睡眠剥夺对大鼠海马区c-fos和IL-1β表达影响

研究显示,失眠对中枢神经系统的毒性作用包括思维紊乱、反应迟钝、注意力分散、定向障碍、学习记忆受损等,睡眠剥夺(sleep deprivation,SD)24 h使人的认知能力下降30%~40%,持续48 h,认知能力下降达60%~70%^〔1-2〕。     

IEX-1和NT在卵巢癌组织中的表达及其意义

目的:检测卵巢癌组织中即刻早期反应基因X-1(IEX-1)和硝基酪氨酸(Nitro tyrosine,NT)的表达,探讨IEX-1与NT在卵巢癌发生发展中的作用。方法:选取郑州大学附属医院妇产科2007年1月～2008年10月104例卵巢肿瘤蜡块,其中良性卵巢肿瘤20例、交界性瘤24例、恶性组织60例,采用免疫组织化学方法检测卵巢组织中IEX-1与NT的表达,并分析两者的相关性。结果:①IEX-1在卵巢癌组织中的表达率38.3%,明显低于良性及交界性卵巢肿瘤(P<0.01);NT在卵巢癌组织中的表达率76.0%,明显高于良性及交界性卵巢肿瘤(P<0.001);②卵巢癌组织中IEX-1和NT蛋白的表达均与FIGO分期、组织学分级相关(P<0.05),与患者年龄、肿瘤的组织学类型无关(P>0.05);③IEX-1蛋白的阳性表达和NT蛋白的阳性表达在卵巢癌组织中的表达呈负相关(r=-0.271,P<0.05)。结论:IEX-1和NT蛋白的表达变化可能与卵巢癌的发生发展有关。     

应激与神经细胞即刻早期基因的表达

应激是机体对环境变化的反应。应激因素广泛存在。应激的研究对预防医学和军事医学都有重要意义，应激过程具有刺激、评价或处理、反应三个要素。应激状态时神经细胞即刻早期基因（ＩＥＧ）有明显表达，其主要表现是特定部位尤其是视丘下部ｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ和Ｆｏｓ蛋白的改变。ｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ的改变不仅具有地区性，而且还具有时相性。反复刺激时具有习惯性和条件性。由于ＩＥＧ的表达产物可以启动某些靶基因，而视丘下部是促肾上腺皮质激素释放因子ＣＲＦ的产生部位，因此应激状态神经细胞即刻早期基因的表达是观察神经细胞活动的一个窗口，引起了人们广泛的关注。     

铅对大鼠不同脑区IEG表达的影响

为了研究即刻早期基因（ＩＥＧ）在铅的神经毒性机制中的作用,本实验应用ＦＯＳ和ＪＵＮ蛋白免疫组织化学方法对腹腔注射染铅１３ｍｇ／ｋｇ及１３０ｍｇ／ｋｇ的大鼠不同脑区ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ表达水平进行了观察。图像分析及统计检验结果表明,急性染铅２小时后,大鼠脑组织皮层、海马ＣＡ３区及小脑的ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ表达的阳性面积比［Ａａ（％）］、平均灰度或阳性细胞个数等参数与对照组相比有显著性差异（Ｐ＜０．０５）,即染铅组ＩＥＧ表达高于对照组。这一结果提示第三信使ＩＥＧ作为转录调控因子可能参与了铅对学习记忆损害的神经毒性过程。这对深入阐明铅神经毒性的分子机制提供了一定的实验依据。     

c-fos基因在长期砷暴露大鼠肾小管上皮细胞的表达

目的研究凋亡调控基因c-fos对亚慢性砷中毒大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响,探讨凋亡机制在砷中毒肾小管细胞损伤中的意义。方法 SD大鼠随机分为高、低砷剂量组和对照组,砷染毒组自由饮用含砷水[高砷组:50mg/L,相当于10mg/(kg·d);低砷组:2mg/L,相当于0.4mg/(kg·d)],对照组饮蒸馏水。连续染砷16周后,以光镜观察肾小管上皮细胞形态结构变化并以免疫组化SABC方法检测肾小管上皮细胞c-fos的表达,并进行图像分析、计数。结果各砷染毒组肾小管上皮细胞c-fos阳性细胞数与对照组比较均增多,灰度值均降低,高剂量组肾小管上皮细胞c-fos阳性细胞数与低剂量组比较均增多,灰度值均降低,差异均有统计学意义(P0.01)。光镜下砷染毒组肾小管细胞可见空泡样变,核固缩,刷状缘不整齐,管腔狭小等形态学损伤改变。结论砷能致大鼠肾小管上皮细胞组织病理损害,c-fos基因的高表达可能参与了砷中毒肾小管上皮细胞凋亡的调控。     

MTA1基因在宫颈癌组织中的表达及其临床意义

目的 MTA1基因是近年来发现的与肿瘤转移浸润有关的基因,该文探讨该基因在宫颈癌组织中的表达及其临床意义.方法 采用逆转录-聚合酶链反应方法检测53例新鲜宫颈标本组织中MTA1 mRNA的表达水平,进行定量分析并与临床病理资料比较.结果 正常宫颈MTA1 mRNA表达量为0.456±0.430、宫颈上皮内瘤变0.716±0.146,宫颈癌1.217±0.416.晚期及有淋巴结转移的宫颈癌MTA1 mRNA表达量增加,差异有显著意义(χ2=7.9562,P=0.0187;t =-2.89,P=0.0409),与肿瘤分化程度无关(χ2=1.0358,P=0.5958 ).结论 MTA1基因表达与宫颈癌临床分期及转移有关,可能预示宫颈癌的浸润转移的分子指标.     

16SrRNA基因扩增在新生儿败血症诊断中的研究

目的:探讨建立新生儿败血症的分子生物学诊断方法。方法:分析16S rRNA核苷酸序列,设计引物及探针,选取临床常见菌株进行PCR扩增及检测;对疑为败血症的317例新生患儿分别行PCR和血培养检测。结果:PCR检测阳性率明显高于血培养(P<0.05)。以血培养为参照,PCR检测的敏感性高,特异性好。结论:建立了新生儿败血症的分子生物学诊断方法,满足临床快速、准确的要求,具有较大的推广及应用价值。     

KLK11基因在卵巢癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨KLK 11基因mRNA及其蛋白在卵巢癌组织中的表达及其临床意义。方法:采用半定量RT-PCR和免疫组化SP法检测87例卵巢癌组织KLK 11 mRNA及蛋白的表达。结果:KLK 11基因mRNA及蛋白表达与卵巢癌临床病理特征关系密切,晚期卵巢癌(Ⅲ、Ⅳ)中KLK 11基因mRNA和蛋白表达明显高于早期卵巢癌(Ⅰ、Ⅱ)(P<0.05);中低分化卵巢癌中KLK 11基因mRNA和蛋白表达明显高于高分化卵巢癌(P<0.05)。在卵巢癌不同组织学类型中KLK11基因mRNA表达水平无明显差异(P>0.05)。结论:KLK 11基因表达可能与卵巢癌的恶性度有关,可作为一项检测卵巢癌预后的指标。     

RECK基因在子宫内膜异位症中的表达及临床意义

目的:探讨RECK基因在子宫内膜异位症发病机制中的作用及意义。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术在40例异位内膜,24例在位内膜,20例正常内膜组织中检测RECK基因的表达。结果:RECK基因在正常内膜中表达量高于在位内膜,在位内膜的表达量高于异位内膜,增生期表达量低于分泌期,且随着临床分期的进展而表达量减少(P0.05)。结论:RECK基因与子宫内膜异位症的发生发展密切相关。     

类毒素-A激活PC12细胞时胞内即刻早期基因的表达

目的探讨即刻早期基因在类毒素A激活PC12细胞烟碱受体过程中的调控作用。方法运用逆转录聚合酶链反应方法测定类毒素A激活PC12细胞烟碱受体时胞内cfos,cjun,NGFIA和NGFIB四个即刻早期基因的mRNA基因表达情况。结果当10-9、10-8、10-7molL类毒素A激活PC12细胞烟碱受体1小时,或10-7molL类毒素A激活PC12细胞30、60、120分钟时,细胞内cfos和NGFIAmRNA基因表达均显著高于对照组(P<005),是对照组的2～6倍,且cfos基因表达呈剂量反应和时间效应关系。而此间cjun和NGFIB基因表达与对照比较没有明显变化。结论cfos和NGFIA可能参与调控类毒素A激活PC12细胞烟碱受体的作用。     

乐果对小鼠骨骼肌细胞毒性作用及凋亡的诱导

目的 研究乐果对小鼠骨胳肌的细胞毒性和凋亡的诱导效应，探讨急性有机磷农药中毒中间型综合征（IMs）肌无力发生的细胞学基础。方法以35，350，3500μmol／L乐果浓度接触3h及350μmol／L乐果浓度接触3，9，24h，观察乐果对小鼠骨胳肌细胞形态、细胞活力以及对细胞凋亡率的影响。结果乐果具有明显的细胞毒性．使乳酸脱氢酶（LDH）漏出增加和细胞存活率明显下降，并具有明显的剂量依赖关系（r=0．684，P〈0．01）和时间依赖关系（r=0．955，P〈0．01）；乐果处理能诱导明显的骨路肌细胞凋亡形态学变化及凋亡率增加。结论乐果对离体骨胳肌细胞具有明显细胞毒性，并诱导骨胳肌细胞的凋亡，这可能在IMS的发病过程中发生作用。     

乐果对大鼠大脑分区多巴胺神经递质的影响

目的观察乐果染毒对大鼠大脑分区单胺类神经递质多巴胺(DA)及其代谢物(DOPAC)浓度变化的影响。方法104只雄性SD大鼠随机分为对照组(生理盐水)和乐果染毒低(38.9mg/kg)、中(83.7mg/kg)、高(180.0mg/kg)3个剂量组,腹腔一次注射染毒,给药后0.5、2、8和24h断头处死并分离脑组织(大脑皮层、纹状体、海马、脑干和小脑5部分)。用正丁醇、正庚烷、高氯酸、三氯甲烷处理脑组织样品,用高效液相色谱电化学检测法检测。结果不同时程的染毒组(低、中、高剂量组)大脑DA浓度及其代谢物DOPAC与对照组相比差异均有显著性(P<0.05)。DA及其代谢物DOPAC在纹状体分别增加了28%~122%、89%~538%;DA在其它分区变化差异没有显著性。DOPAC在大脑皮层有的剂量和时程增加了50%~72%、有的剂量和时程减少了31%~51%;在海马差异没有显著性;在脑干有的剂量和时程增加了4%~102%、有的剂量和时程减少了10%~16%;在小脑有的剂量和时程增加了6%~39%、有的剂量和时程减少了6%~23%。DA和DOPAC浓度在不同时程的低、中、高剂量组间差异均有显著性(P<0.05)。结论DA和DOPAC浓度有随染毒剂量和时程的增加而增加的趋势,存在剂量-效应和时程-效应关系。因此乐果的中毒存在非胆碱能机制,多巴胺类能机制。     

铅对大鼠星型胶质细胞c-Fos和c-Jun蛋白表达影响

目的探讨不同时间点低浓度铅暴露对体外原代培养的星型胶质细胞中即早基因c-Fos和c-Jun蛋白表达的影响。方法出生4～8 d Wistar大鼠脑星型胶质细胞原代培养,1.0μmol/L醋酸铅暴露不同时间后分别收集样品,应用蛋白免疫印迹法测定样品c-Fos和c-Jun蛋白表达的变化。结果 1.0μmol/L醋酸铅处理后,星型胶质细胞中c-Fos和c-Jun蛋白表达均明显降低,与对照组比较,染铅15 min时蛋白表达降低有统计学意义(P<0.05),分别比对照降低33.4%和17.3%;至染铅180 min时c-Fos和c-Jun蛋白表达降至最低,均低于对照的1/2(P<0.01)。结论低浓度染铅可使原代培养的星型胶质细胞中c-Fos和c-Jun蛋白表达持续降低,这可能与铅致大鼠学习记忆功能损害有关。     

铅对小鼠海马c-jun表达及学习记忆功能影响

目的　观察铅对小鼠学习记忆功能及海马区c jun表达的影响。 方法　 5～ 6周龄小白鼠交配后 ,通过饮水饲以不同浓度醋酸铅 2 4,4 8,9 6mmol/L。小鼠子代自胚胎期始即暴露于醋酸铅。幼鼠出生后 ,先通过哺乳接触铅 ,断乳后则自行饮用与母鼠饮用浓度相同的含铅水。 6周后用跳台学习试验测试小鼠学习记忆能力 ;最后处死小鼠 ,用RT PCR法观察各组小鼠海马区c junmRNA的表达状况。 结果　 3个染铅组小鼠跳台学习成绩显著低于对照组 (P <0 0 1 ) ;3个染铅组小鼠c junmRNA水平均明显降低 ,并具有剂量效应关系。 结论　c jun基因表达水平的下降可能是铅致小鼠学习记忆功能损害的分子机制之一。     

膳食脂肪含量对乐果致雄性大鼠生殖毒性的影响

为观察膳食脂肪含量对乐果致雄性大鼠生殖毒性的影响 ,将 32只断乳SD大鼠随机分成三个染毒组和一个对照组 ,染毒组灌喂乐果 12 5 0mg (kg·d) ,并分别饲以高脂、中脂和低脂饲料 ;对照组每天灌喂生理盐水 ,同时饲以中脂饲料。各组均连续灌喂 6 0天。结果发现 :(1)高脂或低脂饲料可明显减轻乐果对血清睾酮 (To)和间质细胞刺激素 (LH)水平的影响 ,而对血清卵泡刺激素 (FSH)水平的变化没有明显作用 ;(2 )低脂饲料可明显减轻乐果对大鼠睾丸酸性磷酸酶 (ACP)、乳酸脱氢酶 (LDH)活性的抑制 ,而对睾丸碱性磷酸酶(ALP)活性降低没有明显影响 ;(3)高脂或低脂饲料可减轻乐果对睾丸组织的损伤。以上结果提示在饲料中添加或减少脂肪含量可能会在相同或不同环节上不同程度地减轻乐果对雄性大鼠生殖系统的损害。     

多药耐药基因MDR1在大肠癌的表达及意义

目的探讨多药耐药基因（MDR1基因）在大肠癌组织中的表达及其与临床病理的关系。方法应用RT—PCR方法检测了93例手术切除大肠癌组织中的MDR1 mRNA．结果MDR1 mRNA的阳性率为37.63％，MDR1基因的表达与年龄、性别、肿瘤大小、组织学类型、淋巴结转移及Dukes分期等无关。结论化疗前大肠癌组织中MDR1基因即存在较高的表达率，且独立于病理形态学之外。提示化疗前要区别对待，对MDR1基因表达阳性者应合理选择化疗。     

铅对大鼠海马C-fos基因表达及学习记忆的影响

目的　观察和探讨铅对大鼠海马C -fos基因表达及学习记忆的影响。方法　选用健康大鼠 30只 ,每天给醋酸铅灌胃 1次 ,高剂量组 0 2 g/ (kg·d) ,低剂量组 0 1g/ (kg·d) ,连续染毒 3个月后 ,用Y型迷宫试验测试大鼠学习记忆能力 ;最后处死大鼠 ,用原位杂交法观察各组大鼠海马C -fosmRNA的表达状况。结果　 ( 1) 2个染铅组大鼠主被动回避反应正确次数显著低于对照组 (P <0 0 1) ;( 2 )光镜下观察高铅组海马切片着色很浅 ,C -fosmRNA阳性细胞很少 ;低铅组着色较浅 ,可见少数C -fosmRNA阳性细胞 ;对照组着色较深 ,C -fos阳性细胞密集 ,阳性锥体细胞呈多角形 ,胞体较大 ,胞浆染色呈不规则的环形。结论　C -fos基因表达水平下降可能是亚慢性铅染毒致大鼠学习记忆障碍的重要环节 ,是铅对学习记忆损害的分子机制之一。     

川芎嗪预处理对心脏手术患者心肌组织热休克蛋白72基因表达的影响

目的研究川芎嗪预处理对体外循环主动脉阻断(ACC)前后非发绀型先天性心脏病矫治术患者心肌组织热休克蛋白72基因表达的影响,并探讨川芎嗪预处理的心肌保护机制。方法28例非发绀型先天性心脏病患者,随机分为对照组和川芎嗪组,每组14例。川芎嗪组预处理麻醉诱导后经颈内静脉滴入川芎嗪3 mg/kg,30 min内滴完,转流中追加1 mg/kg于氧合器中,对照组于上述时间给予等量生理盐水。两组分别于转流前、主动脉开放后30 min和术后24 h测定外周血心肌酶的变化。结果川芎嗪组心肌组织热休克蛋白72基因的表达量在ACC后明显高于对照组(P<0.05)。川芎嗪组心肌损伤指标明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论川芎嗪预处理可上调心肌组织热休克蛋白72基因表达,产生一定程度的心肌保护作用,表现为心肌酶漏出减少。     

乙基亚硝基脲对人白血病细胞HPRT基因的影响

目的 探讨乙基亚硝基脲(ENU）诱导人次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖基转移酶(HPRT)基因突变的分子图谱和发生机制。方法 采用单细胞克隆培养、双向筛选计数、多重聚合酶链反应扩增和电泳分析等方法。结果 随着ENU剂量的增加,细胞接种存活率非常显著下降(100～200μg/ml剂量组)、突变频率显著升高（12．5～200．0μg/ml剂量组)。自发突变没有全部基因外显子缺失型,只有7．7％检测出单个外显子缺失;而ENU诱发突变中却有79．7％显示缺失改变,其中缺失突变可以发生于：HPRT基因的每个外显子,且诱发突变中大多数是多个外显子连锁缺失(88．1％)。结论 ENU诱发：HPRT基因突变图谱与自发突变完全不同,易诱发较大遗传结构改变,提示其具有较强的致突变作用。