脑水肿时血脑屏障内皮细胞ICAM-1的表达及其对T淋巴细胞粘附的影响

本研究采用液氮冷冻Wistar大鼠一侧大脑制成血管源性脑水肿模型,将大鼠全脑沿冷冻中心制成冠状面冰冻切片,运用免疫组化染色观察脑水肿组及对照组白质血脑屏障内皮细胞ICAM-1蛋白表达量的变化。对此进行图像分析．并将脑组织冰冻切片与大鼠T淋巴细胞悬液共同孵育后,常规HE染色、显微镜下观察,求出T淋巴细胞与血管壁的特异性粘附率,发现大鼠内皮细胞在正常情况下表达少量的ICAM－1蛋白分子,冷冻后3小时有明显的升高（P＜0．001）,3～12小时达高峰,以后逐渐恢复,至24小时后基本降至冷冻前表达量水平,ICAM－1蛋白表达量的高峰时间与脑水肿达高峰的时间一致;T淋巴细胞的特异性粘附率在事先未满加抗ICAM-1单抗组较高,而在事先满加抗ICAM－1单抗组则明显下降（P＜0.0001）,但并未完全被抑制,说明ICAM－1并不是唯一介导T淋巴细胞特异性粘附的分子。     

大鼠脑缺血再灌注区ICAM—1的表达与粘附性变化的实验研究

目的:观察大鼠脑缺血再灌注后缺血区ＩＣＡＭ－１ｍＲＮＡ和蛋白的表达及白细胞和血管内皮细胞间粘附性的变化。方法:４０只Ｗｉｓｔａｒ大鼠分为正常组、假手术组和缺血２ｈ再灌注２、４、１２、２４、４８、９６ｈ组,原位杂交和兔疫组化法检测ＩＣＡＭ、１ ｍＲＮＡ和蛋白表达,超高速摄录像系统观察缺血区微血管内白细胞与内皮细胞间的粘附性变化。结果:缺血再灌注后局部脑组织ＩＣＡＭ－１ｍＲＮＡ和蛋白的表达以及微动脉内白细胞与内皮细胞间粘附性均明显增高。结论:脑缺血再灌注后ＩＣＡＭ－１表达增高,介导了白细胞与血管内皮细胞间的粘附增强,参与了缺血再灌注损伤。     

实验性超负荷血糖大鼠脑缺血后脑毛细血管内皮细胞ICAM-1表达的研究

目的　了解超负荷血糖条件下，脑缺血后，脑毛细血管内皮细胞细胞间粘附分子１（ＩＣＡＭ－１）表达的情况。方法　采用ＳＤ大鼠尾静脉注射链脲霉素，建立超负荷血糖模型。用免疫组化方法动态观察大鼠超负荷血糖１ 月条件下以尼龙线栓堵大鼠大脑中动脉造成持续性局灶性脑缺血后不同时间，脑毛细血管内皮细胞ＩＣＡＭ－１ 的表达。结果　超负荷血糖１月脑缺血０．５ 小时ＩＣＡＭ－１ 的表达明显升高；１小时达高峰，表达范围弥漫整个缺血半球；缺血３～１２ 小时， ＩＣＡＭ－１表达仍很明显，但主要集中在颞、顶叶缺血区；缺血２４ 小时表达不明显；假手术组大鼠脑组织毛细血管内皮细胞ＩＣＡＭ－１只有较少的表达；正常血糖对照组及阴性对照者脑毛细血管内皮细胞均未见ＩＣＡＭ－１ 表达。结论　与正常血糖ＳＤ大鼠脑缺血相比，超负荷血糖大鼠脑缺血后， ＩＣＡＭ－１ 在脑毛细血管内皮细胞上表达出现的早而明显，提示对加重脑缺血后的病理损伤起到了重要作用。     

实验性超负荷血糖大鼠脑缺血后脑毛细血管内皮细胞ICAM—1表 …

目的 了解超负荷血糖条件下,脑缺血后,脑毛细血管内皮细胞间粘附分子１（ＩＣＡＭ－１）表达的情况。方法 采用ＳＤ大鼠尾静脉注射链脲霉素,建立超负荷血糖模型。用免疫组化方法动态观察大鼠超负荷血糖１月条件下以尼龙线栓堵大鼠中动脉造成持续性局灶性脑缺血后不同时间,脑毛细血管内皮细胞ＩＣＡＭ－１的表达。结果 超负荷血糖１月脑缺血０．５小时ＩＣＡＭ－１的表达明显升高;１小时达高峰,表达范围弥漫整个缺血半球;缺     

小鼠局灶性脑缺血模型中细胞间粘附分子-1表达升高

目的　白细胞可以导致缺血细胞损伤,内皮细胞上表达的细胞间粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）有利于白细胞迁移至组织。本研究目的是对小鼠大脑中动脉栓塞（ＭＣＡＯ）后脑内ＩＣＡＭ－１ 蛋白在组织中表达和含量进行检测。方法　通过对成年雄性ＣＤ－１ 小鼠使用血管腔内尼龙线栓塞术,造成０、３、６、１２、２４、４８ 和７２ ｈ 的持续性大脑中动脉栓塞。缺血程度由激光多普勒流量仪确定,缺血脑组织ＩＣＡＭ－１ 的阳性表达由免疫组化技术检测,并用免疫沉淀和Ｗｅｓｔｅｒｎ 印迹来定量。结果　在大脑中动脉栓塞后,小鼠缺血脑半球的表面脑血流量减少到基准值的９％ ～１５％ 。各组间大脑中动脉栓塞过程中的脑血流量无显著差异。免疫组化技术显示,缺血中心区和末影区都见ＩＣＡＭ－１ 阳性的微血管内皮细胞,从缺血中心到缺血边缘区微血管内皮细胞表达ＩＣＡＭ－１ 出现增高的趋势。免疫沉淀和Ｗｅｓｔｅｒｎ 印迹分析结果表明,缺血区ＩＣＡＭ－１的表达在大脑中动脉栓塞后３ ｈ 增高,６～１２ ｈ 达到高峰,并持续到７２ ｈ。结论　研究表明,在持续性大脑中动脉栓塞的小鼠中检测到ＩＣＡＭ－１ 表达明显升高,因为在持续局灶性大脑中动脉缺血后ＩＣＡＭ－１ 可介导白细胞和内皮细胞粘附,加速     

缺氧复氧对血管内皮细胞ICAM-1表达及内皮-白细胞粘附的影响

目的：评价缺氧／复氧后血管内皮细胞ＩＣＡＭ－１表达及内皮－白细胞粘附率的变化。方法：体外培养大鼠骨髓血窦内皮细胞,缺氧９０ｍｉｎ,分别给予复氧１ｈ,２ｈ,４ｈ,８ｈ,１２ｈ,２４ｈ,用半定量ＥＬＩＳＡ法测ＩＣＡＭ－１的表达量,同时人皮细胞对中性粒细胞的粘附率。     

大鼠局灶性脑缺血再灌注后皮层ICAM-1表达增加

目的：研究大鼠局灶性脑缺血再灌注不同时相皮层 ＩＣＡＭ－１变化规律。方法：改良 Ｋｏｉｚｕｍｉ法建立 ＬＭＣＡＯ局灶性脑缺血再灌注模型;ＲＴ－ＰＣＲ和 Ｄｏｔ ｂｌｏｔｔｉｎｇ法分别检测 ＩＣＡＭ－１的转录和翻译水平变化。结果：缺血皮层 ＩＣＡＭ－１ｍＲＮＡ和 Ｉ－ＣＡＭ－１分别于缺血 ２ｈ和再灌注 ２ｈ显著升高,再灌注 １０和 ４６ｈ达高峰,持续 １周仍维持在较高水平。结论：ＩＣＡＭ－１在脑缺血再灌注时表达明显上调,介导白细胞和脑血管内皮细胞的粘附。ＩＣＡＭ－１ 将成为缺血性脑卒中治疗的新突破点。     

EAN血清可溶性细胞间粘附分子—1的测定

目的探讨血清可溶性细胞间粘附分子－１（ｓＩＣＡＭ－１）在实验性变态反应性神经炎（ＥＡＮ）中的作用。方法用兔坐骨神经匀浆加完全福氏佐剂（ＣＦＡ）免疫大鼠，建立ＥＡＮ模型；同时用抗细胞间粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）单克隆抗体注入大鼠体内后再诱导ＥＡＮ；观察自然病程组、抗体注射组及对照组的发病情况与病理特点；应用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法检测不同发病程度ＥＡＮ动物血清中ｓＩＣＡＭ－１的浓度。结果抗体注射组发病率及发病程度明显低于自然病程组；自然病程组ｓＩＣＡＭ－１的浓度高于抗体注射组及对照组；ＥＡＮ发病程度与ｓＩＣＡＭ－１的浓度呈正比。结论ｓＩＣＡＭ－１与ＥＡＮ的发病关系密切，ｓＩＣＡＭ－１的测定是观测自身免疫性疾病的一个有用的指标；抗ＩＣＡＭ－１抗体能够减轻或预防ＥＡＮ的发生。     

大鼠下丘脑ET—1mRNA阳性表达神经元的分布

用地高辛标记的大鼠ＥＴ－１反义ｃＲＮＡ探针作原位杂交组织化学，观察了正常大鼠下丘脑ＥＴ－１ｍＲＮＡ阳性表达神经元的分布，结果显示：ＥＴ－１ｍＲＮＡ阳性杂交信号大部集中在视上核主部和室旁核内，外侧亚核大细胞内，在视上副核，室周核及视前区第三脑室室管膜内皮细胞也可见一定量的ＥＴ－１ｍＲＮＡ，ＥＴ－１ｍＲＮＡ与血管升压素和催产素分布范围非常相似，推测下丘脑ＥＴ－１神经元功能可能与血管升压素和催产素合成和     

氧化修饰低密度脂蛋白刺激血管内皮细胞表达VCAM-1的实验研究

目的：探讨氧化修饰低密度脂蛋白（ＯＸ－ＬＤＬ）对血管内皮细胞表达血管细胞粘附分子－１（ＶＣＡＭ—１）的影响,以阐明其在动脉粥样硬化发生中的作用。方法：在血管内皮细胞的培养基中分别加入２５μｇ／ｍｌ的低密度脂蛋白（ＬＤＬ）和ＯＸ－ＬＤＬ,３7℃下温育 ２４小时,应用定量免疫细胞化学分析技术检测内皮细胞 ＶＣＡＭ－１蛋白的表达。结果：与对照组和ＬＤＬ组比较,ＯＸ－ＬＤＬ组内皮细胞ＶＣＡＭ－１蛋白的表达显著增加。结抡：ＯＸ－ＬＤＬ能够明显刺激内皮细胞ＶＣＡＭ－１的表达。     

T细胞亚群及粘附分子在实验性变态反应性神经炎中的作用

目的探讨Ｔ细胞亚群及粘附分子在实验性变态反应性神经炎（ＥＡＮ）中的作用。方法用兔坐骨神经匀浆免疫Ｗｉｓｔａｒ大鼠，建立ＥＡＮ模型；同时用抗细胞间粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）单抗注入大鼠后再诱导ＥＡＮ。观察自然病程组、抗体注射组及对照组动物的临床病理。用双重酶标免疫组化技术检测ＣＤ４＋、ＣＤ８＋Ｔ细胞分布以及粘附分子ＣＤ５４、ＣＤ１１ａ、ＣＤ６２在ＣＤ４＋及ＣＤ８＋细胞上的表达。结果抗体注射组发病率及发病程度明显低于自然病程组；组织中粘附分子在ＣＤ４＋细胞上的表达及ＣＤ４＋／ＣＤ８＋自然病程组高于抗体注射组；ＣＤ５４、ＣＤ１１ａ在ＣＤ４＋细胞上的表达高于ＣＤ８＋细胞。结论ＣＤ４＋细胞是主要的效应细胞，ＣＤ４＋细胞上粘附分子的表达对效应Ｔ细胞进入病变组织起主导作用；抗ＩＣＡＭ－１抗体能够预防ＥＡＮ发生。     

大鼠局灶性脑缺血再灌流损伤时神经细胞凋亡及其调控基 …

目的 探讨脑缺血再灌流损伤时神经细胞凋亡及其调控基因ｂｃｌ－２的作用。方法 采用大鼠大脑中动脉（ＭＣＡ）阻断模型阻断血液２小时后再灌注，分别在不同再灌注时间将大鼠断头取脑，连续切片分别作ＨＥ、ＴＵＮＥＬ染色及ｂｃｌ－２蛋白免疫组化染色。结果（１）ＭＣＡ阻断后脑缺血周边区部分神经细胞发生凋亡，随着再灌注时间的延长，一定时程内凋亡细胞逐渐增多，２４小时达高峰，各组之间及与假手术组之间差异显著（Ｐ〈０．     

脑缺血抗细胞间粘附分子—1抗体作用的实验研究

目的探讨抗细胞间粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）抗体保护神经元缺血性损伤的作用机制。方法分离培养鼠脑毛细血管内皮细胞（ＣＣＥＣ）和多形核白细胞（ＰＭＮ），利用微管吸吮技术，观察ＰＭＮ与ＣＣＥＣ间粘附力学特性的变化。结果脑缺血－再灌注后各时间点，ＰＭＮ与ＣＣＥＣ的粘附力和粘附应力均明显高于正常对照组和伪手术组（Ｐ＜０．０１）；加抗ＩＣＡＭ－１抗体后，细胞粘附力和粘附应力均明显下降（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。结论脑缺血－再灌注损伤后抗ＩＣＡＭ－１抗体使ＰＭＮ与ＣＣＥＣ粘附力减小，粘附应力下降；抗粘附分子抗体将可能成为治疗缺血性脑血管疾病的一条新的有效途径     

脑缺血再灌注期内皮细胞间粘附分子-1转录水平的表达

脑缺血再灌注期内皮细胞间粘附分子－１转录水平的表达余勇崔尧元刘银坤△张晓彪细胞间粘附分子－１（Ｉｎｔｅｒｃｅｌｕｌａｒａｄｈｅｓｉｏｎｍｏｌｅｃｕｌｅ－１）ＩＣＡＭ－１，属粘附分子中免疫球蛋白超家族，主要参与异种细胞粘附。最近的研究表明，细胞间...     

TNF-α对血管内皮细胞VCAM-1诱导作用的研究

目的：探讨肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）对血管内皮细胞ＶＣＡＭ－１表达的诱导作用。方法：通过血管内皮细胞培养,采用免疫组织化学方法分别观察不同浓度ＴＮＦ－α（０．２５０Ｕ．ｍＬ＾－１）２４小时内以及相同浓度（１００Ｕｍｌ＾－１）ＴＮＦ－μ０－α０－７２ｈ对内皮细胞ＶＣＡＭ－１表达的影响。结果：与对照组比较,ＴＮＦ－α对内皮细胞ＶＣＡＭ－１的诱导作用具有明显浓度与时间依赖性。结论：ＴＮＦ－α可诱导血     

AVP_(4-8)增加海马组织内NGF mRNA和蛋白含量

本文采用了Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交和ＥＬＩＳＡ法，观察了神经肽ＡＶＰ４－８对大鼠海马组织中神经生长因子（ＮＧＦ）ｍＲＮＡ和蛋白水平的影响，结果显示：给大鼠皮下注射ＡＶＰ４－８１２ｈ后，海马组织中ＮＧＦｍＲＮＡ的水平明显高于生理盐水对照组。而给大鼠皮下注射精氨酸加压素（ＡＶＰ）和催产素（ＯＴ）对ＮＧＦｍＲＮＡ的水平均无显著影响。另外，用ＡＶＰ４－８孵育离体大鼠海马组织切片，能使ＮＧＦ蛋白表达量升高，且在４．５ｈ左右达到高峰。     

大鼠局灶性脑缺血后Bcl—2Bax的表达与细胞凋？…

目的 探讨缺血性脑损伤中Ｂｃｌ－２基因家族与细胞凋亡的关系，方法 用线栓法制成Ｗｉｓｔａｒ大鼠大脑中动脉（ＭＣＡ）阻塞－再通模型，应用免疫组化方法和ＴＵＮＥＬ法，分别以大鼠灶性缺血脑组织Ｂｃｌ－２，Ｂａｘ免疫反应阳性细胞和凋亡细胞的分布进行观察，结果 大鼠ＭＣＡ闭塞２ｈ再能４８ｈ后，ＴＵＮＥＬ阳性细胞主要分布在梗死灶周围的内侧尾壳核和额顶部皮层，与Ｂｃｌ－２和Ｂａｘ阳性细胞烽在该区域的明显增加基本     

大鼠脑缺血再灌注区ICAM-1表达与白细胞浸润的观察及丹参的影响

目的　观察细胞间粘附分子（ Ｉ Ｃ Ａ Ｍ１） 蛋白在大鼠脑缺血再灌注的不同时程脑组织中的表达与中性白细胞浸润程度的关系及丹参对它们的影响。方法　 Ｓ Ｄ大鼠分为３ 组：假手术组、对照组及丹参组。大脑中动脉缺血２ ｈ 再灌注２ ｈ 、１２ ｈ、２４ ｈ 、４８ ｈ 、７２ ｈ 、７ ｄ、１４ ｄ 后,分别进行 Ｉ Ｃ Ａ Ｍ１ 免疫组织化学及组织 Ｈ Ｅ染色。结果　在脑缺血再灌早期,脑微血管内皮细胞 Ｉ Ｃ Ａ Ｍ１ 免疫反应开始逐渐增加,再灌注４８ ｈ 达到高峰,再灌注１４ ｄ 接近正常水平,同时脑缺血区中性白细胞浸润也随之增加,在时程上与 Ｉ Ｃ Ａ Ｍ１ 表达同步。丹参组,再灌注４８ ｈ 后, Ｉ Ｃ Ａ Ｍ１ 免疫阳性血管数及中性白细胞的浸润比同时间对照组明显降低。结论　脑缺血 Ｉ Ｃ Ａ Ｍ１ 的表达与中性白细胞浸润密切相关,丹参能降低 Ｉ Ｃ Ａ Ｍ１ 的表达,抑制中性白细胞的浸润。     

β淀粉样蛋白诱导脑内神经元调亡及褪黑素的保护作用

目的 探讨凋亡机制在β－淀粉样蛋白（Ａβ）服内致阿尔茨海默病（ＡＤ）作用中的意义及褪黑素（ＭＴ）对Ａβ脑内神经毒性的干预效果。地将Ａβ１－４０微量注射至大鼠右侧海马ＣＡ１区,７天后,用尼氏染色检测神经元丢失,ＨＥ染色、ＴＵＮＥＬ染色及透射电镜检测细胞凋亡,用免疫组织化ＳＡＢＣ法检测Ｂａｘ／Ｂｃｌ－２表达。结果 Ａβ组右侧海马ＣＡ１区发现大量凋亡细胞,而假手术对照组和生理盐水对照组未发现细胞凋亡;Ａ     

腺病毒介导反义IGF-1抑制鼠胶质瘤细胞增殖的实验研究

目的重组腺病毒反义ＩＧＦ－１基因（ＡｄＨＣＭＶ－ＩＧＦ－１Ａ）治疗大鼠Ｃ６胶质瘤。方法体外克隆反义ＩＧＦ－１３００ｂＰ基因片段重组入腺病毒,经扩增纯化,测定滴度,体外体内感染Ｃ６胶质瘤细胞,观察ＩＧＦ－１的表达及肿瘤大小、生存期变化。结果重组腺病毒反义ＩＧＦ－１滴度６．５×１０１０ｐｆｕ／ｍｌ,反义ＩＧＦ－１基因序列正确,体外Ｃ６－Ａｄ－ＩＧＦ－１Ａ的ＩＧＦ－１表达降低,Ａｄ－ＩＣＦ－１Ａ治疗皮下Ｃ６肿瘤细胞接种组,肿瘤完全消失。与对照组相比有显著性差异（Ｐ＜０．０１）,Ａｄ－ＩＧＦ－１Ａ治疗脑内Ｃ６肿瘤细胞接种组,大鼠生存期超过９０天,而对照组分别为１６．５±１．４天（Ａｄ－ｌａｃｚ组）、１５．７±１．６天（生理盐水组）,Ｐ＜０．００１。结论重组腺病毒反义ＩＧＦ－１可抑制Ｃ６细胞ＩＧＦ－１的表达,ＡｄＨＣＭＶ－ＩＧＦ－１Ａ治疗大鼠Ｃ６胶质瘤效果显著。