紫外光血液辐照疗法对放射治疗鼠肿瘤细胞DNA含量、AgNORs计数的影响

应用多功能图像分析仪，检测了鼠Ｗ２５６移植性肿瘤细胞ＤＮＡ含量，并同时测定细胞ＡｇＮＯＲｓ计数，探讨紫外光血液辐照疗法（ＵＢＩ）对放射治疗的增敏作用。结果表明；光量＋放疗组肿瘤细胞ＤＮＡ含量为５．３４±１．０９Ｃ，ＡｇＮＯＲｓ计数为２．２４±０．４３；单纯放疗组肿瘤细胞ＤＮＡ含量为７．８３±０．８６Ｃ，ＡｇＮＯＲｓ计数为５．３５±０．８４；前者ＤＮＡ含量及ＡｇＮＯＲｓ计数显著小于后者（Ｐ＜０．０５）。表明ＵＢＩ对放疗恶性肿瘤有明显的增敏作用。     

大肠癌细胞DNA、AgNORs定量研究──两者相关性及预后意义的探讨

应用ＡｇＮＯＲｓ染色技术，对６３例大肠癌的ＡｇＮＯＲｓ颗粒进行了计数研究。其中３８例同时进行肿瘤细胞核ＤＮＡ含量静态测定。结果表明，大肠癌细胞ＡｇＮＯＲｓ数量与其ＤＮＡ含量之间有明显相关性（Ｐ＜０．０ｌ）。ＤＮＡ含量和ＡｇＮＯＲｓ计数愈低，肿瘤分化愈好，患者预后愈好；反之，ＤＮＡ含量和Ａｇ－ＮＯＲｓ计数愈高、肝瘤分化愈差，患者预后愈差。表明ＡｇＮＯＲｓ计数，ＤＮＡ含量检测均可作为大肠癌分级、判断预后的参考指标。     

前列腺癌AgNOR计数与DNA含量测定的意义

作者应用银染色技术对３０例前列腺癌、２０例前列腺增生症组织中的核仁组成区相关嗜银蛋白（ＡｇＮＯＲ）进行检测，并采用图像分析技术测定其ＤＮＡ含量。结果显示，在前列腺癌组织中，ＡｇＮＯＲ计数与ＤＮＡ含量均明显高于前列腺增生症组织（Ｐ＜０．００１）；肿瘤分化越差，ＡｇＮＯＲ计数和ＤＮＡ含量越高，并且与患者预后相关（Ｐ＜０．００１）；ＡｇＮＯＲ计数与ＤＮＡ含量呈明显的正相关（Ｐ＜０．０１）。结果提示ＡｇＮＯＲ计数与ＤＮＡ含量可作为反映前列腺癌生物学行为的指标。     

食管鳞癌组织AgNOR计数与DNA倍的关系

本文应用ＡｇＮＯＲ技术对２０例食管鳞癌手术切除标本中癌细胞核内ＡｇＮＯＲ进行计数，同时运用流式细胞分析技术测定其ＤＮＡ指数及Ｓ期细胞百分率，并与ＡｇＮＯＲ计数进行比较，结果显示：食管鳞癌细胞核内平均ＡｇＮＯＲ数目与Ｓ期细胞百分率呈明显正相关（ｒ＝０．７３）。而ＤＩ与ＡｇＮＯＲ计数无明显相关关系（ｒ＝０．３０）。     

食管鳞癌组织AgNOR计数与DNA倍体的关系

本文应用ＡｇＮＯＲ技术对２０例食管鳞癌手术切除标本中癌细胞核内ＡｇＮＯＲ进行计数，同时运用流式细胞分析技术测定其ＤＮＡ指数（ＤＩ）及Ｓ期细胞百分率，并与ＡｇＮＯＲ计数进行比较。结果显示：食管鳞癌细胞核内平均ＡｇＮＯＲ数目与Ｓ期细胞百分率呈明显正相关（ｒ＝０．７３）。而ＤＩ与ＡｇＮＯＲ计数无明显相关关系（ｒ＝０．３０）。     

核仁形成区相关嗜银蛋白与上皮细胞增殖

应用放射自显影和银染技术检测Ｗｉｓｔａｒ大鼠食管和小肠上皮细胞增殖状态结果表明：食管底层细胞３Ｈ－ＴｄＲ标记率０．２１，ＡｇＮＯＲｓ数目１．７７，高于浅层细胞的０．０５和１．４０（Ｐ＜０．００５）。肠腺上皮细胞３Ｈ－ＴｄＲ标记率为０．７５，ＡｇＮＯＲｓ数目２．７７，高于绒毛上皮细胞的０．５０和２．０５（Ｐ＜０．００１）。３Ｈ－ＴｄＲ标记率和ＡｇＮＯＲｓ数目在底层细胞（ｒ＝０．８６）、浅层细胞（ｒ＝０．８８）、肠腺细胞（ｒ＝０．９１）和绒毛细胞（ｒ＝０．６７）均呈直线密切正相关。提示：上皮细胞中ＡｇＮＯＲｓ数目与ＤＮＡ合成同步增长；ＡｇＮＯＲＳ数目准确标示了不同增殖状态细胞群体，是反映细胞增殖水平的敏感指标。     

肺癌细胞AgNOR计数与DNA含量测定之间相关性研究

目的研究肺癌细胞ＤＮＡ倍体类型和核仁组织区嗜银蛋白（ＡｇＮＯＲ）及两者之间的相互关系。方法对３６例肺癌石蜡标本进行细胞ＡｇＮＯＲ定量计数和ＤＮＡ含量的流式细胞术（ＦＣＭ）检测。检测结果进行ｔ检验和Ｘ２检验。结果二倍体肺癌细胞ＡｇＮＯＲ计数（１．６５±０．８７）显著低于异倍体肺癌细胞者（３．０９±１．０３）细胞周期中Ｓ期细胞＜２０％的肺癌细胞ＡｇＮＯＲ计数（１．３８±１．０２）显著低于Ｓ期细胞≥２０％者（２．７７±１．１４）。在二倍体肿瘤中，分化Ⅱ级和Ⅲ级细胞的ＡｇＮＯＲ计数显著高于分化Ⅰ级者，但在Ⅱ、Ⅲ级之间ＡｇＮＯＲ计数则无显著差异；分化Ⅲ级肿瘤的异倍体检出率显著高于分化Ⅰ、Ⅱ级肿瘤，但在Ⅰ、Ⅱ级之间异倍体检出率则无显著差异。结论细胞ＤＮＡ含量和ＡｇＮＯＲ计数与肺癌细胞的增殖状态、恶性程度及预后有密切相关性；在病理分级中以上两种检测具有互补性。     

恶性淋巴瘤AgNORs定量分析的临床意义

采用核仁组成区相关嗜银蛋白（ＡｇＮＯＲｓ）染色技术，对７１例淋巴结良、恶性病变的组织石蜡切片进行ＡｇＮＯＲｓ定量研究。结果显示：３２例淋巴结良性病变平均每个细胞核内ＡｇＮＯＲｓ计数为１．７９±０．５９，３１例恶性淋巴瘤平均每个细胞核内ＡｇＮＯＲｓ计数为６．６２±３．０２，８例淋巴结内低分化转移癌平均每个细胞核内ＡｇＮＯＲｓ计数高达１３．７７±５．２４，表明良、恶性病变ＡｇＮＯＲｓ计数差别十分显著（Ｐ＜０．０１）。２０的非何杰金淋巴瘤（ＮＨＬ）中，低度恶性组ＡｇＮＯＲｓ计数为３．７９±１．４６，而中、高度恶性组ＡｇＮＯＲｓ计数为平均每个细胞核内ＡｇＮＯＲｓ８．２８±２．５８，两组比较差别有显著意义（Ｐ＜０．０１），显示低分化的恶性肿瘤，具有更加恶性的生物学行为。     

胃癌前病变AgNOR面积及形态与其DNA含量的对照研究

本文应用计算机图象分析系统对１０例肠化、３０例不同程度异型增生的胃粘膜，１０例正常胃粘膜和１０例高分化腺癌细胞核内ＡｇＮＯＲ蛋白的面积及其颗粒的形状进行了定量，并测定了其ＤＮＡ含量，结果显示，随胃粘膜病变程度的加重，其核内ＡｇＮＯＲ蛋白与ＤＮＡ含量依次增加，而ＡｇＮＯＲ颗粒的形状因子呈递减趋势。ＡｇＮＯＲ蛋白面积／核和其颗粒的形状因子与ＤＮＡ含量均有良好的线性相关关系，前者为正相关（ｒ＝０．９９Ｐ＜０．００１），后者为负相关（ｒ＝－０．９５２Ｐ＜０．００１）。我们认为，ＡｇＮＯＲ面积及其颗粒的形状可以反映出胃粘膜的病变程度。可作为胃癌前病变诊断及病情监测的有用指标。     

DNA与AgNOR在甲状腺良、恶性病变中的定量研究

本研究采用Ｆｅｕｌｇｅｎ染色和ＡｇＮＯＲ银染色，检测ＤＮＡ及ＡｇＮＯＲ物质，发现：ＤＮＡ含量Ⅲ级为甲状腺癌组＞非典型结节组＞结甲肿组＞对照组，而Ⅰ级则反之；ＡｇＮＯＲ均数为甲状腺癌组（９．２７±２：７２）＞非典型结节组（４．７８±１．６６）＞结甲肿组（３．１６±１．３８）＞对照组（３．０８±０．４１）；甲状腺癌组与各组间差异有显著意义（Ｐ＜０．０１），非典型结节组与结甲肿组、对照组间差异也有显著意义（Ｐ＜０．０１），而结甲肿组与对照组间则无差异（Ｐ＞０．０５）。作者认为Ⅲ级ＤＡＮ含量的细胞出现频率越高或／和ＡｇＮＯＲ均数越高，恶性的可能性就越大或分化程度越低；本研究提示ＡｇＮＯＲ的均数与ＤＮＡ含量具有显著的相关性，并与细胞增生的程度呈正比，故对鉴别良、恶性肿瘤及交界性病变有肯定价值。     

肺鳞癌及癌前病变的核仁组成区嗜银蛋白测定分析

本文应用ＡｇＮＯＲｓ染色法，对肺鳞癌癌变不同阶段的支气管活检粘膜组织其８５例石蜡切片作定量分析。结果表明，在这一癌变过程中，ＡｇＮＯＲ颗粒既有数量的增加，也有形态的异常，组织学分级与ＡｇＮＯＲ／核均数及畸异型胞核呈正相关ｒ＝０．９１０和０．９０７，Ｐ值均〉０．０５，与核仁型胞核负相关ｒ＝（－０．９６２，Ｐ〈０．００５）。对ＡｇＮＯＲ的数量及颗粒形态的分计数综合分析，试图为肺鳞癌和癌前病变的论断及其     

放疗或化疗对肺癌细胞AgNOR的影响

目的探讨放疗或化疗对肺癌细胞核仁组织区嗜银蛋白（ＡｇＮＯＲ）的影响。方法应用ＡｇＮＯＲ染色技术检测３５例未治疗肺癌和３７例化疗或放疗后肺癌细胞核内ＡｇＮＯＲ颗粒数目，并进行对比分析。结果未治疗组鳞癌、腺癌、小细胞癌ＡｇＮＯＲ数分别为４．７２±０．６８、４．２７±０．８７和５．６３±０．８２，化疗组分别为３．６７±１．０４、３．８８±０．８４和３．３４±０．９２，放疗组鳞癌和小细胞癌分别为３．６３±０．５６和３．０６±０．８５。治疗组与未治疗组有显著差异（Ｐ＜０．０１）；鳞癌、小细胞癌也均有显著差异（Ｐ＜０．０１），而腺癌无明显差异。ＡｇＮＯＲ均值下降率依次为放疗、化疗组小细胞癌（３９．８７％和３４．３１％）、鳞癌（１７．１６％和１７．８４％）和化疗组腺癌（９．３１％）。结论放疗或化疗对鳞癌和小细胞癌ＡｇＮＯＲ有明显影响。     

ＮＯＤ１对甲状腺癌细胞 ＢＰＣＰＡ恶性生物学功能的影响及机制

目的：探讨核苷酸结合寡聚结构域 １（ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ｂｉｎｄｉｎｇｏｌｉｇｏｍｅｒｉｚａｔｉｏｎｄｏｍａｉｎ１,ＮＯＤ１）对甲状腺癌细胞 ＢＰＣＰＡ生物学行为的影响及其调控机制。方法：通过 ｓｉＲＮＡ技术干扰甲状腺癌细胞株 ＢＰＣＰＡ中 ＮＯＤ１的表达水 平,转染空载体质粒 ＮＣｓｉＲＮＡ的细胞命名为 ｓｉＮＣ组,转染 ＮＯＤ１干扰质粒 ＮＯＤ１ ｓｉＲＮＡ的细胞命名为 ｓｉＮＯＤ１组。 采用 ｑＲＴ ＰＣＲ和 Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ验证干扰效果;采用 ＥｄＵ增殖实验检测 ＮＯＤ１表达下调后细胞增殖的变化;流式细胞 术检测 ＮＯＤ１表达下调后细胞周期和凋亡的变化;细胞划痕实验检测 ＮＯＤ１表达下调后细胞运动能力的变化;Ｔｒａｎ ｓｗｅｌｌ实验检测 ＮＯＤ１表达下调后细胞侵袭能力的变化;Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测干扰 ＮＯＤ１对 ＭＡＰＫ信号通路的影响。结 果：转染 ＮＯＤ１ｓｉＲＮＡ后,ｓｉＮＯＤ１组细胞中 ＮＯＤ１的 ｍＲＮＡ和蛋白表达水平较 ｓｉＮＣ组明显下降（０．１９４±０．０５９ｖｓ １．００±０．０００,ｔ＝１９．２２０,Ｐ＜０．００１;０．０７３±０．０２０ｖｓ０．３５２±０．０４０,ｔ＝８．８５２,Ｐ＜０．００１）;ｓｉＮＯＤ１组细胞的 ＥｄＵ阳 性率高于 ｓｉＮＣ组（７６．４１％ ±３．７５％ ｖｓ２８．７５％ ±３．７９％,ｔ＝４．７５１,Ｐ＜０．００１）;相较于 ｓｉＮＣ组细胞,ｓｉＮＯＤ１组 Ｇ１ 期细胞比例下降（６６．２３％ ±４．２８％ ｖｓ５５．３８％ ±３．１１％,ｔ＝２．９０２,Ｐ＝０．０４４）,Ｓ期和 Ｇ２／Ｍ期细胞比例增加 （２２．４１％ ±２．８７％ ｖｓ３６．００％ ±３．４９％,ｔ＝４．２４９,Ｐ＝０．０１３;６．８４％ ±０．５０％ ｖｓ１０．９２％ ±１．０８％,ｔ＝４．８５９,Ｐ＝ ０．０１０）;ｓｉＮＯＤ１组和 ｓｉＮＣ组细胞的凋亡率差异无统计学意义（８．４７％ ±０．６１％ ｖｓ８．７４％ ±１．０３％,ｔ＝０．３２２,Ｐ＝ ０．７６３）;ｓｉＮＯＤ１组细胞划痕愈合距离显著多于 ｓｉＮＣ组［（６０９．３３±４１．１１）μｍｖｓ（３１６．６３±２４．０５）μｍ,ｔ＝８．６９１,Ｐ＝ ０．００１］;ｓｉＮＯＤ１组侵袭细胞数量为（５４５．３±２４．５）个,显著多于 ｓｉＮＣ组（３９２．３±１７．６）个（ｔ＝５．０６０,Ｐ＝０．００７）;ｓｉ ＮＯＤ１组细胞的 Ｐ３８和 ＥＲＫ磷酸化水平较 ｓｉＮＣ组高（１．１９６±０．０４５ｖｓ０．３５７±０．０３０,ｔ＝２１．９６１,Ｐ＜０．００１;０．７６４± ０．０３９ｖｓ０．２１９±０．０３８,ｔ＝１４．２６５,Ｐ＜０．００１）。结论：ＮＯＤ１通过 ＭＡＰＫ信号通路抑制甲状腺癌细胞 ＢＰＣＰＡ的增殖和转移,可能是甲状腺癌潜在的治疗靶点。     

甲状腺滤泡性肿瘤DNA含量与AgNOR计数研究

目的：探讨ＤＮＡ含量与ＡｇＮＯＲ对甲状腺良恶性滤泡性肿瘤的鉴别诊断价值。方法：应用流式细胞术和胶体银染技术对９例正常甲状腺组织和３６例滤泡生肿瘤（２２例腺瘤和１４例腺癌）进行ＤＮＡ含量分析和ＡｇＮＯＲ计数。结果：１４例滤泡性癌中，１１例为ＤＮＡ异倍体，而２２例滤泡性腺瘤仅１例为ＤＮＡ异倍体，且伴有不典型增生。ＡｇＮＯＲ由正常甲状腺组织、滤泡性腺瘤至滤泡性癌逐渐增加，相互之间有显著性差异（Ｐ〈０．０     

卵巢癌实验性化疗增敏中核仁形成区相关嗜银蛋白的图像分析

本实验以人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤（ＣＯＣ１／ＤＤＰ）为模型，运用银染和图像分析，观察瘤细胞核仁形成区相关嗜银蛋白（ＡｇＮＯＲｓ）在化疗增敏前后的变化。顺铂用环孢素Ａ增敏后，ＡｇＮＯＲｓ面积，颗粒数及面积与核面积比值均明显低于未增敏组（Ｐ＜０．０５）。提示ＡｇＮＯＲｓ定量研究可作为判断肿瘤化疗疗效，估计预后的一项参考指标。     

AgNOR在淋巴结病变良恶性鉴别诊断中的价值

本文应用核仁组成区银染色（Ａｇ－ｓｔａｉｎｅｄＮｕｃｌｅｏｌａｓＯｓｇａｎｉｓｅｓＲｅｇｉｏｎｓ，ＡｇＮＯＲｓ）技术对２０例组织细胞性坏死性淋巴结炎、１０例非何杰金氏恶性淋巴瘤的石蜡切片标本进行定量研究。结果表明，组织细胞性坏死性淋巴结炎细胞核内ＮＯＲＳ均值为１．４２±０．１０（ｘ±ＳＤ），显著低于非何杰金氏恶性淋巴瘤的ＮＯＲＳ均值（６．０８±１．３６，ｘ±ＳＤ），Ｐ＜０．００１。提示ＡｇＮＯＲｓ的定量研究对组织细胞性坏死性淋巴结炎与非何杰金氏恶性淋巴瘤的鉴别诊断具有一定价值。     

AgNOR检测在乳腺疾病中的应用

细胞核内核仁组成区相关嗜银蛋白（ＡｇＮＯＲ）的检测对乳腺良、恶性病变的鉴别诊断具有价值［１］。本文对４５１例乳腺恶性、良性及交界性病变进行了ＡｇＮＯＲ检测，发现良性组与恶性组无论数量还是形态、大小都有显著差异（Ｐ＜０．００１）。恶性肿瘤伴腋下淋巴结转移的病人术后２年内发生远处转移或死亡组其ＡｇＮＯＲ计数与无远处转移存活组比较有显著差异（Ｐ＜０．００５）．在交界性病变中ＡｇＮＯＲ平均计数介于良恶性之间，（平均计数４．５２）．在复发或癌变者的ＡｇＮＯＲ颗粒基本为弥散型或混合型，发生癌变者计数均超过平均值。我们认为交界性病变ＡｇＮＯＲ计数及形态对临床处理和估计预后均有价值。结果提示在非恶性病变的诊断中，尤其在交界性病变中ＡｇＮＯＲ计数大于４．５，且以弥散型或混合型为主者，要结合病人年龄及临床表现作出适宜的手术处理。     

淋巴结印片中良,恶性细胞AgNORs形态学观察

应用ＡｇＮＯＲｓ银染技术，观察６９例淋巴结及３例涎腺印片中良恶性细胞ＡｇＮＯＲｓ的形态、数量及特点，以提高活检淋巴结恶性肿瘤的检出率，推广ＡｇＮＯＲｓ染色技术在组织印片中的应用。结果表明：良性细胞全部为单一型（１００％），恶性肿瘤细胞大多数为聚集型、混合型或弥散型。本文结果提示ＡｇＮＯＲｓ染色技术可提高组织印片中恶性肿瘤细胞检出率，对协助诊断肿瘤细胞分化程度有一定参考价值。     

AgNOR计数对宫颈良恶性病变的鉴别诊断意义

目的：探讨核仁形成区嗜银蛋白（ＡｇＮＯＲ）计数对宫颈良恶性病变鉴别诊断价值。方法：采用ＡｇＮＯＲ银染法对比１５例宫颈癌癌与２２例慢性宫颈为的ＡｇＮＯＲ计数。结果：宫颈鳞癌与宫颈良性病变的ＡｇＮＯＲ计数差异有显著性（Ｐ〈０．０１）。宫颈不典型增生ＡｇＮＯＲ计数也较宫颈良性增生上皮增高（Ｐ〈０．０５）。结论：宫颈良恶性病变的ＡｇＮＯＲ计数明显不同,此方法简便易行,可用于宫颈良恶性病变的鉴别。     

大肠癌中AgNORs计量,PCNA,p53的表达与预后

采用嗜银染色、ＡＢＣ免疫组化染色技术分别检测了６０ 例大肠癌组织中的ＡｇＮＯＲｓ 颗粒数、ＡｇＮＯＲｓ 面积、ＰＣＮＡ及ｐ５３ 的表达量,结合临床Ｄｕｋｅｓ′分期,采用Ｃｏｘ 回归分析评估ＡｇＮＯＲｓ 颗粒数、ＡｇＮＯＲｓ 面积、ＰＣＮＡ、ｐ５３ 表达量及Ｄｕｋｅｓ′分期在大肠癌预后评估中的作用。建立预后判别方程为ｐｖ ＝ｅ（（０ ．７１０２３８Ｘｌ ＋ ０．９１８５Ｘ２ ＋ ０．５２７５１３Ｘ３ ＋ ０．４６３１５６Ｘ４）,判别值Ｌｎ（ｐｖ）≥１２．０ 时判别为存活５ ａ 以下,反之判为存活５ ａ 以上,灵敏度为９０．３％ ,特异度为９３．１ ％ ,准确率为９１ ．６％ 。提示ＡｇＮＯＲｓ 计量、ＰＣＮＡ、ｐ５３ 的表达多少可用于辅助评估大肠癌患者的预后。