在位与异位子宫内膜细胞凋亡及免疫组化研究

目的:探讨子宫腺肌病与卵巢内膜异位囊肿异位内膜细胞凋亡和增殖特性及发病机制。方法:2004年6月～2008年6月手术病例采用免疫组化EnVision法检测子宫腺肌病和卵巢异位囊肿各60例的在位及异位子宫内膜中凋亡调控基因蛋白Bcl-2、bax及细胞增殖标记物ki-67蛋白表达。结果:Bcl-2蛋白、bax蛋白及ki-67蛋白在两病的在位内膜及子宫腺肌病异位内膜中均呈现周期性改变,而Bcl-2蛋白及ki-67蛋白在卵巢异位囊肿异位内膜中呈持续性增强,较在位内膜差异有统计学意义(P<0.05)。结论:子宫腺肌病异位内膜的细胞凋亡和增殖受卵巢性激素周期性调节,卵巢异位囊肿异位内膜则相反,两者细胞凋亡和增殖特性截然不同,是两种不同的疾病。     

自噬基因Beclin-1在子宫腺肌病中的表达及意义

目的探讨子宫腺肌病中细胞自噬基因Beclin-1的表达及意义。方法采用免疫组化SP法检测82例子宫腺肌病、40例子宫内膜样腺癌、及20例正常子宫内膜组织中自噬基因Beclin-1蛋白及细胞凋亡的标记物Ki-67蛋白的表达水平。结果子宫腺肌病中异位子宫内膜及子宫内膜样腺癌中Beclin-1表达水平低于正常子宫内膜组织(P<0.05);Beclin-1表达随着临床症状严重程度而下调(P<0.05)。在正常子宫内膜组织中Ki-67微弱表达,在子宫腺肌病及子宫内膜腺癌中的Ki-67表达均显著上调。结论子宫腺肌病与子宫内膜样腺癌类似,其发生、发展中自噬基因Beclin-1起到一定的作用。     

子宫内膜异位症患者在位内膜细胞凋亡特性

目的:探讨子宫内膜异位症(EMs)在位内膜细胞凋亡特性的改变。方法:①应用免疫组化方法对32例EMs在位子宫内膜组织及24例对照组子宫内膜组织的Survivin蛋白及Ki-67蛋白的表达进行测定;②应用TUNEL技术监测两组子宫内膜细胞的凋亡特性。结果:EMs在位内膜组织Survivin蛋白表达高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);EMs在位内膜细胞分泌期凋亡指数低于同期对照组子宫内膜,差异有统计学意义(P<0.05);EMs在位内膜组织Ki-67蛋白表达与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:EMs在位子宫内膜细胞因凋亡能力下降并非高度增殖导致细胞活性升高,在位内膜细胞的生物学特性改变在EMs的病理生理中可能起着重要作用。     

Survivin与Livin在子宫内膜异位症中的表达与意义

目的:探讨Survivin与L ivin在子宫内膜异位症中的表达与意义。方法:收集80例因子宫腺肌症行子宫切除术的子宫在位内膜标本为实验组,同期因子宫肌瘤行子宫切除的子宫在位内膜标本45例为对照组。免疫组织化学法检测Survivin、L ivin蛋白的表达,将检测结果进行相关分析。结果:EM s在位内膜中Survivin与L ivin的表达均明显强于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:内异症患者的子宫内膜本身即不同于正常内膜,对凋亡易感性低,随经血逆流到盆腔后具有存活能力,能够逃避盆腔中多种凋亡诱导信号的刺激,易于形成异位灶,同时致使子宫内膜组织向子宫肌层浸润,易于形成子宫腺肌症。     

子宫内膜异位症中Survivin的表达及临床意义

目的观察凋亡抑制基因Survivin在子宫内膜异位症中的表达,探讨其表达的意义。方法采用免疫组化法检测异位内膜组（40例）、在位内膜组（40例）及正常内膜组（20例）中Survivin蛋白的表达水平。结果 Survivin的阳性表达位于腺上皮细胞的细胞核或细胞浆,异位内膜组阳性表达分别高于在位内膜组、正常内膜组（P〈0.05）,在位内膜组阳性表达高于正常内膜组（P〈0.05）。结论 Survivin在子宫内膜异位组表达明显增高,Survivin可能与子宫内膜异位症的发生密切相关。     

Bcl-2蛋白在子宫内膜异位症的表达及意义

目的检测正常子宫内膜及内膜异位症的在位、异位内膜Bcl-2蛋白表达及细胞凋亡率,探讨其在子宫内膜异位症发生机制中的作用.方法采用免疫组化方法对50例同期因宫颈癌Ⅰ期,输卵管节育术患者及盆腔子宫内膜异位症患者47例的在位、异位内膜Bcl-2蛋白表达及应用流式细胞技术检测细胞凋亡率.结果①对照组子宫内膜的Bcl-2蛋白主要表达于子宫内膜腺上皮细胞浆和/或细胞膜上.增生期Bcl-2蛋白的表达显著高于分泌期(P＜0.01).②内膜异位症组在位内膜的Bcl-2蛋白亦主要表达于子宫内膜腺上皮细胞胞浆和/或胞膜上,增生期Bcl-2蛋白表达与分泌期有显著性差异(P＜0.01).异位症组异位内膜增生期、分泌期无显著性差异(P＞0.05).③异位症组异位内膜与在位内膜分泌期比较Bcl-2蛋白表达有显著性差异(P＜0.05).④内膜异位症组与对照组比较其分泌期Bcl-2蛋白表达显著高于对照组的分泌期(P＜0.01).内膜异位症在位内膜细胞凋亡率低于正常子宫内膜.异位内膜细胞AP峰明显低于异位症在位内膜细胞和正常子宫内膜细胞.结论①子宫内膜周期性生理变化与Bcl-2蛋白表达水平有关.子宫内膜的周期性变化可能与凋亡有关.Bcl-2蛋白的表达水平越高,组织的抗凋亡性越强.②异位内膜细胞凋亡率低于在位内膜,更低于正常子宫内膜即子宫内膜异位症的异位内膜及在位内膜分泌期抗凋亡能力明显增强.     

Bcl-2蛋白在子宫内膜异位症的表达及意义

目的 :检测正常子宫内膜及内膜异位症的在位、异位内膜 Bcl-2蛋白表达及细胞凋亡率 ,探讨其在子宫内膜异位症发生机制中的作用。方法 :采用免疫组化方法对 50例同期因宫颈癌 I期 ,输卵管节育术患者及盆腔子宫内膜异位症患者 47例的在位、异位内膜 Bcl-2蛋白表达及应用流式细胞技术检测细胞凋亡率。结果 :1对照组 :子宫内膜的 Bcl-2蛋白主要表达于子宫内膜腺上皮细胞浆和 /或细胞膜上。增生期 Bcl-2蛋白的表达显著高于分泌期 (P<0 .0 1)。 2内膜异位症组 :在位内膜的 Bcl-2蛋白亦主要表达于子宫内膜腺上皮细胞胞浆和 /或胞膜上 ,增生期 Bcl-2蛋白表达与分泌期有显著性差异 (P<0 .0 1)。异位症组异位内膜增生期、分泌期无显著性差异 (P>0 .0 5)。 3异位症组 :异位内膜与在位内膜分泌期比较 Bcl-2蛋白表达有显著性差异 (P<0 .0 5)。 4内膜异位症组与对照组比较 :其分泌期 Bcl-2蛋白表达显著高于对照组的分泌期 (P<0 .0 1)。内膜异位症在位内膜细胞凋亡率低于正常子宫内膜。异位内膜细胞 AP峰明显低于异位症在位内膜细胞和正常子宫内膜细胞。结论 :1子宫内膜周期性生理变化与 Bcl-2蛋白表达水平有关。子宫内膜的周期性变化可能与凋亡有关。 Bcl-2蛋白的表达水平越高 ,组织的抗凋亡性越强。 2异位内膜细胞凋?     

细胞核相关抗原、血管内皮生长因子与子宫腺肌症发生发展的相关性

目的:探讨细胞核增殖抗原(Ki67)及血管内皮生长因子(VEGF)在子宫腺肌症中在位和异位内膜的表达及意义。方法:用免疫组化EnVision法检测30例子宫腺肌症在位子宫内膜和肌间异位内膜Ki67和VEGF的表达情况。结果:Ki67和VEGF在子宫腺肌症病变中均有不同程度的阳性表达,子宫肌层异位内膜Ki67阳性表达率为53.3%,VEGF阳性表达率为96.7%。异位内膜的腺上皮Ki67和VEGF表达高于在位内膜的腺上皮(P0.05)。腺上皮表达高于间质(P0.05)。月经周期中VEGF的表达差异无统计学意义(P0.05)。异位内膜腺体VEGF和Ki67的表达具有相关性(P0.01)。结论:子宫腺肌症是一种细胞增殖性疾病。子宫腺肌症异位和在位子宫内膜组织中均有Ki67和VEGF的阳性表达,与子宫腺肌症的临床症状可能有关。     

趋化细胞因子ENA-78在子宫腺肌病中的表达

目的:探讨趋化细胞因子(ENA-78)在子宫腺肌病组织中的表达及其与子宫腺肌病发生、发展的关系。方法:收集27例子宫腺肌病患者的异位内膜及在位内膜组织和18例子宫肌瘤在位子宫内膜组织(对照组),分别测定ENA-78的表达。结果:①ENA-78阳性染色定位于腺体细胞胞浆内;②子宫腺肌病患者的在位内膜及异位内膜ENA-78的表达高于对照组(P<0.05);③不同月经周期中子宫腺肌病患者的在位内膜与异位内膜组织中ENA-78的表达无统计学意义(P>0.05)。结论:ENA-78在子宫腺肌病的异位内膜及在位内膜组织中表达增强,提示ENA-78在子宫腺肌病发生、发展中有一定意义。     

MMP-2与VEGF在子宫腺肌病中的表达和意义

目的:探讨MMP-2和VEGF在子宫腺肌病中的表达及在发病机制中的作用。方法:应用免疫组织化学法(SABC法)检测56例腺肌病子宫及26例正常子宫中MMP-2及VEGF的表达。结果:在异位内膜和在位内膜组中MMP-2的阳性表达率分别为71·4%和67·5%,均明显高于对照组正常内膜的42·3%(P<0·05)。异位内膜周围肌层和正常肌层中的阳性表达率分别为67·9%和34·6%(P<0·01);在异位内膜中VEGF的阳性表达率为75·0%,明显高于在位内膜和对照组正常内膜的52·5%和46·2%,(P均<0·05)。异位内膜周围肌层和正常肌层中的阳性表达率为69·6%和38·5%(P<0·05);在异位内膜和异位内膜周围肌层中MMP-2与VEGF的表达呈正相关(P均<0·01)。结论:异位内膜及内膜周围肌层中MMP-2的过度表达与子宫腺肌病病理过程中的内膜组织侵袭力和平滑肌大量增生有关,VEGF与腺肌病的血管生成密切相关,MMP-2和VEGF在子宫腺肌病的发生发展中有重要的协同作用。     

神经生长因子对子宫内膜基质细胞增殖及子宫腺肌病雌激素受体α表达的影响

目的:探讨神经生长因子(NGF)对离体培养在位子宫内膜基质细胞增殖及子宫腺肌病雌激素受体α表达的影响。方法:体外原代培养人子宫内膜细胞,用0 ng/ml、10 ng/ml、50 ng/ml和100 ng/ml的神经生长因子分别干预,用MTT法测定内膜基质细胞增殖情况,用Westen-blotting测定50 ng/ml NGF对基质细胞雌激素受体α表达的影响。结果:50 ng/ml的NGF可促进子宫内膜基质细胞增殖,细胞存活率为82.61%,比其他浓度NGF显著升高(P<0.05)。50 ng/ml NGF对病例组和对照组不同细胞雌激素受体表达有影响,病例组腺上皮细胞和基质细胞总体均数差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:50 ng/ml的NGF可促进在位内膜基质细胞增殖及子宫腺肌病腺上皮细胞和基质细胞雌激素受体α表达。     

趋化因子CXCL12在子宫腺肌病组织中的表达及意义

目的 探讨趋化因子CXCL12在子宫腺肌病发病中的作用.方法 选择2010年2月至2011年2月在济南军区总医院行全、次全子宫切除术或病灶切除术,经病理学确诊的36例子宫腺肌病患者术前、术中的取材标本为研究对象,并根据取材部位不同将其分为在位内膜组（n=36）、异位病灶组（n=36）和病灶周围组织组（n=36）.选择同期住院手术治疗的33例子宫肌瘤患者术中取材标本为对照,按照取材部位不同,将其分别纳入对照内膜组（n=33）和对照肌层组（n=33）（本研究遵循的程序符合济南军区总医院人体试验委员会所制定的伦理学标准,得到该委员会批准,分组征得受试对象本人的知情同意,与之签署临床研究知情同意书）.子宫腺肌病患者和子宫肌瘤患者年龄等一般资料比较,差异无统计学意义（P＞0.05）.对各组CXCL12蛋白表达和CXCL12 mRNA的含量进行比较及相关性分析.结果 ①异位病灶组CXCL12蛋白表达显著高于在位内膜组和对照内膜组,前者分别与后二者比较,差异有统计学意义（P＜0.05）,在位内膜组CXCL12蛋白表达与对照内膜组比较,差异亦有统计学意义（P＜0.05）.②在位内膜组、病灶周围组织组和异位病灶组CXCL12 mRNA含量均高于对照内膜组,前三者分别与后者比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）;异位病灶组CXCL12 mRNA含量分别与在位内膜组和病灶周围组织组比较,差异也有统计学意义（P＜0.05）.③Pearson相关分析结果显示,在位内膜组CXCL12蛋白表达与异位病灶组具有相关关系（r=0.780,P=0.000）;在位内膜组CXCL12 mRNA含量与病灶周围组织组、异位病灶组均呈正相关关系（r=0.499和0.461;P=0.002和0.005）;病灶周围组织组CXCL12 mRNA含量与异位病灶组呈正相关关系（r=0.679,P=0.000）.结论 CXCL12在子宫腺肌病发生、发展过程中起一定作用,其可能通过诱导内膜细胞异位发挥致病作用.     

血管生成素-2及其受体Tie-2在子宫内膜异位症中的表达

目的:探讨Ang-2及受体Tie-2在子宫内膜异位症(EMs)患者的在位内膜和异位内膜中的表达。方法:选取病理证实为EMs患者60例为研究组(异位内膜组、在位内膜组),选取同期因不孕症等行腹腔镜手术患者的子宫内膜组织36例为对照组。采用免疫组织化学染色方法检测Ang-2及受体Tie-2的表达。结果:①Ang-2主要表达于腺上皮细胞和血管内皮细胞,少数表达于间质细胞。Ang-2在EMs异位内膜、在位内膜的阳性表达率明显高于对照组(P<0.05);在位内膜同异位内膜间比较差异无显著性(P>0.05);EMs在位内膜组分泌期的阳性表达率高于增殖期(P<0.05);对照组增生期的阳性表达率高于分泌期(P<0.05)。Ang-2在EMs在位内膜组、正常对照组的表达均随月经呈周期性改变,差异均有显著性。②Tie-2主要表达于腺上皮细胞和血管内皮细胞,EMs组异位内膜和在位内膜Tie-2的表达明显高于对照组(P<0.05);EMs患者异位及在位内膜比较差异无显著性(P>0.05);Tie-2在正常子宫内膜、EMs在位内膜中的表达具有周期性,均为增生期高于分泌期(P<0.05)。结论:EMs患者异位及在位内膜中血管生成活跃,导致异位病灶组织中的血管数增加。异位内膜和在位内膜可能具有组织同源性。分泌期内膜更易在盆腹腔等处种植生长,增生期血管生成更为活跃。     

肝细胞生长因子及其激活物在子宫内膜异位症的表达

目的:探讨肝细胞生长因子(HGF)及其激活物(HGFA)在子宫内膜异位症的表达及与发病机理的关系。方法:采用链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶法检测27例异位内膜、27例对应的在位内膜及25例对照组子宫内膜组织中的HGF和HGFA的免疫表达水平。结果:HGF和HGFA主要在内膜的腺上皮阳性表达,在间质仅弱阳性表达。子宫内膜异位症患者在位内膜腺上皮HGF和HGFA阳性表达最强,异位内膜次之,正常对照组在位内膜腺上皮最弱(P均<0.05)。对照组内膜腺上皮HGF和HGFA的表达增殖期强于分泌期(P<0.05)。HGF和HGFA两者在各组内膜腺上皮中的表达水平呈正相关(P<0.05)。结论:子宫内膜异位症患者在位内膜腺上皮HGF和HGFA的高表达可能与子宫内膜异位症的发病相关。     

OTR、ER在子宫腺肌病中的表达及与痛经的关系

目的:探讨OTR、ER在子宫腺肌病患者在位及病灶组织中的表达及其与痛经的关系。方法:采用免疫组化法检测30例子宫腺肌病在位和异位内膜中OTR、ER的表达,以子宫正常肌层组织和在位内膜为对照。结果:在子宫腺肌病灶组织中OTR、ER的表达高于在位内膜组及对照组(P<0.05);在子宫腺肌病组的在位内膜和病灶组织中,痛经组OTR、ER的表达高于无痛经组及对照组(P<0.05);在不同痛经程度分组中OTR、ER的表达依次降低。在子宫腺肌病的在位内膜和病灶组织中,OTR、ER两者之间存在正相关关系。结论:子宫腺肌病组织中OTR、ER的表达随痛经程度增强而增加,在子宫腺肌病痛经的发生与发展间可能存在协同作用。     

COX-2和VEGF在子宫腺肌病组织中的表达及其意义

目的:观测子宫腺肌病异位子宫内膜组织COX-2和VEGF表达及其临床意义。方法:34例经病理证实为子宫腺肌病标本为研究组,30例非子宫腺肌病子宫标本为对照组。采用免疫组化法检测研究组原位内膜和腺肌病病灶、对照组内膜和子宫平滑肌层中COX-2和VEGF的表达。采用RT-PCR检测COX-2mRNA和VEGFmRNA的表达。结果:COX-2和VEGF在研究组原位内膜和腺肌病病灶中的表达率均高于对照组内膜,研究组腺肌病病灶表达率均高于原位内膜(P<0.01)。增殖期和分泌期二者在腺肌病病灶表达率均无统计学差异(P>0.05)。分泌期二者在研究组和对照组中内膜的表达均高于增殖期(P<0.05)。COX-2和VEGF蛋白表达存在线性相关(r=0.787,0.562,P<0.01)。RT-PCR检测表明,COX-2mRNA在研究组腺肌病病灶存在高表达,对照组肌层和内膜不存在COX-2mRNA表达。比较对照组正常肌层,腺肌病病灶中VEGF165和VEGF121呈现高表达(P<0.01)。结论:COX-2和VEGF的高表达可能与子宫腺肌病的发生、发展有关。