基质金属蛋白酶-9及其组织抑制物-1在皮肤鳞状细胞癌中的表达

目的探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其组织抑制物-1(TIMP-1)在皮肤鳞状细胞癌(SCC)中的表达及其与肿瘤浸润转移的关系。方法免疫组化SP法检测MMP-9和TIMP-1蛋白在65例皮肤SCC(Bowen病17例,SCC48例)和5例正常表皮石蜡切片的表达,采用图像分析技术对免疫组化结果进行定量分析。结果MMP-9和TIMP-1蛋白均弥漫表达于皮肤SCC,分布于SCC癌巢及癌巢周围间质细胞,而在正常人皮肤仅见MMP-9和TIMP-1的弱阳性表达。SCC组MMP-9蛋白的表达水平及MMP-9/TIMP1比值高于Bowen病组(t值分别为2.33、2.36,P<0.05),SCC中淋巴结转移组MMP-9/TIMP1的比值高于无淋巴结转移组(t=2.46,P<0.05)。结论MMP-9、TIMP-1蛋白的表达与SCC的侵袭性有关,MMP-9/TIMP1比值升高(MMP-TIMP失衡)预示了SCC肿瘤细胞较高的侵袭转移潜能。     

MMP-2,MMP-9和E-cadherin在皮肤恶性黑素瘤中的表达及意义

目的检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和上皮型钙黏附蛋白(E-cadherin)在皮肤恶性黑素瘤中的表达及在肿瘤侵袭转移过程中的作用。方法采用免疫组化SP法检测MMP-2、MMP-9和E-cadherin在32例恶性黑素瘤及10例色素痣中的表达。结果 MMP-2与MMP-9在恶性黑素瘤中阳性表达率分别为93.75%和87.50%,均明显高于色素痣,组间差异有统计学意义(P0.01,P0.01);MMP-2与MMP-9在有淋巴结转移者中阳性表达率均高于无淋巴结转移者(P0.05,P0.01)。E-cadherin在恶性黑素瘤中阳性表达率为21.88%,明显低于色素痣,组间差异有统计学意义(P0.01);E-cadherin在有淋巴结转移者中阳性表达率低于无淋巴结转移者(P0.05)。结论 MMP-2、MMP-9在恶性黑素瘤中均呈高表达,E-cadherin却高表达于色素痣,对它们的检测可能成为预测恶性黑素瘤转移和预后的重要指标。     

骨桥蛋白及基质金属蛋白酶—9在恶性黑素瘤中的表达

目的 探讨骨桥蛋白及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在人恶性黑素瘤中的表达及意义。方法 采用免疫组化SP法检测23例原发性恶性黑素瘤、17例转移性恶性黑素瘤及20例色素痣中骨桥蛋白和MMP-9的表达。结果 40例恶性黑素瘤中骨桥蛋白及MMP-9表达的阳性率分别为87.5%、75.0%;20例色素痣中的阳性表达率分别为15.0%、10.0%。骨桥蛋白及MMP-9在恶性黑素瘤中阳性表达率明显高于色素痣,差异具有统计学意义(P<0.05)。骨桥蛋白和MMP-9的表达与年龄、性别、发病部位、是否淋巴结转移等因素均无关(P>0.05)。40例恶性黑素瘤中,骨桥蛋白与MMP-9均表达29例,均不表达4例。结论 骨桥蛋白及MMP-9在人恶性黑素瘤中高表达,但与淋巴结转移无相关性。     

黑素瘤中VEGF-D,MMP-7和MMP -9的表达

目的:确定黑素瘤组织中血管内皮生长因子D(VEGF-D)、基质金属蛋白酶- 7(MMP-7)和MMP-9表达水平及其与肿瘤侵袭和转移的关系.方法:应用免疫组化法检测16例黑素瘤和12例黑素痣组织中VEGF-D,MMP-7和MMP-9蛋白的原位表达,并与临床肿瘤的侵袭和转移进行相关分析.结果:黑素瘤组织中VEGF-D,MMP -7和MMP-9阳性表达率(75％,62.5％和56.3％)明显高于黑素痣组织(25％,16.7％,41.7％),在有淋巴转移的黑素瘤组织中,VEGF-D,MMP-7和MMP-9的表达(91.7％,66.67％和66.67％)明显高于无淋巴转移的黑素瘤组织(25％,50％和25％),均P ＜0.05.结论:VEGF-D,MMP-7和MMP-9与黑素瘤的侵袭和转移有关,它们的表达水平可作为预测肿瘤转移的指标,可为临床治疗提供靶点.     

黑素瘤抑制性活性蛋白及基质金属蛋白酶－9在恶性黑素瘤的表达

目的：探讨黑素瘤抑制性活性蛋白（MIA）及基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在恶性黑素瘤中的表达以及作用。方法：应用SP免疫组化技术对38例恶性黑素瘤石蜡标本以及32例色素痣石蜡标本检测MIA及MMP-9表达水平。结果：MIA在所有色素痣中表达阴性,而在原位黑素瘤、侵袭性黑素瘤、有淋巴结转移恶性黑素瘤、无淋巴结转移恶性黑素瘤阳性表达率分别为21.4%,91.6%、94.1%、42.8%,MMP-9在恶性黑素瘤阳性表达率为71.1%,MIA的表达与MMP-9的表达呈正相关。结论：MIA在恶性黑素瘤的发生发展中起着重要作用,这种作用可能是通过上调MMP-9的表达来实现的。MIA有可能成为临床诊断、治疗恶性黑素瘤的有力靶点。     

大麻素2型受体在皮肤恶性黑素瘤中的表达

目的 探讨大麻素2型受体(CB2受体)在色素痣及皮肤恶性黑素瘤中的表达规律及其意义.方法 免疫组化、RT-PCR检测色素痣和恶性黑素瘤组织中CB2受体在蛋白和mRNA不同水平的表达情况.结果 CB2受体在色素痣和恶性黑素瘤均有表达;在色素痣主要表达分布于痣细胞和表皮层的基底细胞层,在皮下组织中表达不明显;皮肤恶性黑素瘤与色素痣表达CB2的强度间差异有统计学意义(P<0.05).结论 恶性黑素瘤中CB2受体在蛋白和基因水平表达均升高,恶性黑素瘤CB2受体表达强度明显大于色素痣.     

Integrinβ1和CD44v6蛋白在皮肤黑素瘤中的表达

目的 探讨Integrinβ1和CD44v6在皮肤黑素瘤组织中的表达及意义.方法 采用免疫组化ABC法检测Integrinβ1和CD44v6蛋白在36例皮肤黑素瘤、34例色素痣及31例正常皮肤组织中的表达.结果 Integrinβ1在正常对照、色素痣和黑素瘤组织中表达的阳性率分别为41.9%,47.1%和77.7%,在黑素瘤组织中的表达强度显著高于色素痣和正常对照( P<0.05) ;CD44v6在正常对照、色素痣和黑素瘤组织中的阳性率分别为51.6%,58.8%和75.0%,三组间表达无显著差异(P＞0.05).Integrinβ1和CD44v6在黑素瘤IV～V级组和有淋巴结转移组中的表达强度显著高于I～III级组和无淋巴结转移组 (P<0.05);二者在黑素瘤组织中表达呈正相关(r=0.463,P<0.05).结论 Integrinβ1和CD44v6的表达与皮肤黑素瘤的发生发展及浸润转移有关.     

色素痣和恶性黑素瘤组织及A375细胞中色素上皮衍生因子的表达

目的 探讨色素上皮衍生因子(PEDF)在色素痣和恶性黑素瘤组织及A375细胞中的表达及其意义.方法 用免疫组化法检测正常人皮肤组织、正常人色素痣以及恶性黑素瘤组织中PEDF的表达与分布.用蛋白印迹法检测正常黑素细胞及恶性黑素瘤细胞株A375中PEDF的表达与分布.用RTPCR法检测正常黑素细胞及A375中PEDF mRNA的表达.结果 ①PEDF在正常皮肤组织、正常人色素痣及恶性黑素瘤组织中的表达逐渐降低,三组间差异有统计学意义(P<0.05).②PEDF在正常黑素细胞中表达,而在恶性黑素瘤细胞株缺失.③PEDF mRNA在恶性黑素瘤细胞中的表达量明显低于正常黑素细胞.结论 PEDF的表达降低在恶性黑素瘤的发病机制中可能起一定作用.     

生存素在恶性黑素瘤中的表达及与VEGF和PCNA的关系

目的 探讨人恶性黑素瘤组织中凋亡抑制蛋白生存素的表达,及其与恶性黑素瘤临床特征、血管内皮生长因子(VEGF)和增殖细胞核抗原(PCNA)表达的关系.方法 免疫组化方法检测36例人恶性黑素瘤和30例色素痣组织中生存素、VEGF和PCNA蛋白表达.结果 ①生存素在恶性黑素瘤和色素痣中均有表达,但在恶性黑素瘤中表达明显高于色素痣(P<0.01).②在恶性黑素瘤组织中有30例表达VEGF(阳性率83.3%),36例表达PCNA(阳性率100%),而色素痣组织不表达VEGF和PCNA.③生存素的阳性表达与恶性黑素瘤患者的发病年龄、性别、淋巴结转移均无相关性(P>0.05),但其表达与VEGF和PCNA的表达密切相关(P<0.01).结论 生存素可能参与恶性黑素瘤的增殖和与VEGF相关的肿瘤血管生成.     

基质金属蛋白酶抑制剂4在皮肤恶性黑素瘤中的表达及其与肿瘤发生、侵袭和转移的相关性

【摘要】 目的 探讨基质金属蛋白酶抑制剂4（TIMP-4）在皮肤恶性黑素瘤（CMM）中的表达及其与肿瘤增殖、侵袭和转移的相关性。 方法 应用蛋白免疫印迹方法分析5例CMM和瘤旁组织及3例色素痣组织中TIMP-4蛋白表达差异。应用免疫组化法检测TIMP-4在43例CMM和51 例色素痣组织中的表达,并分析其与临床病理特征、Ki-67、基质金属蛋白酶2（MMP-2）、血管内皮细胞生长因子（VEGF）及黑素瘤表面标志物CD63表达的相关性。免疫组化法检测Ki-67、MMP-2、VEGF和CD63表达。 结果 Western印迹结果提示,5例CMM组织中4例TIMP-4表达高于瘤旁组织和3例色素痣组织。免疫组化分析结果,TIMP-4在43例CMM和51 例色素痣中分别有37例和10例阳性,阳性率分别为86.04%和19.6%,两组差异有统计学意义（χ2 = 31.55,P < 0.05）。TIMP-4表达水平与CMM的进展呈正相关（rs = 0.309,P < 0.05）,随着肿瘤从原位到侵袭性再发展到转移性,TIMP-4表达水平呈升高趋势。CMM中TIMP-4表达与临床分期、肿瘤厚度、Clark分级、溃疡与否等预后变量无显著相关性,与Ki-67亦无显著相关,但TIMP-4表达与VEGF表达呈正相关（rs = 0.345,P < 0.05）;CMM中MMP-2阳性组TIMP-4的表达明显高于MMP-2阴性组（P < 0.01）;此外,TIMP-4表达与CD63表达呈正相关（rs = 0.555,P < 0.01）。 结论 TIMP-4在CMM中呈高表达,可能参与CMM的发生及发展,尤其与其转移及血管生成密切相关。 【关键词】 黑色素瘤; 金属蛋白酶类组织抑制剂; 基质金属蛋白酶类     

基质金属蛋白酶7在恶性黑素瘤中的表达

目的 探讨基质金属蛋白酶7（MMP7）的表达与恶性黑素瘤浸润、转移的关系。方法 采用免疫组化SP法研究MMP7在恶性黑素瘤（30例）、交界痣（30例）、正常人皮肤（15例）组织中的表达，并观察其在恶性黑素瘤A375细胞株和不同浓度乙酰肝素酶反义寡核苷酸转染的裸鼠体内恶性黑素瘤移植瘤中的表达情况。结果 MMP7在恶性黑素瘤组、交界痣组及正常人皮肤组中的阳性表达率分别为83.33%（25/30）、6.67%（2/30）和0，恶性黑素瘤组与交界痣组MMP7的阳性表达率比较，χ2 = 35.62，P < 0.01；交界痣组与正常人皮肤组比较，差异无统计学意义。10、20、30 μmol/L乙酰肝素酶反义寡核苷酸对裸鼠体内恶性黑素瘤移植瘤MMP7表达表现出不同程度的抑制作用，30 μmol/L组的抑制作用最强，与其他2个组相比，差异均有统计学意义（P < 0.05）。MMP7在A375细胞株中呈强阳性表达。结论 MMP7在恶性黑素瘤中的表达明显高于其在交界痣和正常人皮肤；乙酰肝素酶反义寡核苷酸对裸鼠体内恶性黑素瘤移植瘤中MMP7的表达有显著抑制效应；MMP7在A375细胞株中呈强阳性表达。     

Clinical relevance of serum levels of matrix metallopeptidase-2, and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 and -2 in patients with malignant melanoma

The interaction and/or balance between matrix metallopeptidase (MMP)-2 and tissue inhibitor of metalloproteinase (TIMP)-2 in vivo may play important roles in the process of tumor growth, invasion and metastasis of malignant melanoma. In this study, we investigated the serum levels and immunohistochemical expression of MMP-2, TIMP-1 and TIMP-2 in patients with melanoma and analyzed the correlation with clinicopathological parameters. The level of serum MMP-2 in patients was significantly higher than that of the control. Moreover, the level of MMP-2 was significantly higher than that of the control in patients who were: (i) female; (ii) pT1 and pT4; (iii) with and without lymph node (LN) metastasis; (iv) in stage I and stage IV; (v) with and without recurrence; and (v) alive and dead. The level of serum TIMP-1 in patients with melanoma was significantly higher than that of the control. Among melanoma patients, the level of TIMP-1 with pT4 was significantly higher for patients who were: (i) pT1 and pT3; (ii) with LN metastasis (vs those without); (iii) in stage IV (vs those in stages I, II and III); and (iv) dead (vs those alive). The level of serum TIMP-2 in patients with melanoma was not different from the control. However, the level of TIMP-2 in patients with pT4 was significantly higher than for patients who were: (i) pT1, pT3 and control; (ii) with LN metastasis (vs those without metastasis and control); (iii) with stage IV (vs those in stages I and II and control); (iv) in recurrence (vs control); and (v) dead (vs those alive and control). These results suggest that increased serum levels of TIMP-1 and TIMP-2 reflected the extent of metastatic melanoma lesions, and that serum levels of TIMP-1 may be a new useful marker for melanoma progression.     

Matrix metalloproteinases of epithelial origin in facial sebum of patients with acne and their regulation by isotretinoin

Acne vulgaris is a skin disorder of the sebaceous follicles, involving hyperkeratinization and perifollicular inflammation. Matrix metalloproteinases (MMP) have a predominant role in inflammatory matrix remodeling and hyperproliferative skin disorders. We investigated the expression of MMP and tissue inhibitors of MMP (TIMP) in facial sebum specimens from acne patients, before and after treatment with isotretinoin. Gelatin zymography and Western-blot analysis revealed that sebum contains proMMP-9, which was decreased following per os or topical treatment with isotretinoin and in parallel to the clinical improvement of acne. Sebum also contains MMP-1, MMP-13, TIMP-1, and TIMP-2, as assessed by ELISA and western blot, but only MMP-13 was decreased following treatment with isotretinoin. The origin of MMP and TIMP in sebum is attributed to keratinocytes and sebocytes, since we found that HaCaT keratinocytes in culture secrete proMMP-2, proMMP-9, MMP-1, MMP-13, TIMP-1, and TIMP-2. SZ95 sebocytes in culture secreted proMMP-2 and proMMP-9, which was also confirmed by microarray analysis. Isotretinoin inhibited the arachidonic acid-induced secretion and mRNA expression of proMMP-2 and -9 in both cell types and of MMP-13 in HaCaT keratinocytes. These data indicate that MMP and TIMP of epithelial origin may be involved in acne pathogenesis, and that isotretinoin-induced reduction in MMP-9 and -13 may contribute to the therapeutic effects of the agent in acne.     

MV3恶性黑素瘤皮肤体外模型中基质金属蛋白酶-2、9的表达

目的 探讨体外构建的MV3恶性黑素瘤皮肤模型中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的表达及意义。方法 用MV3恶性黑素瘤细胞接种至去表皮的真皮（DED）上,采用液下和空气－液面培养相结合的方式进行组织培养,2周后取培养的黑素瘤组织切片分别做HE染色及MMP-2、9免疫组化染色。同时用RT-PCR对培养组织进行MMP-2、9表达检测。结果 HE染色显示MV3黑素瘤细胞在DED表面呈条带状生长,在凹陷处聚集生长,在DED残留的皮肤附属器管腔中形成大小不等的团、灶;免疫组化染色显示在MV3黑素瘤细胞生长的DED表层及DED附属器管壁基底膜处MMP-2、9均呈阳性表达;RT-PCR检测进一步证实体外构建的恶性黑素瘤组织表达MMP-2和MMP-9,而未接种MV3黑素瘤细胞的DED组织无MMP-2、9表达。结论 体外构建的恶性黑素瘤皮肤模型中瘤细胞侵入到真皮,表达MMP-2、9,为进一步研究黑素瘤的侵袭与转移提供实验依据。     

MMP-2、MMP-9在恶性黑色素瘤中的表达及预后意义

目的观察基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9在恶性黑色素瘤(Malignant melanoma,MM)细胞中的表达以及预后意义。方法采用免疫组化SP法分别检测52例MM组织、20例色素痣中MMP-2、MMP-9的表达,用χ^2检验分析MM组织与色素痣组织中二者表达的差异性,用多变量Cox回归分析其预后关系,单因素Kaplan-Meier法和对数秩检验进行生存分析。结果MM组织中MMP-2(90.4%)、MMP-9(78.8%)表达均显著高于色素痣组织(P<0.05);MMP-2、MMP-9表达阳性患者死亡风险显著升高;MMP-2阳性表达的MM患者的生存期显著低于阴性者(均P=0.004),MMP-9阳性表达的MM患者的生存期显著低于阴性者(均P<0.001)。结论MMP-2及MMP-9在MM组织中高表达,且与患者预后关系密切。     

乙酰肝素酶、基质金属蛋白酶2和金属蛋白酶组织抑制剂2在恶性黑素瘤的表达

【摘要】 目的 探讨乙酰肝素酶、基质金属蛋白酶2（MMP2）和金属蛋白酶组织抑制剂2（TIMP2）蛋白在恶性黑素瘤皮损中的表达及意义。方法 选择恶性黑素瘤30例、黑素细胞痣30例、正常皮肤组织15例,分别采用免疫组化SP法检测皮损中乙酰肝素酶、MMP2和TIMP2蛋白的表达。结果 恶性黑素瘤皮损乙酰肝素酶蛋白的阳性表达率与黑素细胞痣、与正常皮肤组织相比,差异均有统计学意义（χ21 = 21.172,P < 0.01;χ22 = 27.805,P < 0.01）。恶性黑素瘤皮损MMP2蛋白的阳性表达率与黑素细胞痣、与正常皮肤组织相比,差异均有统计学意义（χ21 = 19.817,P < 0.01;χ22 = 19.866,P < 0.01）。恶性黑素瘤皮损TIMP2蛋白的阳性表达率与黑素细胞痣、与正常皮肤组织相比,差异均有统计学意义（χ21 = 19.200,P < 0.01;χ22 = 15.000,P < 0.01）。结论 乙酰肝素酶、MMP2和TIMP2蛋白在恶性黑素瘤中的表达水平明显高于其在黑素细胞痣和正常皮肤中的表达水平。