大鼠脊髓横断伤后后肢运动功能恢复的规律

目的：研究大鼠脊髓完全性损伤后后肢运动功能恢复的规律并探讨其机制。方法：15只SD大鼠于T9平面切断脊髓并切除3mm使其完全横断。于伤后1，2，4，6周行后肢运动功能联合评分(CBS)及Basso-Beattle-Bresnahan(BBB)评分。并于伤后6周行组织学、免疫组化、脊髓运动诱发电位(MEP)检测及再次横断实验。结果：伤后后肢运动功能均有不同程度的恢复，4周时恢复速度最明显，6周时BBB最高评分可达12分；MEP的结果与刺激电极的位置有关，刺激电极置于损伤平面以上时，不能引出MEP，而置于损伤平面以下时，可引出正常波形的MEP；损伤平面以上再次横断脊髓对已恢复的后肢运动功能无影响，而损伤平面以下再次横断则致再次完全截瘫；损伤处组织学检查为胶质瘢痕，未见轴索通过，有少量神经丝蛋白200(NF200)阳性纤维，但零星、散乱。结论：大鼠脊髓完全性损伤后，后肢运动功能存在明显的自发性恢复，这种恢复与脊髓下行传导束的修复无关，而是损伤远段脊髓的自主功能。远段脊髓在功能上是一个整体。     

胚胎脊髓不同移植方法促进成鼠损伤脊髓功能恢复的研究

目的研究提供血运的胚胎脊髓移植对成鼠损伤脊髓功能恢复的作用。方法将胚胎脊髓组织、胚胎十大网膜组织、胚胎＋椎旁肌组织移植到成鼠半切洞损伤的脊髓中,手术后进行联合行为评分,感觉诱发电位,运动诱发电位检查。结果联合行为评分,单纯移植组和胚胎＋大网膜组织优于单纯损伤组,感觉诱发电位,运动诱发电位潜峰时的恢复,移植各组均优于单损伤组。胚胎＋大网膜组效果最好,单纯胚胎脊髓移植组优于胚胎＋椎旁肌移植组。结论通过各种功能检查表明提供血运的胚胎脊髓移植对成鼠损伤脊髓功能恢复有较好的促进作用。     

胚胎脊髓移植对大鼠损伤脊髓胶质纤维酸性蛋白表达的影响

目的 研究大鼠脊髓损伤后胚胎脊髓（ＦＳＣ）移植是否能够影响胶质纤维酸性蛋白（ＧＦＡＰ）的表达和伤后大鼠后肢功能的恢复情况。方法 将６０只大鼠分为脊髓半脊髓半切洞损伤＿胚胎脊髓移植组（Ａ组）和单纯脊髓半切洞损伤组（Ｂ组）。伤后１,３,,７,１４,２８天,应用行为学和电生理检查观察大鼠功能恢复情况,应用原位杂我和免疫细胞化学方法观察ＧＦＡＰ的表达,并采用计算机图像分析技术,进行定量分析。结果 大鼠脊髓     

急性脊髓损伤后运动诱发电位与MRI表现相关性研究

目的：研究实验性脊髓急性创伤后动态MR表现和运动诱发电位评分间的相关性。材料和方法：23只家兔建立脊髓液压损伤模型，其中对照组5只，脊髓按不同损伤程度分A、B两纽，各9只．于伤后24h、72h、7d行MRI与运动诱发电位评分。结果：脊髓损伤A组创后24h出现高低混杂信号．MEP未引出且随时间延睫未见恢复；72h出现血肿信号特征．7d创区大部分坏死信号．其功能未见恢复。损伤B组24h见点状水肿信号．MEP潜伏期明显延长．72h-7d范围扩大，MEP表现山脊髓功能部分恢复。结论：脊髓功能的MEP评判准确地提供了量化标准。高场MRI发现72h表现出脊髓血肿的信号提示脊髓功能缺失严重，而72h的点状高信号提示脊髓不完全损伤．并可有恢复。     

脊髓腹侧压迫损伤后运动功能恢复的变化规律

目的 观察脊髓侧压迫致伤后脊髓功能变化的规律。方法 先制作脊髓腹侧压迫损伤模型、造成脊髓不完全损伤,应用后肢功能评分、神经电生理检查等手段,观察受试动物双后肢的功能变化。结果 脊髓受压致脊髓不完全损伤后,随着观察时间的延长,受试动物后肢功能呈不同程度的恢复,但以伤后2周功能恢复最快。脊髓完全损伤后受试动物后肢功能无明显变化。结论 脊髓损伤后其功能恢复机制目前尚不完全清楚,如果脊髓功能在伤后2周内有明显恢复,将预示着脊髓功能最终有较好的恢复。     

胶质细胞源性神经营养因子对大鼠脊髓损伤后后肢运动功能及其运动诱发电位的影响

目的：探讨胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）对大鼠脊髓损伤后后肢运动功能及其运动诱发电位（MEP）的影响。方法：将30只SD雄性大鼠（200－250g)随机分为对照组、等渗盐水（NS）组和GDNF组,每组10只,改良Allen方法致T13段脊髓不完全损伤,蛛网膜下腔分别给予NS或GDNF20μl,伤后1,5h和1,3,5d评定后肢出现运动功能（Salzman评分）和检测MEP。结果：脊髓损伤后后肢运动障碍。MEP波幅（P1－N1峰峰值）降低,潜伏期延长,对照组无变经。伤后1,5h和1,3,5d,NS组波幅分别恢复至伤前的36．7％、38．9％、47．1％、74．1％和92．3％,潜伏期恢复至112．5％、111．2％、111．3％、105．0％及103．5％;伤后5h和1,3dGDNF组波幅恢复明显优于NS组,伤后1,3dGDNF组潜伏期恢复优于NS组（P＜0．05）。伤后1,5h后肢运动功能无恢复,伤后1d开始恢复,伤后3,5d明显恢复,其中GDNF组恢复显著优于NS组（P＜0．01）。结论：GDNF能够早期促进MEP波形的恢复,增强后肢运动功能的恢复;MEP恢复早于后肢运动功能恢复。     

胚胎脊髓移植联合应用bFGF对脊髓损伤后神经再生的影响

目的 探讨胚胎脊髓（Fetal spinal cord,FSC）移植联合外源性碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,bFGF）的应用对脊髓损伤后脊髓神经再生的影响。方法 采用大鼠胸段（T8～T11）脊髓左侧半横切损伤模型。移植供体为同种异体妊娠14天的孕鼠,将实验动物分为3组：A组为损伤——FSC移植组;B组为损伤＋FSC移植＋bFGF组;C组为单纯损伤组。术后1～8周每周行综合行为评分（combined behavioral score,CBS）,评定大鼠功能,并取术后8周损伤区脊髓组织0.5cm作嗜银梁色及NF200免疫组织化学检查,分别标记轴突和胶质细胞,进行定量分析,观察神经纤维再生情况。结果 胚胎脊髓移植和外源性bFGF可以防止成鼠脊髓损伤后神经元的萎缩,图像分析发现其作用A、B组组优于C组,可以较好地恢复神经元形态。CBS评分提示大鼠神经功能的恢复也有同样趋势,治疗组统计学分析与对照组间有显著性差异。免疫组织化学检查,术后8周A、B组神经中丝（neurofilament,NF）着色点较C组密集,且没有明显的胶质增生。结论 脊髓损伤后联合应用胚胎脊髓移植和bFGF可以防止神经元的萎缩,并且对神经纤维再生及功能的恢复有促进作用。     

脊髓半切后胫后神经体感诱发电位与后肢运动功能的相关性研究

目的：研究成年猴脊髓半切后胫后神经体感诱发电位（T－SEPs）与后肢运动功能的关系。方法：雄性成年恒河猴2只，半切右侧脊髓L1节段，5个月后分别于左侧和右侧T11节段行第二次脊髓半切。分别于两次手术前后不同时间点检测后肢T－SEPs及肌力的变化。结果：首次脊髓半切致动物右后肢完全瘫痪，右侧T－SEPs消失，左侧的潜伏期（PL）延长、波幅降低，随瘫肢肌力的恢复，右侧T－SEPs重新出现与左侧T－SEPs同时改善。左侧二次脊髓半切后双后肢完全瘫痪，双侧T－SEPs消失；右侧二次半切后仅出现双后肢肌力轻度减退，伴右侧T－SEPs再度消失，左侧PL延长，波幅度低，统计分析示PL、峰峰值与肌力变化间存在高度相关性。结论：成年猴脊髓半切后T－SEPs变化与后肢运动功能密切相关，为脊髓损伤后后肢运动功能的一项间接、客观的检测指标。     

K506促进神经干细胞移植后损伤脊髓神经传导通路的修复

目的 观察他克莫司(FK506)促进神经干细胞(neural stem cels,NSCs)移植后损伤脊髓神经传导通路修复的作用.方法 显微镜下动脉瘤夹压迫SD大鼠T8脊髓,建立压迫型脊髓损伤动物模型.损伤后7 d按随机数字表法分为三组:对照组,于损伤中心定向注射等渗盐水;细胞移植组,于损伤中心定向注射NSCs;FK506组,于损伤中心定向注射NSCs,同时按1 mg·kg-1·d-1连续7 d腹腔注射FKS06.连续观察1,2,4,8周,通过BBB评分、BDA顺行示踪、体感诱发电位(SEP)与运动诱发电位(MEP)监测,比较观察大鼠脊髓神经传导功能的恢复情况.结果 伤后后肢运动功能均有不同程度的恢复,4周时恢复速度最明显,8周时BBB最高评分可达6分;BDA顺行示踪,FK506组和细胞移植组在1周后有部分神经纤维通过,8周时各组均有部分BDA阳性标记的皮质脊髓束再生通过脊髓损伤部位,特别是FK506组可延续至距损伤中心1.7 cm.诱发电位结果显示,FKS06组在2周时SEP的潜伏期即明显缩短(P<0.05).4周后,FK506组MEP潜伏期与各组比较明显缩短(P<0.05),表明应用免疫抑制剂能促进NSCs对损伤脊髓的恢复,缩短SEP和MEP的潜伏期,早期对SEP改善明显,后期对MEP改善明显.结论 脊髓损伤大鼠移植NSCs后,系统应用FK506后具有神经保护和神经营养作用,可加快神经传导功能的恢复.

Abstract：

Objective To observe the effect of tacrolimus(FK506)in promoting repair of the injured spinal cord pathway after neural stem cell transplantation in rats. Methods A neurysm clip was used to compress the T8 spinal cord segment of SD rats under microscope to establish model of spinal cord injury.The rats were randomly divided into three groups seven days after injury,ie,control group (injection of normal saline at the injury center),transplantation group(injection of neural stem cells,NSCs,at the injury center),FK506 group(injection of NSCs at the injury center plus 7 days of intrapernerve conduction was compared by using the Basso-Beatfle-Bresnahan (BBB) scale,BDA tracing,somatosensory evoked potential(SEP)and motor evoked potentials(MEP)monitoring at 1,2,4 and 8weeks. Results The motor function of the hind limb after injury was recovered in various degrees with time,with the most significant recovery at 4 weeks.The BBB score reached 6,the maximum at 8 weeks.BDA tracing showed that some nerve fibers were found crossing the injured center of the spinal cord one week later in FK506 group and cell transplantation group,that BDA-positive labeled corticospinal tract fibets were seen across the injury site in all groups by the end ofthe eight weeks.In the FKS06 group,the regeneration could be observed even as 1.7 cm away from tlle injury center.SEP latency was significantly shorter in the FK506 group after two weeks(P<0.05)and the MEP latency in the FK506 group was shortened significantly at four weeks compared with the other groups(P<0.05),indicating that the immunosuppressants could promote the recovery of the injured spihal cord,shorten the latency of SEP and MEP,improve SEP at early stage and MEP at late stage．Conclusions Systemic application immuno suppressive agents FK506 plays an important role in neuroprotection and neurotrophy,which promotes the repair of the injured spinal cord after neural stem cell transplantation．     

人神经干细胞移植对脊髓损伤大鼠后肢运动功能恢复的影响

目的:探讨人神经干细胞(hNSCs)移植对脊髓损伤大鼠后肢运动功能恢复的影响及可能机制。方法:取2～3个月流产胎儿海马区组织,体外培养神经干细胞;采用通用型脊髓打击器将24只成年SD大鼠制成脊髓损伤模型,伤后第8天随机分为移植组和对照组,于损伤中心分别注入CM-DiI标记的hNSCs悬液和DMEM/F12培养液。分别于hNSCs移植后当天及1、2、3、4、6、8周采用Basso,Beattie,Bresnahan(BBB)行为功能评定量表评估大鼠后肢运动功能恢复情况。移植后第4、8周取损伤部位脊髓,行病理切片,免疫组化方法观察移植细胞的存活和迁移,并检测损伤脊髓处胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、神经元核心抗原(NeuN)、2,3-环核苷酸磷酸二酯酶(CNPase)、神经巢蛋白(Nestin)等抗原的表达。结果:移植组后肢运动功能评分随时间延长而逐渐升高,移植1周时后肢运动功能有所改善,与对照组无明显差异(6.4±0.99 vs 6.0±0.93,P>0.05);移植4周时后肢运动功能比1周时有明显恢复,BBB评分明显高于对照组(9.7±1.04 vs 7.4±0.95,P<0.05);移植的hNSCs可在损伤脊髓处长时间存活(至少8周),并分化为神经元、少突胶质细胞和星形胶质细胞。结论:人神经干细胞可在损伤脊髓处向神经元和神经胶质细胞分化,并能促进脊髓损伤大鼠后肢运动功能的部分恢复。