防己类药材中马兜铃酸Ⅰ和总生物碱的含量测定

采用薄层扫描法测定马兜铃科防己类药材广防己,异叶马兜铃,穆坪马兜铃,大叶青木香和耳叶马兜铃中马兜铃酸I的含量,并以酸性染料比色法测定粉防己和木防己中总生物碱的含量。     

防己类药材中马兜铃酸Ⅰ和总生物碱的含量测定

采用薄层扫描法测定马兜铃科防己类药材广防己，异叶马兜铃，穆坪马兜铃，大叶青木香和耳叶马兜铃中马兜铃酸Ｉ的含量，并以酸性染料比色法测定粉防己和木防己中总生物碱的含量。     

脑灵片与广防己共煎后马兜铃酸A含量的变化

目的:通过研究脑灵片对广防己中马兜铃酸A含量的影响,以初步探讨对广防己的解毒问题。方法:广防己与脑灵片共煎后用RP-HPLC法测定马兜铃酸A的吸收值,观测其含量的变化情况。结果:加入脑灵片后,广防己中马兜铃酸A的含量明显降低。结论:脑灵片可显著降低广防己中马兜铃酸A的含量。     

滋阴补肾丸对广防己减毒作用的初步研究

目的通过研究滋阴补肾丸对广防己中马兜铃酸A含量的影响，探讨广防己的解毒问题。方法广防己与滋阴补肾丸共煎后，采用RP-HPLC法测定马兜铃酸A的吸收值，观测其含量的变化情况。结果加入滋阴补肾丸后，广防己中马兜铃酸A的含量明显降低。结论滋阴补肾丸可显著降低广防己中马兜铃酸A的含量。     

龙胆泻肝汤配伍减毒的化学研究

目的探讨含关木通的龙胆泻肝汤及其相关配伍制剂的减毒机制.方法采用HPLC法测定关木通及龙胆泻肝汤相关配伍制剂中马兜铃酸A含量.结果关木通甲醇提取液;关木通水提取液;龙胆泻肝汤;去除当归、生地、甘草的龙胆泻肝汤中马兜铃酸A含量分别为0.193 6,0.062 7,0.032 4,0.045 4 mg·mL-1.结论龙胆泻肝汤全方中马兜铃酸A含量明显低于单味关木通和去除当归、生地、甘草的龙胆泻肝汤方,提示龙胆泻肝汤全方相对较低的肾毒性与其水提过程中马兜铃酸A溶出减少有关,方中佐使药味当归、生地、甘草的配伍可能起重要作用.     

秦巴山区马兜铃科两种常用药材中马兜铃酸含量分析

目的 分析测定秦巴山区产细辛Aristolochia sieboldii Miq.和汉中防己A.heterophylla Hemsl.两种药材中马兜铃酸A的含量.方法 色谱柱:Agilent ODS (5 μm,4.6 mm×250 mm);流动相:甲醇-乙腈-1%冰乙酸(47:17:36);流速1.0 ml/min;柱温:室温;检测波长315 nm.结果 细辛中马兜铃酸A的平均含量为74.1 μg/g,汉中防己中马兜铃酸A的平均含量为2.14 mg/g.结论 汉中防己中的马兜铃酸A含量是细辛中马兜铃酸A含量的30倍左右.     

粉防己与其主要组分粉防己碱效、毒作用及关系初探

目的:结合粉防己碱在生药及水提物中含量的测定,从效、毒两个维度来阐释粉防己与其主要生物碱粉防己碱的作用差异及两者之间的关系。方法:HPLC测定粉防己水提物中粉防己碱的含量的基础上,确定粉防己碱给药剂量,分别采用热板法、小鼠耳肿胀法对粉防己与粉防己碱的镇痛、抗炎作用进行比较研究;同时,选取给药12,24 d以及停药12 d 3个不同时间点实验动物总蛋白(TP),白蛋白(ALB),丙氨酸氨基转氨酶(ALT),天冬氨酸氨基转氨酶(AST),总胆红素(TBIL)作为观测指标,对粉防己与粉防己碱的肝脏毒性进行探查和比较。结果:1防己药材中粉防己碱的含量8.99 mg·g-1,粉防己水提液中粉防己碱的转移率为30.03%;2粉防己与粉防己碱均有明显的镇痛作用,但从短期镇痛效果而言,以粉防己碱为佳,从长期镇痛效果而言,以粉防己水提物为佳。粉防己碱的抗炎效果相对优于粉防己水提物的抗炎效果,但两者相比无显著性差异。3粉防己水提物和粉防己碱给药均可以造成一定程度的肝细胞受损,但两者的作用机制不同,且粉防己水提物造成的肝脏损伤停药后具有可逆性,而粉防己碱造成的肝脏损伤在停药后则继续发展。结论:粉防己碱作为粉防己的主要组分,并不能够完全表征粉防己的药效及毒性,同样的,粉防己中的其他组分也对粉防己碱的毒性作用没有明显的监制作用。粉防己碱与粉防己的效、毒作用表现及机制并不相同。     

不同剂量竹叶对关木通中马兜铃酸A溶出量的影响实验研究

目的 观察不同剂量竹叶对关木通中马兜铃酸A溶出量的影响.方法 采用反相高效液相色谱法测定不同剂量竹叶配伍关木通中马兜铃酸A的溶出量.结果 关木通马兜铃酸A溶出量为0.106 mg/ml;竹叶与关木通1∶4配伍其溶出量为0.041 mg/ml.结论 中药竹叶可明显降低关木通马兜铃酸A溶出量61%;竹叶与关木通以1∶4配比对其马兜铃酸A的溶出量降低最明显.     

广防己中马兜铃酸Ⅰ的提取工艺优选及真菌发酵对其含量的影响

目的:优化广防己中马兜铃酸Ⅰ的提取工艺,并探讨真菌发酵降低毒性作用的可能性。方法:采用L9(34)正交设计,以提取时间、溶剂倍数、甲醇浓度、提取次数4个因素为考察指标,直接加热回流法提取,采用高效液相色谱法(HPLC)测定广防己及其两种药用真菌(F1菌和F2菌)发酵品溶液中马兜铃酸Ⅰ的含量,流动相为乙腈-1%冰醋酸水溶液(51:49),流速为1.0mL/min,检测波长315nm,柱温30℃。结果:最佳制备工艺为粉末40目,加10倍量60%甲醇直接加热回流提取一次1h;与广防己药材相比,两种发酵品GF1和GF2中马兜铃酸Ⅰ的含量均明显下降,下降率分别为68.67%和52.67%,且有新的色谱峰出现。结论:该工艺马兜铃酸Ⅰ提取率高,稳定性好,提示真菌发酵可能对广防己的减毒具有一定的意义。     

粉防己及其替代广防己的安全性质疑

国家食品药品监督管理局决定，以粉防己替代广防己，但有三点值得注意：1)粉防己中硝基菲类物质的分布特征；2)马兜铃酸Ⅰ以外的其他马兜铃酸类及其衍生物的毒性特性；3)粉防己急性毒性大而快，是否与粉防己与硝基菲类物质叠加的毒性有关。为科学评价粉防己及其替代广防己的安全性提供实验依据。     

马兜铃酸毒性研究进展及风险因素分析

马兜铃酸（aristolochic acids,AA）的肾毒性和致突变性,以及其对泌尿系统上尿路移行上皮的致癌性已广为人知。2003年以来,药品监管部门先后取消了青木香、关木通、广防己等含AA药材的质量标准,并对其他含AA的药材如朱砂莲、马兜铃、寻骨风等采取了加强监管、修订说明书或质量标准等措施,以控制其安全性风险。近年来,国内外对AA的研究内容主要包括AA毒性的作用机制及临床表现、早期诊断及治疗方法。该文对使用含AA药品的风险因素做了简要的归纳与评述,并提出了预防及控制AA毒性发生的措施及建议。     

广防己提取物致大鼠慢性肾间质纤维化的机制研究

目的：探讨广防己提取物（RAFE）所致的大鼠慢性肾间质纤维化的作用机制。 方法：用广防己提取物（200 mg·kg^-1·d^-1）和马兜铃酸（AA,10.0 mg·kg^-1·d^-1）给予大鼠间断灌胃22周,造成大鼠慢性间质纤维化模型,通过免疫组化方法观察肾小管上皮细胞转分化标志性蛋白角蛋白(CK)、平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和波形蛋白(Vimentin)以及致纤维化因子-转化生长因子（TGF-β₁）在大鼠肾小管间质的表达。 结果：经图像分析, RAFE和AA组肾小管上皮细胞CK较对照组表达减弱,而α-SMA在肾小管上皮细胞及肾间质细胞呈弱阳性表达、Vimentin表达较对照组明显增多；同时RAFE和AA组大鼠肾小管TGF-β₁表达较对照组明显增多,各项指标统计学均有显著性差异。 结论：RAFE参与了肾小管上皮细胞转分化,促进了大鼠慢性肾小管上皮纤维化的发生,其中TGF-β₁对肾小管上皮细胞转分化起到重要作用。RAFE所致大鼠慢性肾小管上皮细胞转分化机制与AA作用相似。     

红芪替换玉屏风口服液中的黄芪后对免疫抑制小鼠细胞免疫作用的比较研究

目的:比较研究红芪替换玉屏风口服液中的黄芪后对免疫抑制小鼠细胞免疫调节作用。方法:通过给小鼠腹腔注射免疫抑制剂环磷酰胺致成免疫功能低下模型,以相同剂量的红芪替代玉屏风口服液中的黄芪灌胃进行体内拮抗实验,测定胸腺指数、脾脏指数、巨噬细胞吞噬功能、T淋巴细胞的增殖能力、杀伤活性、T细胞亚群、血清IL-1β的含量。结果:玉屏风口服液和红芪替换黄芪的玉屏风水提物均可显著提高被环磷酰胺抑制的小鼠胸腺指数和脾脏指数;使巨噬细胞吞噬功能明显增加;并能拮抗环磷酰胺对小鼠脾脏T淋巴细胞增殖、杀伤活性、T细胞亚群数量和IL-1β产生的免疫抑制作用。且红芪替换黄芪的玉屏风水提物提高被环磷酰胺抑制的小鼠脾脏指数和T淋巴细胞增殖能力优于玉屏风口服液。结论:红芪与防风、白术配伍后与玉屏风口服液相比在细胞免疫调节方面具有相似的作用,且在恢复脾脏质量和T淋巴细胞增殖方面优于玉屏风口服液。     

比较同一复方中用红芪与用黄芪对免疫抑制小鼠体液免疫的作用

目的:比较红芪替换经典复方中的黄芪后对免疫抑制小鼠体液免疫的调节作用。方法:通过给小鼠注射环磷酰胺建立免疫抑制小鼠模型,以相同剂量的红芪替换补中益气口服液、益气养血口服液、复芪止汗颗粒和玉屏风口服液中的黄芪后灌胃进行体内拮抗实验,测定小鼠脾脏指数、血清HC50、CD19+B淋巴细胞亚群以及血清IL-4含量。结果:环磷酰胺免疫抑制小鼠经各黄芪复方和红芪复方作用后小鼠脾脏指数、血清HC50、CD19+B淋巴细胞亚群及血清IL-4含量均出现不同程度的增加;其中含红芪的玉屏风水提物在提高环磷酰胺免疫抑制小鼠脾脏指数方面优于含黄芪的玉屏风口服液,其余各复方经比较虽然红芪复方作用稍强于黄芪复方,但差异无统计学。结论:红芪替换黄芪配伍其他药物后与原方相比在调节体液免疫方面具有相似作用。     

安神益心液制备工艺的优化

目的：优化安神益心液的制备工艺,提高其质量,改善其稳定性。方法：以各有效成分转移率及干膏收率为指标,选用L9（34）正交试验,考察加水量、煎煮时间、煎煮次数对提取效率的影响,结合评分方式,确定黄芪、白芍及五味子共提步骤的最佳工艺。改变加醇顺序,并以各有效成分的转移率及干浸膏收率为指标,结合评分方法,筛选最佳的醇沉浓度。结果：黄芪、白芍及五味子共提步骤的最佳工艺为：取处方量的黄芪、白芍及五味子药材,加10倍量的水煎煮3次,每次1.5 h,最佳的醇沉浓度为70%。结论：新工艺合理可行,弥补了原工艺的不足,提高了制剂质量,改善了制剂的稳定性,延长了制剂有效期。     

长期服用青木香或冠心苏合丸对大鼠肝、肾功能的影响

目的:评价青木香的毒性,为临床合理用药提供实验依据。方法:长期给予不同组大鼠2.5 g.kg^-1的青木香、2.5 g.kg^-1的冠心苏合丸(含青木香)和2.5 g.kg^-1的冠心苏合丸(不含青木香),检测各组大鼠的凝血酶原时间(PT)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、白蛋白(ALB)、碱性磷酸酶(ALP)、肌酐(Crea)和尿素氮(BUN)等指标,并对肾脏、肝脏、胃和膀胱进行病理学检查。结果:青木香和冠心苏合丸(含青木香)组PT,ALT,AST,ALB,ALP,Crea和BUN等指标均发生显著性改变,病理检查发现肝、肾均有坏死现象,胃和膀胱均发生癌变。结论:青木香和冠心苏合丸(含青木香)具有强烈的毒性,均能损害大鼠的肾脏和肝脏,并引起胃和膀胱的肿瘤。     

广防己致大鼠慢性肾小管-间质损伤的实验研究Ⅱ

目的:接前报继续观察广防己提取物诱导大鼠慢性肾损害作用,进一步了解不同剂量的广防己提取物(RAFE)可否引起慢性肾小管-间质损伤。方法:分别用广防己醇提取物25.0,120.0,200.0 mg.kg^-1.d^-1和马兜铃总酸10.0 mg.kg^-1.d^-1给大鼠间断(连续2周,停药1周)灌胃给药22周后,停药4周;分别于给药第17,22,26周留取血、尿和肾组织标本,检测相关肾功能指标;并取肾脏进行形态组织学观察,于给药第17,22,26周对肾组织进行Masson染色,并与马兜铃总酸进行比较。结果:RAFE作用肾组织形态学病变:小、中、大剂量和总酸组主要表现为肾小管功能损害———慢性间质纤维化,这些病理表现与马兜铃总酸所致肾损害极为相似。结论:RAFE小、中、大剂量灌胃给药13周以上可致大鼠慢性肾小管-间质纤维化,其肾功能和肾组织形态表现上与马兜铃总酸所致肾损伤相似,结果提示马兜铃酸是RAFE主要毒性成分。     

ICP-MS研究中药炮制前后18种微量元素总量和溶出特性的变化

 目的 应用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）技术对中药炮制前后18种微量元素的总量及溶出特性的改变进行考察。方法 应用ICP-MS技术建立中药中18种元素的同时测定方法,并用该方法对黄芪、大黄、黄芩、何首乌、地黄等5种中药材炮制前后元素总量和水煎过程中溶出特性的改变进行比较和分析。结果 测定方法中所有元素的线性相关系数（r）都大于0.999 0,检出限在0.000 1～0.068 9 μg·L^-1之间,重复性和稳定性的相对标准偏差（RSD）都小于10%,药材的加标回收率在70.89%～122.4%之间,水煎液的加标回收率在74.65%～130.0%之间,标准物质茶叶（GBW 07605）的测定值和其标定值之间有良好的吻合性。测定结果显示,炮制后,微量元素总量的变化因中药品种和炮制方法而异,但各元素的溶出率总体呈现上升的趋势。结论 中药炮制可改变微量元素的总量和溶出特性。
     

从马兜铃酸含量影响因素探讨含马兜铃酸中药的风险控制

马兜铃酸广泛地存在于马兜铃科马兜铃属Aristolochia和细辛属Asarum等植物中,由于具有很强的肾脏毒性和对泌尿系统的致癌性而引起了广泛关注。我国于2003—2004年禁止关木通、广防己和青木香的使用,其他的含马兜铃酸中药均按照处方药管理使用。该文检索了近十年发表的有关马兜铃酸含量分析的文献,提示细辛属Asarum药材尤其是其根和根茎中的马兜铃酸含量较低,含细辛的中成药多数未检出马兜铃酸Ⅰ,个别中成药品种可检出微量马兜铃酸Ⅰ。而马兜铃属Aristolochia药材如马兜铃、朱砂莲、寻骨风等药材中的马兜铃酸含量相对较高,含这些药材的中成药马兜铃酸含量研究文献较少。影响中药材及中成药中马兜铃酸含量的因素较多,包括药材的使用部位、药材的产地、炮制方法、提取工艺等。建议重视含马兜铃酸中药尤其是马兜铃属Aristolochia中药的毒性,对相关的饮片和中成药的使用要慎重。加强含马兜铃酸中药的基础研究,选择合适的产地、炮制方法及提取工艺,同时加强相关中药材、饮片及中成药中马兜铃酸含量的监测,以降低用药风险,保证临床用药安全。