进展     

线粒体DNA与心血管疾病相关性的研究进展

线粒体作为人体的能量工厂,具有自己独立的基因组——线粒体DNA(mtDNA)。心肌作为一种高耗能组织,线粒体的正常供能至关重要,而mtDNA在一定程度上可以影响线粒体的供能。根据最新的全球疾病负担研究,心血管疾病(CVD)是导致死亡的主要原因,冠心病是CVD患者主要的死亡原因之一。mtDNA作为一种新发现的生物标志物,与冠心病的发生机制、潜在的治疗靶点、对预后的预测等具有很强的关联性,本文就mtDNA与冠心病相关性的研究进展进行综述。     

线粒体与细胞凋亡的研究进展

线粒体在细胞凋亡和肿瘤的发生及耐药中有重要作用,线粒体信号转导通路在细胞能量代谢、细胞凋亡启动中的特殊地位,及线粒体DNA(mtDNA)突变与肿瘤耐药的密切关系,使探讨线粒体与肿瘤细胞凋亡的相关性研究具有重要的理论和临床意义。     

线粒体DNA13731点突变与脊髓小脑性共济失调相关性研究

目的 探索线粒体DNA(mtDNA)突变位点与脊髓小脑性共济失调(SCA)的关系.方法 采用聚合酶链反应(PCR)对基因确诊的四个SCA家系10例患者及其亲属共34例与40例健康对照的线粒体ND5基因片段进行扩增,扩增产物进行单链构象多态性分析(SSCP),对SSCP出现异常的样本进行相应mtDNA片段测序.结果 在一家系的1名确诊患者及1名症状前患者检测到mtDNA13731(T>C)点突变.结论 脊髓小脑性共济失调的发生、发展可能与mtDNA突变有关.