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相似文献
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1.
目的探讨前列腺素E2(PGE2)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对鼠肺成纤维细胞第二信使的影响,为细胞因子治疗尘肺提供新靶点.方法在原代培养的小鼠肺成纤维细胞中,加10 ng/mlTNF-α或10 ng/ml TNF-α联合不同剂量的PGE2细胞因子,在不同的观察时点,用放射免疫分析法检测肺成纤维细胞内环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)和1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)等第二信使的量变模式对肺成纤维细胞增殖效应的影响.结果在120 s时点,10 ng/ml TNF-α与1 000 pg/ml PGE2联合时,成纤维细胞内IP3的计数值最高[(76.33±7.10)CPM];而cAMP/cGMP比值较低时(作用时点24 h,4.29),对成纤维细胞的增殖效应最强;当10 ng/ml TNF-α与500 pg/ml PGE2和2 000 pg/ml PGE2联合时,成纤维细胞内IP3的CPM值明显降低作用120 s时,CPM值分别为27.00±3.00、61.00±2.65;cAMP/cGMP比值在作用24 h时(分别为3.50、9.83),成纤维细胞的增殖效应明显下降.结论一定剂量的PGE2能提高肺成纤维细胞内cAMP/cGMP比值,拮抗TNF-α对成纤维细胞的增殖效应.  相似文献   

2.
目的 探讨不同浓度的前列腺素E2(PGE2)联合肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对肺成纤维细胞膜肿瘤坏死因子-α受体(TNF-αR)和胞内1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)和Ca2 的影响,为细胞因子治疗尘肺提供依据.方法 在原代培养的小鼠肺成纤维细胞中,单独加入10μg/LTNF-α并将10μg/L TNF-α联合不同剂量(0.5、1.0、2.0 μg/L)的PGE2细胞因子,于染毒30、60、120 s时,用免疫组织化学方法检测膜TNF-αR的表达,用放射免疫分析方法检测成纤维细胞IP3的水平,应用流式细胞技术检测成纤维细胞内Ca2 的含量.结果 随着PGE2剂量的增加(0.5~1.0 μg/L),在30、60 s时,IP3的cpm值逐渐下降;当以1.0 μg/L PGE2染毒120 s时,IP3的cpm值明显增加(P<0.05);而PGE2剂量为2.0 μg/L时,IP3的cpm值较1.0 μg/L时明显降低(P<0.05).细胞膜TNF-αR的表达和胞内Ca2 度随着PGE2剂量的增加呈剂量依赖性降低.结论 一定剂量的PGE2可通过膜TNF-αR介导的IP3-Ca2 途径,拮抗TNF-α对肺成纤维细胞的增殖作用.  相似文献   

3.
目的研究TNF-α诱导Gq-Ca2+信号途径对鼠肺成纤维细胞增殖的机制及尼莫地平(Nim)的拮抗效应。方法以不同浓度的TNF-α刺激4—5代SD大鼠乳鼠肺成纤维细胞,氯氨T法检测成纤维细胞羟脯氨酸的含量;Western blot检测成纤维细胞Gq蛋白的表达,流式细胞技术检测细胞内Ca2+的含量;酶联免疫吸附试验检测各组成纤维细胞内环磷酸腺苷(cAMP)的水平。结果 Gq蛋白的结果显示随TNF-α剂量的增加而增加;Ca2+和羟脯氨酸的结果显示在10 ng/ml TNF-α剂量组有明显增加,与各组比较有明显的统计学意义(P<0.05);当TNF-α联合Nim后,促使cAMP表达量增强,同时使羟脯氨酸的表达降低。结论 TNF-α介导Gq-Ca2+信号途径使羟脯氨酸表达增强,Nim通过提高cAMP的水平来拮抗TNF-α介导的效应。  相似文献   

4.
【目的】探讨支气管哮喘患儿血浆环磷酸腺苷(cAMP)/磷酸鸟苷(cGMP)比值变化及其临床意义,以及心先安治疗支气管哮喘的疗效。【方法】①采用特异性放射免疫分析法检测22例哮喘患儿急性期和缓解期外周血浆cAMP、cGMP表达水平,并以24例正常儿童作对照。②采用特异性放射免疫分析法检测接受常规治疗和心先安治疗(每次2.5~5.0 mg/kg,每日1~2次,连续7 d)的19例哮喘患儿外周血浆cAMP、cGMP表达水平,以接受常规治疗的22例哮喘患儿作对照。【结果】①哮喘患儿急性期外周血浆cGMP水平高于缓解期和正常组(P<0.05),而cAMP水平和cAMP/cGMP水平低于缓解期和正常组(P<0.05);②予心先安治疗的哮喘患儿外周血浆cAMP水平和cAMP/cGMP水平高于对照组(P<0.05),而cGMP水平低于对照组(P<0.05)。【结论】①哮喘患儿cGMP表达亢进,cAMP表达不足。cAMP/cGMP平衡失调,可作为监测和指导哮喘治疗的生化指标;②哮喘患儿给予心先安治疗能够纠正cAMP/cGMP失衡,疗效较好。  相似文献   

5.
目的 通过体外实验探讨肿瘤坏死因子-alpha(TNF-α)对鼠肺成纤维细胞增殖的信号转导机制.方法实验分为5组:空白对照组;TNF-α组;TNF-α分别联合10-7、10-6和10-5mol/L佛司克林(FSK)组.SD大鼠乳鼠肺成纤维细胞进行传代培养,刺激培养肺成纤维细胞4和24 h后,用氯氨T法检测细胞培养上清液...  相似文献   

6.
目的通过对冷应激大鼠脑组织环磷酸腺苷(cAMP)与环磷酸鸟苷(cGMP)含量,腺苷酸环化酶(AC)和磷酸二酯酶(PDE)生物活力的研究,旨在探讨冷应激对中枢神经系统损伤的机制。方法将大鼠分对照组与实验组〔含冷应激组和冷应激恢复组(以下简称恢复组)〕,cAMP、cGMP含量检测采用酶联免疫分析法(ELISA)。AC和PDE的生物活力检测采用放射性同位素法。结果大鼠脑皮质cAMP含量和AC活力:对照组为(0.516±0.271)pmol/mg和(1.67±0.52)pmol/(mg.min),冷应激组为(0.338±0.204)pmol/mg和(1.38±0.15pmol/(mg.min),而恢复组cAMP含量为(0.419±0.197)pmol/mg,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。大鼠脑干cAMP含量和AC活力:对照组为(0.326±0.212)pmol/mg和(2.21±0.13)pmol/(mg.min),冷应激组为(0.297±0.224)pmol/mg和(1.95±0.14)pmol/(mg.min),与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。大鼠丘脑下部cAMP含量和AC活力:...  相似文献   

7.
目的探讨染不同浓度煤尘的肺泡巨噬细胞(染煤尘-AM)上清液作用成纤维细胞不同时点对肌醇-1,4-二磷酸(IP2)和肌醇-1,4,5-三磷酸(IP3)信号物质的影响.方法应用细胞培养技术,用小鼠胸腺细胞增殖法和放射免疫分析法,分别测定染煤尘-AM上清液中白细胞介素1(IL-1)、前列腺素E2(PGE2)的含量;用Dowex-1×8阴离子交换柱层析法,分析染煤尘-AM上清液作用于3H-肌醇标记成纤维细胞后IP2和IP3的液闪计数值(cpm).结果 AM培养上清液中IL-1,PGE2含量随染煤尘浓度的增加而增高,与对照组比较差异有显著性.用这种含细胞因子的染煤尘-AM上清液作用成纤维细胞,在不同的作用时点,对IP2的影响不同,在10,20 s 时点,上清液中IL-1和PGE2对IP2显示有上调作用,随着作用时间的延长,IP2出现了下调现象.对IP3的影响表现为,在不同的作用时点均随上清液中细胞因子的增加IP3呈现增加趋势.煤尘组与对照组比较,在不同的观察时点显示有不同的差异显著性.结论染煤尘-AM培养上清液中含有高于对照组的IL-1和PGE2细胞因子,用这种上清液作用于成纤维细胞后,可影响成纤维细胞中磷酸肌醇信号物质的含量,影响程度与细胞因子的浓度和作用时间有关.  相似文献   

8.
拟除虫菊酯对大鼠皮层腺苷酸环化酶水平影响   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的研究溴氰菊酯(deltamethrin,DM)和氯菊酯(permethrin,PM)对雄性SD大鼠大脑皮层及纹状体腺苷酸环化酶(adenylyl cyclases,AC)蛋白含量和纹状体环磷酸腺苷(cAMP)水平的影响。方法采用不同剂量的溴氰菊酯、氯菊酯对雄性SD大鼠进行经口灌胃给药后,免疫组化的方法测定大鼠大脑皮层及纹状体AC蛋白含量,及放射免疫方法检测DM和PM对大鼠纹状体cAMP水平的影响。结果连续灌胃10d染毒后,大鼠皮层的AC水平和纹状体的cAMP水平明显被抑制。结论拟除虫菊酯能明显降低大鼠皮层AC含量和纹状体cAMP水平。  相似文献   

9.
目的研究肌醇六磷酸(IP6)对人结肠癌细胞系(HT-29)的凋亡诱导作用。方法将不同浓度IP6以不同时间作用于HT-29细胞,运用透射电镜观察IP6对HT-29细胞凋亡作用;流式细胞仪检测细胞凋亡率变化;钙离子荧光探针(Fura-2/AM)法测定细胞内Ca2+浓度变化;RT-PCR法检测细胞内caspase-3 mRNA表达。结果IP6诱导HT-29细胞发生凋亡的形态学变化为染色体固缩,可见凋亡小体;3.3mmol/L IP6作用6个月HT-29细胞凋亡率为4.4%,细胞内Ca2+浓度为38.66 mmol/L,与对照组比较明显升高(P0.05);各IP6组Caspase-3mRNA表达均升高(P0.05);IP6诱导HT-29细胞凋亡作用及Ca2+、Caspase-3mRNA的表达变化具有时间依赖关系。结论IP6对HT-29细胞有诱导凋亡作用,其机制可能是通过调节细胞内Ca2+浓度及Caspase-3的表达来实现。  相似文献   

10.
枣环磷酸腺苷提取液对小鼠抗疲劳作用的药效学研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:探讨枣环磷酸腺苷提取液对啮齿类动物的抗疲劳作用,为临床试验提供数据支持。方法:1将40只小鼠随机分为模型组、对照组(口服红景天液体)和枣环磷酸腺苷提取液(2.2、6.7和20.0 ml/kg)组。环磷酸腺苷剂量为0.42、1.28和3.84 mg/kg,分别连续口服14 d,每天1次。采用Morris水迷宫强迫小鼠游泳,记录小鼠30 min内的游泳划水时间,以评价其抗疲劳效果;2再将40只大鼠随机分为模型组、对照组(口服红景天液体)和枣环磷酸腺苷提取液(1.1、3.3和10.0 ml/kg)组。环磷酸腺苷剂量为0.21、0.64和1.92 mg/kg,分别连续口服14 d,每天1次。采用Morris水迷宫使各组大鼠强迫游泳20 min,检测大鼠强迫游泳后的血清生化和肝组织糖原水平。结果:枣环磷酸腺苷提取液中、高剂量组动物的游泳划水时间与模型组相比有统计学意义;三个不同剂量的枣环磷酸腺苷提取液对游泳后动物的血清尿素氮含量均有明显的降低作用,与模型组相比有统计学意义,中、高剂量组动物的血清乳酸明显下降,同时高剂量组肝组织糖原含量显著增加,枣环磷酸腺苷提取液对各组动物乳酸脱氢酶没有影响。结论:枣环磷酸腺苷提取液具有较好的抗疲劳和增强机体耐力的作用。  相似文献   

11.
[目的]观察亚硒酸钠(Na_2SeO_3)、硫酸镁(MgSO_4)对二氧化硅(石英)致巨噬细胞(RAW264.7)释放肿瘤坏死因子(TNF-a)、白介素-1(IL-1)的单独拮抗作用以及对人胚肺成纤维细胞羟脯氨酸(Hyp)合成水平变化的单独以及联合拮抗作用。[方法]对数生长期的RAW264.7细胞,调整浓度为2×10~5个/ml。在染200mg/L石英同时单独加入不同浓度Na_2SeO_3、MgSO_4溶液,24h后测定培养液中TNF和IL-1水平,并取培养液与人胚肺成纤维细胞共同培养,48h后测定人胚肺成纤维细胞培养液中Hyp含量。另外,在染石英同时联合加入不同浓度的Na_2SeO_3和MgSO_4溶液,培养24h后取培养液与人胚肺成纤维细胞共同培养,48h后测定其中的Hyp含量。[结果]①与石英组比,Na_2SeO_3对RAW264.7细胞释放TNF-α无明显影响,MgSO_4可以显著降低TNF-α的活性(P<0.05),其中以1.0μmol/L MgSO_4的效果更为明显。②与石英组比,一定剂量的Na_2SeO_3、MgSO_4可以降低IL-1的活性,其中以0.5μmol/L Na_2SeO_3和2.0μmol/L MgSO_4的效果最好(P<0.05)。③与石英组比,一定剂量的Na_2SeO_3、MgSO_4可以显著降低人胚肺成纤维细胞Hyp合成水平(P<0.05),其中以2.0μmol/L Na_2SeO_3和2.0μmol/L MgSO_4的效果最明显。④与石英组比,一定剂量的Na_2SeO_3与MgSO_4联合可以降低人胚肺成纤维细胞Hyp合成水平,其中以2.0μmol/L Na_2SeO_3和2.0μmol/L MgSO_4联合作用效果最明显(P<0.05)。[结论]一定剂量的MgSO_4对石英致巨噬细胞释放TNF-α具有拮抗作用;一定剂量的Na_2SeO_3和MgSO_4对石英致巨噬细胞释放IL-1具有单独拮抗作用,对人胚肺成纤维细胞Hyp合成水平具有单独及联合拮抗作用。  相似文献   

12.
SD大鼠分别照射微波(MW)、长波紫外线(UVA)、短波紫外线(UVC)、UVA+MW和UVC+MW。结果表明,UVA或UVC单独照射、UVA+MW或UVC+MW联合照射均引起血浆前列腺素E_2(PGE_2)、血液淋巴细胞的环磷酸腺苷(cAMP)、酸性α-乙酸萘酯酶阳性细胞(ANAE~+)的分散颗粒型细胞(DG)百分比升高;血液淋巴细胞ANAE~+百分比、ANAE~+的斑块颗粒型细胞(MG)百分比、MG/DG比值降低。联合照射时上述各项指标的变化显著地大于单独照射,表现为协同作用,其中以PGE_2和cAMP变化更为明显;这种协同作用属于相加作用或相乘作用有待进一步阐明。  相似文献   

13.
目的:观察葡萄糖酸锌(ZnG)和亚硒酸钠(Na2SeO3)对人胚肺成纤维细胞羟脯氨酸(Hyp)合成水平的单独以及联合拮抗作用.方法:用RAW264.7细胞和人胚肺成纤维细胞分别于37℃、5%CO2培养箱进行培养,RAW264.7细胞在细胞生长对数期时加入二氧化硅(SiO2),同时加入不同浓度ZnG、Na2SeO3的溶液,24 h后取RAW264.7细胞培养液与人胚肺成纤维细胞共同培养,作用48 h后测人胚肺成纤维细胞培养液中Hyp含量.结果:ZnG、Na2SeO3单独与联合作用均可以显著降低人胚肺成纤维细胞Hyp合成水平(P<0.05),其中以ZnG 2.25 mg/L和Na2SeO3 2.0 μmol/L浓度的单独与联合作用效果最明显.结论:一定剂量的ZnG、Na2SeO3对SiO2致人胚肺成纤维细胞Hyp合成水平具有单独以及联合拮抗作用.  相似文献   

14.
目的探讨彗星尾矩和双核细胞微核(CBMN)率两个指标对多环芳烃反应动力学的差异。方法应用4株细胞系,分别是中国仓鼠卵巢细胞CHO-K1、小鼠成纤维细胞NIH3T3、中国仓鼠肺成纤维细胞CHL、人胚肺成纤维细胞HELF,给予不同浓度的苯并(a)芘[B(a)P]处理,观察彗星尾矩和CBMN率的变化情况。阳性对照分别是过氧化氢和环磷酰胺。结果在所应用的B(a)P浓度范围内,4种细胞均在较低剂量下就出现了明显的拖尾(CHO-K1:0.5μmol/L;NIH3T3:0.75μmol/L;CHL:0.5μmol/L;HELF:0.3125μmol/L),并且随作用浓度的增加,彗星尾矩呈直线形上升趋势,各组与其邻近的较低剂量组相比,差异有显著性。CBMN率在中剂量组才出现显著升高(CHO-K1:2.0μmol/L;NIH3T3:1.5μmol/L;CHL:2.0μmol/L;HELF:1.25μmol/L),达到一定作用剂量后,CBMN率的上升趋于平缓,其剂量反应曲线基本呈S型。结论彗星尾矩和CBMN率对多环芳烃动力学反应模式不同,敏感性不同,在进行环境致癌物早期效应标志物研究时,应合理地将两种方法相结合,综合评价化学物所致遗传损伤。  相似文献   

15.
大气PM_(10)对两种不同细胞分泌炎性细胞因子的影响   总被引:3,自引:0,他引:3  
目的探讨大气可吸入颗粒物(PM10)对小鼠肺泡巨噬细胞(RAW264·7)和人肺成纤维细胞(HLF)分泌肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素8(IL-8)的影响。方法颗粒物样品采自北京市城区采暖期。两种染毒途径:(1)不同剂量的PM10直接对HLF染毒;(2)PM10首先作用于RAW264·7细胞,染毒一定时间后的细胞上清液再作用于HLF细胞。采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色(MTT)法测定细胞毒性;放射免疫法测定炎性因子TNF-α、IL-6和IL-8。结果PM10作用24h后,表现为低剂量时刺激细胞增殖,而高剂量时抑制细胞增殖,细胞存活率随浓度增加而降低(P<0·01);PM10能刺激HLF分泌炎性因子TNF-α、IL-6和IL-8,且有剂量-反应关系(P<0·05);巨噬细胞上清液亦能刺激HLF产生TNF-α、IL-6和IL-8,且其产生量高于PM10作用于HLF产生的量(P<0·05)。结论大气可吸入颗粒物PM10对HLF有一定毒性作用;PM10染毒24小时后能诱导人肺成纤维细胞分泌炎性因子TNF-α、IL-6和IL-8;巨噬细胞上清液亦能刺激人肺成纤维细胞释放上述三种炎性因子,其产生量高于PM10。  相似文献   

16.
目的使用不同浓度的肌醇六磷酸(IP6)作用于人结肠癌细胞系HT-29,观察IP6对癌细胞分化的影响,并对其机制进行探讨。方法将不同浓度的IP6(对照,1.8mmol/L,3.3mmol/L)作用HT-29细胞不同时间(1d,3d,5d),分别进行如下研究:(1)使用透射电镜观察细胞超微结构的改变;(2)测定碱性磷酸酶比活性;(3)应用RT-PCR法检测细胞内c-Myc基因的表达;(4)使用免疫细胞化学法检测细胞内Rb蛋白的表达。结果(1)3.3mmol/LIP6持续作用后,透射电镜下可以观察到细胞结构发生改变,出现核固缩、细胞器丰富、微绒毛增多等分化趋势;(2)IP6作用HT-29细胞后,碱性磷酸酶比活性明显增强;(3)RT-PCR结果显示,与对照组相比,各浓度IP6均能使细胞内c-Myc mRNA的表达减少(P<0.05);(4)IP6能够上调Rb蛋白的表达(P<0.05)。结论IP6能够促使HT-29细胞向正常细胞转化。IP6可能通过上调Rb蛋白的表达,下调c-Myc蛋白的表达,阻滞细胞周期,诱导细胞分化而发挥其抗肿瘤作用。  相似文献   

17.
目的观察慢性氟中毒大鼠骨组织中AC、cAMP、PKA的表达。方法将48只断乳2周的Wistar大鼠按体重随机分为4组,分别为对照组(自来水)和低剂量组(含50 mg/L NaF自来水)、中剂量组(含150mg/L NaF自来水)、高剂量组(含250 mg/L NaF自来水),每组12只,雌雄各半。采用自由饮用的方式进行染毒,连续染毒6个月。检测大鼠尿氟、骨氟浓度及氟斑牙发生率以及骨组织中AC、cAMP、PKA的水平。结果与对照组比较,各剂量染毒组大鼠尿氟、牙氟及骨氟浓度均较高(P<0.05),斑牙检出率随染毒时间延长而增高,随染毒剂量的增加氟斑牙程度越严重;而各组骨组织中AC、cAMP、PKA含量差异无统计学意义(P>0.05)。结论在本次实验中未观察到氟化钠引起大鼠骨组织AC、cAMP含量的改变。  相似文献   

18.
氯化镉的体外毒性及锌的拮抗作用   总被引:2,自引:1,他引:2  
目的观察镉与锌体外对中国仓鼠肺成纤维细胞(V79)增殖的影响,初步探讨镉毒性机制。方法采用MTT法及3H-TdR掺入法,研究不同浓度氯化镉(CdCl2)单独或与生理浓度氯化锌(ZnCl2,10 μmol/L)同时染毒对V79细胞增殖的影响,并采用等离子体光谱仪测定细胞内Cd2 、Zn2 含量。结果 CdCl2对于V79细胞的增殖有抑制作用,且呈剂量依赖性.采用MTT法和3H-TdR掺入法所得CdCl2染毒24 h后50%抑制浓度(IC50)分别为13.73 μmol/L和13.60 μmol/L.随着CdCl2染毒浓度的增加,细胞内Cd2 含量也增加.而同时给予锌则对镉的增殖抑制效应在一定程度上具有明显的拮抗作用,锌可使细胞内Cd2 含量降低。结论在本实验条件下,CdCl2对V79细胞增殖具有抑制作用,锌对镉的毒性有拮抗作用。  相似文献   

19.
哮喘是一种常见病,平喘药在防治哮喘与呼吸道疾患引起的喘息占有重要地位,近年来对平喘药的研究颇多,迄今已有50余种,本文就其作用环节不同分述如下。一、茶碱类药茶碱类是最常用的传统平喘药,既往认为其作用为抑制磷酸二脂酶,使气道平滑肌细胞内cAMP不易分解,从而使平滑肌松弛。近年研究表明对磷酸二脂酶影响不大,其主要作用:1.平滑肌内外钙离子浓度的改变,增加细胞内cAMP含量;2.抑制前列腺素F_(2α)对平滑肌的收缩;3.促  相似文献   

20.
张皓  郑唯韡  王霞  刘莉  屈卫东 《卫生研究》2012,41(5):704-709
目的研究S型氯代甘油醇(SACH)对大鼠精子运动和超活化的影响和可能机制。方法 20只成熟雄性SD大鼠随机分为4组,分别给予0、2.5、5.0和10mg/kg BW SACH,连续灌胃染毒52天。取附睾尾精子,获能条件下培养5h,以计算机辅助精子分析系统检测精子运动和超活化运动,同时检测精子特异的3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDS)活性、三磷酸腺苷(ATP)和环磷酸腺苷(cAMP)水平,观察己酮可可碱(PTF)对SACH的拮抗作用。结果 SACH染毒组大鼠精子曲线运动速率(VCL)、平均路径速率(VAP)、直线运动速率(VSL)和精子头侧摆幅度(ALH)与对照组相比受到显著抑制(P0.01),运动直线性(LIN)显著增强(P0.01)。SACH使VCL≥400μm/s或LIN≤20%的比例显著减少(P0.01和P0.05),表明精子超活化受抑制。SACH显著抑制GAPDS活性,ATP和cAMP水平也随染毒剂量增加呈下降趋势。PTF可改善精子cAMP水平,部分缓解精子运动和超活化的抑制程度。结论 SACH抑制大鼠精子GAPDS活性导致ATP和cAMP水平下降,可能是影响精子运动和超活化的重要机制。  相似文献   

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