MPTP诱导猴帕金森病模型全脑糖代谢变化研究

目的 探索帕金森病猴行为学和脑葡萄糖代谢变化特点,进一步了解帕金森病病理生理机制.方法 选取健康成年猕猴4只,经适应性饲养后采用以18F标记的脱氧葡萄糖(DG)为示踪剂的正电子发射计算机断层扫描(18F DG-PET-CT)进行全脑糖代谢检测.采用经外周静脉连续注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)溶液,建立全身性猴帕金森病模型.对模型猴进行行为学评分.建模成功3个月后,再次对模型猴进行脑18FDG-PET-CT扫描.对比分析建模前后模型猴脑葡萄糖代谢变化,并行脑组织病理检测.结果 4只猕猴均建模成功.模型猴表现出典型的运动迟缓、肌僵直、运动减少等帕金森病样症状,行为学评分均超过20分,经左旋多巴治疗后,帕金森病样症状显著缓解.模型猴还表现出淡漠、攻击性减退等高级神经活动改变.18FDG-PET-CT显示,帕金森病模型猴脑葡萄糖代谢显著降低,且并不局限于黑质纹状体区域.结论 本研究发现帕金森病猴神经代谢变化范围广泛,这可能是导致帕金森病非运动症状的重要因素.     

妇康口服液对大鼠实验性宫腔粘连预防效果及对宫内膜组织TGF-β1、PAI-1和MMP-9表达影响的实验研究

【摘要】 目的探索帕金森病猴行为学和脑葡萄糖代谢变化特点,进一步了解帕金森病病理生理机制。方法选取健康成年猕猴4只,经适应性饲养后采用以18F标记的脱氧葡萄糖(DG)为示踪剂的正电子发射计算机断层扫描(18F DG-PET-CT)进行全脑糖代谢检测。采用经外周静脉连续注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)溶液,建立全身性猴帕金森病模型。对模型猴进行行为学评分。建模成功3个月后,再次对模型猴进行脑18 FDG-PET-CT扫描。对比分析建模前后模型猴脑葡萄糖代谢变化,并行脑组织病理检测。结果 4只猕猴均建模成功。模型猴表现出典型的运动迟缓、肌僵直、运动减少等帕金森病样症状,行为学评分均超过20分,经左旋多巴治疗后,帕金森病样症状显著缓解。模型猴还表现出淡漠、攻击性减退等高级神经活动改变。18 FDG-PET-CT显示,帕金森病模型猴脑葡萄糖代谢显著降低,且并不局限于黑质纹状体区域。结论本研究发现帕金森病猴神经代谢变化范围广泛,这可能是导致帕金森病非运动症状的重要因素。 更多还原     

偏侧PD猴模型纹状体HMW MAP-2表达的变化

目的 探讨偏侧帕金森病(Parkinson's disease,PD)猴模型纹状体高分子量微管相关蛋白-2(HMW MAP-2)表达的变化.方法 对4只恒河猴经单侧颈内动脉注射1-甲基4-苯基1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)制备成偏侧PD猴模型后,应用免疫组化染色方法,观察4只偏侧PD猴模型和2只正常猴纹状体HMW MAP-2表达的变化.结果 偏侧PD模型猴MPTP毁损侧的纹状体的HMW MAP-2免疫活性较毁损侧对侧和正常对照猴明显降低,但MPTP毁损侧对侧的纹状体的HMW MAP-2免疫活性未发现明显变化.结论 偏侧PD猴模型纹状体的HMW MAP-2表述减少可能对纹状体神经元的变性和死亡起重要作用.     

偏侧帕金森病模型猴脑黑质和纹状体的超微结构变化

目的: 观察偏侧帕金森病(Parkinson's disease, PD)模型猴脑黑质和纹状体的超微结构变化. 方法: 对2只恒河猴经右侧颈内动脉注射1-甲基4-苯基1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)制备成偏侧PD模型猴后,应用透射电镜观察黑质和纹状体神经元和神经胶质细胞的超微结构变化. 结果: 偏侧PD模型猴MPTP注射侧黑质和纹状体的超微结构均呈病理性改变: 神经元细胞线粒体肿胀和部分空泡化、粗面内质网和高尔基复合体囊腔扩张、脂褐素增多,星形胶质细胞呈增生性改变. MPTP注射侧对侧黑质和纹状体的超微结构未发现异常变化. 结论: 黑质和纹状体的超微结构的病理性变化从而导致黑质-纹状体-黑质环路功能障碍,是引发PD的结构基础.     

帕金森病小鼠与猴模型中肝功能与结构的变化特征

【目的】探讨小鼠和食蟹猴帕金森病(PD)模型中肝脏变化。【方法】选用雄性C57BL小鼠20只,16月龄,随机分为正常组和造模组,每组10只,造模组采用腹腔注射1-甲基-4-苯基1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP,剂量为25 mg/kg)5周。雄性食蟹猴8只,10岁左右,随机分为正常组3只及造模组5只,造模组以MPTP静脉注射30 d(剂量为0.2 mg·kg-1·d-1)。动物造模过程中观察行为学并记录。食蟹猴造模成功后,抽血测量肝功能。动物麻醉安乐死后,取肝脏,进行苏木精—伊红(HE)、糖原(PAS)染色,并观察病理学改变。【结果】PD小鼠模型和食蟹猴模型成功建立,食蟹猴肝功能检测结果显示:造模组总蛋白和白蛋白含量均显著降低(P0.05)。PD小鼠肝索细胞排列紊乱,肝窦扩张,肝细胞变性坏死,糖原减少。PD食蟹猴肝细胞排列相对紊乱,肝窦明显扩张,糖原明显减少。肝细胞发生变性、坏死,肝细胞核深染,肝细胞间充满粉红色的、粗细不等的颗粒状物,有程度不等的炎性细胞浸润。【结论】帕金森病的发病可能与肝脏功能和结构改变相关。     

微囊化牛肾上腺髓质嗜铬细胞脑内移植治疗偏侧帕金森病样猴的行为及神经生化效应

目的:观察微囊化牛肾上腺嗜铬细胞(BCC)脑内移植对偏侧帕金森病(PD)样猴的行为和脑组织液中单胺类物质含量的影响;评价微胶囊的免疫隔离效果.方法:以海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠(APA)为材料包裹BCC.右侧颈内动脉注射甲基-苯基-四氢吡啶(MPTP)诱发PD样猴模型.将微囊化、非囊化BCC或空微囊分别植入PD样猴右侧尾状核和壳核,观察PD样猴行为、尾状核及壳核微透析液中单胺类物质的变化.结果:囊化组(n=6)和非囊化组(n=2)移植后1周开始PD样猴左侧上肢活动明显增加,阿朴吗啡(Apo)诱发的异常旋转次数减少.非囊化组猴在移植1～2个月后主动行为及Apo诱发的异常旋转圈数逐渐退回到移植前水平;而移植囊化BCC 6只PD样猴的异常行为纠正效果,在观察的7个月内仍存在.空囊组(n=1)PD样猴异常行为无变化.移植前PD样猴右侧壳核、尾状核细胞外液中DA、DOPAC和HVA水平较左侧明显降低(P＜0.05).移植后2、7个月时,囊化组右侧壳核、尾状核细胞外液中DA、DOPAC和HVA水平较移植前明显提高(P＜0.05),但仍低于左侧的水平.结论:PD样猴脑内移植BCC后异常行为明显改善,微囊组的纠正效果明显优于非囊化组,其移植区DA及其代谢产生明显增加.APA微囊具有良好的免疫隔离作用,能明显延长BCC在异种脑内存活和发挥作用的时间.     

Deprenyl拮抗MPTP神经毒性作用的实验研究

本文对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)在恒河猴帕金森病(PD)动物模型上的应用进行了研究,并对B型单胺氧化酶(MAO-B)抑制剂Deprenyl拮抗MPTP的神经毒性作用进行了探讨。结果表明:1.应用MPTP制成恒河猴PD动物模型与人类PD的特征十分相近。2.预先应用MAO-B抑制剂Deprenyl能有效地阻止MPTP的神经毒性作用。     

丘脑底核脑深部电刺激治疗帕金森病的功能显像实验研究

目的:通过PET、SPECT功能显像研究探讨丘脑底核(subthalamic nucleus,STN) 脑深部电刺激(deep brain stimulation,DBS)对猴偏侧帕金森病(Parkinson disease, PD)模型纹状体区代谢的影响.方法:采用右侧颈内动脉注入1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)建立猴偏侧PD模型,行右侧STN脑深部电极植入术,给予慢性高频电刺激.在刺激前及刺激后1、3个月分别行SPECT、PET功能显像测定.结果:PD模型猴在慢性高频电刺激下对侧肢体僵硬明显缓解,活动增多,步态稳定.SPECT检查显示注药侧纹状体区的多巴胺转运体(DAT)特异摄取率在给予有效刺激后较术前增高,多巴胺D2受体(D2R)的特异摄取率逐渐下降至接近正常侧水平.PET检查提示在电极植入术前右侧基底节区放射性摄取浓度较左侧偏低,给予慢性高频电刺激1个月后复查提示右侧放射性摄取浓度稍高于左侧,但双侧均较低, 3个月时复查右侧放射性摄取浓度明显高于左侧.结论:STN DBS可有效改善偏侧猴PD模型症状,通过刺激后纹状体区DAT升高,D2R逐渐下降,同时糖代谢提高.结果提示给予STN有效慢性高频电刺激可能提高了纹状体区的代谢活性.     

帕金森病发病机制、功能显像诊断及基因治疗的实验研究

目的研究帕金森病(PD)的发病机制,提高临床的正确诊断及其探索基因治疗。方法和结果MTT法、末端标记法(TUNEL)、流式细胞仪(FCM)、电镜、DNA电泳、RT-PCR和Western blot方法检测显示MPP~+致使MES23.5细胞活力显著减低,线粒体膜电势(△m)下降和氧自由基增加,MPTP、MPP~+和(或)6-OHDA使黑质细胞和(或)PC12细胞发生凋亡,Caspase-3mRNA表达增加。微透析与HPLC、免疫组化等显示PD患者血IgG、脂多糖(LPS)、Fe~(2+)致使大鼠黑质酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞减少,纹状体多巴胺(DA)降低,MPTP致使猴纹状体谷氨酸、天门冬氨酸、一氧化氮增高。~(125)I-β-CIT、~(99m)Tc-TRODAT-1及~(125)I-IBZM、~(131)I-AIBZM单光子发射断层扫描和(或)放射自显影显示PD猴、大鼠或小鼠模型的纹状体DA转运载体(DAT)功能降低和D_2DA受体活性增强。转TH基因成肌细胞或转TH与GTP环水解酶-1(GCH)成纤维细胞,以及腺病毒介导的胶质源性神经营养因子(GDNF)移植治疗显示PD大鼠模型的旋转行为改善,TH和GDNF基因表达,以及DA浓度增加。结论氧化应激、兴奋性毒性、免疫异常等与PD发病有关。DAT和D_2DA受体显像有助于提高疾病的诊断和病情监测。TH和(或)GDNF基因可能是PD治疗的有效措施。     

甲基-苯基-四氢吡啶建立恒河猴PD模型的MRI表现

对甲基 苯基 四氢吡啶 (MPTP)制成的帕金森病 (PD)模型恒河猴脑行MRI检查 ,T2 WI显示 :注入侧中脑黑质面积减小 ,内有局灶性高信号。对PD模型恒河猴脑组织切片行酪氨酸羟化酶免疫组化方法检查 ,证实注药侧中脑多巴胺能神经元明显减少 ;行Grino染色显示注药侧黑质区有大量胶质细胞增生。实验结果表明MRI可作为评价MPTP建立恒河猴PD模型的手段     

慢性帕金森病MPTP猴模型自体颈动脉体细胞纹状体移植术后1H-MRS研究

目的　应用质子磁共振波谱 (1H- MRS) 技术, 进行慢性帕金森病 (PD) 1 甲基 4 苯基 1, 2, 3, 6- 四氢吡啶 (MPTP) 猴模型自体颈动脉体 (CB) 细胞纹状体区移植术后细胞结构生存能力检测。方法　采用 4 只按非人类灵长类帕金森病评分量表 (PPRS) 评价, 行为学症状持续稳定 1 个月的慢性 PD MPTP雄性猴模型, 应用 GE Signa1 5T NV/i磁共振扫描系统进行移植术前定位, 取一侧自体颈动脉体, 使用 Leksell立体导向系统行纹状体区立体定向移植术, 于移植术后 8 周内每 2 周行双侧纹状体区1H MRS 采集, 检测大脑主要代谢物氮 乙酰天门冬氨酸(NAA)、胆碱化合物 (Cho)、肌酸及磷酸肌酸 (Cr), 采用随机软件FuncTool 4 .0对各代谢物含量行半定量分析, 观察NAA/Cr和Cho/Cr的变化, 以配对 t检验行统计学分析, 按PPRS标准进行移植后行为学评分并与代谢物比值进行对照分析。结果　移植术4周后, 移植侧纹状体区 NAA/Cr逐渐增高, Cho/Cr逐渐下降, 术后 6 周与未移植侧纹状体区比较出现显著性差异 (P<0 .05)。行为学评分呈下降趋势。结论　1H MRS能够显示慢性PD MPTP猴模型移植区域的代谢及生化改变, 自体CB细胞移植能够促进局部多巴胺神经元的生长, 可以作为有效手段应用于 PD的治疗。     

6-羟基多巴胺诱导帕金森病大鼠相关蛋白及mRNA的表达

目的:研究双点法注射6-羟基多巴胺(6-OHDA)制备的帕金森病(PD)大鼠相关分子的改变.方法:采用脑立体定位仪6-OHDA微量注射建立大鼠PD模型,2周后注射阿朴吗啡(APO),观察其行为学改变,并利用高效液相-电化学法测定正常大鼠(n=10)及PD大鼠(n=23)黑质组织中多巴胺(DA)及其代谢物3,4-二羟基苯...     

茶多酚对帕金森病猴多巴胺能神经元保护作用的研究

目的 探索茶多酚对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine, MPTP)诱导的帕金森病猴神经元的保护作用及机制。方法 健康雌性食蟹猴年龄10~12岁,采用数字表法随机分为4组:正常对照组、茶多酚对照组(TP组)、帕金森病模型组(MPTP组)和茶多酚治疗组(MPTP + TP组),每组4只。正常对照组不进行任何处理;茶多酚对照组灌胃给予茶多酚80 d;PD模型组静脉注射MPTP诱导PD模型,茶多酚治疗组在PD模型建立后给予茶多酚治疗80 d,每周2次用帕金森病临床行为评价量表评价各组动物运动损伤。实验动物经安乐死后,分离脑组织,高效液相色谱分析纹状体多巴胺及其代谢产物含量,免疫组织化学和体视学分析黑质多巴胺能神经元变化。结果 TP能减少MPTP诱导的食蟹猴黑质多巴胺能神经元的损伤并缓解其运动障碍。结果 首次在灵长类动物体内实验证实茶多酚能有效减少多巴胺能神经元的损伤并改善其运动机能。     

甲基-苯基-四氢吡啶建立恒河猴PD模型的MRI表现

对甲基苯基四氢吡啶(MPTP)制成的帕金森病(PD)模型恒河猴脑行MRI检查,T₂WI显示：注入侧中脑黑质面积减小,内有局灶性高信号。对PD模型恒河猴脑组织切片行酪氨酸羟化酶免疫组化方法检查,证实注药侧中脑多巴胺能神经元明显减少;行Grino染色显示注药侧黑质区有大量胶质细胞增生。实验结果表明MRI可作为评价MPTP建立恒河猴PD模型的手段.     

药物干预对帕金森病大鼠行为的影响

目的通过建立大鼠帕金森病(PD)异动症(LID)模型,观察大鼠在药物干预前后的行为改变。方法选取内侧前脑束(MFB)注射6-OHDA建立单侧毁损PD鼠模型,给予左旋多巴(L-dopa 20 mg.kg-1.d-1)及生理盐水(NS,2 ml)干预满1个月,并设正常对照。观察大鼠的行为并每周1次阿朴吗啡诱发旋转行为,每2两次异常不自主运动(AIM)评分。结果MFB注射点造模成功率为75%,PD大鼠的行为改变有一定的规律性,其旋转速度存在先升后降的现象;AIM评分显示异动症发生率为72%。结论选择MFB注射点造模成功率高;PD大鼠行为变化有规律性;LID的发生与波动用药、损伤程度密切相关。     

磷酸化ERK1/2对MPTP帕金森病小鼠黑质iNOS表达的影响

目的 研究磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)所致帕金森病(PD)小鼠模型黑质诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达调控作用,探讨PD中脑黑质多巴胺(DA)能神经元丢失的可能机制.方法 建立PD小鼠模型,观察小鼠行为学变化;免疫组化和免疫印迹法检测黑质酪氨酸羟化酶(TH)、iNOS和P-ERK1/2的阳性细胞数和蛋白表达水平的变化,并观察给予人参皂甙Rg1(Rg1)对上述变化的影响.结果 模型组小鼠出现典型PD行为学症状.在MPTP第5次注射后7 d,与对照组相比黑质区TH阳性神经元数量显著丢失77%(P<0.01),中脑黑质TH蛋白印记表达水平显著降低约75%(P<0.01);Rg1预处理后,PD小鼠行为学症状减轻,与对照组相比TH上述指标分别下降约44%和41%(P<0.01).MPTP第3次注射后1.5 h P-ERK1/2核内始见,至6 h iNOS有较高表达.Rg1预处理可显著阻抑P-ERK1/2和iNOS的表达(P<0.01).Spearman相关性分析,P-ERK1/2和iNOS的表达呈显著正相关(P<0.01).结论 P-ERK1/2可能通过捌控iNOS表达进而导致PD黑质DA能神经元丢失,Rg1可能阻抑此通路以保护DA能神经元.     

运用质子磁共振波谱研究培补肝肾中药治疗帕金森病疗效机制

0 引言 帕金森病(Parkinson's disease, PD)是中老年人神经系统常见疾病. 其特征性病理改变是中脑黑质多巴胺能神经元变性减少,导致纹状体内多巴胺浓度明显下降[1,2]. 我们既往的实验表明[3,4],培补肝肾中药能有效改善PD患者的临床症状. 我们通过运用培补肝肾中药对偏侧PD模型猴治疗前后进行1H-MRS分析对照研究,为中药治疗PD提供一些初步的实验依据.     

帕金森病基因疗法向临床迈进

帕金森病(PD)是一种常见的神经变性疾病,以黑质纹状体的多巴胺能神经元逐渐丧失为表现特征。症状包括震颤、肌强直、运动迟缓和体位的不稳定性。当大约50％的多巴胺能神经元已死亡时即可发生帕金森病,这些症状常常在发病之初都很轻,应用左旋多巴即可得到有效的治疗。但PD总是渐进性地发展,大多数病人可出现左旋多巴功效逐渐丧失伴运动原振动和运动迟缓。一种对提高PD治疗效果的主要策略就是通过投用可进一步阻止多巴胺能细胞丧失的药物以延缓疾病的发展。但目前尚未研究出有效治疗PD的神经保护疗法。在2000年10月27日的《科学》杂志上,Kordower等人证实,应用一个脑半球间注射了慢病毒的媒介动物,给黑质纹状体系统局部投放神经胶质细胞系衍生的神经营养因子(GDNF),在MPTP(1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶)灵长类PD模型中,几     

α-syn在MPTP诱导的帕金森病猴模型肾小球中的表达观察

目的探索MPTP诱导的帕金森病猴模型的肾小球中α-syn的表达情况。方法年龄在10岁左右的雄性食蟹猴8只,随机分成模型组和对照组。其中对照组3只,模型组5只。对模型组注射MPTP,对照组注射等量的生理盐水,注射时间共计30天。注射药物过程中,以非人类灵长类PD评分量表为依据进行评分,密切观察并记录动物的行为特征变化。免疫组织化学方法染色肾脏观察肾小球内a-syn的表达情况。结果在MPTP诱导的慢性帕金森病猴模型的肾小球内观察到α-syn的表达,α-syn的表达分布与肾脏内神经走行相一致。结论在帕金森病猴模型的肾小球中α-syn存在表达,且表达量较对照组明显增多。     

过表达SDF-1a帕金森病小鼠模型的建立与评价

目的:探讨建立及评价稳定的脑内过表达基质细胞衍生因子-1a(stromal cell derived factor-1,SDF-1a)的帕金森病(Parkinson’s disease,PD)小鼠模型的方法。方法:采用间隔多次注射方法将小剂量1-甲基-4-苯基-1,2,3,6四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-tet-rahy dropyridine,MPTP)注射已立体定向下脑内注射质粒pDsRed2-N1-SDF-1a的小鼠皮下,在不同时间点观察小鼠的行为改变,以及检测小鼠爬杆时间、脑内酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)阳性细胞数量以及多巴胺含量(dopamine,DA)含量的变化,同时观察和检测小鼠脑内SDF-1a的表达。结果:MPTP组小鼠出现PD样行为表现,并至少持续40d;各检测时间点下,MPTP组小鼠的爬杆时间显著长于对照组,而TH阳性细胞数量及DA含量较对照组显著减少;同时,在MPTP组小鼠脑内可观察质粒红色荧光蛋白的表达,以及可以检测到SDF-1a蛋白的表达。结论:采用立体定向质粒注射及间隔多次小剂量皮下注射MPTP的方法能够有效建立了过表达SDF-1a帕金森病小鼠模型,为进一步观察SDF-1a趋化细胞迁移并治疗PD的研究提供了前提条件。