内蒙古大兴安岭林区牙克石段的蜱种及蜱携病原体感染调查

目的 调查内蒙古东部大兴安岭林区牙克石段的蜱种分布及病原体感染状况。方法 2016-2019年,在东部林区蜱活跃高峰期(5-6月)采用布旗法采集游离蜱标本,使用体视显微镜对蜱初步分类;提取蜱全基因组DNA,采用斑点热立克次体、无形体属、埃立克体属、莱姆病螺旋体和新型回归热螺旋体病原体的特异性基因进行PCR检测。结果 本次共采集蜱虫2 786只,通过体视显微镜和基因检测分析,隶属于1科3属4种,分别为全沟硬蜱(Ixodes persulcatus)、嗜群血蜱(Haemaphysalinae concinna)、日本血蜱(Haemaphysalinae japonica)、森林革蜱(Dermacentor silvarum)。其中,全沟硬蜱(78.6%,2 191/2 786)、嗜群血蜱(15.9%,442/2 786)为本地区的优势蜱种。在大兴安岭林区牙克石段的7个采样地区的蜱中,乌奴耳镇斑点热立克次体检出率最高,为74.2%(222/299);博克图镇无形体属检出率较高,为18.9%(39/206);库都尔镇埃立克体属、莱姆病螺旋体、新型回归热螺旋体的检出率均较高,分别为26.1%(12/46)、76.1%(35/46)、13.0%(6/46)。除新型回归热螺旋体外,其他4种病原体的检出率雄蜱均高于雌蜱(P<0.05);成蜱的无形体、埃立克体、莱姆病螺旋体检出率均高于幼蜱(P<0.05)。大兴安岭林区牙克石段蜱的复合感染率为19.5%(544/2 786)。其中,免渡河镇蜱携2种病原体复合感染率为40.6%(186/458),乌奴耳镇蜱携3种及以上病原体复合感染率分别是47.4%(36/76)、90%(9/10)。结论 大兴安岭林区牙克石段共存在4种蜱,蜱携莱姆病螺旋体最普遍,其中免渡河镇和乌奴耳镇的蜱普遍携带多种病原体,需重点加强该地区蜱媒传染病的监测和预防。     

从内蒙采集的全沟硬蜱中分离出莱姆病病原体

1989年5月在内蒙呼盟莫尔道嘎林区采集到游离的全沟硬蜱(Ixodes persulcatus)和草原革蜱(Dermacentor nuttalli)。从一组全沟硬蜱(20只)中分离出一株螺旋体,经形态及免疫学初步鉴定,为伯氏疏螺旋体。从而,在病原学上提示,内蒙可能也存在莱姆病自然疫源地。     

吉林林区动物莱姆病螺旋体感染的调查研究

目的了解吉林珲春林区的蜱、野鼠及牛、绵羊感染莱姆病的情况。方法对蜱和野鼠进行莱姆病螺旋体的PCR扩增,阳性标本RFLP分型,应用间接免疫荧光法检测家畜血清中的IgG抗体。结果PCR检测全沟硬蜱和森林革蜱的带菌率为36.0%和30.9%;在五种鼠中检测到莱姆病螺旋体的特异性片段,带菌率分别为14.0%、8.3%、13.0%、25.0%和33.3%。阳性标本RFLP分型结果属于B.garinii和B.afzelii型;牛、羊血清学检测阳性率为27.5%和31.5%。结论野鼠、蜱和牛羊中都检测到伯氏疏螺旋体的感染,证实吉林珲春林区存在莱姆病的自然疫源地。     

我国部分地区蜱中莱姆病螺旋体的检测与基因分型研究

目的 对我国部分地区的多种蜱类进行莱姆病螺旋体的检测和基因分型。方法 选择我国黑龙江、吉林和浙江省部分林区为调查点，采集当地蜱类，用巢式PCR法进行检测，阳性产物进行限制性片段长度多态性（RFLP）分析和单链构象多态性（SSCP）分析，确定莱姆病螺旋体的基因型。结果 共检测蜱512只，阳性126只，阳性率24．61％。其中吉林全沟硬蜱带菌率为37．00％，黑龙江全沟硬蜱带菌率为20．87％，浙江长角血蜱带菌率为28．07％。RFLP分析表明，蜱中莱姆病螺旋体包括B．garinii和B．afzelii两种基因型。SSCP分析显示为7种亚型，其中B．garinii分为5个亚型，B．afzelii分为2个亚型。发现有3只蜱同时感染不同基因（亚）型莱姆病螺旋体。结论 证实B．garinii和B．afzelii基因型为我国莱姆病螺旋体的优势基因型，并在我国蜱中发现莱姆病螺旋体不同基因（亚）型的混合感染。     

我国部分林区鼠中莱姆病螺旋体的分子流行病学调查研究

目的了解我国部分林区鼠中莱姆病螺旋体感染及其基因分型情况。方法应用巢式PCR扩增鼠中莱姆病螺旋体5S-23S rRNA间隔区片段,对阳性产物进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析。结果共检测鼠8属19种455只,感染莱姆病螺旋体的有4属8种26只,感染率为5.71%。内蒙古、黑龙江、浙江、贵州林区鼠的感染率分别为3.45%、4.84%、8.00%、7.14%;其中东北林区(包括内蒙古和黑龙江)棕背鼠平的感染率为9.09%;浙江林区社鼠的感染率为9.26%;未发现新疆林区鼠感染莱姆病螺旋体。RFLP分析结果显示内蒙古、黑龙江林区鼠中莱姆病螺旋体均为B.garinii基因型,而浙江、贵州林区鼠感染的莱姆病螺旋体包括B.garinii和B.valaisiana两种基因型。结论东北林区及浙江林区以B.garinii基因型为主,棕背鼠平、社鼠可能分别是两地林区莱姆病螺旋体的主要储存宿主。     

内蒙古中西部草原蜱媒病原体多样性及基因型分析

目的了解内蒙古中西部草原蜱类的群落结构、携带病原体多样性及基因型。方法于2016-2019年春夏季,在内蒙古中西部草原,采用动物体表搜集法采集蜱标本,进行蜱种鉴定。解剖摘取蜱的唾液腺并提取基因组DNA,以斑点热立克次体柠檬酸合成酶A (gltA)、疏螺旋体以鞭毛蛋白B (flaB)、埃立克体属以外膜蛋白质1 (omp1)、无形体属主要表面蛋白2 (msp2)为靶基因进行PCR扩增初筛。立克次体gltA初筛阳性样品经限制性片段长度多态性(RFLP)分类,再根据蜱种和地区每类选20~30个代表性样品进行gltA、立克次体外膜蛋白A (rOmpA)基因测序。扩增序列测序后用BLAST、 Clustal W和MEGA 7.0软件进行同源性分析,以邻接法构建系统进化树。结果共采集成蜱3 822只,经形态学特征和特异性18S r RNA基因分型法鉴定,隶属于2属3种,分别为草原革蜱、亚东璃眼蜱和边缘璃眼蜱,其中草原革蜱占55.7%(2 129/3 822)、亚东璃眼蜱占30.0%(1 147/3 822),为该地区的优势蜱种。PCR检测结果显示,立克次体gltA基因阳性蜱1 899只,阳性率为49.7%(1 899/3 822), gltA基因阳性样品根据RFLP结果分为两类,两类样品的gltA基因序列均为581 bp,与R. raoultii (DQ365804)或R. aeschlimanni (KT873466)的同源性为100%;两类样品的rOmpA基因均长367 bp,与R. raoultii (AH015610)或R. aeschlimanni (U83466)的同源性为100%,与gltA基因的结果相符。3 822只蜱中,R. raoultii和R. aeschlimanni的阳性率分别为37.2%(1 422/3 822)和12.5%(477/3 822),其中草原革蜱中分别为58.5%(1 245/2 129)和11.1%(477/2 129);亚东璃眼蜱中分别为15.4%(177/1 147)和0;边缘璃眼蜱中分别为0和44.0%(240/546)。疏螺旋体flaB基因阳性蜱28只,阳性率为0.7%(28/3 822),其中草原革蜱中为0.8%(16/2 129),亚东璃眼蜱为1.0%(12/1 147)。共获得疏螺旋体flaB基因序列10条,与莱姆病主要病原体B. garinii (AB035602)和B. afzelii PKo (NC008277)的同源性分别为90.6%~100%和95.6%~100%。亚东璃眼蜱中B. garinii和B. afzelii的阳性率分别为0.9%(10/1 147)和0.2%(2/1 147),草原革蜱中均为0.4%(8/2 129)。3 822只蜱中omp1基因阳性1只,TA克隆后获得8个氨基酸序列相同的克隆和3个氨基酸序列存在差异的克隆,11个克隆的氨基酸序列与E. muris的同源性最高,但仅为65%~69%。3 822只蜱中均未检出无形体属菌群。系统进化树分析结果显示,3种蜱感染的立克次体均与R. raoultii和R. aeschlimanni聚在一簇。在获得的10条疏螺旋体菌群flaB基因序列中,源于草原革蜱和亚东璃眼蜱的1条序列与B. garinii聚在一簇,草原革蜱的另1条序列与B. afzelii聚在一簇,其余8条序列与B. garinii和B. afzelii的flaB基因序列处在不同的分支。草原革蜱感染的埃立克体属菌与目前已知的埃立克体属菌群关系较远,形成独自的聚类。结论内蒙古中西部草原存在草原革蜱、亚东璃眼蜱和边缘璃眼蜱,蜱类中广泛存在斑点热立克次体和莱姆病螺旋体的感染,是R. raoultii、R. aeschlimanni、 B. garinii和B. afzelii潜在的自然疫源地。有必要加强该地区蜱媒传染病的预防控制工作。     

新疆博尔塔拉和伊犁地区蜱类区系考察

本文报道了1990年4月3日至5月9日在博尔塔拉自治州的博乐、温泉和伊犁地区的察布查尔、新源、巩留、特克斯和昭苏等7县15个点,在北纬42°30′～45°15′,东经79°55′～84°35′,之间蜱类区系的考察结果。在此期间共获蜱类2700余只,结合既往的标本和资料,共记述该地区已知蜱类7属23种的采集地点、宿主及与疾病的关系。其中全沟硬蜱、边缘革蜱、森林革蜱、草原革蜱和残缘璃眼蜱的数量占优势,分布亦较广。业已证实,全沟硬蜱是森林脑炎和莱姆病的重要传播媒介,从边缘革蜱和草原革蜱体内已分离到土拉伦斯菌和蜱媒斑点热的病原体。     

腊子口林区莱姆病自然疫源地调查研究

莱姆病是由伯格多弗疏螺旋体(Borreliaburgdorferi)引起的一种蜱媒自然疫源性疾病。我国莱姆病自1987年于黑龙江海林县林区首次发现并证实存在自然疫源地以来〔1〕,许多地区进行了蜱类和野生动物的莱姆病病原体调查〔2〕,北方莱姆病疫源地以全沟硬蜱I persulcatus为传播媒介,姬鼠和鼠平鼠为主要贮存宿主,大型野生动物和家畜为蜱的繁殖宿主。疫源地分布的南界,现知东自华北的太行山脉,经六盘山,西到新疆的天山〔3、4、5〕。甘肃省曾有莱姆病病人发现〔6、7〕,为了进一步了解甘肃省迭部县腊子口林区是否有本病疫源地存在及性质,作者进行了人…     

甘肃麦积山区媒介及宿主动物中莱姆病螺旋体检测及基因型别研究

目的 了解甘肃麦积山景区蜱及野鼠体内莱姆病螺旋体感染及其基因分型情况。方法 采用布旗法采集蜱标本,采用夹夜法捕捉野鼠。经种类鉴定后,提取病原体DNA,应用巢式PCR扩增鼠中莱姆病螺旋体5S-23S rRNA间隔区片段,对阳性产物进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析。结果 共检测4个蜱种1 273只蜱标本,其中若蜱1 126只,成蜱147只,若蜱分组进行处理和检测,共分为67组,其中13组检测到莱姆病螺旋体DNA片段;成蜱15只检测阳性。检测4个鼠种42只野鼠,其中10只检测阳性,不同鼠种阳性率存在差别(χ²=16.93, P=0.00),4个鼠种中以大林姬鼠的阳性率为最高,达到33.33%。基因分型分析结果显示蜱及野鼠标本中莱姆病螺旋体为B. garinii 及B. afzelii基因型,其中B. garinii基因型占78.95%。结论 麦积山景区存在莱姆病螺旋体,并至少有B. garinii 及B. afzelii两种基因型。     

西北新疆等4省区蜱感染莱姆病螺旋体的分子流行病学调查

目的了解我国西北部分省区蜱中莱姆病螺旋体感染及其基因分型情况。方法应用巢式PCR扩增脾中莱姆病螺旋体5S-23S rRNA间隔区片段,对阳性产物进行限制性片段长度多态性（RFLP）分析。结果共检测11个蜱种2 460只,感染莱姆病螺旋体的有11个种304只,阳性率为12.36%。新疆、宁夏、陕西、甘肃的感染率分别为11.31%、17.96、12.35%及11.64%。不同省区阳性率存在差别;不同蜱种间阳性率亦存在明显差别,其中以青海血蜱阳性率最高,达到59.38%。RFLP分析结果显示西北四省区蜱中莱姆病螺旋体为B.garinii及B.afzelii基因型,其中B.garinii基因型为主要基因型,占80%以上。结论莱姆病螺旋体在我国西北4省区中广泛存在,存在B.garinii及B.afzelii两种基因型。     

内蒙古奇乾地区媒介蜱携带伯氏疏螺旋体的调查研究

目的了解内蒙古奇乾地区媒介蜱携带伯氏疏螺旋体(Borrelia burgdorferii,B.b)的感染情况。方法用布旗法采集游离蜱,利用PCR和基因测序法对媒介蜱标本中B.b的感染进行检测和基因分型。结果采集媒介蜱共320只,其中全沟硬蜱293只(91.56%),森林革蜱22只(6.88%),嗜群血蜱5只(1.56%)。媒介蜱B.b阳性携带率为26.88%,可携带B.garinii、B.afzelii和B.miyamotoi 3种基因型。其中全沟硬蜱、森林革蜱和嗜群血蜱B.b阳性携带率分别为29.01%(85/293)、4.55%(1/22)、0(0/5)。结论内蒙古奇乾地区全沟硬蜱为优势蜱种,携带B.b基因型存在多样性,应引起公共卫生部门的高度重视。     

用随机扩增多态DNA技术区分7种硬蜱

目的　分析 7种硬蜱基因组DNA的随机扩增多态性 ,探讨随机扩增多态性DNA(RAPD)技术在硬蜱分类中的应用。　方法　提取草原革蜱、森林革蜱、青海血蜱、台湾血蜱、刻点血蜱、龟形花蜱、卵形硬蜱DNA。选取 3条不同的随机排列碱基顺序的多聚核苷酸单链为引物 (P5、P6、P7)进行RAPD PCR扩增反应。将扩增产物制备成DNA图谱 ,对这 7种硬蜱的DNA多态性进行分析。　结果　 7种硬蜱分别扩增出不同数量与不同分子质量的DNA片段。有些硬蜱基因组DNA扩增产物中具有相同的DNA条带 ,这反映出它们的基因组DNA具有同源性 ;同时又具有各自独特的DNA条带 ,且DNA条带的亮度也有差异。　结论　RAPD技术可以准确地区分这 7种蜱。     

Investigation of Borrelia spp. in ticks (Acari: Ixodidae) at the border crossings between China and Russia in Heilongjiang Province, China

ObjectiveTo investigate the precise species of tick vector and the Borrelia spirochete pathogen at the Heilongjiang Province international border with Russia.MethodsIn this study, ticks were collected from 12 Heilongjiang border crossings (including grasslands, shrublands, forests, and plantantions) to determine the rate and species type of spirochete-infected ticks and the most prevalent spirochete genotypes.ResultsThe ticks represented three genera and four species of the Ixodidae family [Ixodes persulcatus, Dermacentor silvarum, Haemaphysalis concinna and Haemaphysalis japonica]. Ixodes persulcatus had the highest amount of Borrelia burgdorferi sensu lato infection of 25.6% and the most common species of Borrelia isolated from Ixodes persulcatus was Borrelia garinii, strain PD91.ConclusionsOur results suggest that Borrelia garinii PD91-infected Ixodes persulcatus may be the principal cause of Lyme disease in the border crossing areas of Heilongjiang Province.     

七种媒介硬蜱基因组随机扩增多态性DNA分析

目的　研究7种硬蜱的基因组随机扩增多态性DNA(RAPD)以及种间的遗传距离。　方法　用5条不同的多聚核苷酸单链引物对草原革蜱、森林革蜱、青海血蜱、台湾血蜱、刻点血蜱、龟形花蜱、卵形硬蜱7种硬蜱基因组DNA进行随机扩增,分析DNA图谱并计算 7种硬蜱间的遗传距离。　结果　 7种硬蜱基因组随机扩增产物均有各自独特的DNA条带,种间的平均遗传距离为071。　结论　RAPD技术可以区分这7种硬蜱。     

Biochemical characteristics of ticks of the families Argasidae and Ixodidae

Polyacrylamide gel electrophoresis was used to study homogenate supernatants from the bloodsucking ticks (Argasidae and Ixodidae) belonging to 8 different genera and species. Differences were found in the electrophoretic mobility of protein fractions in adult ticks of these two different families and between several genera of Ixodes ticks (such as Haemaphysalis, Hyalomma, Dermacentor, Rhipicephalus and Ixodes). Argasidae ticks were found to have generic and even species-specific differences at the nymphal stage of development. A. lahorensis nymph-3 contained 5 protein fractions; O. papillipes had 2 fractions, and O. moubata had 3 fractions. Electrophoretic protein separation showed the equal number of protein fractions within one genus of ticks. At the larval stage, the tick homogenates were always found to have one protein fraction. The hemolymph of O. papillipes and O. moubata ticks displayed differences between the imago and nymph-3. A new biochemical marker was proposed to establish a species affinity.     

Genotyping of spotted tick fever rickettsiae, detected in Russia and Kazakhstan

R. slovaca was first detected in the ticks D. marginatus gathered in the Stavropol Territory and the Voronezh Region (European Russia). The recently discovered rickettsial genotype DnS14 was first found in the ticks D. silvarum from Buryatia and D. niveus from the Karaganda Region (Central Kazakhstan). The rickettsial genotype RpA4 was most common in the ticks of the genus Dermacentor in Russia and Central Kazakhstan. An analysis of the spread of rickettsias of the STF group shows their close ecological relation to definite types of Ixodes. The rickettsias R. slovaca and RpA4 co-exist in the ticks D. marginatus and D. reticulatus (the western part of a Dermacentor area in Eurasia) and DnS14 and R. sibirica do in D. nuttalli and D. silvarum (the eastern part of the area). D. marginatus and D. reticulatus in the areas characterized by the most specific saturation of a Dermacentor area (the south of West Siberia) are carriers and reservoir of R. sibirica. The rickettsial genotype DnS28 may be now considered to be environmentally associated with one species of ticks--D. nuttalli. At least 6 genotypes of STF rickettsias--R. sibirica, R. astrahan fever (R. conorii), R. slovaca, RpA4, DnS14, DnS28--has been currently identified in Russia and Kazakhstan.     

新疆额尔齐斯河流域及其毗邻山地蜱螨区系调查

到目前为止,在新疆北部额尔齐斯河流域及其毗邻的阿尔泰山地、萨吾尔山东段和准噶尔盆地北部共发现蜱5属11种;革螨6科15属33种,其中外贝加尔巨鳌螨Macrocheles transbaicalicus和欧亚异肢螨 Poecilochirus eurasiaticus是新疆地区首次记录的种类;恙螨4周4种。本文记述这些蜱螨的地理分布和宿主种类,并介绍了有关蜱类的医学意义。     

First detection of spotted fever group Rickettsiae in ticks in Serbia

Ticks can transmit multiple pathogenic bacteria responsible for diseases in animals and humans such as Borrelia burgdorferi sensu lato, Anaplasma phagocytophilum, and spotted fever group Rickettsia sp. The current study aimed to investigate the presence of Rickettsiae in ticks collected from seven localities in Serbia. One hundred thirty-one (131) questing ticks belonging to 5 tick species (Dermacentor marginatus, Dermacentor reticulatus, Haemaphysalis punctata, Haemaphysalis Concinna, and Ixodes ricinus) were collected in 2007 and 2009. Ticks were tested by polymerase chain reaction, amplifying gltA, ompA, and 17-kd genes, and sequencing analysis, revealing the presence of Rickettsia helvetica and Rickettsia monacensis in I. ricinus ticks only (infection rates 7.7% and 15.4% for R. helvetica and R. monacensis, respectively). R. helvetica has been isolated from I. ricinus ticks and has been implicated in fatal perimyocarditis. R. monacensis was first identified in I. ricinus samples collected in Germany and has recently been implicated in human infection. The results of the current study make fundamental the need to evaluate the incidence of infection with R. helvetica and R. monacensis among the resident population.     

新疆阿勒泰山地蜱传脑炎疫源地调查

目的 调查新疆阿勒泰山地蜱传脑炎疫源地特征,分离鉴定蜱传脑炎病毒。方法 通过家畜体表捡法采集寄生蜱;利用间接免疫荧光法检测当地健康人群血清中蜱传脑炎病毒IgG抗体;通过将蜱研磨液接种实验小鼠进行病原动物分离;通过接种BHK-21细胞对蜱传脑炎病毒进行分离培养;利用RT-PCR方法对病毒E蛋白基因片段进行扩增和测序,通过序列分析明确病毒系统进化特征。结果 新疆阿勒泰山地白哈巴地区分布有2种蜱,森林革蜱为优势种(55.6%),其次为边缘革蜱(44.4%);当地人群蜱传脑炎IgG抗体阳性率5.31%(6/113);通过动物试验和细胞分离培养,从森林革蜱中分离出一株森林脑炎病毒;对病毒E蛋白基因序列的系统进化分析表明,蜱传脑炎病毒阿勒泰分离株属于远东亚型。结论 首次从病原学上证实新疆阿勒泰山地存在蜱传脑炎疫源地,媒介为森林革蜱,病毒流行株为远东亚型。     

黑河口岸地区蜱类调查及研究

目的 调查分析黑河口岸地区蜱种类多样性。方法 对2012年至2014年黑龙江省黑河区域内蜱种群密度、数量、分布以及季节变迁方面的数据进行整理及总结,通过形态学的观察及PCR检测明确黑河地区蜱的分类及携带病原体情况。结果 黑河口岸地区的蜱类采集活动中,共获得蜱类1 343只,经鉴定分属3属3种,其中森林革蜱1 054只,占总体构成78.48%,为优势蜱种;嗜群血蜱236只,占总体构成17.57%;全沟硬蜱53只,占总体构成3.94%。之后本试验对采集到的1 343只蜱针对10种病原体进行PCR检测。在黑河地区的蜱类中,森林革蜱的立克次体感染率为64.37%、巴尔通体感染率为3.35%、类似巴贝西虫病原体检出率为1.70%,其他相关蜱虫病原检测结果为阴性。结论 森林革蜱为试验采集蜱虫中的优势蜱种;进行病原体检查发现立克次体具有较高感染率,其中病原体主要在森林革蜱中发现,森林革蜱仍然是监测新发蜱媒传染病的前哨种类。携带的病原体的种类随着生态环境的变化在慢慢发生变化,边境的生态环境复杂多样,在蜱虫比较活跃繁多的地区和季节应该增大防范措施,以免人们在工作以及生活中被其感染,从而造成生命财产损失。