基于UPLC指纹图谱结合化学计量学的肝爽颗粒质量评价研究

摘要：目的:建立肝爽颗粒的UPLC指纹图谱,并结合化学计量学等方法寻找表征不同批次肝爽颗粒质量差异性标志物,为科学全面地评价肝爽颗粒的质量提供参考。方法:采用UPLC法对18批肝爽颗粒进行分析,建立肝爽颗粒指纹图谱,使用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”进行相似度评价,利用对照品对共有峰进行指认,并结合化学计量学方法对不同批次肝爽颗粒质量及控制方法进行分析和评价。结果:建立的指纹图谱确定23个共有峰,指认出10个成分,分别为阿魏酸（5号峰）、虎杖苷（6号峰）、菊苣酸（7号峰）、柚皮苷（11号峰）、橙皮苷（12号峰）、迷迭香酸（13号峰）、新橙皮苷（14号峰）、丹酚酸B（16号峰）、大黄素（21号峰）、大黄素甲醚（23号峰）;18批肝爽颗粒指纹图谱的相似度均在0.990以上;聚类分析和主成分分析（PCA）将18批肝爽颗粒基本分为3类;正交偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA）筛选得到12个变量重要性投影（VIP）＞1的共有峰（峰7、2、19、22、3、20、14、5、1、11、13、4）,经对照品指认了其中5个差异性标志物（菊苣酸、新橙皮苷、阿魏酸、柚皮苷、迷迭香酸）。结论:该研究建立的UPLC指纹图谱方法合理、有效、准确、简便,结合化学计量学分析方法可用于评价肝爽颗粒的质量,为肝爽颗粒的质量控制提供科学依据。     

基于HPLC指纹图谱结合化学计量学评价天龙竭胶囊质量及5个成分的含量测定

目的:建立天龙竭胶囊HPLC指纹图谱分析方法,并同时测定红景天苷、三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、龙血素A和龙血素B的含量.方法:采用Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长203 nm,流速1 mL·min-,进样量10 μL,柱温30℃....     

党参HPLC指纹图谱结合多种化学模式识别研究

目的 基于HPLC指纹图谱对党参药材中多种化学成分进行含量检测,并结合多种化学计量学统计分析评价多产地多来源多批次的党参药材整体质量。方法 用ACE Neptune-C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈-0.15%甲酸水溶液为流动相,体积流量0.8 mL·min^-1,检测波长260 nm,柱温20℃,对41批次来源于多个产地的党参药材构建HPLC指纹图谱并结合化学计量学分析对党参质量进行评价,同时筛选出特征性成分进行含量检测及分析。结果 建立了党参HPLC指纹图谱,确定了23个共有峰,并指认了其中7个色谱峰;41批党参HPLC指纹图谱的相似度在0.650~0.962;聚类分析将41批次党参聚为2类;主成分分析中6个主要成分分别反映23个共有峰信息;偏最小二乘法判别分析中根据投影重要性指标的值进一步筛选出主要影响党参间差异的9个成分峰,并进行多指标成分的方法学考察,结果各成分的加样回收率在99.09%~103.68%,RSD为1.21%~3.68%。结论 不同产地和来源的党参药材存在一定的质量差异。通过指纹图谱、聚类分析、主成分分析及偏最小二乘法判别分析等方法相结合可全面地评价党参的质量,此方法的建立可以为党参的质量控制、产品评价提供一定的参考依据。     

基于HPLC指纹图谱结合多种化学模式识别评价生脉饮(党参方)质量

目的:建立多批次生脉饮(党参方)HPLC指纹图谱并采用多种化学计量学分析评价多厂家多批次生脉饮(党参方)的整体质量.方法:采用Ultimate XB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.15％甲酸水溶液,检测波长为260 nm,流速0.8 mL· min-1,柱温20℃,对多批不同厂家...     

基于指纹图谱结合化学计量学的独活寄生丸的质量评价研究

目的 建立独活寄生丸的指纹图谱,并采用化学计量学进行评价。方法 采用HPLC法建立独活寄生丸的指纹图谱和相似度评价,以聚类分析、主成分分析、正交偏最小二乘判别分析法分析数据。结果 建立了独活寄生丸HPLC特征指纹图谱,共确定32个共有峰,指认6个成分龙胆苦苷、川芎嗪、芝麻脂素、蛇床子素、细辛脂素、二氢欧山芹醇当归酸酯。15批独活寄生丸与对照图谱的相似度均大于0.900。15批独活寄生丸样品可分为2类,S1、S4、S6聚为一类,其余样品为另一类。9个主成分因子可作为独活寄生丸的评价指标。对模型分类贡献较大的3个变量,分别为共有峰4、17、2。结论该方法可用于独活寄生丸的质量评价,为独活寄生丸的质量标准研究提供依据。     

HPLC指纹图谱结合化学模式识别评价天冬的质量

目的 采用指纹图谱结合化学模式识别评价不同产地天冬的质量。方法 采用中谱红ODS-H C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm),流动相为乙腈-甲醇-0.1%磷酸水,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,柱温30℃,检测波长215 nm。采用SIMCA 14.1软件,用化学模式识别分析21批不同产地天冬样品的共有峰。结果 建立了不同产地天冬的HPLC指纹图谱,标定了11个共有峰,并指认了2个成分,相似度为0.712～0.951;聚类分析、主成分分析及偏最小二乘判别分析均将21批天冬分为4类,结合投影重要性指标(VIP)>1,筛选出峰1、峰5、峰6、峰8、峰9、峰11等6个成分可能是不同产地天冬的差异性特征成分。结论 所用方法稳定可靠、专属性强,可为综合评价不同产地天冬药材的质量提供参考。     

基于UPLC指纹图谱和化学计量学对华山参及其混伪品的鉴别研究

目的 建立华山参的UPLC指纹图谱,鉴别其正品和混伪品。方法 建立华山参的UPLC指纹图谱,对相似度进行分析,采用聚类分析、主成分分析、偏最小二乘-判别分析法对共有峰进行分析。结果 建立的指纹图谱共标定出15个共有峰。华山参正品的相似度均在0.867以上,混伪品的相似度均低于0.555。30批华山参样品聚为3类,正品与伪品、主产地与非主产地华山参药材被显著区分,并筛选出4个差异性成分。结论 建立的UPLC指纹图谱能有效鉴别华山参及其混伪品,为华山参药材的质量评价和真伪鉴别提供参考。     

基于多元化学模式识别分析的生姜UPLC指纹图谱研究

摘要：目的:建立生姜UPLC指纹图谱研究方法,通过多元化学模式识别分析,为生姜药材的质量控制提供参考。方法:采用Acclaim C18（2.1 mm×100 mm, 2.2μm）色谱柱,流动相为甲醇-乙腈-水,梯度洗脱,检测波长为280 nm,流速为0.4 ml·min-1,柱温为30℃,建立不同产地的生姜指纹图谱,利用总量统计矩分析、相似度评价、聚类分析、主成分分析和偏最小二乘判别分析等多元化学计量方法对生姜进行质量评价。结果:建立了18批生姜样品指纹图谱,确定了13个共有峰,18批样品相似度均大于0.9。经过聚类分析,18批生姜样品可聚为两类,采用主成分分析确定3个主成分为影响药材样品质量评价的主要因子;13个共有峰中对样品组分起关键作用的成分为峰3（6-姜辣素）、峰7、峰9、峰10、峰11、峰12。结论:利用UPLC法建立的生姜药材指纹图谱准确,可有效评价生姜药材的质量。     

基于指纹图谱通便灵胶囊的化学计量学分析

目的 通过HPLC建立通便灵胶囊指纹图谱,并借助化学计量学分析,对其进行系统、科学的质量评价。方法 采用JADE-PAK ODS柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,以流动相为甲醇（A）-0.1%甲酸溶液（B）,进行梯度洗脱,流速1.0 mL·min^–1,柱温30℃,检测波长340 nm,建立通便灵胶囊的指纹图谱,通过ChemPattern软件确立共有峰,利用UPLC-Q/TOF-MS对共有峰进行成分确认,并进行化学计量学分析。结果 通过建立的通便灵胶囊指纹图谱确定14个共有峰,主成分分析得分图显示4个厂家的样品能够明显区分开,偏最小二乘判别分析载荷图显示化学成分松果菊苷、山柰酚-3-O-β-D-槐糖苷和异鼠李素-3-O-龙胆二糖苷对4个厂家样品的区分有较大贡献。结论 不同厂家样品存在较大差异,有可能会造成药效的不一致,此方法可为通便灵胶囊的质量控制提供参考依据。     

基于指纹图谱结合化学计量学的香砂平胃颗粒质量评价

目的 建立评价香砂平胃颗粒质量的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱结合聚类分析(CA)及正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)法。方法 色谱柱为Waters XTERRA C₁₈柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为220 nm(苍术素、苍术醇)、284 nm(厚朴酚、和厚朴酚、橙皮苷、川陈皮素及甘草苷),柱温为25℃,进样量为10μL。以苍术素为参照,建立14批香砂平胃颗粒的HPLC指纹图谱;与对照品溶液比对,确定共有峰;结合化学计量学方法对制剂进行质量评价。结果 确定23个共有峰,指认7个成分,分别为甘草苷、橙皮苷、苍术醇、苍术素、川陈皮素、和厚朴酚、厚朴酚;14批制剂的指纹图谱相似度为0.971～0.994;CA和OPLS-DA结果显示,14批样品聚为3类,表明不同年份样品间的质量存在一定差异;发现5个差异性标志物,分别为苍术醇、和厚朴酚、厚朴酚、7号峰和16号峰。结论 所建立的HPLC指纹图谱结合CA及OPLS-DA方法,可有效评价香砂平胃颗粒的质量。     

基于UPLC指纹图谱结合化学计量学的小儿咳喘灵颗粒质量评价

目的 建立UPLC指纹图谱结合化学计量学的小儿咳喘灵颗粒质量评价方法。方法 采用UPLC法,以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,建立36批小儿咳喘灵颗粒的指纹图谱,并利用对照品对其特征峰进行指认;同时采用Chempattern化学计量学软件结合主成分分析(PCA)、聚类分析(CA)对数据进行处理,对不同厂家生产的小儿咳喘灵颗粒进行质量评价。结果 建立的小儿咳喘灵颗粒的UPLC指纹图谱有18个共有峰,并指认了8个成分((R,S)-告依春、绿原酸、隐绿原酸、木樨草苷、甘草苷、异绿原酸A、异绿原酸C、甘草酸);36批样品与对照指纹图谱的相似度均高于0.88;不同厂家及批次的小儿咳喘灵颗粒存在较大的差异。结论 所建立的指纹图谱能为小儿咳喘灵颗粒的质量控制提供更全面的参考。     

窍耳聋丸UPLC特征图谱的研究

目的：用UPLC建立通窍耳聋丸特征图谱的质量评价方法。方法：Acquity UPLC BEH C18色谱柱（2.1 mm×100mm,1.7μm）;流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液,采用梯度洗脱;流量0.3ml?min-1;检测波长250nm;柱温35℃。结果：建立的特征图谱信息丰富,7味中药材中的15个特征峰分离良好,且重复性和稳定性的相对标准偏差均小于1.0%。结论：所建立的方法快速、可靠,专属性强,适用于全面控制通窍耳聋丸的质量。     

基于液-质联用技术的乳腺癌血清代谢组学分析

目的：应用代谢组学的方法观察乳腺癌患者的血清代谢产物变化规律，并将其用于发现诊断乳腺癌病情进展及治疗的生物标志物。 方法：收集正常人和乳腺癌病人的血清标本，分为正常人组49例，乳腺癌组31例。经超高效液相色谱-三重四极杆-飞行时间串联质谱（UPLC/Q-TOF-MS）检测，将所得数据输入SIMCA-14.0软件，对其进行多变量统计分析。如主成分分析法（PCA）和正交偏最小二乘法判别分析（OPLS-DA）模式识别分析各代谢物的变化。 结果：乳腺癌和正常组血清产物水平呈现不同的分布。 结论：代谢组学方法可展示乳腺癌血清中代谢产物的变化特点，为进一步发现乳腺癌发病的生物机制奠定基础。     

基于网络药理学和化学计量学方法预测桔梗的质量标志物

目的 基于中药质量标志物(qualitymarker,Q-marker)理论的有效性和可测性对桔梗饮片Q-marker进行初步预测分析。方法 建立20批桔梗样品的指纹图谱，进行相似度评价，同时通过网络药理学构建“成分-靶点-通路”网络图，预测桔梗药材的潜在活性成分。运用主成分分析法、正交偏最小二乘判别分析等数理分析方法筛选差异性成分，并对候选成分进行含量测定。结果 建立的指纹图谱有19个共有峰，指认了8个共有成分作为候选活性成分，进行网络药理学分析。网络药理学筛选出6个联接度较高的化合物，基于Q-marker溯源及传递性、特有性、有效性、可测性等方面综合考虑，初步预测了木犀草素、紫丁香苷、绿原酸、桔梗皂苷D、桔梗皂苷D3和桔梗皂苷E作为桔梗潜在Q-marker。结论桔梗Q-marker预测分析为桔梗药材质量的全面控制提供参考，同时也为桔梗药效关联物质基础及作用机制的研究和探索奠定基础。     

不同产地黄芪药材的UPLC/Q-TOF-MS指纹图谱研究

目的:采用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱仪(UPLC/Q-TOF-MS)建立黄芪药材的指纹图谱,初步鉴定其主要色谱峰,并结合主成分分析(PCA)模式识别方法评价不同产地药材质量。方法:用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱,以水-乙腈-异丙醇体系梯度洗脱,使用ESI离子源,正、负离子模式下采集数据。应用Markerlynx软件进行不同产地药材的PCA分析。结果:在18 min内建立了黄芪药材的UPLC/Q-TOF-MS指纹图谱,结合PCA分析,可以区分不同产地的药材,并找出包括毛蕊异黄酮,芒柄花素,黄芪皂苷Ⅰ、Ⅱ等8个差异最大的化合物。结论:UPLC/Q-TOF-MS方法所得谱图重现性和特征性较好,可以用于黄芪指纹图谱的快速鉴别。应用化学计量学方法可以较全面地反映不同产地药材学成分的差异,为其质量控制提供实验依据。     

复方麝香注射液特征图谱及5种主要成分的含量测定

摘 要 目的： 利用气相色谱法建立复方麝香注射液的特征图谱,并同时测定薄荷脑、冰片、百秋李醇、麝香酮、α 细辛脑5种主要成分的含量。方法: 采用DB WAX毛细管色谱柱,FID检测器,采取固相萃取技术净化样品。结果: 特征图谱共有6个特征峰,10批样品与对照图谱相似度在0.91以上;薄荷脑、冰片、百秋李醇、麝香酮、α 细辛脑等5种成分在各自范围内线性关系良好,r均为0.999 9,回收率在95.1%~102.6％之间,RSD均小于3.0%。结论:该方法简单、准确、重复性好,特征图谱结合多成分含量测定较好地体现了复方麝香注射液的整体质量状况,可用于该制剂的质量控制。     

基于UPLC/Q-TOF-MS技术分析女贞子与墨旱莲配伍协同增效的物质基础

目的：探究女贞子与墨旱莲配伍前后化学成分变化,以期从化学层面阐释二者协同增效机制。方法：采用超高效液相色谱联用四级杆串联飞行时间质谱（UPLC/Q-TOF-MS）技术分析两药配伍前后化学成分差异,通过主成分分析和正交偏最小二乘判别法分析,根据高分辨质谱数据和元素组成等,对筛选到的潜在差异性成分进行结构鉴定。结果：两药合提液和合并液化学成分存在明显差异,其中女贞苷、蟛蜞菊内酯等含量显著下降,而特女贞苷、橄榄苦苷等含量显著升高。结论：女贞子与墨旱莲配伍可显著提高三萜类、环烯醚萜类等多种化学成分在合提液中的溶出量,为探明二者配伍协同增效机制的物质基础提供了重要的实验依据。     

Rapid qualitative and quantitative analyses of Asian ginseng in adulterated American ginseng preparations by UPLC/Q-TOF-MS

A new method using ultra-performance liquid chromatography quadrupole time-of-flight mass spectrometry (UPLC/Q-TOF-MS) was developed for the rapid qualitative and quantitative analyses of Asian ginseng (Panax ginseng C.A.Meyer) in adulterated American ginseng (Panax quinquefolium L.) preparations within 2 min. The method was based on the baseline chromatographic separation of isomeric compounds of ginsenoside Rf and 24(R)-pseudoginsenoside F₁₁, two potential chemical markers present in Panax ginseng C.A.Meyer and P. quinquefolium L. methanolic extracts.     

基于UPLC指纹图谱和化学计量学相结合的川芎质量研究

目的 建立并比较川芎药材、破壁饮片、标准煎液、配方颗粒的UPLC指纹图谱,分析其相似度并对川芎不同饮片形式进行聚类分析（cluster analysis,CA）及主成分分析（principal component analysis,PCA）,为川芎不同的饮片形式提供质量控制依据。方法 采用Waters ACQUITY UPLC BEH C₁₈色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.7 μm）;以乙腈-0.1%磷酸为流动相,梯度洗脱;流速0.3 mL·min^-1;检测波长276 nm;柱温35℃;进样量2 μL。对12批川芎药材及其标准煎液、7批破壁饮片、以及6家厂家的川芎配方颗粒进行检测,采用国家药典委员会中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件（2012年版）中位数法计算其相似度,并运用SPSS 22.0统计软件进行化学模式识别分析。结果 川芎各饮片形式相似度均>0.9,川芎药材、破壁饮片、标准煎液、配方颗粒与对照图谱的相似度分别为0.534,0.449,0.979,0.968。CA及PCA分析揭示了川芎不同饮片形式之间的相似性及差异性。结论 以指纹图谱数据为基础,将CA与PCA相结合,可以看出川芎每种饮片形式质量较稳定,并且川芎破壁饮片与药材相似度较高,川芎标准煎液与川芎配方颗粒相似度较高。     

红曲药材中洛伐他汀含量及指纹图谱的质量评价

目的：初步调查红曲药材的质量现状。方法：从市场上随机抽取5份红曲药材,依据《中国药典》2015版一部收载方法考察其指纹图谱以及其主要功效成分洛伐他汀的含量。结果：抽取到的5份红曲药材的指纹图谱与《中国药典》收载的对照图谱以及彼此之间均有显著性差异,均未检出洛伐他汀（最低检出限约为1 ng）,显微鉴别难以发现红曲发酵菌紫色红曲霉的典型特征。结论：目前流通市场上的红曲药材质量一致性较差,亟需规范提高。