山西黄芪根腐病优势病原菌鉴定及其拮抗菌的多重筛选北大核心CSCD

目的:在明确山西省黄芪根腐病优势病原菌的基础上,针对其进行拮抗菌的筛选。方法:通过组织分离法获得黄芪根腐病的致病菌,并根据柯赫氏法则进行回接证病,采用常规形态和EF-1α序列分子鉴定相结合的方法确定其分类地位;同时以优势病原菌为靶标,通过室内多重筛选的方式筛选获得生防菌株。结果:明确了腐皮镰刀菌Fusarium solani为山西黄芪根腐病的优势病原菌之一,筛选获得的拮抗菌G10对其表现出了良好的平皿拮抗和离体防病效果。结论:以Fusarium solani为靶标筛选获得的拮抗菌G10,具有开发为专用生防制剂的潜力。     

邯郸地区柴胡根腐病病原鉴定及室内药剂毒力测定

目的:明确邯郸地区柴胡根腐病的致病菌种类及适宜防治药剂,为邯郸地区柴胡根腐病田间防治提供依据。方法:采用组织分离法分离病原菌并进行致病性测定,通过形态观察和分子生物鉴定明确病原菌种类。采用菌丝生长速率法对6种常用杀菌剂进行室内毒力测定。结果:从柴胡根部分离病原菌株,经致病性测定明确该菌株为柴胡根腐病病原菌。结合形态学与分子生物学鉴定确定该病原菌为尖孢镰刀菌Fusarium oxysporum。室内毒力测定表明300 g/L苯甲·丙环唑效果最好,EC₅₀仅为0.0002μL/mL,其次是戊唑醇和氟唑菌酰羟胺,EC₅₀分别为0.0310和0.0446μL/mL。250 g/L嘧菌酯和500 g/L甲基硫菌灵的EC₅₀分别为0.1460和0.1472μL/mL,也表现出一定的抑菌效果。23.4%双炔菌酰胺对尖孢镰刀菌的抑制效果较差。结论:邯郸地区柴胡根腐病是由尖孢镰刀菌Fusarium oxysporum引起,三唑类复配药剂苯甲·丙环唑对尖孢镰刀菌的防治效果最好。戊唑醇、氟唑菌酰羟胺、嘧菌酯和甲基硫菌灵可以作为轮换使用药剂,以减缓病原菌产生抗药性。     

甘肃省黄芪细菌性叶斑病病原的分离和鉴定

目的：明确甘肃省黄芪细菌性叶斑病的病原。方法：通过植物病原细菌形态学、生理生化指标测定,以及16S rDNA、rpoB和rpoD基因位点联合构建系统发育树,对黄芪细菌性叶斑病病原菌进行鉴定。结果：病原菌在营养琼脂（NA）培养基上培养24 h后菌落直径为1～3 mm,圆形或近圆形,乳白色、光滑凸起、半透明状、边缘整齐;革兰染色反应为阴性,好氧型,在10～40℃均能生长,在pH为5.7、6.8的环境中生长良好,在2%、5%NaCl环境下可生长;可利用葡萄糖、木糖、甘露糖、柠檬酸盐及硝酸盐;在代谢活动中可产生酪氨酸酶、过氧化氢酶、苯丙氨酸脱氨酶;分解色氨酸,液化明胶;不产生卵磷脂酶、淀粉水解酶及乙酰甲基甲醇。致病性测定初步验证了黄芪细菌性叶斑病的致病菌;16S rDNA、rpoB和rpoD基因序列分析进一步确定引起黄芪细菌性叶斑病的病原菌为绿黄假单胞菌Pseudomonas viridiflava(Burkholder)Dowson。结论：明确了甘肃省黄芪细菌性叶斑病的病原,为黄芪细菌性叶斑病的有效防治提供参考。     

黄芪冠腐病病原鉴定

目的：发现一种新的黄芪根部病害,症状表现为根冠部表皮褐色至黑色、呈龟裂状,定名为黄芪冠腐病。明确引起该病害的病原菌种类,为田间防治提供理论依据。方法：采用组织分离法对患有冠腐病的黄芪典型病株进行病原菌分离培养,结合病原形态学和分子生物学方法进行病原鉴定。结果：基于形态学鉴定共分离得到52株菌株,分为3类病原菌;选取代表性菌株,对rDNA-ITS序列、TEF1-α、β-TUB基因序列进行扩增并测序后,进行多基因联合系统发育分析。其中菌株HJ108与木贼镰刀菌Fusarium equiseti聚为一支;菌株HJ201与锐顶镰刀菌Fusarium acuminatum聚为一支;菌株HJ305与尖孢镰刀菌Fusarium oxysporum聚为一支。结论：将引起黄芪冠腐病发生的致病菌鉴定为木贼镰刀菌Fusarium equiseti、锐顶镰刀菌Fusarium acuminatum和尖孢镰刀菌Fusarium oxysporum,其中木贼镰刀菌分离频率为57.7%,是该病害的优势病原。     

黄连根腐病镰刀菌属病原真菌鉴定

根腐病是黄连的主要病害之一,近几年大面积爆发,给生产造成了严重损失,也大大打击了连农的积极性。为了明确其病原真菌,采用组织分离法分离出病根镰刀菌属真菌,通过离体回接初步筛选出疑似病原真菌,再进行活体回接明确病原菌,结合分子鉴定和形态鉴定将病原菌鉴定到种。结果共计分离到镰刀菌属真菌20株,其中的5株离体回接和活体回接均显示强致病性。根据以上结果推断,尖孢镰刀菌Fusarium oxysporum、腐皮镰刀菌F.solani、三线镰刀菌F.tricinctum是黄连根腐病的病原真菌,且可能是复合侵染的前期入侵菌,其中尖孢镰刀菌在分离出的镰刀菌中占据优势,其他镰刀菌分离频率相对较低,因此在大田生产中应针对该菌进行重点防护。高温和高湿度会增强镰刀菌的致病性,据此推测,全球气候变暖使原本冷凉的黄连产区气温升高,适合病原菌生长繁殖入侵,可能是导致近年黄连根腐病大爆发的主要原因之一。因此,解决黄连根腐病的方法除了研发和施用农药,还可以将种植基地向高海拔地区转移。     

湖南地区玉竹根腐病病原鉴定及其生物学特性研究

目的：明确导致湖南地区玉竹根腐病发生的主要病原。方法：通过调查湖南玉竹主产区玉竹根腐病发生情况,对病原进行分离,并采用柯赫氏法则进行致病性测定,最后根据真菌形态和分子鉴定结果确定病原菌种属,同时对该病原菌基本的生物学特性进行了测定。结果：芬芳镰刀菌Fusarium redolens为玉竹根腐病主要病原,该菌菌丝生长适宜碳源为蔗糖,氮源为牛肉膏,温度为25℃左右,pH为8～9。结论：本研究明确了湖南玉竹主产区玉竹根腐病病原及其基本的生物学特性,不但为该病害的防控提供了依据,还可为抗病育种奠定基础。     

甘肃省大黄病害调查与病原鉴定

目的:通过调查甘肃省大黄主产区大黄病害种类及其特性,为病害综合防治提供理论依据.方法:田间调查和室内分离鉴定相结合.结果和讨论:共发现真菌性病害8种,分别为叶黑粉病Thecaphora schwarzmaniana、斑枯病Septoria sp.、锈病Puccinia rhei-palmati、轮纹病Ascochyta rhei、叶点霉灰斑病Phyllostica rhei、白粉病Erysiphe polygoni、灰霉病Botrytis sp.、根腐病Fusarium oxysporiums、1种病毒病(毒源待定).黑粉病发病率为:14%～26%,为害严重,急待解决.白粉病、灰霉病为国内首次报道.     

甘肃省羌活病害种类调查及病原鉴定

目的:对甘肃省岷县、渭源等地的羌活病害进行了调查和病原鉴定.方法:采取五点取样,每点调查10株,记载发病率,严重度.结果:共发现病害8种:壳二胞褐斑病Ascochyta levistici、白粉病 Erysiphe heraclei、链格孢灰斑病Alternaria burnsii壳针孢叶斑病 Septoria dearnessii、角斑病Pleospora sp.、茎点霉条斑病Phoma sp.、细菌性角斑病(属种待定)和1种病毒病(毒源待定).结论:白粉病和细菌性角斑病为害严重,是急待解决的问题.以上病害均为国内首次报道.     

甘肃省甘草病害种类调查及病原鉴定

目的：为甘草病害综合防治以及规范化种植提供理论依据。方法：2007~2013年对甘肃省民勤、岷县、陇西、渭源,兰州5个市县的甘草病害进行了田间系统调查和室内病原鉴定。结果：共发现病害7种：褐斑病Cercospora glycyrrhizae、锈病Uromyces glycyrrhiza、壳二孢轮纹病Ascochyta onobrychidis、灰霉病Botrytis cinerea、白粉病Erysiphe sp.、链格孢黑斑病Alternaria sp.和1种病毒病（毒源待定）。结论：甘肃省生产中甘草褐斑病和锈病发生为害严重,应引起重视,并研究安全有效的防控对策。     

广金钱草根腐病病原生物学特性研究

目的:研究温度、pH、培养基、碳源和光照对广金钱草茄病镰刀菌生长、产孢以及孢子萌发的影响。方法:设置不同处理,每处理接3个平板,每项实验重复3次。结果:茄病镰刀菌生长温度范围为12～37℃,最适为20～30℃。茄病镰刀菌在pH3.0～14.0范围内均能生长,最适pH为9.0～11.0。PDA、PSA、OMA和Czapek培养基对茄病镰刀菌生长影响不显著,但对孢子萌发率有较大影响,在Czapek培养液中孢子萌发率最高。不同碳源Czapek培养基上茄病镰刀菌生长和孢子萌发率明显不同,以蔗糖和麦芽糖为碳源的培养基菌落扩展最快,其次是葡萄糖和乳糖,果糖最差,同时以果糖、葡萄糖、麦芽糖和蔗糖为碳源的Czapek培养液孢子萌发最高,而乳糖较低。光照对茄病镰刀菌菌丝生长没有影响,但有利于产孢。     

拮抗黄芪根腐病菌的根际促生菌的室内筛选与鉴定

该文以黄芪根腐病菌Fusarium solani为靶标,采用平板对峙和牛津杯法对被筛菌株进行了抑菌活性评价,并测定了抑菌效果显著且稳定性良好菌株的促生性能,结果显示:菌株G10的活体和发酵液均表现出了明显且稳定的抑菌效果;同时,还具有溶磷能力、固氮能力、淀粉酶活性、产IAA和产HCN等5项促生长特性。形态学观察、生理生化特性测定、16S rDNA序列同源性分析、以及BBL CrystalTM细菌鉴定仪鉴定结果均表明:菌株G10为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis。综上,枯草芽孢杆菌G1 0具备了多功能菌株的基本特征,是开发黄芪根腐病专用微生物农药的有效物质基础。     

黄芪与其混伪品的ITS序列分子鉴定研究

目的:研究黄芪与其混伪品之间的DNA分子鉴别方法.方法:采集不同产地的黄芪药材13份,替代品红芪2份,混伪品紫花苜蓿3份和蜀葵1份,所有样品进行总DNA的提取,PCR扩增,并对扩增产物进行测序得到相应的序列,同时从GenBank下载蓝花棘豆、锦鸡儿2种伪品的ITS序列.用MEGA 4计算其种间的K-2-P距离,最后利用ITS序列构建其系统发育树.结果:测得了19份样品的ITS序列全长,分别为蒙古黄芪646 ～ 650 bp,膜荚黄芪为646～650 bp;红芪为664 bp;紫花苜蓿为659 bp;蜀葵为728 bp,在GenBank中注册,获得登记号.通过以ITS序列重建系统进化树进行的聚类分析可以将黄芪与其混伪品有效的区分开.结论:ITS序列能够成功鉴定黄芪及其易混伪品,可以作为黄芪与其混伪品的分子鉴定方法.     

白术根腐病病原菌的分离鉴定及特性研究

目的:分离白术根腐病病原菌,探究温度和pH值对病原菌生长状态的影响.方法:采用组织分离法分离、纯化得到病原菌,致病性试验判定其对白术的致病性.通过分子生物学鉴定病原菌的种属.分别采用不同的温度和pH值探究不同条件对病原菌生长的影响.结果:白术根腐病病原菌为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum).在温度超过3...     

广西莪术叶斑病病原鉴定及生物学特性研究

目的:明确广西莪术叶斑病病原菌种类,掌握其生物学特性。方法:依据柯赫氏法则进行致病性测定和病原菌验证,通过形态学特征观察、r DNA-ITS序列分析来确定病原菌;设置不同的培养基、温度、PH值、湿度,观测菌丝生长及孢子萌发,进行生物学特性研究。结果:病原菌为大豆拟茎点种腐病菌(Phomopsis longicolla);菌株在PDA培养基生长良好,加了莪术汁的PDA培养基更利于生长及产孢,温度20~30℃、PH值5~6条件下适宜菌丝生长及孢子萌发,RH为80%时孢子萌发率最高。结论:广西莪术叶斑病病原菌鉴定为Phomopsis longicolla;中温、潮湿、偏弱酸性环境条件适宜该菌生长。     

重庆云阳橘红褐斑病病原鉴定及生物学特性初步研究

目的:鉴定从重庆云阳橘红基地采集到疑似橘红褐斑病样品病原菌。方法:使用组织分离、形态学鉴定、真菌ITS序列分析及致病性测定。结果:将其鉴定为橘红褐斑病,病原菌为交链格胞菌(Alternaria alternata)。生物学特性分析表明,该病原菌菌丝生长适宜温度为15～30℃,最适温度为20～25℃,37℃时不能生长;pH值为4～12时均可生长,最适pH值为10;光照对菌丝生长影响不大;该菌可利用多种碳、氮源,最适碳源为果糖和D-甘露醇,最适氮源为蛋白胨和硝酸钠。结论:不同褐斑病菌株间存在一定的差异。