PASM-Masson套染在肾穿刺活检中的应用

肾穿刺活检组织病理诊断是肾脏疾病诊断以及鉴别的重要方法,包括常规HE染色、特殊染色、免疫荧光染色及电镜检查等。其中,特殊染色是肾穿刺活检组织的重要辅助检查方法,主要包括PAS染色、PASM染色、Masson染色以及刚果红染色等。在日常工作中,如果对穿刺肾组织分别进行染色,所需时间长,工作量大,不利于病理医师镜下观察免疫复合物沉积及其位置[1]。     

肾穿刺活检组织切片制备技术的改进

肾穿刺活检组织切片的制备是病理技术工作中一项特殊的技术,其制备质量的优劣在一定程度上关系到临床肾病诊治工作的开展。为提高肾穿刺活检组织切片制备技术、准确把握肾脏疾病的诊断与治疗,作者收集141例肾穿刺活检组织标本,在组织标本的切割分配与固定、半薄切片的制备以及常规染色、特殊染色和免疫组化染色方面,对肾穿刺活检组织切片的制备进行改良,效果良好,现介绍如下。     

肾移植后多瘤病毒相关性肾病

背景：多瘤病毒感染是导致多瘤病毒相关性肾病和移植肾失功的重要原因之一。 目的：观察分析多瘤病毒相关性肾病的临床特征及其病理学特点。 方法：121例患者移植肾活检行多瘤病毒大T抗原染色,发现9例阳性诊断为多瘤病毒相关性肾病,利用SV-40 大 T 抗原免疫组织化学染色,对确认为多瘤病毒相关性肾病患者进行临床、病理、免疫荧光、免疫组织化学观察。 结果与结论：多瘤病毒相关性肾病组肾活检时检测霉酚酸-AUC 0-12和他克莫司血药浓度均明显高于同期非多瘤病毒相关性肾病组(P < 0.05)。9例活检组织经SV-40 大T抗原染色,肾皮质和髓质均可见散在的肾小管多瘤病毒阳性。免疫荧光IgG,IgM,IgA,C3,C4,C1q和C4d全阴性,所有肾组织病理均可见肾间质大量聚集的CD3,CD4,CD8,CD68阳性细胞,1例合并排斥反应者,人白细胞DR抗原和白细胞介素2受体高表达;不合并排斥者人白细胞DR抗原和白细胞介素2受体表达多小于5%。9例多瘤病毒相关性肾病患者随访均超过半年,移植肾失功1例,3例好转,2例稳定,3例恶化。结果表明,多瘤病毒相关性肾病的诊断主要依赖于移植肾活检组织病理;利用SV-40 大T 抗原免疫组织化学染色可提高多瘤病毒相关性肾病的诊断率;移植肾组织C4d、白细胞介素2受体和人白细胞DR抗原检测对多瘤病毒感染相关性肾病的鉴别诊断具有极其重要的临床价值。     

血清HBsAg阳性IgA肾病肾组织HBV抗原蛋白及血清和肾组织HBV-DNA检测分析

目的探讨乙型肝炎病毒（HBV）感染与IgA肾病发病的关系。方法32例肾活检冰冻切片组织HBsAg和HBcAg蛋白和42例HBsAg阳性的肾活检石蜡切片组织及其部分血清HBV-DNA的检测。结果HBsAg和HBcAg在IgA肾病肾活检组织的总阳性率为59．1％，在非IgA肾病中的总阳性率为63．6％，二者差异无统计学意义。42例肾活检组织中，仅发现有5例（11．9％）在肾活检组织中有HBV-DNA的存在。且5例均为大三阳患者，其病理诊断为系膜增生性肾小球肾炎2例，轻微肾小球病变1例，基底膜病变1例，IgA肾病仅1例。血清HBsAg阳性的患者，同时进行了42例肾活检组织的血清HBV-DNA检测，其中大三阳患者为12例，其血清HBV-DNA均为阳性，而这12例血清阳性的肾活检组织中仅有5例HBV-DNA为阳性，其余30例血清及肾活检组织中HBV-DNA为阴性。结论HBsAg和HBcAg蛋白在IgA肾病肾活检组织和非IgA肾病肾活检组织表达差异无统计学意义，表明HBV感染与IgA肾病并无直接关系。     

144例乙型肝炎病毒相关性肾炎的临床与病理分析

目的 探讨肾活检组织内乙肝病毒标志物在乙肝病毒相关性肾炎(HBV-GN)中的表达意义及HBV-GN的临床病理特点.方法 应用免疫荧光法和免疫组化SP法,分别在石腊切片和冰冻切片中检测肾活检组织内HBV标志物.结果 2001年1月至2012年10月肾活检确诊为HBV-GN的144例患者,经免疫组织化学检测,证实HBV标志物阳性率在病例中以膜性肾病最高(117例,占81.2％),膜增殖性肾小球肾炎次之(21例,占4.5％),阳性物质沉积于毛细血管袢或系膜区.结论 鉴于我国是HBV的高感染地区,在肾活检组织中常规检测HBV标志物,对HBV-GN的早期诊断具有重要意义.     

淀粉样变性肾病的临床病理研究

目的探讨淀粉样变性肾病的病理学特征、诊断及鉴别诊断。方法对11例淀粉样变性肾病病例临床资料进行分析,肾穿刺活组织进行常规染色、刚果红、高锰酸钾氧化刚果红染色后光镜、偏振光观察,同时做免疫荧光和免疫组化染色,并进行文献复习。结果在肾脏的不同部位,淀粉样蛋白呈不同程度的沉积。10例为淀粉样轻链(AL)蛋白型,1例为淀粉样相关(AA)蛋白型。淀粉样蛋白沉积区HE染色呈无定型弱嗜伊红玻璃状,PASM染色见特征性毛刷样结构,刚果红染色呈砖红色、偏振光下见苹果绿色双折光,经高锰酸钾处理后1例刚果红反应消失。免疫荧光:4例显示IgM和(或)IgG灶性系膜区阳性。5例做免疫组化染色,其中1例λ强阳性;2例λ强阳性、κ弱阳性。结论淀粉样变性肾病是一种少见的与免疫系统有关的疾病,有一定的病理学特征,可与其他肾脏病变相区别。     

石蜡切片免疫荧光染色在肾脏病理诊断中的应用

我们应用石蜡切片免疫荧光染色法,对肾活检组织进行免疫荧光染色,取得了较好的效果,现报道如下。1材料与方法1.1材料选用中南大学湘雅二医院肾脏病研究所肾活检标本35例,其中狼疮性肾炎(LN)10例,乙肝相关性肾炎(HBVGN)5例,IgA肾病(IgAGN)10例,膜性肾病(MN)5例,肾小球轻微病变(G     

石蜡切片免疫荧光染色在肾活检病理诊断中的应用

在肾脏的病理诊断中,肾穿刺组织必须进行冷冻切片免疫荧光染色[1,2]、石蜡切片HE、Masson、PAS、PASM染色和电镜检查等,以达到正确的诊断.光镜观察时须有10个以上的肾小球才能作出客观的诊断[3,4].在肾脏的病理诊断中,冷冻切片免疫荧光染色具有不可或缺的作用,但有时各种原因导致所取的肾小球数目不够或基层单位无冷冻切片设备等因素均给诊断带来困难.因此,我们通过对肾活检组织石蜡切片进行免疫荧光染色,取得了较好的效果,现介绍如下.     

肾穿刺活检电镜检查组织标本肾小球定位技术的应用与体会

正肾小球疾病是导致终末期肾脏病的最常见病因~([1,2]),其诊断与鉴别诊断能协助临床医师制定个体化有效的治疗方案及对患者的病情转归给予初步的判定~([3]),故快速准确定位肾小球成为肾穿刺活检的关键环节。本实验室总结2年来1 800例肾穿刺活检电镜检查标本定位经验,将大体检测与光镜学检测相结合,快速准确地进行肾小球定位,有效提高临床标本的利用率,节约制片成本及工作量。现将肾穿刺活检组织标本肾小球定位技术的应用及体会介绍如下。     

免疫胶体金在标记超薄切片中抗原的几点体会

金标法是利用胶体金在碱性环境中带负电的性质 ,使其与抗体相吸引 ,从而将抗体标记。我们在使用免疫胶体金标记超薄切片抗原的实验中深深地体会到 ,要提高标记阳性的成功率 ,某些因素将在实验中起到很重要的作用。1、材料和方法1 .1材料　 2 0例通过光镜、免疫荧光、电镜诊断为 Ig A肾病的肾活检组织的环氧树脂包埋块。1 .2方法　取肾活检组织 ,经 0 .0 5 %戊二醛 ,1 %多聚甲醛 (二甲砷酸钠缓冲液配制 )固定 3- 4 h,1 % Os O4后固定 2 h,梯度丙酮脱水 ,Epon81 2包埋 ,6 0℃聚合 1 2 h,制备超薄切片 ( 5 0 - 70 nm) ,粘贴于带有 formar膜的…     

儿童肾脏疾病263例临床病理分析

目的总结儿童肾脏疾病的临床资料、病理类型及两者间的关系。方法回顾性分析2015～2017年深圳市儿童医院接受经皮肾穿刺活检的263例肾脏疾病患儿的临床病理资料及部分患儿的基因检测结果。其中男性156例、女性107例,年龄2.1～15.5岁,平均8.6岁。结果 263例患儿中原发性肾小球疾病140例(53.23%),继发性肾小球疾病101例(38.40%),遗传性肾脏疾病22例(8.37%)。原发性肾小球疾病中最常见的临床诊断为血尿和(或)蛋白尿查因,其次为难治性肾病综合征;常见病理类型为IgA肾病,微小病变性肾病。继发性肾小球疾病中常见的临床表现为紫癜性肾炎、狼疮性肾炎;常见病理类型分别为局灶增生型紫癜性肾炎、弥漫节段增生性狼疮性肾炎。遗传性肾脏疾病中最常见的为薄基膜肾病和Alport综合征,部分遗传性肾脏疾病需依靠肾穿刺活检联合基因检测诊断。结论儿童肾脏疾病以原发性肾小球疾病为主,最常见的临床诊断和病理类型分别为血尿和(或)蛋白尿查因,微小病变性肾病。肾穿刺活检联合基因检查有助于及时明确治疗效果欠佳儿童肾脏疾病的病因,调整治疗方案。     

组织内Ang-2表达与糖尿病肾病分型的相关性

目的:讨组织内促血管生成素-2(Ang-2)表达与糖尿病肾病分型的相关性.方法:回顾性分析2018年11月至2020年12月我院收治的70例糖尿病肾病患者的临床资料,于完善相关检查后,所有患者均行肾穿刺活检明确病理分型,依据糖尿病肾病分型将患者分为5组;检测肾组织内Ang-2表达情况.分析糖尿病肾病分型与组织内Ang-2表达、肾小球评分的相关性.结果:经肾穿刺活检结果显示,70例糖尿病肾病患者中Ⅰ型3例,Ⅱa型8例,Ⅱb型7例,Ⅲ型45例,Ⅳ型7例;组织内Ang-2表达结果显示,(+)表达25例,(++)表达33例,(+++)表达12例;肾小球评分1-3分26例,4-6分31例,7-9分13例;经Kendall''s tau-b相关系数分析显示,糖尿病肾病分型与组织内Ang-2表达、肾小球评分呈正相关(r=0.328、0.279,P<0.05).结论:糖尿病肾病分型与组织内Ang-2表达、肾小球评分密切相关,可根据Ang-2表达评估糖尿病肾病分型,有利于早期诊断治疗.     

石蜡切片免疫组化套染PAS在肾活检组织病理诊断中的应用

在肾穿刺组织的病理诊断中,采用常规冷冻切片免疫荧光染色、石蜡切片HE染色、PAS染色、Masson染色、PASM染色以及电镜观察,以得到准确的病理诊断。但由于肾穿刺为有创性检查,再加上术者技术精疏有别以及患者个体差异,不仅所取组织十分细小,而且标本质量亦常不尽人意;另外,没有能力购置电镜的单位难以做超微诊断。因此需要我们摸索新的方法,以达到最大限度获得疾病信息,同时又省时、省力,且节约成本。作者实验室前期已经建立了石蜡切片免疫荧光染色法,其他学者也有相关报道[1-3]。最近又建立了肾活检组织石蜡切片免疫组化结合PAS染色方法,取得了较好的效果,现报道如下。     

免疫病理技术对诊断肾病的价值

众所周知,肾穿剌组织检查,包括光镜,免疫荧光（或免疫酶标）和电镜检查,对于肾脏疾病,尤其是肾小球病的组织病理学分类或病理学诊断常起决定性作用。而对其诊断的正确与否,又直接关系到对肾病患者的合理治疗及其预后的判断。肾活检组织的免疫病理学检查,即免疫荧光或免疫酶标技术对沉积于肾组织,     

肾穿刺组织冷冻切片常见问题及对策

正肾穿刺组织冷冻切片是进行免疫荧光检查的重要环节。切片质量的优劣直接关系免疫荧光染色技术成功与否,其对肾脏疾病的诊断及分类具有重要的作用。切片内见足量的肾小球是成功的保障~[1-2]。免疫荧光检查所用的肾穿刺组织极小,制作冷冻切片具有较大的挑战性。病理技术人员只有熟练运用冷冻切片技术,掌握制片技巧,才能制作出合格的冷冻切片。肾穿刺组织冷冻切片过程中,常见下列问题:切片内无肾小球;切片不完整;切片出现冰晶空洞;切片卷曲、折叠;切     

肾穿刺活检标本制片体会

正肾穿刺活检涉及的病理学技术多而复杂,包括常规病理、免疫组化及电镜检查等几大方面,技术要求高~([1])。为提高肾穿刺活检标本的制片质量,作者结合2009~2015年安徽医科大学第二附属医院病理科700余例肾穿刺活检标本的制片工作经验进行介绍并讨论。1材料与方法1.1材料收集安徽医科大学第二附属医院病理科2009~2015年肾穿刺活检标本706例,所有标本均由肾内科医     

Notch信号通路蛋白在糖尿病肾病患者肾组织中的表达及意义

目的观察糖尿病肾病肾组织中Notch信号通路的表达情况,探讨其与糖尿病肾病肾脏损害的关系。方法收集10例手术切除的远离肿瘤的瘤旁肾组织及34例糖尿病肾病肾穿刺组织,免疫组化检测Jagged1、Notch1、NICD1和Hes1蛋白表达情况。结果 Jagged1、Notch1、NICD1和Hes1蛋白在糖尿病肾病肾组织中高表达,并与24小时尿蛋白成正相关,而与肾小球滤过率成负相关。结论 Notch信号通路在糖尿病肾病肾组织中激活,与糖尿病肾病肾脏损伤有关。     

肾活检冰冻切片不同储存条件对免疫荧光结果的影响

目的:探讨肾活检组织冰冻切片储存温度对免疫荧光结果的影响。方法:选择2015年1月~2015年6月浙江省人民医院肾脏病科肾脏活检标本100例,将同一肾穿组织同时切两套切片分别储存于-70℃低温冰箱和-12℃冷冻切片机内,其中储存于-70℃低温冰箱的切片作为实验组,储存于-12℃冷冻切片机内的切片作为对照组,次日用直接免疫荧光法检测免疫球蛋白(IgG、IgA和IgM)、补体(C3、C4和C1q)及纤维蛋白原,间接免疫荧光法检测Ⅳ型胶原a3和a5链,荧光显微镜下观察定性及半定量结果。结果:实验组3+~4+IgG 16例,对应的对照组IgG均为1+~2+,阳性强度明显弱于实验组,差异有统计学显著性(P0.05);实验组3+~4+a3 99例,对照组1+~2+a3 92例,阴性8例;实验组3+~4+a5 99例,对照组1+~2+a5 92例,阴性8例,对照组阳性强度减弱,差异有统计学显著性(P0.05)。实验组4+IgA 15例,3+IgA 19例,3+IgM 15例,2+IgM11例,4+C3 13例,3+C3 12例,相对应的对照组阳性强度没有明显减弱,差异无统计学显著性。结论:肾活检冰冻切片免疫荧光结果受切片储存温度影响大,其中对IgG和Ⅳ型胶原免疫荧光阳性强度影响更大,建议肾脏活检组织冰冻切片置于-70℃低温冰箱储存。     

超声引导下经皮肾穿刺对于小肾病病理分型的研究

目的探讨超声引导下经皮肾穿刺对小儿肾病病理分型的重要作用与价值.方法对16例小儿肾病患者,在超声引导下经皮肾实质穿刺抽出肾组织送检作组织学诊断.结果本组16例均全部抽出肾组织穿刺成功率达100%,光镜达到组织学诊断14例(14/16),占87.5%.其中急性毛细血管内皮增生性肾炎迁延型3例,膜增生性肾小球肾炎(轻、中、重度)8例,肝炎性肾炎1例,红斑狼疮性肾炎2例,组织学诊断不成功2例.16例均无发生出血、感染等并发症.结论小儿肾病超声引导下经皮肾穿刺术是获得病理分型的唯一最佳手段,也是介入性超声的又一新技术的发展,是一种方法简便、安全、并发症少的有效方法.     

显微镜型多血管炎肾活检病例的临床病理分析

目的探讨血清抗中性粒细胞胞质抗体（ANCA）及肾小球内有无免疫球蛋白（Ig）沉积在显微镜型多血管炎（MPA）肾活检病例中的病理诊断价值及其临床病理意义。方法34例MPA均为该系2000年1月至2007年3月7年间的就诊患者,其临床资料比较完整,后经肾穿刺活检而确诊者,分别对其血清ANCA阳性和阴性及肾小球内有无Ig沉积的临床病理特点进行比较。结果34例MPA患者,约1／5—1／2病例伴有各种肾外症状;经血清ANCA检测,阳性者26例（76．5％）;阴性者8例（23．5％）;其尿蛋白多呈轻一中度,呈肾病综合征者仅3例;肾功能减退者32例。经病理检查显示,24例为新月体性肾炎,8例为局灶节段性肾炎,其他类型者仅2例;伴肾血管坏死或内膜炎症7例,内膜增厚24例;伴间质炎性细胞浸润29例,其中21例伴有中性粒细胞浸润。经临床与病理比较分析,发现ANCA阳性组的新月体形成率显著高于ANCA阴性组（P〈0．05）;在26例ANCA阳性组病例中,肾小球Ig沉积者的尿蛋白定量显著高于无Ig沉积组（P〈0．05）,其中1例合并IgA肾病。结论对MPA的诊断有赖于对患者血清ANCA的检测和肾活检组织的病理学检查;ANCA是促进肾小球新月体形成的一个重要因素;Ig在肾小球内的沉积对患者蛋白尿的加重起促进作用。