块菌多糖的相对分子质量测定和单糖组成分析

目的 测定从块菌菌丝体中分离得到的均一多糖KJB-1的平均相对分子质量,并分析其单糖组成.方法 块菌菌丝体通过水提醇沉,再以Sevage法去除蛋白质,得到粗多糖KJB.经Sepharose CL6B柱色谱分离纯化得到均一多糖KJB-1.利用高效液相色谱法测定KJB-1的平均相对分子质量;三氟乙酸完全酸水解后进行糖醇衍生化,之后运用气相色谱法,与标准品对照后分析其单糖组成.结果 KJB-1在高效液相下呈单一对称峰,其平均相对分子质量大于2×10~6,单糖组成分析该多糖是由单一组分葡萄糖组成.结论 KJB-1为分子质量大于2×10~6的葡聚糖.     

柱前衍生HPLC分析酸枣仁汤中多糖的单糖组成

目的:建立1-苯基-3-甲基-5-吡唑琳酮(PMP)柱前衍生高效液相色谱法分离检测4种单糖和2种糖醛酸的方法.方法:采用水提醇沉法提取酸枣仁汤中多糖,中空纤维超滤膜法纯化,然后用硫酸水解,1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生后,利用反相高效液相色谱法,分析单糖的PMP衍生物.以单糖PMP衍生物的峰面积大小为指标,分别对衍生化反应中反应时间、PMP与NaOH的用量、中和温度和盐酸用量进行考察,从而得到较佳的样品衍生化制备条件.并将该方法应用于酸枣仁汤中总多糖(SDP)、相对分子量＜10 kDa多糖(SDP-1)、相对分子量为10 ～ 50 kDa多糖(SDP-2)、相对分子量＞ 50 kDa多糖(SDP-3)的单糖组成分析和含量测定.结果:SDP和SDP-1均由Man-GlcUA-GalUA-Glc-Gal-Ara组成,摩尔比分别为1∶0.8∶0.7∶3.4∶3.3∶2.1和1∶0.5∶0.3∶0.6∶0.6∶0.4.SDP-2由Man-Glc-Gal-Ara组成,摩尔比为1∶2.0∶0.2∶0.3;SDP-3由Man-Glc组成,摩尔比为1∶5.4.结论:方法准确、灵敏度高,适用于酸枣仁汤中多糖的单糖组成测定.     

女贞子多糖相对分子质量与组成分析

目的透析进一步纯化女贞子多糖,通过对女贞子多糖相对分子质量及组成分析,为探究多糖生物活性与其组成之间的关系提供理论数据。方法实验以女贞子为研究对象,采用水提醇沉法提取女贞子多糖,通过Sevage法、过氧化氢、透析等方法纯化多糖,凝胶渗透色谱分析多糖相对分子质量,三氟乙酸水解后采用高效液相色谱-示差检测器分析多糖组成。结果女贞子多糖重均相对分子质量为10721,数均相对分子质量为10673,女贞子多糖由葡萄糖、鼠李糖、阿拉伯糖3种单糖所组成,其物质的量比为9.14∶8.10∶5.18。结论此种方法纯化后的女贞子多糖组成较为均一,纯度较高,采用高效液相色谱-示差检测器无需柱前衍生化即可分析多糖中单糖组成。     

抗肿瘤活性茯苓多糖的提取、纯化与结构分析

目的 对具有抗肿瘤活性的茯苓多糖进行提取、纯化以及结构分析.方法 采用水提醇沉法提取茯苓多糖,三氯乙酸法除蛋白,凝胶色谱柱纯化得到抗肿瘤活性茯苓多糖ATPCP,高效液相凝胶色谱法测其相对分子质量,样品水解后经过TLC及GC-MS分析确定单糖组成,通过FT-IR、13C-NMR和1H-NMR对其进行结构分析.结果 GPC结果显示抗肿瘤活性茯苓多糖的重均相对分子质量为16 850,多分散性为1.34,TLC及GC-MS结果显示其含有岩藻糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖,各单糖的物质的量比为1∶2.36∶5.49∶2.34.FT-IR和NMR结果显示ATPCP含有α-型和β-型吡喃糖,其主链为1,6-糖苷键,并存在1,4-糖苷键支链.结论 茯苓中具有抗肿瘤活性的茯苓多糖是由4种确定的单糖组成并伴有支链的杂多糖.     

枇杷叶多糖分离纯化及其单糖组成研究

目的从枇杷Eriobotrya japonica叶中分离纯化得到枇杷叶多糖,并对其进行相对分子质量和单糖组成分析以及结构的初步鉴定。方法枇杷叶经水提、醇沉、冷冻干燥得到枇杷叶多糖(PEL)组分,经DEAE-Sepharose Fast Flow离子柱和Sephacryl S 500 High-Resolution凝胶柱色谱进行分离纯化得均一组分(PEL60-A)。采用高效液相色谱、气质联用确定其纯度、相对分子质量和单糖组成。结果枇杷叶多糖PEL60-A相对分子质量为2.69×10~5;单糖组成主要是L-鼠李糖、L-岩藻糖,并含有少量D-木糖、D-甘露糖、D-葡萄糖和D-半乳糖,其物质的量比为0.78∶1.00∶0.15∶0.09∶0.11∶0.19。结论研究枇杷叶多糖分离纯化及其单糖组成,对其结构进行了初步鉴定,为枇杷叶精细加工提供重要的科学理论依据。     

响应面法优化水提醇沉玄参多糖工艺及其含量分析

目的:优化水提醇沉法提取纯化玄参多糖的工艺条件,建立多糖酸水解、1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生化高效液相色谱法(HPLC)测定玄参多糖单糖组成和含量的方法。方法:在单因素试验基础上,选择溶媒量(A)、提取时间(B)和醇沉浓度(C)为考察因素,应用Box-Behnken响应面中心组合法进行三因素三水平设计,以多糖含量为指标,优化玄参多糖的提取工艺;玄参多糖用三氟乙酸(TFA)水解后,以PMP对水解单糖进行衍生化,并建立6种单糖的HPLC分离和含量测定方法。结果:玄参多糖的最佳提取工艺条件为50倍溶媒量,提取时间1 h,醇沉浓度90%;玄参多糖由甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖组成;各单糖的平均质量比为0.48∶1.40∶1.00∶69.80∶93.00∶2.20;玄参多糖平均质量分数为16.80%。结论:优选的玄参多糖水提醇沉提取纯化工艺可将玄参中的多糖提取完全,用于后续分析;PMP柱前衍生化HPLC单糖测定法的精密度、重复性和准确性良好,适用于玄参多糖的组成及含量测定。     

太子参均一多糖的分离与表征

目的:对太子参抗二型糖尿病多糖活性部位(PF40),进行分离纯化得到均一多糖并对其进行结构表征。方法:太子参粉碎后,通过水提醇沉法(40%乙醇)得到太子参粗多糖,采用DEAE-纤维素、葡聚糖凝胶柱对其分离纯化,得到一种均一多糖,采用高效凝胶渗透色谱法测定分子量,1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)-柱前衍生高效液相色谱法分析单糖组成。结果:分离得到一种均一多糖,由葡萄糖组成,分子量为18400Da,命名为HPh-1-1。结论:太子参均一多糖HPh-1-1是一种葡聚糖。     

柱前衍生化高效液相色谱法测定地稔多糖中单糖组成

目的:从地稔中提取分离地稔多糖,并对单糖组成进行研究。方法:采用水提醇沉法提取地稔粗多糖,再用DEAE纤维素柱色谱进行分离纯化,获得一种水溶性较好的中性多糖和一种酸性多糖,然后采用高效液相柱前衍生法对其单糖组成进行测定。结果:地稔中性多糖主要是由葡萄糖、半乳糖、甘露糖、阿拉伯糖、鼠李糖等5种单糖组成,摩尔比为123∶84∶27∶19∶5,另有极少量木糖。地稔酸性多糖单糖组成主要是半乳糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖醛酸、鼠李糖7种单糖组成,摩尔比为14∶10∶7∶6∶4∶1∶1,另外还有少量的木糖。结论:本研究建立了分离及测定地稔多糖组成成分的分析方法,该方法操作简单,方便可行。     

板蓝根糖肽的组成测定

目的测定从板蓝根粗多糖中分离纯化得到的板蓝根糖肽的氨基酸和单糖组成成分。方法 70%醇沉粗多糖经柱层析分离得板蓝根糖肽,其单糖组成采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生化高效液相色谱法测定。采用响应面试验优化板蓝根糖肽的肽链酸水解条件,使用柱前在线衍生高效液相色谱法测定其氨基酸组成。结果单糖组成为:甘露糖∶鼠李糖∶半乳糖醛酸∶葡萄糖∶半乳糖∶木糖∶阿拉伯糖=132.6∶5.0∶1.0∶7.6∶7.0∶23.8∶76.8,总质量百分数为94.5%。氨基酸组成测定的最佳水解条件是在104℃下用10 mol/L的盐酸水解17 h。测得板蓝根糖肽的氨基酸组成为:天门冬氨酸∶谷氨酸∶丝氨酸∶组氨酸∶苏氨酸∶精氨酸∶丙氨酸∶缬氨酸∶苯丙氨酸∶异亮氨酸∶亮氨酸∶赖氨酸=3.8∶3.8∶2.5∶0.7∶2.5∶1.1∶2.9∶1.9∶0.6∶1.0∶1.5∶1.3,总质量百分数为5.4%。结论本研究为阐明板蓝根糖肽的一级结构奠定了基础。     

白花蛇舌草总多糖的分离纯化、结构鉴定及初步免疫活性分析

目的:分离纯化白花蛇舌草总多糖,研究其对环磷酰胺致免疫低下小鼠的免疫增强活性。方法:采用超滤技术分离纯化白花蛇舌草总多糖,高效凝胶渗透色谱-示差检测器方法测定相对分子质量,柱前衍生化HPLC分析其单糖组成;采用环磷酰胺致免疫低下小鼠碳粒廓清试验研究其免疫活性。结果:从白花蛇舌草中分离得到1个单一多糖组分ODP-1,其相对分子质量20.88 k Da,单糖组成为甘露糖-鼠李糖-半乳糖醛酸-葡萄糖-半乳糖-阿拉伯糖,摩尔比0.005∶0.033∶0.575∶1.000∶0.144∶0.143;免疫活性试验结果表明,ODP-1可升高环磷酰胺致免疫低下小鼠廓清指数、吞噬指数、胸腺指数和脾指数。结论:白花蛇舌草多糖ODP-1为均一多糖,具有免疫增强活性。     

不同产地白茅根多糖成分的含量比较

目的 比较不同产地白茅根的多糖含量.方法 以葡萄糖为对照品,采用苯酚-浓硫酸法比色,通过紫外可见分光光度法测定采自11个不同产地的白茅根中多糖的含量,波长为485nm.结果 该实验测定方法相对稳定,不同产地白茅根中多糖的含量存在显著性差异,其中福建邵武产地的白茅根多糖含量最高(711.45 mg/g),其次为湖北武汉产地含量(604.89 mg/g),江西新建产地含量最低(300.88 mg/g).结论 研究结果可为白茅根多糖成分合理开发,资源的利用及质量控制提供实验依据.     

北豆根多糖的单糖组成分析及分子量研究

目的:分析北豆根多糖的单糖组成及分子量。方法:采用水提醇沉获得北豆根粗多糖,用TCA-正丁醇除蛋白后得到北豆根多糖样品,采用气相色谱法(GC)测定其单糖组成,高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)测分子量。结果:北豆根多糖是由D-阿拉伯糖(D-Ara)、L-岩藻糖(L-Fuc)、D-甘露糖(D-Man)、D-葡萄糖(D-Glc)和D-半乳糖(D-Gal)组成,其摩尔比为13.04∶1.00∶1.69∶8.99∶4.32,重均分子量为4826。结论:用GC和HPGPC可以测得北豆根多糖的单糖组成和分子量,方法简便可行,可以用于北豆根多糖的研究,为北豆根多糖的深入研究奠定基础。     

知母水溶性多糖的分离、纯化及初步研究

 目的分离、纯化出知母水溶性多糖,研究其性质。方法粗多糖经反复冻融S、evage法脱蛋白、高速离心、超滤、柱色谱等方法分离纯化得级分AAB1。经HPLC、比旋光度测定等方法,证明AAB1为均一组分。用气相色谱分析多糖组成。结果AAB1由Xyl,Man,Gal,GalA,Glc组成,其摩尔比为1∶11∶1.75∶7.92∶1.2。平均相对分子质量为5.47×10⁴。结论AAB1为酸性均一杂多糖。     

红花水溶性多糖的分离、纯化及初步研究

 目的从红花中提取水溶性粗多糖,进一步纯化,得到均一的多糖CTP,并研究其组成和性质。方法粗多糖经反复冻融、Sevage法脱蛋白、超滤、柱色谱等方法分离纯化得到CTP。经比旋光度测定、HPLC等方法检验其均一性,结果CTP为均一组分,GC分析其单糖组成为Gle和Cal,摩尔比为6.08:1 结论CTP为中性杂多糖,相对分子质量4000～5000。     

女贞子多糖的提取工艺及单糖组成

目的: 优选女贞子多糖的最佳提取工艺并测定其单糖组成及摩尔比。方法: 采用正交试验法,以多糖提取率为评价指标,对女贞子多糖的提取因素进行研究,用苯酚-硫酸比色法对女贞子多糖进行含量测定。多糖经硫酸水解后,水解产物利用高效液相色谱(HPLC)分析其单糖组成及摩尔比。结果: 女贞子多糖的最佳提取工艺为10倍量水,回流提取3次,3 h/次;该多糖由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖和葡萄糖4种单糖组成,其摩尔比为3.71∶3.21∶1.00∶16.06。结论: 该方法简便、准确,可用于女贞子多糖的单糖组成测定及质量控制。     

不同产地白茅根总酚酸的含量比较

目的比较不同产地白茅根的总酚酸含量。方法以没食子酸为对照品,采用紫外可见分光光度法测定采自11个不同产地白茅根中总酚酸的含量,检测波长为695 nm。结果不同产地白茅根中总酚酸的含量存在差异,其中产于江西九江的白茅根总酚酸含量最高(3.48 mg.g-1),其次是产于南昌的白茅根(3.09 mg.g-1),其他产地总酚酸含量也均超过了2.10 mg.g-1。结论测定方法稳定,该研究可为白茅根总酚酸的合理开发利用及质量控制提供可借鉴的依据。     

松木层孔菌(Phellinus pini)胞外多糖结构解析

 目的 研究松木层孔菌胞外多糖（PPE）的结构性质。方法 采用高效液相色谱法鉴定纯度并测定相对分子质量;气相色谱、红外光谱、完全酸水解、高碘酸氧化及Smith降解、甲基化反应及其产物的GC-MS联机分析、¹³C-核磁共振对松木层孔菌胞外多糖进行结构性质研究。结果 松木层孔菌胞外多糖为均一组分,多糖含量为92.84%,相对分子质量为3.9×10⁴,由甘露糖、葡萄糖、半乳糖组成,其摩尔比为38.4∶1.76∶1,由α型糖苷键构成,主链部分由α-(1→2)-Man构成,在O-6处形成分支点,支链部分由α-(1→3)-Man和α-(1→6)-Man构成,Man构成松木层孔菌胞外多糖的末端。结论 首次对松木层孔菌胞外多糖的化学结构进行深入的研究。     

柘树根多糖CPS-1的分离纯化及理化性质分析

 目的从柘树根中分离纯化出柘树根多糖CPS-1,并研究其理化性质。方法用水浸提柘树根,过3520树脂柱,乙醇沉淀,Sevag法脱蛋白,透析后经DEAE-Sephadex A-50柱纯化得CPS-1。用HPLC,TLC,GC,元素分析,IR,¹H-NMR及¹³C-NMR研究CPS-1的理化性质。结果CPS-1达到高效液相色谱纯,由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成,物质的量之比依次为1.00∶14.02∶0.74∶2.62∶30.06∶17.72,CPS-1的糖苷键为α-构型,具有吡喃型糖环,C-2,C-3,C-4中某一碳上发生取代,C-6未发生取代。结论CPS-1是由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成的杂多糖,其数均相对分子质量(M_n)为4461,重均相对分子质量(M_w)为6572。     

超声波协同复合酶法提取半边莲多糖工艺优选

目的:探讨超声波协同复合酶法对半边莲多糖提取率的影响.方法:以半边莲为原料,用超声波协同复合酶法提取多糖,通过单因素和正交试验对半边莲多糖的提取工艺进行优化.结果:超声波协同复合酶法提取半边莲多糖的最佳工艺条件为pH4.0,料液比1∶40,超声波时间25 min,复合酶用量1.0％.结论:超声波协同复合酶法具有提取率高、工艺简单、节能的特点.     

虎奶菌多糖的分离纯化及成分分析

 目的：虎奶菌碱溶性多糖的分离纯化及成分分析。方法：用0.5 mol·L^-1氢氧化钠溶液从虎奶菌核中提取多糖,利用气相色谱法(GLC)测定多糖组成,凝胶渗透色谱法(GPC)测定相对分子质童,红外光语法(FT-IR)测定糖苷键构型,高腆酸氧化及Smith降解确定糖基间连接方式。结果：虎奶菌多糖由葡萄糖组成,平均相对分子质量为4.3×10⁵。经高碘酸氧化,每摩尔单糖残基消耗0.48 mol·L^-1高碘酸,同时释放0.24 mol·L^-1甲酸,氧化产物经还原,水解后检出葡萄糖和甘油。红外光谱在890 cm^-1处有吸收,而在840 cm^-1处无吸收。结论：虎奶菌碱溶性多糖为(1→3)-β-D-葡聚糖,并含1,6-连续支链。