聚合酶链反应检测非典型淋菌性结膜炎

目的了解久治不愈结膜炎的病因以指导临床。方法选择久治不愈结膜炎患者56例,用灭菌棉拭子擦取眼结膜分泌物后,将此拭子置于0.6mLTE缓冲液中,采用PCR技术进行扩增,紫外灯下观察有无特异性扩增产物,若有,则为阳性。结果56例标本检测出淋球菌阳性18例(其中有5例做眼分泌物涂片查找淋球菌为阴性),阴性38例。结论PCR技术仍然是临床快速检测眼部传染性疾病的有效方法。     

聚合酶链反应在医学检验中的应用分析

聚合酶链反应（PCR）具有操作便捷、灵敏度高和特异性强等特点。它是研究、检测和鉴定标本中特定DNA片段的一种重要方法。实时定量PCR、荧光定量PCR、实时荧光定量PCR等技术在肿瘤学、免疫学、微生物学、遗传学等医学检验领域得到广泛的应用。本文通过对PCR在医学检验中的应用作简要的分析综述。     

聚合酶链反应技术及其在医学检验中的应用

聚合酶链反应（PolymeraseChainReaction,PCR）又称无细胞克隆或体外基因扩增,是一种对特定的DNA片段在体外进行快速扩增的方法,具有特异、敏感、快速、简便、重复性好、易自动化等优点,是分子生物学技术的一项突破。     

4种性病病原体聚合酶链反应检测结果分析

目的　探讨聚合酶链反应 (PCR)联合检测 4种性病病原体的必要性。方法　用PCR对 5 0 5 5例患者进行 4种病原体检测 ,其中对 4 0 99例患者进行沙眼衣原体 (CT)、解脲支原体 (UU)联合检测。结果　CT ,UU阳性率分别是 2 1.5 4 %和 2 4 .4 7% ,混合感染率为 5 .88% ,总感染率达 4 0 .13% ,远高于单项检测的阳性率。对 95 6例患者进行人乳头瘤病毒 (HPV)、单纯疱疹病毒 (HSV)联合检测 ,结果HPV ,HSV阳性率分别是 2 8.97%和 2 8.35 % ,混合感染率为 11.0 9% ,总感染率达 4 6 .2 3%。HPV男、女的阳性率分别为 19.37%和 4 1.12 % ,两者有极显著差异 (P <0 .0 0 5 )。对HSV阳性标本进行分型 ,HSV -II占 97.6 7%。结论　 4种性病病原体应做联合检测 ,以免漏诊。     

聚合酶链反应检测肝病患者血清HBV-DNA的意义

目前ＨＢＶ -ＤＮＡ检测被广泛应用于临床 ,它是测定乙肝病毒最敏感、直接的指标 ,笔者通过检测各类肝炎及肝硬化患者血清ＨＢＶ -ＤＮＡ含量来探讨其与乙肝标志物及乙肝诊断的关系。1　材料与方法1 1　材料1 1 1　研究对象 :4 95例肝病患者均为我院 1999年 6月— 2 0 0 0年 4月收治患者 ,男 370例 ,女 12 5例 ;平均年龄 37.8岁 ;其中慢性肝炎 4 4 9例 (轻度 2 98例 ,中度 12 0例 ,重度 31例 ) ,肝硬化 4 6例。诊断均符合 1995年 5月北京第五次全国传染病寄生虫学术会议修订的病毒性肝炎防治方案 (试行 )。1 1 2　主要试剂及来源。不对称引…     

荧光聚合酶链反应在一期梅毒诊断中的应用探讨

目前临床上对一期梅毒初疮常用的检测主要有血清快速反应素环状卡片试验(RPR)、梅毒螺旋体血凝试验(TPHA)、荧光聚合酶链反应(FQ—PCR)、暗视野显微镜检查等，为探讨荧光聚合酶链反应在检测一期梅毒初疮中的临床意义，作者选取了62例临床上可疑为一期梅毒患者的生殖器溃疡或糜烂面分泌物同时作RPR、TPHA、暗视野显微镜、FQ—PCR检测，所选病例中初疮出现2周内的26例，初疮出现2周以上的38例，把两个时段患者所测结果进行对比分析，以评价FQ—PCR在检测一期梅毒初疮中的作用。现把所得结果报道如下。     

聚合酶链反应检测慢性肝炎患者血清乙型、丙型肝炎病毒感染

我院自1996年8月～1998年10月采用江苏常熟制药厂生产的苦黄注射液,治疗慢性乙型病毒性肝炎40例,取得良好疗效,同时设立不用该药的慢性乙型病毒性肝炎40例为对照组,结果如下。     

微孔渗漏法与聚合酶链反应联合检测沙眼衣原体

目的： 探索一种快速、经济、敏感的方法用来诊断泌尿生殖道中沙眼衣原体（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ， ＣＴ）。方法：用微孔渗漏法、聚合酶链反应法（ＰＣＲ）和直接免疫荧光分析法（ＤＦＡ）检测泌尿生殖道中ＣＴ。结果：微孔渗漏法阳性率为 ２５． ８７％， ＰＣＲ法阳性率为 ３４． ２８％，而 ＤＦＡ法仅为 ２５． ２４％，且微孔渗漏法不需要特殊仪器，测定时间短，工作量小，灵敏度高。微孔渗漏法与ＤＦＡ二者阳性率无显著性差别（Ｐ＜０．０５）。ＰＣＲ与ＤＦＡ二者阳性率有显著性差别（Ｐ＜０．０１）。结论： 因此微孔渗漏法与 ＰＣＲ法联合检测泌尿生殖道中 ＣＴ具有简便、快速、检出率高的优点。     

兼并复合聚合酶链反应检测白念珠菌和其它念珠菌

目的 为了早期、准确地诊断念珠菌病并使其得到及时治疗。方法 我们建立了检测白念珠菌和其它念珠菌的兼并复合PCR技术，以3条引物PSpA1,PCon1和PCon2复合1个试管中进行PCR扩增。结果 白念珠菌产生105bp和1015bp，其它念珠菌包括白念珠菌在内产生105bp，在0.5ml血液中可检测到30个白念珠菌。结论 该技术是一种简便、快速、准确诊断念珠菌病的方法。     

聚合酶链反应检测乙肝六项及抗HBc-IgM阳性血清中HBV-DNA

近年来应用聚合酶链反应检测血清中HBV－DNA的报道很多,但对各种血清中HBV－DNA阳性率之间的比较报道较少。现将我们检测的结果报道如下。三材料和方法1．1标本：310例阳性标本均来自我科门诊患者,其中男198人,女112人,最大年龄69岁,最小年龄9岁。100例阴性标本来自健康体检者。1．2主要试剂：HBsAg、抗一HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc、抗HBc－IgMEIA试剂盒和HBV－DNAPCR试剂盒均购于华美生物工程公司。1．3方法：HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc、抗HBc－lgMEIA法,按试剂盒说明书进行操作;nnV－DNAPCR,…     

聚合酶链反应-酶联免疫吸附试验检测乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸

目的 :评价聚合酶链反应 -酶联免疫吸附试验 (PCR- EL ISA)测定乙型肝炎病毒 DNA(HBV DNA)的临床应用价值。方法 :采用定量 PCR- EL ISA法和 EL ISA法分别检测 2 0 8例乙型肝炎患者血清的 HBV DNA和 HBV血清标志物(HBVm ) ,3 4份健康体检者作为阴性对照。结果 :血清 HBV DNA含量 >4× 10 6 拷贝 /ml分别是抗 HBc Ig M组、HBe Ag组、抗 HBc组、抗 HBe组和三抗体组 (抗 HBs、抗 HBBe、抗 HBc) ,其 HBV DNA阳性率分别为 10 0 % ,97.75 % ,62 .3 0 % ,41.67% ,16.0 0 %。结论 :PCR- EL ISA法定量检测 HBV DNA具有较强的特异性和灵敏度 ,为临床早期诊断 ,了解乙型肝炎病毒复制情况 ,判断有无传染性以及药物疗效观察具有重要的临床意义     

荧光定量聚合酶链反应在儿童病毒性脑炎病原体检测中的应用

目的：探讨儿童病毒性脑炎早期诊断的快捷方法。方法：应用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测儿童病毒性脑炎脑脊液(CSF)中的病原体，其中单纯疱疹病毒脑炎(HSVE)分别在3个时点(治疗前、治疗中、出院时)检测DNA拷贝数。结果：定性聚合酶链反应(PCR)阳性标本FQ—PC检测100％阳性，HSV—DNA量在3时点有差异，病毒核酸拷贝数与临床表现一致。结论：FQ-PCR可作为儿童病毒性脑炎早期诊断的有效方法之一，动态观察HSV—DNA含量有助于指导治疗，估计疾病的发展和预后。     

逆转录聚合酶链反应在中医药治疗抑郁症分子机制研究中的应用

逆转录聚合酶链反应主要用于检测或定量细胞中基因表达水平,是目前生物学及医学等领域研究基因表达调控的一种主要方法,中医药在治疗抑郁症上取得了很好的疗效,为了进一步探索中药对抑郁症的干预途径和寻找作用靶点,许多中医学者近年来成功设计了抑郁症动物模型,并采用逆转录聚合酶链反应技术对抑郁症模型动物的某些神经递质及受体、神经营养因子等进行基因表达分析,在基因水平为揭示中医药对抑郁症的治疗提供了崭新的思路.     

荧光探针定量聚合酶链反应检测乙型肝炎病毒DNA的临床应用

荧光定量聚合酶链反应 (FQ -PCR)首先由美国的Ap pliedBiosystems公司于 1996年推出 ,该技术实现了PCR从定性到定量的飞跃 ,融会了PCR的高灵敏性、DNA杂交的高特异性和光谱技术的高精确定量等优点 ,有效地解决了其他方法很难处理的PCR污染的问题 ,尤其在检测HBV -DNA中的应用越     

三种性病男性患者聚合酶链反应（PCR）检测结果分析

本文对553例男性泌尿生殖道炎患者用聚合酶链反应（PcR）技术进行沙眼衣原体（CT）、解脲支原体（UU）、淋球菌（NG）的检测,阳性率分别为11．4％、30．8％、35．6％．同时,我们对高度怀疑为淋病患者111例及95例非淋病性尿道炎患者同时进行细菌培养和PCR检测,淋病患者细菌培养阳性检测率为30．6％,与06—08年间所进行的培养检测结果基本一致,均低于PCR检测结果（77．4％）,解脲支原体培养阳性率为16．8％,亦明显低于PCR结果（30．8％）,此外,对患者同时分UU＋CT和NG＋UU进行PCR检测结果分析,发现约40％的淋病患者并发UU感染,而CT和UU复合感染亦在10％左右。上述结果说明PCR方法在三种性病病原体的诊断中比细菌培养法更为可靠,特别是在多种病原体复合感染的情况下更为有效。     

聚合酶链反应快速检测痰液中结核分支杆菌DNA的临床应用

目的:评价聚合酶链反应(PCR)检测痰液中结核分支杆菌在肺结核诊断中的价值。方法:62例已经确诊的肺结核患与62例同期非肺结核的呼吸内科病人,全部病例取清晨漱口后深部痰液3～5ml,分别作痰涂片找抗酸杆菌、作结核分支杆菌培养及PCR检测,对比效果。结果:两组病例的PCR检测结果分别与同组痰涂片找抗酸杆菌、结核分支杆菌培养比较,差异显著(P<0.01),PCR检测特异、敏感、快速。结论:用PCR检测痰中结核分支杆菌DNA可作为临床诊断肺结核的常规辅助手段。     

应用DNA提取改良和二次聚合酶链反应技术检测乌头及其炮制品

【目的】筛选适用于9种乌头属植物根茎炮制前后DNA提取的方法。【方法】采用基于十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）法、十二烷基硫酸钠（SDS）法的12种改良方法提取9种乌头属植物根茎炮制前后DNA,考察提取缓冲液种类、聚乙烯吡咯烷酮（PVP）添加、水浴时间、DNA沉降方式对乌头属植物根茎炮制前后DNA提取的影响,以及二次聚合酶链反应（PCR）技术对乌头炮制品ITS2片段浓度提高的影响。【结果】不同缓冲液与水浴时间互作提取DNA效应不同,2×CTAB（含2.5mol/LNaCl）水浴3h提取的9种乌头生品DNA的ITS2扩增效果最佳,2×CTAB（含1.4mol/LNaCl）水浴3h提取的9种乌头炮制品DNA的ITS2扩增效果最佳。添加PVP或添加PVP+改变DNA沉降方式对生品DNA提取影响不大,但对炮制品有明显的抑制作用。经过二次PCR可显著提高炮制品ITS2的扩增效率。【结论】提取缓冲液和水浴时间的有效互作提取DNA以及二次PCR技术的应用可提高乌头属植物根茎ITS2片段制备效率,为DNA条形码技术广泛应用于乌头属药材提供必要的技术支持。     

实时荧光定量聚合酶链反应法检测肺结核患者痰标本价值的对照研究

目的探讨不同方法对肺结核的诊断价值。方法以实时荧光定量聚合酶链反应法、痰直接涂片找抗酸杆菌法、痰结核杆菌培养法对我院56例确诊肺结核患者痰标本检查比较。结果荧光定量PCR法检出结核杆菌阳性率显著高于痰涂片抗酸染色和培养法,其他非肺结核结果阳性率仅为2.7%,特异度较高。结论实时荧光定量聚合酶链反应法对肺结核诊断方面灵敏度及特异度较高,同时反映抗结核治疗过程中痰标本中的结核杆菌的数量变化,对抗结核药物疗效有良好的监控效果,应列入肺结核常规实验室检查项目。     

探讨多重聚合酶链反应系统用于儿童常见细菌及真菌血流感染的价值

目的:探讨在儿童常见细菌及真菌血流感染中应用多重聚合酶链反应系统的价值。方法:选择140例疑诊血流感染患儿作为研究对象,采集患儿血液标本后实施血培养法与多重聚合酶链反应系统检测,比较两种检测方式的阳性率。结果:血培养法检测阳性标本为16份(阳性率为11.43%);多重聚合酶链反应系统检测阳性标本为30份(阳性率为21.43%),血培养法与多重聚合酶链反应系统阳性检出率比较差异有统计学意义(P0.05)。结论:多重聚合酶链反应系统检测儿童常见细菌及真菌血流感染具有更高的应用价值,可在短时间内检测微生物阳性率,且操作简便,更值得临床推广与应用。