美禽流感疫苗通过人体试验可预防H5N1病毒

据医学空间网8月9日报道，美国科学家研制的第一种人用禽流感疫苗已经通过人体试验，这种疫苗能保护人类不受高致病性H5N1禽流感病毒的感染。     

H5N1高致病性禽流感病毒研究进展

流行性感冒病毒属正粘病毒科,根据内部核蛋白（NP）和基质蛋白（MP）抗原性的不同,将流感病毒分为A型、B型和c型3型。A型流感病毒的基因组是由8个分节段的单负链RNA组成,编码11种蛋白质,表面糖蛋白为HA和NA,根据HA和NA的抗原差异分为16种HA亚型（H1一H16）和9种NA亚型（N1～N9）。     

试验鸡感染H5N1亚型禽流感病毒后排毒规律的研究

目的　为揭示H5N1亚型禽流感病毒感染试验鸡后体内各组织的排毒规律。方法　将 180只 2 8d非免疫石岐杂鸡随机分为两组 ,每组 90只 ,一组为攻毒组 ,用含H5N1亚型AIV(A/Goose/GD/ 2 / 96 ,对 2 8d非免疫石岐杂鸡LD50 为 10 -5 4× 0 2ml)尿囊液 10 -4× 0 2ml/只经肌肉注射途径攻毒 ,一组接种 0 2ml/只灭菌生理盐水为对照。攻毒后前 4d ,每隔 6h观察试验组和对照组鸡的临床表现 ,每组随机抽取两只剖杀 ,收集脑、肝、脾、肾、胰腺、肌肉、喉头与泄殖腔拭子进行病毒分离 ;攻毒4d后改为每隔 12h取样 ,直至第 11d ,同时采集血清测定禽流感HI抗体效价。结果　试验鸡攻毒 18h后可从泄殖腔及喉头拭子中分离到病毒 ,持续到攻毒后第 7d左右 ;攻毒后 36h可以从脑、肝、脾、肾、胰腺的混合样品中分离到病毒 ,可持续到攻毒后第 10d左右 ;而肌肉组织中始终未分离到病毒     

感染人类的禽流感病毒A（H5N1）研究进展

禽流感病毒A（H5N1）[avian influenza（H5N1） viruses]之前一直存在于鸟类，但却能导致人类疾病，并且具有高致死性和广泛流行的威胁。本文在综合了第二届世界卫生组织（World Health Organization，WHO）感染人类禽流感病毒A（H5N1）临床诊断咨询会议公布的研究信息基础上，对2005年的报告进行了更新。     

H5N1禽流感病毒变异后更易致人感染

据Medscape．com10月5日报道，H5N1禽流感病毒变异后更易致人感染，不过目前还没有演变出可以导致广泛流行的毒株。     

佐剂可改善禽流感疫苗的免疫原性

据Medscape．com 8月16日报道（原载Lancet 2007；370：544-545，580-589），在比利时进行的一项Ⅰ期研究发现，禽流感疫苗加入某种特定的佐剂后可以引发更强的免疫反应且与H5N1病毒其它亚群可发生交叉反应。佐剂是重要的节省抗原的策略。由于对人类免疫反应较弱，禽类H5红血球凝集素需要2倍剂量才能诱发免疫反应。一旦发生全球性的流行，目前的生产能力将不能满足需求，因此需要有节省抗原的策略。[第一段]     

H5N1亚型禽流感病毒NS1基因在大肠杆菌和昆虫细胞中的表达

目的构建大肠杆菌表达载体pET-NS1和昆虫杆状病毒转移载体pFast-NS1,将H5N1亚型禽流感病毒NS1基因分别在大肠杆菌和昆虫细胞中进行表达,表达产物用Western blot进行检测分析。方法酶切含有NS1基因的质粒pUC-NS1,分别克隆进大肠杆菌表达载体pET-28a(+)和杆状病毒转移载体pFastBac HT A中,分别获得表达载体pET-NS1和pFast-NS1。将pET-NS1转化大肠杆菌BL21,以异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达;将pFast-NS1转化DH10Bac感受态细胞,提取重组Bac-NS1DNA,以M13为通用引物作PCR鉴定,阳性Bac-NS1用脂质体转染sf9细胞,72h后收集感染细胞。大肠杆菌表达产物和细胞表达产物分别裂解后作SDS-PAGE和Western blot分析。结果成功构建了大肠杆菌表达载体pET-NS1和昆虫杆状病毒转移载体pFast-NS1,大肠杆菌和昆虫细胞中表达的融合蛋白Western blot都能检测到特异性条带。结论NS1基因在大肠杆菌和昆虫细胞中得到成功表达,为获得大量NS1蛋白进行功能研究及抗体制备奠定了基础。     

疫区夏秋季鸡鸭H5N1亚型禽流感病毒隐性感染调查

目的调查H5N1亚型禽流感疫区夏秋季鸡鸭H5N1亚型禽流感病毒的流行情况。方法以2005年12月出现过因H5N1亚型禽流感感染死亡病例的烟竹村及周围3 km范围为疫区,10 km外未发生过禽流感疫情的塘洞村为非疫区,于2008年11月（秋季）和2009年7月（夏季）采集疫区与非疫区健康散养鸡鸭血,采用酶联免疫吸附法检测H5N1亚型禽流感病毒隐性感染情况。结果总感染率为44%。疫区和非疫区隐性感染率分别为49.12%和42.11%,两者相比P〉0.05。2008年11月鸡鸭H5N1亚型病毒隐性感染阳性率为63.6%,明显高于2009年7月的29.0%,P〈0.05。烟竹村鸡隐性感染总阳性率为59.34%,明显高于鸭的11.02%,P〈0.05。结论 H5N1亚型禽流感疫区健康散养鸡鸭对H5N1病毒普遍易感,有可能成为H5N1亚型禽流感主要传染源,其中鸡作为传染源的可能性更大。秋季隐性感染率偏高,对禽流感的防控重点应放在秋季。     

成都市金牛区健康人群甲型H1N1流感抗体水平监测及疫苗免疫效果分析

了解成都市金牛区健康人群甲型H1N1流感抗体水平和甲型H1N1流感疫苗的免疫效果。方法分别于一个流行期前后检测3~11、12~17、18~60、60岁4个年龄组健康人群甲型H1N1流感抗体水平,同时对部分人群分年龄组接种甲型H1N1流感疫苗,1月后检测其抗体水平。结果目前该区健康人群甲型H1N1流感抗体达到保护水平的比例为44.23%,GMT水平为1∶23.35,各年龄组差异有统计学意义(χ2=46.42,P0.01;F=25.02,P0.01),其中3~11、12~17岁组抗体水平较流行前期均有上升;甲型H1N1流感疫苗免疫后人群抗体阳转率为88.98%,GMT水平为1∶325.20,各年龄组之间差异有统计学意义(χ2=23.78,P0.01;F=13.23,P0.01),以311岁组水平较低。结论目前除1217岁组抗体水平较高外,其他年龄组保护性抗体比例仍较低,有必要对其继续加强甲型H1N1流感疫苗的宣传和接种。     

H5N1人禽流感的临床诊治

1959年首次分离到A群H5N1亚型禽流感病毒,1997年5月中国香港首次发生人禽流感流行,发病18例、死亡6例,说明A群H5N1亚型病毒是强致病性,并证明其为致禽、兽及人共患的病毒。事隔7年,2004年再次在东北亚、东南亚禽流感疫点频繁暴发,既有大批家禽、野禽（如青海湖野鸟）死亡。也有人感染禽流感、兽类（如泰国虎）死亡的报道。进人2005年流行季节H5N1亚型在土耳其禽流感多点暴发,已发生人禽流感11例,死亡4例,并同时在欧洲波兰、罗马尼亚、伊朗、希腊以及非洲尼日利亚等国家出现禽流感疫点,引起全球重视。这是进入21世纪以来,     

H5N1禽流感病毒抗原基因的体外转录及RNA标准品构建

目的 通过基因克隆和体外转录,获得H5N1禽流感病毒血凝素(HA)、神经氨酸酶(NA)、基质蛋白M(M)基因的RNA片段,为病原学检测提供阳性定量标准品.方法　设计H5N1禽流感病毒的HA、NA及M基因全长开放阅读框的克隆引物,提取H5N1禽流感病毒总RNA,用RT-PCR获得相应片段,分别连接至Pgem-T easy...     

人禽流感疫苗试验前景乐观

据Medscape．com 12月15日报道（Additional reporting by Noelle Mennella and Ben Hirschler），一种针对H5N1禽流感病毒的试验性疫苗的早期试验显示它使人体产生了良好的免疫反应，并且非常安全。     

恒河猴H5N1禽流感病毒性肺炎模型建立及其发病机制

目的 探讨H5N1病毒(AF148678/ACGoose/Guangdong/11961H5N1)感染恒河猴诱发自初期至恢复期过程肺炎的机制。方法 以H5N1 病毒液经鼻滴入恒河猴,染毒后第0 h、12 h、1 d、2 d、3 d、4 d、6 d、10 d、12 d和14 d采血作血液学和流感特异抗体检测。染毒后第1、3、6、14 d分别剖杀1 只恒河猴,取气管支气管淋巴结、肺、心、肝、肾、大脑及小脑进行病毒分离、滴定、病理及免疫组化检测并观察感染后临床表现。结果 猴感染后出现发热、呼吸困难,食欲下降等。病毒仅在肺组织复制,主要侵犯下呼吸道的肺泡上皮细胞和肺巨噬细胞。感染后第1~3 d引起暂时性的严重肺炎,主要为中性粒细胞浸润;第6 d后逐渐恢复,以巨噬细胞浸润为主;第14 d后以T淋巴细胞浸润为主,肺组织呈恢复期状态。结论 下呼吸道是H5N1病毒感染主要攻击的对象,这可能是H5N1病毒在人与人之间传递的障碍之一,其发病可能经过病毒侵入、复制阶段及免疫损伤阶段。     

人感染严重致病性甲型禽流感（H5N1）（上）

目前数个国家报道人类感染甲型禽流感H5N1（AI H5N1）的病例在增加。尽管病例数还是很少，但一旦获得更大的传染性将导致大流行。1918年，西班牙流感病毒导致2—5千万人死亡，核苷酸序列表明其完全来自禽类。近来，美国公共卫生官员表示了对AI H5N1大流行时呼吸机缺少的担心。我们检查了该疾病相关的重症监护措施，包括它的临床表现、     

H5N1禽流感病毒感染孕鼠的研究

目的用H5N1禽流感病毒感染昆明孕鼠,检测病毒在感染孕鼠各组织脏器中的复制及分布情况,并证明病毒能否通过孕鼠的胎盘垂直传染给胎鼠。方法用虎源H5N1亚型禽流感病毒滴鼻感染妊娠10-12 d的昆明孕鼠,观察孕鼠感染后的临床症状。接种病毒后第3、4、5、6和7 d分别处死3只孕鼠,取孕鼠的肺、脑、脾、肾、子宫、胎盘及胎鼠,利用RT-PCR、Real-time PCR和病毒分离方法检测各组织中的病毒核酸和病毒滴度,并进行病理组织学与免疫组织化学检测。结果昆明孕鼠接种病毒后第3 d,即可在肺、脑、脾、肾、子宫及胎盘组织中检测出H5N1禽流感病毒核酸,并从子宫、胎盘分离出H5N1禽流感病毒;感染后第6 d,从胎鼠体内检测到病毒核酸并分离出H5N1禽流感病毒。结论H5N1亚型禽流感病毒可以感染孕鼠,在孕鼠子宫和胎盘复制,感染后期可通过胎盘屏障传给胎鼠。     

用甲型H1N1抗体血浆协助治疗甲型H1N1流感11例

输血是治疗疾病的重要手段之一,以往临床输血大多是以扩充血容量和止血为目的。本文阐述的是用甲型H1N1抗体血浆协助治疗甲型H1N1流感,就是用主动或被动免疫的献血者血浆协助治疗某种疾病。用这种输血方式治疗疾病,目前在国内的报道罕见。     

H5N1被发现仅需5次基因突变便能人际传播

荷兰研究人员近日发现,H5N1禽流感病毒只需经5次基因突变就能像普通流感一样,通过咳嗽和打喷嚏进行空气传播。荷兰鹿特丹市伊拉斯姆斯大学医学中心的病毒学家RonFouchier称,这并不代表H5N1病毒会更有可能成为人感染人的流行性疾病,但同时也不能排除这种可能性的存在。     

4株野鸭源H5N1亚型禽流感病毒的全基因组鉴定

目的为了解H5N1病毒对基因进化情况,方法对4株野鸭源的H5N1禽流感病毒(A/mallard/Huadong/S/2005(S),A/mallard/Huadong/lk/2005(lk),A/mallard/Huadong/Y/2003(Y),A/mallard/Huadong/hn/2005(hn))进行全基因组测序分析,并鉴定对非免疫麻鸭的毒力。结果4株病毒全基因组序列及其氨基酸序列无明显差异,仅在HA裂解位点区,S和lk病毒的322位是Leu,329位缺失,而Y和hn在此两处分别是Gln和Lys。在遗传距离上,Y和hn比较接近,S与lk比较接近。结论根据H5亚型病毒最新分类规则,S和lk的与clade 2.3.4一致,而Y属于clade 2,hn位于clade 3。对麻鸭致病性试验表明,Y和hn是低致病性病毒,而S及lk是高致病性病毒。HA的322位的Leu和329位缺失可能是clade 2.3.4这类病毒的一个遗传进化标志。     

疫苗保护小鼠免遣多种H5N1型禽流感病毒侵袭

据Medscape．com 2月1日报道（原载Lancet 2006），美国研究已经研制了一种依赖腺病毒载体的疫苗可用来有效地预防禽流感，与过去的同类疫苗相比，它具有多种优点，包括易于大规模生产和可针对不同抗原型的H5N1禽流感病毒株产生保护功效。对高致病性H5N1型禽流感病毒在人与人之间传播可能会造成流感大流行的惧怕反而刺激了人们努力去研制一种新的预防此病毒的疫苗。以前的此类疫苗都是依赖受精鸡胚生产的减毒疫苗。