地黄饮子对大鼠局灶性脑缺血后SDF-1蛋白的影响

目的:探讨地黄饮子对大鼠局灶性脑缺血后SDF-1蛋白的影响。方法:SD雄性大鼠75只,随机分为模型组、地黄饮子高剂量组、地黄饮子中剂量组、地黄饮子低剂量组、伪手术组,每组15只。观察局灶性脑缺血后各组脑梗死面积、BrdU阳性细胞数量、SDF-1蛋白含量的变化。结果:地黄饮子能有效减轻脑水肿,减少脑梗死面积,大剂量组和中剂量组疗效较好。对大鼠BrdU阳性细胞的数量比较,在CA1区和CA3区、DG区,地黄饮子高剂量组与模型组比较,差异具有非常显著性。各组大鼠脑内SDF-1蛋白含量测定,地黄饮子高剂量组和中剂量组与模型组比较有非常显著差异。结论:地黄饮子能促进脑缺血后大鼠神经功能恢复,减轻脑水肿,减少脑梗死面积。促进SDF-1蛋白含量的升高,通过SDF-1/CXCR4信号通路进一步促进海马区神经干细胞增殖,并迁移至缺血损伤区域分化成神经元,修复缺血区损伤。     

加减地黄饮子对阿尔茨海默病大鼠模型的实验研究

目的:探讨大鼠海马立体定向注射β-淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)后血清TNF-α和IL-1β含量的变化及加减地黄饮子对其影响。方法:100只SD大鼠随机分为空白对照组、假手术对照组、模型对照组、盐酸多奈哌齐对照组、加减地黄饮子组共5组,采用海马立体定向注射Aβ1-40诱导Alzheimer's病动物模型后,药物干预4周,第5周应用双抗夹心酶联免疫吸附测定法检测TNF-α和IL-1β含量。结果:模型组TNF-α和IL-1β含量显著高于假手术组(p<0.05)。与模型组比较,盐酸多奈哌齐组和加减地黄饮子组TNF-α和IL-1β含量显著降低(p<0.05)。结论:大鼠海马注射Aβ1-40后大鼠血清TNF-α和IL-1β含量明显增高,加减地黄饮子通过降低血清TNF-α和IL-1β的含量,从而发挥其抗老年性痴呆的作用。     

地黄饮子含药脑脊液对受损PC12细胞钙离子内流的影响

目的:探讨古方地黄饮子含药脑脊液对β-淀粉样蛋白(Aβ25-35)所致PC12细胞损伤的保护作用.方法:依据中药脑脊液药理学的方法,把PC12细胞分为空白组,模型组,西药对照组,地黄饮子脑脊液低、中、高剂量组六组,分别加入正常培养液、正常脑脊液以及含药脑脊液中,孵育后,加入钙离子荧光剂flou-3/AM负载后,于激光共聚焦显微镜下观察钙离子在细胞内的含量.结果:含有脑脊液各组加入Aβ25-35后虽然荧光强度升高,但荧光强度达到峰值的平均强度与模型组比较明显降低,差异有统计学意义(P<0.01),而且中、高剂量组与西药对照组比较,荧光强度降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论:地黄饮子脑脊液可以降低Aβ引起的钙离子内流.     

地黄饮子对老年性痴呆大鼠认知能力和MAO AchE活性的影响

目的:观察地黄饮子对老年性痴呆大鼠认知能力和脑内的MAO及AchE的影响。方法:采用大鼠跳台实验观察地黄饮子对老年性痴呆大鼠认知能力的影响;采用比色法检测服用地黄饮子的痴呆大鼠脑内的单胺氧化酶(MAO)及胆碱脂酶(AchE)的含量。结果:地黄饮子可以改善痴呆大鼠的记忆障碍,降低脑内MAO和AchE的含量。结论:地黄饮子具有延缓AD发生的作用。     

地黄饮子对果蝇寿命的影响

以含２％和４％地黄饮子培养基饲养果蝇观察其对果蝇寿命的影响。结果表明：较之对照组，地黄饮子二个剂量组均能增加果蝇平均和最高寿命；使果蝇生存曲线显著右移；并显著降低９５％的相对死亡比。提示地黄饮子益寿作用主要影响老年期。     

地黄饮子的实验研究进展

地黄饮子为古代经典方剂。近年来临床和实验研究表明,地黄饮子在防治阿尔茨海默病、血管性痴呆、中风及后遗症等疾病方面有一定疗效,并且对神经系统具有较好的保护作用,本文就近年来的实验研究进行论述。     

地黄饮子治疗脑梗塞1例

脑梗塞病 ,以肢体偏瘫为主症 ,隶属中医中风、中经络证范畴。笔者曾接触一些该病患者 ,在接受中医治疗时 ,前医多谓“痰瘀阻滞”“气滞血瘀”,而投祛瘀活血、化痰通络之品。如补阳还五汤即为较常用的方剂之一 ,但也有不效者。笔者无意贬低该方治疗之效能 ,但认为 ,“辨证论治”乃中医治病之精髓 ,倘不严谨辨证而附和经验之谈 ,则未免流于盲目。据临床观察所见 ,本病患者多为中年或以上年龄组。作为年龄因素的内涵 ,“肾虚”是本病病机根本之所在。《内经》有云 :“女子……六七 ,面皆焦 ,发始白……丈夫……五八 ,肾气衰 ,发堕齿槁。”这说…     

加减地黄饮子对糖尿病大鼠海马CA1区神经元c-fos表达的影响

目的:观察加减地黄饮子对糖尿病大鼠海马CA1区神经元c-fos表达的影响。方法:腹腔内注射链脲佐菌素(STZ)制作糖尿病大鼠模型,于造模4周后以免疫组化法观察加减地黄饮子对糖尿病大鼠海马CA1区神经元c-fos表达的影响。结果:加减地黄饮子防治组大鼠海马CA1区神经元c-fos阳性细胞密度和平均光密度(8.13±1.70,0.46±0.08)较糖尿病组(9.25±2.36,0.56±0.06)均降低(P<0.05)。结论:加减地黄饮子可以有效防治糖尿病大鼠海马神经元退行性变化。     

地黄饮子对Alzheimer’s disease和Parkinson’s disease大鼠T-SOD、LPO的影响

目的:观察地黄饮子对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease AD)和帕金森病(Parkinson’s disease PD)血清总超氧化物歧化酶(T-SOD)、脂质过氧化物(LPO)的影响,探讨中医"异病同治"理论在地黄饮子治疗AD和PD中的效应机制。方法:将大鼠随机分为AD(正常对照、模型、假手术、地黄饮子)组、PD(正常对照、模型、地黄饮子)组,采用病证结合的造模方式,共6周,以灌胃方式给药,每日一剂,共4周,最后测定各组大鼠血清中T-SOD、LPO。结果:地黄饮子治疗组可显著提高AD、PD大鼠血清中T-SOD含量(P<0.05),并显著降低AD、PD大鼠LPO含量(P<0.05),结论:通过降低脂质过氧化物,提高总超氧化物歧化酶可能是基于"异病同治"理论的地黄饮子汤治疗老年痴呆病和帕金森病病证结合模型大鼠的机理之一。     

地黄饮子对老年性痴呆大鼠记忆功能及神经元计数的影响

目的：观察地黄饮子对老年性痴呆大鼠记忆功能及神经元的保护作用。方法：采用多媒体图文分析系统进行海马CAI区神经元计数；采用大鼠跳台实验来观察地黄饮子对老年性痴呆大鼠记忆功能的影响。结果：地黄饮子可以改善痴呆大鼠的记忆障碍，减少神经元的损伤。结论：地黄饮子对AD有一定的预防和治疗作用。     

地黄饮子血清药物化学研究

目的:对经方地黄饮子的血清药物化学进行研究。方法:利用UPLC-ESI-MS对地黄饮子体外样品及灌胃给予地黄饮子或单味药后家兔血清样品进行分析,比较各样品分析结果,确认地黄饮子的血中移行成分、代谢产物及其生药来源。结果:灌胃给予地黄饮子后家兔血清中发现9个血中移行成分,其中7个为新产生的代谢产物,2个为地黄饮子所含的原型成分,分别由五味子、远志、石菖蒲、巴戟天、山茱萸、肉苁蓉、附子、麦冬贡献产生。结论:初步确定了地黄饮子的血中移行成分及代谢产物,对其进行深入的研究,将助于阐明地黄饮子的有效成分及作用机制。     

加减地黄饮子预处理对局灶性脑缺血大鼠脑组织NGF表达的影响

[目的]观察加减地黄饮子预处理对局灶性脑缺血大鼠脑组织神经生长因子(NGF)表达的影响及其可能的神经元保护机制.[方法]采用栓线法制作大鼠局灶性脑缺血损伤模型(MCAO).120只Wistar大鼠随机分成6组,每组20只.连续灌胃7 d后进行手术操作.苏木一伊红(HE)染色法观察大鼠脑组织病理学改变;免疫组织化学法观察大鼠脑组织NGF的表达.[结果]加减地黄饮子低剂量、高剂量组均能保护梗死区神经细胞,细胞结构较完整;增强梗死区脑组织NGF的表达.[结论]加减地黄饮子预处理可对局灶性脑缺血大鼠脑组织神经元起保护作用,其脑保护作用机制可能与调节大鼠脑组织NGF表达及保护梗死区神经细胞结构有关.     

地黄引子改善AD大鼠脑组织线粒体生物合成与氧化损伤的机制

目的:探讨地黄饮子对阿尔茨海默病(AD)大鼠中枢神经线粒体生物合成能力、氧化损伤保护的作用机制以及对AD大鼠学习记忆能力的改善作用。方法:120只雄性SD大鼠,随机分为假手术组、模型组、安理申组、地黄饮子高、中、低剂量组,除假手术组外均侧脑室注射β-淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)建立AD模型,各治疗组给予相应药物灌胃,假手术组和模型组大鼠给予等体积生理盐水灌胃,每天1次,连续30 d。通过大鼠避暗箱实验,Y迷宫实验对大鼠行为学进行观察。行为学实验后,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测过氧化物酶体增生物激活受体γ共激活因子1α(PGC-1α)表达量和环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)磷酸化水平;测定脑组织线粒体呼吸链复合物Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ和Ⅳ活性;测定丙二醛(MDA)水平及超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果:地黄饮子可显著改善AD大鼠学习记忆和工作记忆能力。与模型组比较,在避暗箱实验中,地黄饮子可使AD大鼠的停留潜伏期明显增加(P0.05,P0.01),而错误次数显著减少(P0.05,P0.01);Y迷宫实验中,地黄饮子可显著提高AD大鼠自发交替反应率(P0.05,P0.01)。地黄饮子显著增加AD大鼠脑组织PGC-1α表达量和CREB磷酸化水平,显著提高脑组织线粒体呼吸链复合物Ⅰ,Ⅲ和Ⅳ活性(P0.01),而对呼吸链复合物Ⅱ活性无显著作用。地黄饮子能显著降低AD大鼠脑组织MDA含量(P0.01),提高抗氧化酶类SOD和GSH-Px活性(P0.05,P0.01)。结论:地黄饮子通过激活AD大鼠CREB/PGC-1α信号通路,提高线粒体生物合成能力,增加线粒体呼吸链酶系活性,改善线粒体功能损伤,同时通过增强抗氧化酶系活性,发挥提高机体抗氧化损伤,从而改善AD大鼠学习记忆和工作记忆能力。     

地黄饮子对大鼠脑缺血再灌注后炎症反应的抑制作用

目的探讨地黄饮子通过抑制脑缺血再灌注模型大鼠炎症反应发挥脑保护作用的机制。方法采用两侧颈总动脉夹闭方法制备脑缺血再灌注模型大鼠,模型复制成功后灌胃给药地黄饮子连续7 d。末次给药后,对大鼠进行神经行为学Longa评分和Berderson评分,核磁共振血管成像检测观察大鼠颅内血管变化,HE染色法观察大鼠脑组织病理改变,酶联免疫吸附法检测大鼠大脑皮层组织、血清的促炎因子和抗炎因子的表达水平。结果地黄饮子可降低脑缺血再灌注大鼠的神经行为学Longa评分和Berderson评分(P<0.05,P<0.01);增宽大鼠颅内血管直径(P<0.05,P<0.01);改善大鼠脑组织神经元形态;降低大鼠大脑皮层以及血清中促炎因子白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素17(IL-17)含量(P<0.05,P<0.01),增加大脑皮层以及血清中抗炎因子白细胞介素10(IL-10)、转化生长因子(TGF)-β含量(P<0.01)。结论地黄饮子可能通过纠正脑缺血后体内促炎因子和抗炎因子的失衡状态,抑制炎症反应,减轻脑组织损伤,发挥脑保护作用。     

含地黄饮子脑脊液对PC-12细胞氧化应激的影响

目的 通过建立Aβ损伤的PC12细胞模型,分析含地黄饮子脑脊液对PC-12细胞氧化应激的影响.方法 将PC12细胞离体培养,待细胞进入对数生长期后吸弃培养液,分别加入空白培养液10％、正常脑脊液10％、含安理申脑脊液10％、含地黄饮子脑脊液5％、含地黄饮子脑脊液10％、含地黄饮子脑脊液20％,并加培养液补至等量,即成为:空白组、模型组、安理申组、地黄饮子低剂量组、地黄饮子中剂量组、地黄饮子高剂量组,37℃孵育2h.除空白组外各组均加入4μl经老化处理终浓度为10μ mol/L的Aβ25-35,建立AD细胞模型,空白组则加入4μl空白培养液,继续37℃孵育24h.然后收集培养液,离心细胞.检测各组PC12细胞培养液中MDA、SOD、CAT、GSH-Px的含量.结果 地黄饮子能降低Aβ25-35损伤PC-12细胞培养液中的MDA含量,提高PC-12细胞培养液中SOD的活性、提高CAT、GSH-Px的含量即抗氧化酶活性,提高自由基清除能力,减少自由基对PC-12细胞的损伤.结论 含地黄饮子脑脊液可能通过改善Aβ25-35损伤的PC-12细胞状态,减轻脂质过氧化反应,提高降低的抗氧化酶活性,清除自由基,从而起到保护细胞的作用.     

地黄饮子对脑缺血再灌注损伤大鼠保护作用及其机制

目的:探讨地黄饮子对脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用及其初步机制。方法:建立大脑中动脉栓塞(MCAO)大鼠模型,随机分为6组,分别为假手术组,模型组,尼莫地平组(0.01 g·kg~(-1)),地黄饮子高、中、低剂量组(38.80,19.40,9.70 g·kg~(-1)),每组20只,连续给药28 d;术后第7,14,28天通过改良神经功能缺损评分(m NSS),第28天行2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色,苏木素-伊红(HE)染色观察地黄饮子的保护作用,应用免疫荧光技术观察侧脑室室管膜下区(SVZ)的5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd U)阳性细胞数(第28天)以分析神经干细胞(NSCs)增殖情况,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)观察Notch1,Jagged1,Hes1 mRNA的表达情况。结果:术后第7,14,28天地黄饮子高、中剂量组,尼莫地平组的m NSS明显低于同时间段的模型组(P0.05,P0.01);术后第28天地黄饮子高、中剂量组和尼莫地平组的脑梗死体积占脑组织体积的百分比均低于模型组(P0.01); HE染色显示地黄饮子高、中剂量组,尼莫地平组大鼠脑组织坏死和软化灶不明显,并可见神经元细胞和神经胶质细胞增生;术后第28天,上述3组SVZ的Brd U阳性细胞数显著高于模型组(P0.05,P0.01),地黄饮子高剂量组Brd U阳性细胞数高于尼莫地平组(P0.05);术后28 d地黄饮子高、中剂量组,尼莫地平组SVZ的Notch1,Jagged1,Hes1 mRNA表达水平明显高于模型组(P0.05,P0.01);尼莫地平组Hes1 mRNA水平高于地黄饮子高、中、低剂量组(P0.05,P0.01)。结论:地黄饮子能改善MCAO大鼠模型的神经功能缺损,减小脑梗死体积,减轻脑组织病理改变,从而对脑缺血再灌注损伤大鼠起到保护作用,可能与激活Notch信号通路,上调Notch1,Jagged1,Hes1 mRNA的表达,从而促进NSCs增殖有关。     

地黄饮子治疗中风后失语临床观察

目的观察地黄饮子治疗中风后失语临床疗效。方法将2013年1月—2015年1月在我院门诊或住院治疗的86例中风后失语患者随机分为对照组(43例)和治疗组(43例)。对照组口服抗血小板聚集、调脂降脂及相应对症治疗,治疗组在对照组基础上加用地黄饮子加减汤剂,治疗2月后进行疗效统计分析。结果总有效率方面,对照组为51.16%,治疗组为72.09%,两者比较有显著性差异(P0.05)。结论地黄饮子治疗中风后失语,能显著提高有效率,无毒副作用,可增强机体免疫力,值得临床推广及进一步研究。     

经典名方地黄饮子的古代文献考究

经典名方地黄饮子现代临床应用广泛,治疗多科疾病,尤其是内科病中的神经系统疾病较多,临床疗效确切,但目前尚未转化成中成药制剂。故笔者采用文献计量学的方法,搜集记载地黄饮子的中医古籍文献,筛选、整理出有效数据254条,涉及中医古籍144部,系统梳理和分析研究了地黄饮子的历史发展源流、主治病证、制方原理、用药剂量、制剂方法、煎服方法等,以期为经典名方的研发和临床应用提供古代文献证据支持。研究发现,地黄饮子出自金代医家刘河间所著《宣明论方》,由熟地黄、巴戟天、山茱萸、肉苁蓉、石斛、附子、五味子、官桂、白茯苓、麦门冬、藏菖蒲、远志12味药物组成,主治喑痱。后世记载的地黄饮子多遵从《宣明论方》中的方剂组成和主治,且临床应用有所扩展,在有主治病证记载的199条文献中,喑痱最多,约占总病证的一半;其次为中风,约占五分之二;亦用于暴喑、痿证、眩晕、遗尿等病证。地黄饮子治疗病证范围较广,但病机总属"肾中水火俱亏"。其制方独特,上下并治,标本兼顾,尤以治下治本为主。在有药物用量记载的56条文献中,约有三分之一继承了《宣明论方》的记载:"等分,上为末,每服3钱。"药物用量总体偏轻。制剂多为汤剂、煮散,在煎服方法上主张"浊药轻投""数滚即服""不计时候"。