间接免疫荧光法测定人乳头瘤病毒在尖锐湿疣诊断中的应用

目的 探讨间接免疫荧光法(IIF)测定尖锐湿疣(CA)疣体表面细胞中人类乳头瘤病毒的敏感性和特异性,及其在尖锐湿疣早期诊断中应用的可行性。方法 收集CA标本52例,对照组50例,分别用刮片法(刮取疣体表面细胞法)及涂片法(切除疣体涂片)取材,用间接免疫荧光法检测。所有标本均进行醋酸白试验、组织病理诊断和PCR法检测。结果 刮片法取材CA组和对照组阳性率分别为51.92%和0。涂片法取材分别为76.92%和0。提示在CA的检测中用刮片法取材的敏感性和特异性分别为51.92%和100%;涂片法的敏感性和特异性分别为76.92%和100%。刮片法的敏感性低于涂片法,差异有统计学意义(P<0.01)。PCR法检测示CA中HPV-6阳性率53.85%和HPV-11型为42.31%。结论 用间接免疫荧光法检测HPV时用表面刮取细胞法取材的敏感性不高,但特异性强,可以作为诊断CA的辅助手段,可提高人类乳头瘤病毒的早期检出率。PCR法检测提示HPV-6和11型为最常见。     

间接免疫荧光技术检测尖锐湿疣中的人乳头瘤病毒

目的:间接免疫荧光技术在临床与基础研究中的应用较为广泛,但却极少有人用于尖锐湿疣的检测,我们旨在验证该方法是否可行,并将之与PCR方法相比较,以了解其准确性和敏感性。材料和方法:60例临床确诊的尖锐湿疣疣体标本均取自性病门诊。采取疣体印片,用小鼠抗人的HPV6型作为Ⅰ抗,FTTC标记的山羊抗鼠IgG作为Ⅱ抗,在荧光显微镜下检查。剩余标本消化后做PCR,证实有无人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)的DNA,并用RFLP方法进行分型。结果:在34例尖锐湿疣标本中检测到特异性荧光,阳性率为56.67%,而用PCR方法共检测到58例阳性,阳性率为96.67%。用X~2检验比较二者的阳性率,P<0.01。主要感染类型为6和11型,占98.28%。结论:间接免疫荧光技术针对的是乳头瘤HPV的衣壳蛋白,能检测有完整衣壳的成熟HPV,操作简便,有望用于宫颈涂片的常规检查,以筛查带HPV者,对预防宫颈癌提供帮助。但敏感性不及PCR技术。     

3种取材法检测尖锐湿疣皮损中人乳头瘤病毒及亚型分布的对比研究

目的分析乌鲁木齐地区尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒(HPV)基因型分布特征以及3种取材方法检测HPV感染的对比研究。方法对乌鲁木齐地区2016年12月-2018年6月在本院皮肤科门诊就诊的277例尖锐湿疣患者采用3种不同方法对皮损随机进行取样,用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测HPV,并对其进行统计分析。结果 277例患者的标本中HPV检测阳性者219例,阳性率为79.06%。阳性率居前4位的HPV亚型分别为HPV6、11、16、42型,维汉以及男女患者之间HPV阳性检出率差异均无统计学意义,HPV感染主要是单一感染。HPV检测结果各年龄段之间的阳性率以20~29岁组阳性率最高,其次为30~39岁、40~49岁。用刮取分泌物法、疣体涂擦法和微创取疣体新鲜组织法进行取样,微创法对HPV检出率最高,刮取法与涂擦法对HPV检出率相比差异无统计学意义。结论乌鲁木齐地区尖锐湿疣患者HPV感染以低危型6和11型为主,好发于20~29年龄段,对不同的患者人群,针对自身情况选择最优的取材方法,可更大程度的提高诊断的准确性。     

咽拭子擦拭检测皮肤疣人乳头瘤病毒分型的敏感性研究

目的研究咽拭子擦拭皮肤疣表面检测人乳头瘤病毒(HPV)分型的敏感性,改进皮肤疣HPV分型检测的取材方法。方法招募50例皮肤疣患者,用被细胞保存液浸湿的咽拭子采样头用力擦拭靶疣表面10次,再用外科手术刀片刮除同一疣体的部分疣体组织,两组方法取材的样本均低温保存;采用聚合酶链反应(PCR)、基因测序和TA克隆技术检测两组样本的HPV型别,通过与刀片刮除法的HPV型检测结果比较,计算咽拭子擦拭法的敏感性。结果刀片刮除、咽拭子擦拭组的HPV型检出率分别为100%(50/50)和92%(46/50),咽拭子擦拭法的敏感性为92%。结论咽拭子擦拭法可作为检测皮肤疣HPV型的常规取材方法。     

抗白念珠菌芽管单抗MAb03.2C1-C2特异性及临床初步应用研究

目的分析抗白念珠菌芽管胞壁外膜抗原单克隆抗体MAb03.2C1-C2的特异性及其应用于实验室检测的可行性。方法用临床分离白念珠菌、致病非白念的念珠菌的孢子、菌丝及常见的酵母菌、细菌做抗原包被,用间接免疫荧光(IIF)方法,对单抗特异性进行分析。取临床口腔念珠菌病患者的真菌涂片菌丝阳性的标本,用IIF方法检测。结果MAb03.2C1-C2仅与白念珠菌芽管或菌丝特异性地结合,与白念珠菌的孢子不发生结合。13种非白念的念珠菌孢子和菌丝、新型隐球菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌均不能与该单抗相结合。59例口腔念珠菌病真菌涂片IIF试验阳性的标本最终鉴定为白念珠菌(100%)。结论MAb03.2C1-C2对白念珠菌芽管有高度的特异性,并可用于口腔念珠菌病真菌涂片中白念珠菌的早期诊断。     

微创活检术在尖锐湿疣诊断中的应用

目的分析微创活检术在尖锐湿疣诊断中的应用结果。方法应用疣体涂擦法和微创法采集疣体组织,用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术对采集标本进行HPV-DNA分型检测,比较两种取材方法的检测结果。结果2005年5月—2006年12月到我科STD门诊就诊,泌尿生殖器有疣体存在总计499例,其中男246例,女253例,年龄4～75岁,平均年龄33.9岁。2005年检测病例均采用涂擦取材法,HPV检出阳性率为76.7%(89/116),2006年病例均采用微创取材法,HPV检出阳性率为93.7%(359/383),两种方法HPV阳性率对比差别有统计学意义(χ2=26.25,P<0.001)。结论疣体微创活检术可提高HPV检测率,指导临床治疗;与病理学检查相比患者损伤小、简单、易行、省时,是一种快速、灵敏、特异、节省费用的检测方法,值得临床推广应用。     

贫民区性传播疾病诊所见到的人类乳头瘤病毒感染

1987年1～6月,作者在美国巴尔的摩城性传播疾病(STD)诊所用临床上见到生殖器疣、Pap涂片细胞病理学检查、宫颈刮片用Southern杂交法分析生殖道HPV基因组序列等3种方法观察了116例(年龄16～43岁,中位数22岁)妇女生殖道人类乳头瘤病毒(HPV)的感染率。结果:3种方法检测HPV感染率:在观察的116例患者中,临床上见到疣者20例(17%),作细胞病理学检查者103例,阳性42例(41%),作脱落细胞的DNA杂交     

自然消退尖锐湿疣的免疫组化研究

为探讨尖锐湿疣(CA)自然消退的免疫学机制,本文对4例自然消退及6例持续存在的肛周CA患者进行了细胞免疫组化研究.对患者皮损取材后快速冰冻切片,采用间接免疫过氧化物酶法,以系列单克隆抗体检测并计数疣间质单位而积内免疫活性细胞.结果:仅在1例持续存在CA疣间质中检测出B淋巴细胞.所有疣间质中均有T淋巴细胞,但其数目在疣与疣之间有较大差异.T淋巴细胞中以辅助T细胞和诱导T细胞占多数,抑制T细胞和杀伤T细胞仅偶见于疣表皮中,T′指数(指3个视野中IL-2受体阳性T细胞平均数和相同视野中总T细胞平均数之比)在自然消退CA与持续存在CA     

细胞涂片直接免疫荧光检查在天疱疮诊断上的应用

本文介绍了疱底细胞涂片直接免疫荧光检查的方法和75例水疱性皮肤病检查的结果.20例天疱疮涂片细胞表面可见特异性的荧光环,55例其它大疱性皮肤病的涂片均未见这种荧光.阐明了天疱疮细胞涂片直接免疫荧光阳性的机理,讨论了该法的临床应用价值,表明在不能作皮损活检冰冻切片直接免疫荧光检查时,该法是确诊天疱疮的一种简使有效的方法.     

干扰素α－2b对尖锐湿疣患者皮损表皮细胞凋亡和增殖的影响

为了探讨干扰素 (INF)对尖锐湿疣患者皮损细胞凋亡与增殖的影响,我们采用原位特异性 DNA片段标记法 (TUNEL)观察了细胞凋亡,并用免疫组化法检测了与增殖有关的 Ki－ 67基因产物的表达。 一、材料和方法 1.研究对象及治疗方法：尖锐湿疣患者 18例,男 5例,女 13例;年龄 21～ 60岁;病程 15～ 90 d。治疗前取疣体活检。于疣体下局部注射 INFα－ 2b 300万 U,日 1次,共 10次。治疗结束后,立即取注射部位的疣体为疗后对照标本。对照标本 5份,为外科手术去除的生殖器部位正常皮肤。 2.实验方法： TUNEL原位末端标记试剂盒 (I…