CCR7在肿瘤转移机制中的地位

CCR7主要表达于淋巴细胞、树突状细胞和各种树突状细胞表面,在促进肿瘤侵袭和淋巴转移过程中发挥着不容忽视的作用。CCR7在多种肿瘤中如乳腺癌、宫颈癌、非小细胞肺癌、结肠癌、甲状腺癌等中表达,而其引起肿瘤转移的机制主要是与DC的相互作用及与NF-k B调控作用。通过对肿瘤细胞表面CCR7表达的研究,明确CCR7介导肿瘤淋巴转移的机制以及以CCR7为靶点的肿瘤转移治疗提供新的思路。     

人趋化因子受体CCR4的克隆与表达

目的：建立pcDI-CCR4稳定转染并具有CCR4功能性表达的细胞株,为深入研究CCR4配体提供基础。方法：利用RT－PCR技术进行人CCR4的cDNA克隆化。通过基因转染技术获得稳定转染细胞株,利用趋骅实验、钙流实验证实稳定转染细胞能有效表达CCR4并具有生物功能。结果：成功地将CCR4 cDNA克隆于真核表达质粒pcDI,转染HEK293细胞获得稳定表达CCR4的HEK293细胞,可被RANTES诱导产生趋化反应和钙内流反应。结论：建立的pcDI－CCR4稳定转染细胞株能有效表达CCR4并具有生物功能。     

E-cadherin的表达与肝细胞癌侵袭和转移的关系

目的研究上皮性钙黏蛋白（E-cadherin）在人肝细胞癌（HCC）中的表达情况,探讨其与肝癌的相关性。方法选择56例有完整随访资料的肝细胞癌及相应癌旁组织标本、20例正常肝组织标本,用RT-PCR方法检测E-cadherinmRNA的表达;用免疫组织化学方法检测E-cadherin的表达。结果①E-cadherin在肝细胞癌组织中的表达显著低于癌旁组织和正常组织（P〈0．05）,而在癌旁组织和正常组织中的表达无差异;②E-cadherin在肝癌组织中的表达与术后复发时间呈正相关（P〈0．05）,与病理分期呈负相关（P〈0．05）;③癌组织中E-cadherin表达与肝外转移呈负相关（P〈0．05）;④癌旁组织中E-cadherin表达与术后复发时间呈正相关（P〈0．05）。结论E-cadherin表达缺失或下调与肝癌的分化程度、侵袭转移能力和复发倾向相关,对肝癌临床转归的评估有一定指导意义。     

利用RNA干扰抑制CXCR4基因表达对乳腺癌细胞转移和侵袭能力的影响

目的探讨抑制趋化因子受体CXCR4基因对乳腺癌细胞转移和侵袭能力的影响。方法将人乳腺癌细胞株MDA-MB-231分为未干扰组、CXCR4干扰组、β-actin干扰组和空白载体干扰组。设计并合成了针对CXCR4基因的发夹式siRNA模板,体外合成siRNA表达框架(siRNA expression cassettes,SECs),经脂质体转染CXCR4干扰组细胞,采用Western blot免疫印迹法和逆转录聚合酶链反应检测各组的抑制效果,用Biocoat Matrigel侵袭能力检测仪检测MDA-MB-231细胞的转移侵袭能力。结果SECs在mRNA水平和蛋白水平均明显抑制CXCR4基因的表达。CXCR4表达被抑制后,癌细胞侵袭能力受到明显抑制,与未干扰组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论SECs可以高效特异地抑制人乳腺癌细胞中CX-CR4基因的表达。CXCR4基因高表达与乳腺癌细胞的转移密切相关,抑制细胞中CXCR4的表达可以抑制乳腺癌细胞转移和侵袭能力。图2参13。     

HIV/AIDS患者CCR5、CXCR4的表达与疾病进展的关系

目的　了解HIV AIDS患者淋巴细胞表面第二受体CCR5、CXCR4的表达 ,分析其与疾病进展的关系 ,探讨HIV感染的免疫基础。方法　收集 33例HIV AIDS患者及 13例健康对照的抗凝全血 ,用流式细胞仪检测第二受体CCR5、CXCR4的表达 ,并分析第二受体表达与病毒载量、CD4 + T淋巴细胞绝对值及T淋巴细胞活化 (HLA DR+ CD38+ )的相关性。结果　艾滋病组CD4 + 、CD8+ T淋巴细胞表面CCR5表达高于无症状HIV 1感染组及健康对照 (P <0 .0 0 1) ;艾滋病组CD8+ T淋巴细胞表面CXCR4表达低于健康对照 (P <0 .0 1)。HIV AIDS患者CD4 + 、CD8+ T淋巴细胞表面CCR5的表达与病毒载量明显正相关 (P <0 .0 1) ;与CD4 + T淋巴细胞绝对值明显负相关 (P <0 .0 1) ,与T淋巴细胞活化(HLA DR+ CD38+ )水平明显正相关 (P <0 .0 0 1)。结论　HIV 1感染者第二受体CCR5的表达与机体对HIV的免疫反应及疾病进展密切相关。     

卵巢肿瘤干细胞中趋化因子表达与细胞侵袭后的转移能力

背景：利用趋化因子或趋化性多肽招募免疫效应细胞汇集于肿瘤,激发抗肿瘤免疫的方法有望成为肿瘤治疗的新策略。 目的：探讨卵巢肿瘤细胞中趋化因子的表达与细胞侵袭转移能力关系。 方法：采用RT-PCR方法检测卵巢肿瘤细胞系SW626和Anglne细胞株中CXCR4的表达,然后在Transwell小室检测CXCL12与CXCL12/CXCR4对SW626细胞趋化活性和侵袭活性的影响。 结果与结论：RT-PCR检测结果提示SW626卵巢细胞株中有CXCR4分子的表达,而在Anglne细胞中CXCR4无表达。CXCR4的表达能促使卵巢肿瘤细胞中发生趋化与侵袭转移的细胞数目增多,而加入CXCR4中和抗体时,能抑制上述效果。结果可见卵巢肿瘤细胞干细胞趋化因子CXCL12对SW626细胞有明显的趋化活性和侵袭转移活性,其活性是通过其受体CXCR4介导的。     

MMP-9和Fas抗原表达与非小细胞肺癌侵袭、转移的关系

肿瘤的侵袭和转移是肿瘤患者的主要死因 ,也是肿瘤治疗所面临的一大难题。基质金属蛋白酶 9(ＭＭＰ 9)能降解细胞外基质 ,Ｆａｓ抗原是细胞凋亡过程中重要的信号传递分子 ,两者在肿瘤侵袭转移过程中起着重要的作用。笔者运用免疫组织化学Ｓ Ｐ法 ,检测非小细胞肺癌 (ＮＳＣＬＣ)组织切片中ＭＭＰ 9和Ｆａｓ抗原的表达 ,探讨它们的表达与肺癌侵袭、转移的关系以及在肺癌患者预后中的意义。1　材料与方法1 .1　材料　选用ＮＳＣＬＣ手术切除标本 83例 ,其中鳞状细胞癌 (鳞癌 ) 35例 ,腺癌 36例 ,大细胞癌 1 2例。男性 62例 ,女性 2 1例 ;男女…     

Id蛋白与肿瘤增殖和侵袭转移的关系

自1990年编码Id蛋白的基因从鼠造血细胞株中被克隆并发现以来,大量研究显示Id蛋白具有一些癌蛋白的属性,它们通过抑制细胞分化、推进细胞周期进程、诱导细胞增殖、抑制衰老,促进细胞存活而参与肿瘤的发生与发展。尤其对Id蛋白功能“缺失/获得”的研究进一步证实,Id蛋白参与人类肿瘤进程以及肿瘤增殖、侵袭转移等恶性潜能。Id蛋白在肿瘤侵袭转移中的作用为恶性肿瘤预后估计提供了新的指标、为Id蛋白靶向肿瘤治疗策略提供新的思路。     

MicroRNA与乳腺癌侵袭转移的关系

文献报道显示乳腺原位癌与侵袭癌相关microRNA种类既有相同者,也有相异者.乳腺癌相关microRNA对癌变和(或)转移的调控能力有的兼具二者,有的仅具其一.microRNA对乳腺癌侵袭、转移的作用包括调控癌细胞迁徙、侵袭与生存能力,改变微环境与促进血管生成及启动瘤细胞上皮--间质转变.乳腺癌干细胞在microRNA调控下不仅促进乳腺癌发生,也与癌侵袭转移的发生、发展密切相关.     

趋化因子受体CXCR4及CCR5真核表达载体的构建及其在卵巢癌细胞中的表达

目的:构建人CXCR4及CCR5真核表达重组质粒,转染人卵巢癌细胞SKOV3,建立稳定转染细胞系并观察其表达效果。方法:从人外周血单个核细胞中提取RNA,采用反转录PCR技术扩增CXCR4及CCR5的基因编码序列,将序列克隆至真核表达载体pEGFP,经酶切和测序鉴定后,应用脂质体转染技术将质粒cancer.pEGFP-CXCR4和pEGFP-CCR5分别导入不表达CXCR4及CCR5蛋白的SKOV3细胞,经G418抗性筛选得到阳性细胞克隆并扩大培养成系。分别采用免疫荧光染色和流式细胞术方法(FCM)检测稳定转染细胞株CXCR4和CCR5的表达。结果:构建了真核表达载体pEG-FP-CXCR4和pEGFP-CCR5;得到了抗G418阳性细胞克隆;免疫荧光染色和FCM检测结果显示,转染质粒的SKOV3细胞表达CXCR4和CCR5。结论:成功建立稳定表达趋化因子受体CXCR4和CCR5的卵巢癌细胞株,为CXCR4和CCR5在卵巢癌中的研究工作提供依据及平台。     

尿路上皮癌诊断中 DNA倍体分析和尿脱落细胞学检查的临床价值

目的：探讨DNA倍体分析和尿脱落细胞学检查对尿路上皮癌诊断的临床价值,寻找早期诊断尿路上皮癌的理想方法。方法随机收集121例尿路上皮癌患者的尿液标本作为实验组,另取95例良性血尿非肿瘤患者的尿液标本作为对照组,分别进行尿脱落细胞学检查和DNA倍体分析。结果尿脱落细胞学检查的敏感性高于DNA倍体分析,但特异性低于DNA倍体分析。尿脱落细胞学检查敏感性为85.10%,特异性为76.80%;DNA倍体分析敏感性为81.80%,特异性为81.10%。121例中,膀胱癌103例,上尿路上皮癌18例。对于不同分型的尿路上皮癌,两种方法在高级别肿瘤中均有较好的敏感性,尤其是DNA倍体分析在浸润性膀胱癌和上尿路上皮癌的诊断中具有极好的敏感性,均>94%。结论 DNA倍体分析结合尿脱落细胞学检查,可大大提高尿路上皮癌检测的特异性,以及增加对浸润性膀胱癌及上尿路上皮癌诊断的灵敏度,是对尿路上皮癌检测方法的有利补充。     

非小细胞肺癌EGFR基因突变与扩增及蛋白表达的相关性分析

目的：观察非小细胞肺癌（ non-sma11 ce111ung cancer,NSCLC）发生、发展中表皮生长因子受体（ epiderma1 growth factor re-ceptor,EGFR）基因突变及扩增与蛋白表达的相关性;探讨EGFR基因突变及扩增与NSCLC临床病理特征的关系。方法应用实时荧光定量PCR（ quantitative rea1-time po1ymerase chain reaction,qRT-PCR）、荧光原位杂交（ f1uorescent in situ hybridization, FISH）及免疫组化（immunohistochemistry,IHC）技术同时对NSCLC石蜡包埋组织中EGFR基因（18~21号外显子）突变、扩增及蛋白表达进行检测。结果 qRT-PCR技术检测NSCLC组织中EGFR基因（18~21号外显子）的突变率为58.18%（32/55）,其中19号外显子缺失和21号外显子L858R点突变占87.50%（28/32）;EGFR基因突变与患者性别、吸烟史、组织病理分型有关（P<0.01）,与患者年龄、淋巴结转移及TNM分期无关（P>0.05）;EGFR基因扩增率为23.64%（13/55）,EGFR蛋白阳性率为70.91%（39/55）;EGFR基因突变与基因扩增具有一定相关性（ P<0.05）,EGFR这两种基因状态与其蛋白表达无相关性（P>0.05）。结论 NSCLC EGFR基因突变在女性、无吸烟史及腺癌中表达较高,是酪氨酸激酶抑制剂（tyrosine kinase inhibi-tors,TKI）筛查主要对象;EGFR基因突变与基因扩增具有一定相关性,但基因突变与扩增的先后顺序尚不清楚,需增加病例数进一步探讨;EGFR基因突变和扩增与蛋白表达不一致,原因有待进一步分析。     

Annexin A3高表达对胃癌 MGC803细胞增殖及凋亡的作用

目的：探讨Annexin A3高表达对胃癌MGC803细胞增殖及凋亡的影响。方法构建重组质粒pYr-ads-4-Annexin A3,转染至胃癌MGC803细胞,G418筛选稳定表达株,Western b1ot法检测转染前后Annexin A3蛋白表达变化;以空载体转染组及未转染MGC803细胞为对照,采用CCK8、平板克隆和流式细胞仪技术检测Annexin A3高表达对MGC803细胞增殖、克隆形成及细胞周期的作用。结果成功构建重组质粒pYr-ads-4-Annexin A3;pYr-ads-4-Annexin A3稳定转染细胞株中Annexin A3蛋白表达均明显高于空载体转染及未转染MGC803细胞组（ P<0.05）;CCK8实验显示,pYr-ads-4-Annexin A3组中肿瘤细胞数目显著多于空载体转染及未转染MGC803细胞组（ P<0.05）;平板克隆实验发现,pYr-ads-4-Annexin A3组中肿瘤细胞形成克隆数量多于其余两组（P<0.05）;流式细胞仪检测结果提示,Annexin A3高表达抑制了MGC803细胞凋亡（P<0.05）。结论 An-nexin A3在胃癌的发生过程中起重要作用,其机制可能与促进胃癌细胞增殖和抑制肿瘤细胞凋亡有关,提示Annexin A3可能成为胃癌治疗的新靶点。     

Influence of nucleotide polymorphisms in the CCR2 gene and the CCR5 promoter on the expression of cell surface CCR5 and CXCR4

Polymorphisms in the CCR2 gene (CCR2-64I) and the CCR5 promoter (pCCR5-59029G) have been correlated with slower HIV-1 disease progression. How these polymorphisms influence the rate of AIDS progression has remained unclear. We have therefore investigated whether these nucleotide polymorphisms will reduce the expression levels of surface CCR5 and CXCR4, and thus lead to slower AIDS progression. For this, a cohort of Chinese volunteers in Taiwan was subjected to the determination of CCR2 and pCCR5 genotypes followed by analysis of the surface CCR5 and CXCR4 expression on five cell types derived from peripheral blood mononuclear cells by flow cytometry. Several significant associations were detected between genotypes and expression levels of the proteins. The most important finding was that an increased number of CD4(+) cells expressing CCR5 correlated with pCCR5-59029A homozygosity without the interference of both the CCR2-64 and the CCR5 delta 32 (deleted 32 bp) mutations (P: = 0.0453), which is consistent with the previous data on the association of the genotype to AIDS progression. Since different genetic polymorphisms co-exist in human beings, the rate of AIDS progression as well as the risk of rheumatoid arthritis may be governed by the interplay of the array of nucleotide changes and their affected proteins.     

多房囊性肾细胞癌18例临床病理分析

目的：探讨多房囊性肾细胞癌（ mu1ti1ocu1ar cystic rena1 ce11 carcinoma,MCRCC）的临床病理学特征、诊断及鉴别诊断。方法回顾性分析18例MCRCC的临床病理学及免疫表型特征,并复习相关文献。结果18例中男性12例,女性6例,年龄26~68岁（平均55.6岁）。影像学检查均示多囊性占位,边界清楚。眼观：肿瘤切面见大小不等的多房囊腔,内含浆液性或血性液体。镜检：肿瘤囊内壁被覆单层透明细胞、复层上皮或上皮缺如,囊内成分大部分流失,纤维性囊壁或囊腔间隔中见灶状透明细胞,呈Ⅰ级细胞核,其为形态学诊断线索。免疫表型：透明细胞CD10、vimentin、EMA均阳性,Ki-67增殖指数低。18例患者平均随访43个月,均无复发或转移,预后良好。结论 MCRCC是一种罕见的肾细胞癌组织学亚型,预后良好,需与肾透明细胞癌囊性变及良性肾囊性病变相鉴别。     

咽区结外滤泡树突状细胞肉瘤3例并文献复习

目的：探讨咽区结外滤泡树突状细胞肉瘤（ fo11icu1ar dendritic ce11 sarcoma,FDCS）的临床病理学特征、诊断及鉴别诊断。方法回顾性分析3例FDCS的临床病理学和免疫表型特征,并复习相关文献。结果例1,男性,70岁,因咽部无痛性包块伴呼吸不畅2个月余入院;例2,女性,40岁,因咽部异物感、痰中带血1个月余入院;例3,男性,38岁,因无明显诱因间断鼻衄2个月余入院。3例肿瘤细胞具有相似的形态学特点：细胞呈梭形~卵圆形,细胞间界限不清,细胞核呈卵圆形,具有空泡状的染色质,核仁小,偶见核内包涵体,散在少许双核、多核细胞。3例肿瘤细胞排列方式不尽相同,主要有三种排列方式：部分区域呈弥漫片状排列,细胞间有多少不一的小淋巴细胞浸润,有时聚集成团;部分区域呈束状与漩涡状排列,部分呈脑膜瘤中可见的360°回旋,细胞间有少许小淋巴细胞浸润;部分区域见富于胶原及血管的间质分隔肿瘤细胞呈巢、片状,细胞间散在淋巴细胞浸润,似胸腺瘤图像。核分裂象2~20个/10 HPF。免疫表型：3例均弥漫强阳性表达1个或多个滤泡树突状细胞标志物,如CD21、CD23和CD35,均弥漫强阳性表达Fascin和D2-40,3例中1例弥漫强阳性表达CXCL-13,Ki-67增殖指数6%~20%。结论咽区结外FDCS罕见,极易误诊。熟悉其临床病理学及免疫表型特征,有助于正确诊断。     

Tiam1表达与胃癌侵袭转移关系的临床和实验研究

目的检测T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1(Tiam1)在正常胃黏膜组织、胃癌组织以及胃癌细胞系中的表达,探讨其与胃癌侵袭转移的关系。方法(1)应用免疫组化SABC法检测60例胃癌及正常胃黏膜组织中Tiam1蛋白的表达并分析其与胃癌临床病理参数间的关系。(2)应用逆转录PCR和SABC免疫组化技术分别检测Tiam1mRNA与蛋白在胃癌MKN45细胞(MO)及其高(MH)、低(ML)侵袭转移亚株中的表达,分析其与胃癌细胞侵袭转移能力的关系。结果(1)Tiam1蛋白在正常胃黏膜组织中阴性表达显著低于癌组织(0vs78.3%),两者差异有统计学意义(P<0.01),且随胃癌组织分化程度的降低、浸润深度的增加、TNM分期的升高及伴有淋巴结转移,Tiam1蛋白染色阳性率逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05)。但Tiam1蛋白表达水平与胃癌患者的性别、年龄、部位及癌肿大小无关,差异无统计学意义(P>0.05)。(2)Tiam1mRNA和蛋白在胃癌MKN45细胞高侵袭转移亚株中的表达均较其在MKN45细胞及低侵袭转移亚株中的表达为强,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Tiam1表达与胃癌侵袭转移能力呈正相关,且其有可能成为反映胃癌恶性生物学行为的一种新型标志物。     

Regulation of CCR5 expression and MIP-1alpha production in CD4+ T cells from patients with rheumatoid arthritis

Production of CCR5 expression and MIP-1alpha, a ligand of CCR5, by CD4+ T cells from patients with rheumatoid arthritis (RA) were studied. We analysed further the influence of IL-15 stimulation, CD40/CD40 ligand (CD40L) interaction and CCR5 promotor polymorphism. One hundred and fifty-five RA patients and another 155 age- and sex-matched healthy individuals were enrolled. Peripheral CD4+ and double negative (DN) T cells from patients had lower portions of CCR5, whereas synovial CD4+ and DN T cells showed a much higher CCR5 expression. IL-15 significantly up-regulated the expression of CCR5 on purified CD4+ T cells. CD40L expression on synovial CD4+ T cells was increased greatly in CCR5+ portions by IL-15. MIP-1alpha production by synovial CD4+ T cells was also enhanced by IL-15. Co-culture of CD40 expressing synovial fibroblasts with IL-15-activated synovial CD4+ T cells significantly increased MIP-1alpha production. Expression of CCR5 on patients' CD4+ T cells was not influenced by the promotor polymorphism of CCR5 gene. Taken together, these data suggest CCR5+CD4+ T cells infiltrate the inflamed synovium and IL-15 up-regulates CCR5 and CD40L expression further and enhance MIP-1alpha production in synovial CD4+ T cells. Production of MIP-1alpha by synovial fibroblasts is significantly increased by engagement of CD40 with CD40L. Synovial microenvironment plays a potential role in regulation of CCR5+CD4+ T cells in rheumatoid joints.     

Constrained use of CCR5 on CD4+ lymphocytes by R5X4 HIV-1: Efficiency of Env-CCR5 interactions and low CCR5 expression determine a range of restricted CCR5-mediated entry

R5X4 HIV-1 has impaired utilization of CCR5 on primary CD4+ lymphocytes but the mechanisms responsible are not well defined. Using a panel of diverse R5X4 Envs we identified a spectrum of CCR5 use on CD4+ lymphocytes. Greater lymphocyte CCR5 use correlated with relative resistance to CCR5 mAbs and small molecule antagonists. Increasing CCR5 expression on lymphocytes increased the proportion of entry mediated by CCR5 for all R5X4 isolates except 89.6. In cell lines with regulated CCR5 expression, strains with greater lymphocyte CCR5 use better exploited limiting levels of CCR5. Introduction of an R306S mutation in the 89.6 V3 domain enhanced its utilization of CCR5 at low levels and switched its preference to CCR5 for lymphocyte entry. Thus, the degree to which R5X4 HIV-1 use primary lymphocyte CCR5 is determined by low CCR5 expression coupled with variations in the efficiency of Env-CCR5 interactions, which is in part governed by V3 sequences.