AK细胞及环磷酰胺治疗肝癌的实验研究

为研究１ 种新的过继免疫化疗治疗肝癌的方法,采用肝癌细胞株Ｈ２２ 接种于近交系Ｂａｌｂ／ｃ 小鼠皮下,制成肿瘤模型。使用ＩＬ２ 、肿瘤活化的杀伤细胞（ＡＫ细胞）及环磷酰胺（Ｃｙ） 进行治疗,检测小鼠脾淋巴细胞ＮＫ、ＬＡＫ及ＣＴＬ 活性,用流式细胞仪检测Ｌ３Ｔ４ 亚群及Ｌｙｔ２ 亚群含量。结果表明在过继免疫化疗组小鼠ＬＡＫ 及ＣＴＬ活性明显高于其它治疗组（Ｐ＜ ０．０１）,荷瘤小鼠肿瘤结节生长较ＩＬ２ 组及Ｃｙ 组明显缓慢（Ｐ＜ ０．０１）,生存期也明显高于其它各治疗组（Ｐ＜０ ．０１）。该研究表明过继免疫化疗有较强的抗肿瘤作用。     

康莱特注射液诱导人肝癌细胞凋亡的研究

目的：探讨康莱特注射液诱导人肝癌细胞凋亡的作用。为康莱特注射液治疗肝癌提供理论依据。方法：采用免疫组织化学及透射电镜技术观察康莱特注射液对肝癌细胞凋亡的影响。结果：肝癌细胞经康莱特注射液培养24h后,其凋亡的百分率明显高于对照组和空白组,有显著性差异（P＜0．05）,且组织细胞凋亡在50％以上者占44．12％（15／34）,而对照组及空白组无1例凋亡超过50％;电镜相可见较为典型的细胞凋亡的形态学变化,细胞核固缩,染色质凝集,呈新月型紧贴于核膜周边,核碎裂,凋亡小体形成等。结论：康莱特注射液能诱导肝癌细胞发生凋亡;诱导细胞凋亡可是康莱特注射液治疗作用的重要机制。     

CD3AK细胞治疗原发性肝癌的实验及临床应用研究

目的观察CD3AK细胞体外杀瘤活性及其治疗中晚期原发性肝癌的效果。方法采用抗CD3单克隆抗体（CD3McAb）辅以少量rlL—2和PHA诱导外周血淋巴细胞制备CD3AK细胞。体外实验用MTT法测定其对K562、Hela—3和H7402肿瘤细胞株杀瘤活性，然后应用于临床，将140例中晚期肝癌患者随机分为三组，A组5l例（CD3AK细胞十化疗），B组45例（单纯化疗），C组44例（单用CD3AK细胞治疗）。结果CD3AK细胞体外对K562、Hela－3和H7402细胞株杀瘤率分别为78．54％、34．09％和64．37％，抗肿瘤效应的最佳时期在培养的第7～10天之间；临床治疗部分缓解率（PR）A、B、C组分别为45．1％、17．7％和20．5％，A、B两组比较有显著性差异（P＜0．o1）。结论CD3AK细胞是继LAK细胞后又一为有效的杀瘤细胞，临床应用安全可靠、有效，在中晚期肝癌辅助治疗中有着良好的应用价值，合理结合其它疗法可增强疗效。     

洛铂对人肝癌细胞HepG2增殖及凋亡作用的实验研究

目的 探讨洛铂（LBP）对人肝癌HepG2细胞增殖、凋亡的影响及其可能机制。方法取对数生长期HepG2细胞,分别采用不同浓度LBP（0、2.5、5、10、20 μmol／L）处理48 h。普通光镜观察细胞形态学改变;MTS法检测细胞增殖,并计算半数抑制浓度（IC50）;Annexin Ⅴ-FITC／PI双染法及Hoechst 33258染色检测细胞凋亡;Western blotting检测Bax、Bak、Bcl-2、Bid、Bcl-XL、Survivin及PARP-1蛋白表达。结果 随着LBP浓度的升高HepG2细胞密度减少,离巢死亡细胞数目增多;光镜下可见典型核固缩、碎裂的凋亡细胞。LBP能显著抑制HepG2细胞增殖,且呈浓度和时间依赖性（P＜0.05）;2.5、5、10、20 μmol／L的LBP作用HepG2细胞48 h后的增殖率分别为（92.11±1.79）％、（65.87±1.78）％、（51.57±0.81）％及（33.11±1.47）％; LBP作用HepG2细胞48 h的IC50为13.28 μmol／L。2.5、5、10、20 μmol／L LBP作用48 h HepG2细胞的凋亡率分别为（11.64±0.85）％、（20.99±2.21）％、（33.02±2.30）％和（40.77±1.58）％,与LBP 0 μmol／L 的（3.29±0.43）％比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。2.5、5、10、20 μmol／L LBP能够下调HepG2细胞中的Bcl-2、Mcl-1蛋白表达,上调Bax、Bid、PARP-1蛋白表达, 对Bcl-XL、Bak及Survivin蛋白表达无影响。结论 LBP能够诱导HepG2细胞凋亡、抑制细胞增殖,其可能机制与上调Bax、Bid和PARP-1蛋白以及下调Bcl-2、Mcl-1蛋白表达有关。     

异环磷酰胺治疗晚期非小细胞肺癌的疗效观察

「目的」观察异环磷酰胺（ＩＦＯ）为主的方案治疗晚期非小细胞肺癌的疗效和毒副反应２。「方法」采用ＩＡＰ或ＩＥＰ方案治疗晚期非小细胞肺癌３８例，ＩＦＯ１．４ｇ／ｍ＾２ｄ１￣５；ＤＤＰ２５ｍｇ／ｍ＾２ｄ１￣３；ＡＤＭ３０ｍｇ／ｍ＾２ｄ１和Ｖｐ１６６０ｍｇ／ｍ＾２ｄ１￣３。「结果」鳞癌有效率３５．７％（５／１４）；腺癌有效率为４５．０％（９／２０）；总有效率３９．５％（１５／３８）。主要毒副反应为骨髓抑制     

环磷酰胺诱导小鼠HAC肝癌细胞凋亡和抑制增殖的体内实验研究

目的 探讨环磷酰胺对荷瘤鼠ＨＡＣ肝癌细胞凋亡和增殖的影响。方法 建立小鼠ＨＡＣ肝癌荷瘤模型,用ＴＵＮＥＬ法和免疫组化法检测环磷酰胺作用下,ＨＡＣ肝癌细胞的凋亡和ＰＣＮＡ表达的变化。结果 １５ｍｇ／ｋｇ环磷酰胺的抑瘤率４３％。ＨＡＣ肝癌细胞的凋亡指数１．９３％,较荷瘤对照组１．１１％明显升高（Ｐ〈０．０５）。增殖指数３５．７５％,较荷瘤对照组５６．３８％明显下降（Ｐ〈０．０１）。结论 环磷酰胺有诱导     

水飞蓟宾对人肝癌细胞SMMC-7721体外增殖的影响

目的：探讨水飞蓟宾对SMMC-7721细胞的抗增殖作用。方法：MTT法观察对细胞的抑制作用;免疫细胞化学法检测增殖细胞核抗原（PCNA）及Ki-67的表达;流式细胞仪分析细胞周期及凋亡;光镜及透射电镜观察细胞形态学的变化。结果：水飞蓟宾可抑制SMMC-7721的增殖,并降低PCNA、Ki-67的表达及引起细胞G2/M期阻滞,同时诱导凋亡。光镜发现细胞体积缩小,核固缩深染;电镜可见凋亡及凋亡小体。结论：在体外,水飞蓟宾可抑制SMMC-7721细胞的增殖。     

含国产异环磷酰胺化疗方案治疗晚期非小细胞肺癌

非小细胞肺癌 (ＮＳＣＬＣ)由于起病隐匿 ,临床上发现时多为晚期 ,临床治疗上多以内科化疗为主。但疗效并不尽人意。异环磷酰胺 (ＩＦＯ)及其尿路保护剂美司钠的出现为ＮＳＣＬＣ的治疗提供了希望。在国外以ＩＦＯ为主的方案治疗有效率在 40 %— 5 0 %之间。 1 995年 1月— 1 998年 1 2月我们采用国产异环磷酰胺 (江苏恒瑞制药有限公司出品 ,商品名匹服平 )与顺铂 (ＤＤＰ)和长春地辛 (ＶＤＳ)组成联合化疗方案治疗晚期ＮＳＣＬＣ 5 3例 ,取得较好的疗效。材料和方法一　研究对象　 5 3例晚期非小细胞肺癌患者均为我科住院病人 ,男性 45例 ,…     

苦参碱对小鼠H22肝癌细胞凋亡作用的实验研究

目的：研究中药苦参碱在体内外对小鼠H22肝癌细胞的诱导凋亡作用，探讨其可能的抗肿瘤作用机制。方法：Annexin V-FITC／PI双标记法检测苦参碱对H22细胞的早期促凋亡作用；免疫组织化学法检测苦参碱作用后H22细胞内Bcl-2、Bax两种凋亡相关蛋白的表达。建立H22肝癌移植瘤小鼠模型，观察苦参碱对荷瘤小鼠肿瘤生长情况的影响及肿瘤抑制率；电镜观察荷瘤小鼠肿瘤组织的超微结构改变；免疫组化方法检测小鼠肿瘤组织内Bcl-2、Bax的表达情况。结果：AnnexinV法检测到1．0mg／mL和1．5mg／mL苦参碱作用48h后H22细胞有早期凋亡改变，凋亡细胞百分率分别为11．71％和17．86％，与对照组相比差异有统计学意义（P〈0．05）。苦参碱对荷瘤小鼠肿瘤的抑制率达60％以上；免疫组化显示，苦参碱作用后H22细胞内及小鼠肿瘤组织内Bcl-2蛋白的表达水平下降，Bax蛋白表达增强。电镜证实苦参碱治疗后荷瘤小鼠肿瘤组织内有凋亡细胞和凋亡小体的存在。结论：苦参碱在体内体外都对小鼠H22肝癌细胞表现出较强的抗肿瘤作用和诱导凋亡作用。促凋亡作用与其上调细胞内Bax表达，抑制Bcl-2表达有关。     

异环磷酰胺治疗晚期非小细胞肺癌的疗效观察

[目的]观察异环磷酰胺(IFO)为主的方案治疗晚期非小细胞肺癌的疗效和毒副反应。[方法]采用IAP或IEP方案治疗晚期非小细胞肺癌38例 ,IFO1 4g/m2d1～5;DDP25mg/m2d1～3;ADM30mg/m2d 1 或Vp1660mg/m2d1～3。[结果]鳞癌有效率35 7 %(5/14) ;腺癌有效率为45.0%(9/20) ;总有效率39 5%(15/38)。主要毒副反应为骨髓抑制 ,发生率为39 5 %。[结论]IFO联合化疗方案治疗晚期非小细胞肺癌有效率较高 ,毒副反应可以耐受 ,值得临床进一步推广。     

异环磷酰胺联合化疗方案治疗晚期非小细胞肺癌

我科自1997年1月开始用ＩＦＯ ＡＤＭ ＤＤＰ方案(简称ＩＡＰ)治疗晚期ＮＳＣＬＣ,取得了较好的疗效,现报告如下。资料和方法一　病人入选条件　①经病理学确诊的不能手术的晚期ＮＳＣＬＣ;②有可测量病灶;③Ｋａｒｎｏｆｓｋｙ评分≥60分;④血象、肝、肾及心功能正常;⑤能接受二个以上周期化疗,预计生存期超过3个月。二　研究对象　40例晚期ＮＳＣＬＣ,男性29例,女性11例,中位年龄51岁,均为初治,其中腺癌21例,鳞癌17例,腺鳞癌2例,Ⅲａ期3例,Ⅲｂ期20例,Ⅳ期17例。三　治疗方案　本组患者采用ＩＡＰ方案,用法:ＩＦＯ每次12ｇ/ｍ2静滴,连用5…     

肝癌患者自体CD3AK细胞与LAK细胞的杀伤活性比较

目的 比较肝癌患者自体CD3AK细胞和LAK细胞的杀伤活性,为临床是供依据。方法 以流式细胞仪检测细胞的杀伤活性。结果 原发性肝癌患者自体的CD3AK细胞的NK活性和LAK活性均高于LAK细胞。结论 CD3AK细胞效果稳定,抗瘤效应明显高于LAK细胞,CD3AK细胞可望作为一种新的生物治疗手段用于肿瘤治疗。     

肝癌细胞凋亡相关蛋白Bax的表达及意义

Ｂｃｌ 2家族是目前被广泛研究的一个与细胞凋亡相关基因家族。Ｂｃｌ 2家族包括作用相反的 2个亚类 :①促进凋亡的Ｂａｘ和Ｂａｋ等 ;②抑制凋亡的Ｂｃｌ 2和Ｂｃｌ ｘｌ等。Ｂａｘ是Ｂｃｌ 2家族中最主要的促凋亡基因。Ｂａｘ蛋白广泛分布于人体许多组织和细胞中 ,尤其在肝脏和肾小管等组织表达较高。与其起源组织相比 ,Ｂａｘ蛋白在多数肿瘤组织及其细胞系中表达下降。对于原发性肝细胞癌 (简称肝癌 )的Ｂａｘ蛋白表达情况目前报道很少。Ｂｅｅｒｈｅｉｄｅ等的研究显示 ,肝癌组织中的Ｂａｘ蛋白表达水平和Ｂａｘ/Ｂｃｌ 2比例均明显低于…     

异环磷酰胺为主治疗晚期非小细胞肺癌疗效和毒性

近年来,ＩＦＯ以单药或联合化疗用于多种恶性肿瘤治疗,并取得明显疗效。本文总结以ＩＦＯ为主的化疗方案治疗32例晚期非小细胞肺癌的临床观察。材料和方法一　研究对象　1995年9月—1997年9月期间住院的晚期肺癌患者32例,其中男20例,女12例,年龄32—73岁。经病理确诊,其中鳞癌15例,腺癌12例,肺泡细胞癌5例。32例中,初次治疗18例,既往化疗后病情进展9例,放疗后复发并远处转移5例。临床分期Ⅲｂ期15例,Ⅳ期17例,均无手术治疗适应证,其中合并上腔静脉综合征5例,合并癌性胸水9例。ＥＣＯＧ评分0分8例,1分14例,2分7例,3分3例。二　治疗方案　ＩＣ…     

CD3AK细胞生物学特性及抗肿瘤作用研究

过继输注体外激活的抗肿瘤效应细胞直接或间接地介导体内肿瘤消退是肿瘤生物治疗研究的重要课题之一。８０年代初,ＮＩＣ的Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ等人发现的ＩＡＫ细胞及其在实验动物和人类肿瘤治疗中抗肿瘤作用的证实将这一工作推进到了一个新的阶段。迄今在用于过继免疫治疗的各种抗肿瘤效应细胞中,ＬＡＫ细胞和ＴＩＬ细胞已引入临床。但近年来的研究观察表明,ＬＡＫ细胞只对少数肿瘤有效,多数肿瘤疗效不佳。ＴＩＬ细胞的抗肿瘤作用虽然优于ＬＡＫ细胞,但由于前体细胞来源困难,临床推广应用受到一定的限制。因此,目前有关的研究工作随…     

CD3AK细胞和LAK细胞治疗晚期恶性肿瘤的临床和实验研究

将５１例晚期恶性肿瘤患者（男性２３例，女性２８例）分成两组，其中一组（３１例）以ＣＤ３ＭｃＡｂ（ＣＤ３单克隆抗体）和小剂量ＩＬ－２（５００ｕ／ｍｌ）共同诱导的ＣＤ３ＡＫ细胞治疗，另一组（２０例）输注大剂量ＩＬ－２（１０００ｕ／ｍｌ）诱导的常规ＬＡＫ细胞治疗，以探讨降低ＩＬ－２用量、提高杀伤细胞细胞毒活性的可能性。结果显示ＣＤ３ＡＫ组患者生活质量改善、症状缓解均优于ＬＡＫ组。ＣＤ３ＡＫ组ＰＲ＋ＭＲ率较ＬＡＫ组高２９．０％，Ｓ＋Ｐ率和死亡率分别较ＬＡＫ组低１２．４％和９．６％。同时比较了ＣＤ３ＡＫ细胞与ＬＡＫ细胞的体外增殖和细胞毒活性，结果表明ＣＤ３ＡＫ细胞增殖率高于ＬＡＫ细胞（Ｐ＜０．０１），靶细胞抑制率二者在０．０５水平无显著差异。提示ＣＤ３ＭｃＡｂ在刺激杀伤细胞活性，尤其在提高其增殖能力方面，具有显著的作用，ＣＤ３ＡＫ／ＩＬ－２能更有效地治疗晚期恶性肿瘤。     

异环磷酰胺联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌的初步临床报告

作者采用含异环磷酰胺的联合化疗方案治疗晚期复治的非小细胞肺癌１６例。结果：ＰＲ６例，ＮＣ８例，ＰＤ２例，无ＣＲ病例。有效率３７．５％，毒性反尖主要是骨髓抑制是轻微的消化道反应。加用Ｍｅｓｎａ和水化利尿后无出现肉眼血尿，但镜下血尿２例一过性蛋白尿６例。     

应用消碱免疫法初步合成抗人肝癌cDNA

目的 筛选抗人肝癌小鼠脾细胞库,初步合成ｃＤＮＡ。方法 利用消减免疫法以三株肝癌细胞系免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠,免疫组化法检测免疫小鼠血清与正常成人肝组织、肝癌组织的反应性,在此基础上进一步合成抗人肝癌ｃＤＮＡ。结果 免疫小鼠未与正常肝组织发生反应,而肝癌组织染色明显;由筛选小鼠脾细胞库初步合成了抗人肝癌ｃＤＮＡ。结论 应用此法免疫初步筛选了的抗人肝癌脾细胞库,为以后的实验研究奠定了良好的基础。     

异环磷酰胺联合诺维本治疗晚期非小细胞肺癌的临床观察

目前我国肺癌发病率仍在上升，其中绝大部分为非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)，确诊时多为晚期，化疗成为晚期NSCLC的主要手段，我科采用异环磷酰胺(ifosfamide)联合诺维苯(vinorelbine)的非铂类方案治疗晚期NSCLC 107例，结果总结报道如下。