缺血预处理对肝脏缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

在大鼠肝脏缺血再灌注模型基础上建立稳定的缺血预处理模型,观察其保护作用,结果发现预处理与缺血再灌注组相比比清肝酶（ＡＬＴ,ＡＳＴ）,透明质酸水平及肝组织局部ＭＤＡ含量均低,而组织ＡＴＰ含量及能荷值均高,形态学损伤改变轻;同时发现预处理组织腺苷含量明显高于缺血再灌注组。实验表明缺血预处理能有效减轻肝脏的缺血再灌注损伤,腺苷分子参与了这一保护机制。     

肝缺血再灌注对肠道损伤及细菌移位的研究进展

肝缺血再灌注损伤除了对肝脏损伤外,还可因肠组织缺血缺氧、再灌注损伤、内毒素血症、免疫屏障受损等引起肠黏膜上皮细胞脱落、坏死,增加小肠通透性,促发肠道细菌和内毒素移位,诱发MODS,并且肝脏损伤和肠道损伤相互形成恶性循环。因此,在肝缺血再灌注过程中,有效的保护肠黏膜屏障,防止细菌和内毒素移位,将减少肝切除、肝移植等手术的并发症,提高其存活率。     

肠黏膜屏障缺血/再灌注损伤研究进展

肠黏膜缺血／再灌注损伤是肠黏膜的主要损伤因素之一。各种原因引起肠道的缺血缺氧,导致肠黏膜的缺血／再灌注损伤,影响肠黏膜屏障功能。与肠黏膜缺血／再灌注损伤有关的主要因素包括：氧自由基、细胞因子、核转录因子-kB、细胞凋亡等。本文就肠黏膜屏障缺血／再灌注损伤相关因素的研究进展予以综述。     

亚低温对肝缺血再灌注损伤的保护作用

目的　探讨亚低温对肝缺血再灌注损伤的保护作用机制。方法　将 18只犬随机分为 3组 :非缺血对照组 (n =6 )、缺血再灌注组 (n =6 )和亚低温处理组 (肝周充填碎冰块造成肝脏亚低温 ,n =6 )。对各组肝上下腔静脉血进行谷丙转氨酶 (ALT)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶 (LHD )以及丙二醛 (MDA)和超氧化物歧化酶 (SOD)、过氧化氢酶 (CAT)、谷胱甘肽过氧化酶 (GSH PX)活性及总抗氧化 (TAX )能力测定。结果　全肝缺血再灌注后ALT ,AST ,LDH和MDA含量明显上升 (P <0 .0 1) ,SOD ,CAT ,GSH PX活性及TAX能力明显下降 (P <0 .0 1) ;而亚低温处理组与缺血再灌注组比较 ,ALT ,AST ,LDH和MDA含量明显下降 (P <0 .0 1) ,SOD ,CAT ,GSH PX活性及TAX能力明显上升 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 )。结论　亚低温能增强肝组织自身抗氧化能力 ,减轻肝缺血再灌注后氧自由基对肝脏的损伤。     

缺血预处理对肝大部切除术中残肝缺血再灌注损伤的保护作用

目的 观察缺血预处理对大鼠肝大部切除术中残肝缺血再灌注损伤的保护作用。方法 健康的雌性SD大鼠随机分为3组：即单纯肝叶切除组（PH组）、缺血再灌注损伤状态下肝叶切除组（IR组）及缺血预处理组（IP组）。分别取术前及术后0．5、6、12、24、48h等时间点，应用全自动生化分析仪检测血清ALT、AST含量，通过免疫组织化学法检测残肝组织中Ki67和Cyclin D1表达变化，采用放免法检测血清中透明质酸（HA）含量。结果 IP组术后24h内各检测点的AST和ALT值明显高于PH组和IR组（P〈0．05）。术后早期IP组大鼠的血清HA表达量明显高于PH组和IR组（P〈0．05）。PH组大鼠肝细胞Ki67和Cyclin D1表达在术后24h达到峰值，并且明显高于IR组和IP组大鼠（P〈0．05）。其中IP组大鼠术后Ki67和Cyclin D1表达量降低地最显著。结论 在合并肝组织大部缺失时，缺血预处理对残留肝组织的缺血再灌注损伤的保护效应消失，它损害了大鼠残肝再生功能。     

缺血后处理对小肠缺血再灌注损伤的保护作用

目的：观察缺血后处理减轻肠缺血再灌注引起的小肠及远隔脏器损伤的效果,并探讨其机制。方法将家兔48只随机分为假手术组、缺血再灌注组、缺血后处理组,每组16只。再灌注2 h 后采集各组动脉血、静脉血及部分肠道组织、肝、肺组织,测动脉血中 TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10水平,测静脉血中 ALT、AST、BUN,Cr、LDH、CK-MB 活性,测内毒素水平,测定血清及小肠、肝、肺组织 MDA、MPO、CAT、SOD 水平,HE 染色,观察肠黏膜损伤情况,细菌培养观察细菌易位率。结果与缺血再灌注组比较,缺血后处理组血清及小肠、肝、肺组织中 MDA、MPO 水平明显降低, SOD、CAT 水平明显升高,静脉血 ALT、AST、LDH、CK-MB、BUN 下降;动脉血中 TNF-α、IL-1β、IL-6、内毒素降低,IL-10水平升高,肠黏膜损伤评分明显降低。结论缺血后处理可以减轻肠黏膜损伤,减少内毒素易位,促进抗炎因子的激活,抑制炎性介质的过度释放,提升小肠组织及远隔脏器的氧自由基的抗氧化能力,减轻小肠及远隔脏器组织损伤。     

缺血预处理对肝脏缺血再灌注损伤中内毒素血症的影响

目的 探讨肠源性内毒素在肝脏缺血再灌注损伤中的作用以及缺血预处理对肠源性内毒素的影响。方法 将３０只ＷＥｉｓｔａｒ大鼠随机分成３组（每组１０只）,缺血再灌注组（ｉｓｃｈｅｍｉａ／ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ,Ｉ／Ｒ）,缺血预处理组（ｉｓｃｈｅｍｉｃ ｐｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇ,ＩＰＣ）和正常对照组。用自动生化仪测定各组丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ０和乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）;用鲎试剂法测定血浆内毒素;用免疫组织     

亚低温缺血预处理对肝缺血再灌注损伤的保护作用

我们在缺血预处理 (ＩＰ)和亚低温研究[1] 的基础上 ,在犬全肝缺血再灌注 (Ｉ/Ｒ)损伤模型上观察亚低温对ＩＰ的增强效应 ,并探讨亚低温缺血预处理 (ＭＨＩＰ)对肝缺血再灌注损伤保护作用的可能机制。一、材料与方法1.动物分组及实验方法 :健康成年杂种犬 2 4条 ,雌雄不拘 ,体重 9.5～ 11.5ｋｇ ,随机分为 4组 (各 4条犬 )。Ａ组 (对照 ) :开腹后即抽取肝上下腔静脉血检测并取右肝组织标本。Ｂ组 (Ｉ/Ｒ) :游离第1肝门 ,以止血带绕扎肝十二指肠韧带 ,阻断肝固有动脉和门静脉入肝血流造成肝缺血 ,松开止血带为肝脏再灌注 ,肝脏持续缺血 60ｍ…     

亚低温对兔肝缺血再灌注损伤的保护作用

目的：研究应用冰毯导致亚低温对肝缺血再灌注损伤的保护作用。方法：30只兔随机均分为3组：常温组、亚低温组和对照组。组织气体分析仪持续测定兔肝组织氧压（PtiO2）；光镜及电镜观察肝脏病理改变；全自动生化仪测定血清丙氨酸氨基转氨酶（ALT）。结果：亚低温组与常温组兔在肝缺血30min、再灌注30min和60min期间的PtiO2值、血清ALT值差异均有显著性（P＜0．05）。亚低温组较常温组肝缺血再灌注的理性损伤明显改善。结果：常温下入肝血流阻断可以导致肝缺血再灌注损伤。亚低温能显著减轻肝缺血再灌注后肝细胞功能障碍和病理损害程度，其作用机制与亚低湿能降低缺血期肝细胞的耗氧量、减轻再灌注后的微循环障碍和防治肝细胞线粒体的损伤有关。     

常温肝缺血再灌注损伤的实验研究

目的：探讨肝缺血再灌注损伤的作用机制。方法：采用大鼠部分肝缺血再灌注模型，将健康雄性SD大鼠24只随机分为三组：A组（手术对照），B组（肝缺血90min），C组（肝缺血90min再灌注120min）。观察每一动物肝组织病理切片；分别检测血浆谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、乳酸脱氢酶（LDH）、肿瘤坏死因子（TNF－α）、白介素1β（IL-1β）浓度；测定肝组织中髓过氧化物酶（MPO）含量。结果：肝缺血再灌注后，光镜下大鼠肝组织有明显的肝血窦和中央静脉瘀血，内皮细胞及肝细胞普遍水肿变性；C组肝细胞坏死较B组明显；血浆中肝功能酶学指标显著升高，（B、C组与A组比及C组比B组P均＜0．01）；肝组织中MPO活性升高，以再灌注120min组为著（C组比A组P＜0．01）；与血浆中TNF－α、IL-1β的变化趋势相同（TNF－α：C组比A组P＜0．05，IL－1β：B、C组比A组P均＜0．01）。结论：肝脏微循环障碍是肝缺血再灌注损伤的病理基础；TNF－α、IL-1β介导中性粒细胞参与的肝缺血再灌注损伤过程。     

参附注射液对大鼠胰腺移植受体小肠肠粘膜屏障的保护作用

目的探讨参附注射液（SF）对大鼠胰腺移植受体肠粘膜屏障的保护作用及机制。方法24只糖尿病大鼠随机分为缺血再灌注组（IR组。n=12），参附注射液预处理组（SF组．n=12），12只正常大鼠为对照组，IR组和SF组大鼠均接受胰腺移植，再灌注后5d检测小肠通透性和吸收功能，检测血清TNF-α、NO、SOD和淀粉酶活性，取受体空肠粘膜组织检测小肠粘膜粘膜湿重、微绒毛高度及宽度、MDA含量及MPO活性，同时取肠系膜静脉血、肠系膜淋巴结、肝及脾组织进行细菌培养，观察细菌易位情况。结果再灌注后SF组血清TNF—α含量（P〈0．01）、淀粉酶活性（P〈0．01）、MDA含量（P〈0．01）、MPO活性（P〈0．01）、小肠通透性（P〈0．01）、细菌易位率（P〈0．01）和小肠粘膜损伤程度均低于IR组；血清NO和SOD含量、小肠吸收功能均高于IR组（P〈0．01）。结论SF预处理可保护大鼠胰腺移植受体小肠肠粘膜屏障，降低细菌易位率，机制可能与降低胰酶活性、减少TNF—α生成、减轻PMNs粘附与聚集、增加NO和SOD含量有关。     

参附注射液对大鼠胰腺移植受体小肠肠粘膜屏障的保护作用

目的探讨参附注射液(SF)对大鼠胰腺移植受体肠粘膜屏障的保护作用及机制。方法24只糖尿病大鼠随机分为缺血再灌注组(IR组,n=12),参附注射液预处理组(SF组,n=12),12只正常大鼠为对照组,IR组和SF组大鼠均接受胰腺移植,再灌注后5d检测小肠通透性和吸收功能,检测血清TNF-α、NO、SOD和淀粉酶活性,取受体空肠粘膜组织检测小肠粘膜粘膜湿重、微绒毛高度及宽度、MDA含量及MPO活性,同时取肠系膜静脉血、肠系膜淋巴结、肝及脾组织进行细菌培养,观察细菌易位情况。结果再灌注后SF组血清TNF-α含量(P<0.01)、淀粉酶活性(P<0.01)、MDA含量(P<0.01)、MPO活性(P<0.01)、小肠通透性(P<0.01)、细菌易位率(P<0.01)和小肠粘膜损伤程度均低于IR组;血清NO和SOD含量、小肠吸收功能均高于IR组(P<0.01)。结论SF预处理可保护大鼠胰腺移植受体小肠肠粘膜屏障,降低细菌易位率,机制可能与降低胰酶活性、减少TNF-α生成、减轻PMNs粘附与聚集、增加NO和SOD含量有关。     

生长抑素对大鼠坏死性胰腺炎GH-IGF-1-白蛋白轴的影响及其对肠黏膜屏障的保护作用

目的:研究生长抑素(somatostatin,S)对坏死性胰腺炎(acute necrotizing pancreatitis,ANP)肠黏膜屏障损害的治疗作用.方法: 逆行胰胆管注射3.5%牛磺胆酸钠(0.2 ml/100 g)诱导ANP模型.分四组,分别为正常( N)组、假手术(SO)组、坏死(ANP)组和治疗(ANP+S)组.术后24 h抽血测血浆D-乳酸、血清G H、胰岛素样生长因子(IGF-1)和白蛋白浓度,取末端回肠观察并计算绒毛高度和黏膜厚度变化. 结果ANP组回肠通透性上升,绒毛高度和黏膜厚度减小,血清白蛋白、GH和IGF-1均下降.生长抑素治疗后可减轻ANP鼠肠黏膜厚度及绒毛的改变,降低肠道通透性,血清GH、白蛋白浓度较ANP组为高,IGF-1两组无显著性差异. 结论外源性生长抑素对ANP鼠肠黏膜屏障有保护作用.     

The effect of ethyl pyruvate on oxidative stress in intestine and bacterial translocation after thermal injury

BACKGROUND: Thermal injury causes a breakdown in the intestinal mucosal barrier due to ischemia reperfusion injury, which can induce bacterial translocation (BT), sepsis, and multiple organ failure in burn patients. The aim of this study was to investigate the effect of ethyl pyruvate (EP) on intestinal oxidant damage and BT in burn injury. MATERIALS AND METHODS: Thirty-two rats were randomly divided into four groups. The sham group was exposed to 21 degrees C water and injected intraperitoneal with saline (1 mL/100 g). The sham + EP group received EP (40 mg/kg) intraperitoneally 6 h after the sham procedure. The burn group was exposed to thermal injury and given intraperitoneal saline injection (1 mL/100 g). The burn + EP group received EP (40 mg/kg) intraperitoneally 6 h after thermal injury. Twenty-four hours later, tissue samples were obtained from mesenteric lymph nodes, spleen, and liver for microbiological analysis and ileum samples were harvested for biochemical analysis. RESULTS: Thermal injury caused severe BT in burn group. EP supplementation decreased BT in mesenteric lymph nodes and spleen in the burn + EP group compared with the burn group (P < 0.05). Also, burn caused BT in liver, but this finding was not statistically significant among all groups. Thermal injury caused a statistically significant increase in malondialdehyde and myeloperoxidase levels, and EP prevented this effects in the burn + EP group compared with the burn group (P < 0.05). CONCLUSION: Our data suggested that EP can inhibit the BT and myeloperoxidase and malondialdehyde production in intestine following thermal injury, suggesting anti-inflammatory and anti-oxidant properties of EP.     

利多卡因对大鼠微栓栓塞致脑损伤的保护作用

目的观察利多卡因对大鼠微栓栓塞致脑损伤的保护作用。方法雄性Wistar大鼠65 只,随机分为5组,对照组(n=8):经右侧颈动脉注射20%葡聚糖(微球载体);微栓1组(n=14)及微栓2组(n=14),分别注射600和900个微球;保护1组(n=12)和保护2组(n=13),分别注射600和900个微球,并于注射微球前30 min经股静脉注射利多卡因1.5 mg/kg负荷剂量,继以2 mg·kg-1·h-1 持续输注直至注射微球后1 h,其余组给予等量生理盐水。另取雄性Wistar大鼠4只,按上述剂量、速率及途径给予利多卡因,用于测定利多卡因血药浓度。注射微球后第1-7天进行脑卒中行为评分; 第8-12天进行水迷宫试验(包括潜伏期和有效搜索策略比率);水迷宫试验后,每组取3只大鼠,取海马制成切片,观察CA1区神经元的病理变化。结果与对照组比较,微栓组和保护组脑卒中行为评分均升高;微栓2组注射微球后第12天潜伏期延长,有效搜索策略比率降低;与微栓1组比较,保护1组在注射微球后第3、4天脑卒中行为评分降低,注射微球后第9、12天有效搜索策略比率较高; 与微栓2组比较,保护2组在注射微球后第1-4、6天脑卒中行为评分降低,注射微球后第12天潜伏期缩短,第9、12天有效搜索策略比率升高(P<0.05或0.01)。与对照组比较,微栓组栓塞侧海马CA1 区的正常神经元计数减少;缺血坏死神经元计数微栓组和保护组均升高(P<0.05或0.01),但保护组少于微栓组(P<0.05)。利多卡因血药浓度为(2.20±0.18)μg/ml。结论利多卡因对大鼠微栓栓塞引起的脑损伤有一定的保护作用。     

瑞芬太尼预先给药对大鼠肝脏缺血再灌注损伤时肝细胞线粒体的影响

目的 探讨瑞芬太尼预先给药对大鼠肝脏缺血再灌注损伤时肝细胞线粒体的影响.方法 健康雄性SD大鼠60只,体重250～270 g,随机分为6组(n=10):对照组(C组)麻醉后直接取肝脏;缺血再灌注组(IR组)静脉输注等容量(7 ml)生理盐水;低浓度瑞芬太尼组(Rl组)静脉输注瑞芬太尼0.2 μg·kg-1·min-1;高浓度瑞芬太尼组(Rh组)静脉输注瑞芬太尼1 μg·kg-1·min-1;5-羟癸酸盐组(5-HD组)静脉输注5-HD 150 μg·kg-1·min-1;5-羟癸酸盐+高浓度瑞芬太尼组(5-HD+Rh组)静脉输注5-HD 150 μg·kg-1·min-1和瑞芬太尼1 μg·kg-1·min-1.除C组外,其余组均于输注20 min开腹,夹闭肝门30 min,再灌注60 min.观察肝细胞线粒体超微结构,制备肝细胞线粒体悬液,测定线粒体基质钙浓度([Ca2+]m)、线粒体摄钙后浓度([Ca2+]upost)、线粒体摄钙量([Ca2+]u)及丙二醛(MDA)含量.结果 C组线粒体[Ca2+]m、[Ca2+]upost、[ca2+]u及MDA含量低于其余各组;与IR组比较,Rl组与Rh组线粒体[Ca2+]m、[Ca2+]upost、[Ca2+]u降低;与RI组比较,Rh组[Ca2+]m、[Ca2+]upost降低;与Rh组比较,5-HD+Rh组和5-HD组[Ca2+]m、[Ca2+]upost、[Ca2+]u升高(P＜0.05或0.01);5-HD组和5-HD+Rh组上述各指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论 瑞芬太尼0.2～1 μg·kg-1·min-1预先给药可减轻大鼠肝脏缺血再灌注时肝细胞线粒体损伤,其机制可能与开放线粒体ATP敏感性钾通道有关.     

Genistein预处理对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用

目的：探讨genistein预处理对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。
方法：54只SD大鼠完全随机分成3组。A组为I/R组:70%热缺血60 min及再灌注;B组为I/R
 genistein（GST）预处理组;C组为假手术组。于成模后2,6,12 h取大鼠血清和肝组织,检测血清AST,ALT浓度和肝组织MDA浓度,免疫组化法检测肝组织casepase-3蛋白的表达,光镜下观察肝脏组织病理变化。
结果：与I/R组相比,genistein预处理血清中AST及ALT浓度明显降低,肝组织病理损伤明显减轻。肝组织casepase-3蛋白表达及MDA浓度显著降低（均P＜0.05）。
结论：genistein预处理对大鼠肝脏热缺血再灌注具有保护作用,其机制与清除氧自由基,抑制细胞凋亡有关。     

The protective effects of melatonin and vitamin E against renal ischemia-reperfusion injury in rats

Reactive oxygen species (ROS) were shown to contribute to the cellular damage induced by ischemia-reperfusion. The purpose of this study was to investigate and compare the efficiency of melatonin and vitamin E in the reduction of injury induced by ROS in a rat model of renal ischemia-reperfusion. Twenty-four Wistar-albino rats were divided into four groups. Rats in the Sham group were given saline 1 mL/kg, intraperitoneally (ip) 72 h, 48 h, 24 h, and 30 min before the sham operation. Rats in ischemia-reperfusion (IR), IR+Melatonin, and IR+Vitamin E groups were given saline (1 mL/kg), melatonin (10 mg/kg), and vitamin E (100 mg/kg) ip, respectively, 72 h, 48 h, 24 h, and 30 min before the ischemia for 60 min, followed by reperfusion for 60 min. The blood samples and kidney tissues of the rats were taken under anesthesia. Ischemia-reperfusion significantly increased urea, creatinine, and malondialdehyde (MDA) levels, and decreased superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT) activities. Histopathological findings of the IR group confirmed that there was renal impairment by cast formation and tubular necrosis in the tubular epithelium. In the IR+Melatonin group, while MDA levels significantly decreased, SOD activities increased. In the IR+Melatonin group, the level of tubular necrosis and cast formation are significantly decreased than those seen in the ischemia-reperfusion group. Melatonin in particular was effective to reverse hot ischemia of kidney by its antioxidant effects. These results may indicate that melatonin pretreatment protects against functional, biochemical, and morphological damage better than vitamin E in renal ischemia-reperfusion injury.     

谷氨酰胺对肠道损伤药理作用研究

肠粘膜上皮细胞、粘膜下免疫细胞和肠腔微生物群之间微妙而复杂的相互作用决定了黏膜的内环境平衡。肠道受到不良刺激情况下可能导致肠损伤,或者肠屏障的破坏,如腹部肿瘤的化疗和放疗、炎性肠病以及肠应激状态下反应,后者如创伤、休克、炎症。受损的上皮屏障和伴随的对肠道微生物群的过度免疫反应导致腹痛、腹泻和炎性肠病,同时肠屏障破坏所致的肠通透性增加可能是引发肠外组织与脏器损伤的因素。谷氨酰胺在营养中是一种真正的具有功能性的氨基酸。膳食或补充的谷氨酰胺通过调节参与细胞增殖、分化和凋亡、蛋白质周转、抗氧化性和免疫反应的基因和蛋白表达,对维持肠黏膜屏障具有重要作用。但谷氨酰胺作用的潜在机制在很大程度上仍然是未知的,因此,谷氨酰胺的重要作用不断激励研究人员在实验动物、基础和临床研究。本文回顾了肠屏障受损的机制及谷氨酰胺对肠道损伤药理作用,对于更好地理解谷氨酰胺的作用以及改善生物体内谷氨酰胺的营养利用是必要的。