脑神经肽类似物Rattin对β-淀粉样蛋白所致大鼠海马神经元损伤的影响

目的:探究Humanin衍生物Rattin拮抗Aβ_(31-35)所致在体海马theta节律紊乱及离体细胞损伤的保护作用及其机制。方法:将SD大鼠随机分为4组(vehicle+saline、vehicle+Aβ_(31-35)、Rattin+saline以及Rattin+Aβ_(31-35)),大鼠海马区注射Aβ_(31-35)/Rattin后,利用微电极记录在体海马局部场电位;分离培养SD大鼠乳鼠原代海马神经元,利用CCK-8法检测Aβ_(31-35)/Rattin处理后细胞活性,利用激光共聚焦显微镜荧光成像技术观察细胞内[Ca~(2+)]、利用real-time RT-PCR检测MAPK、PI3K以及STAT3的表达。结果:(1) Aβ_(31-35)抑制了大鼠海马CA1区的theta节律,Rattin处理可拮抗Aβ_(31-35)所致的theta节律压抑;(2)单独给予Rattin不影响原代海马神经元的存活率,但中等浓度(10μmol/L)或高浓度(100μmol/L)的Rattin明显保护了海马神经元免受Aβ_(31-35)引起的细胞伤害,该效应可被酪氨酸蛋白激酶抑制剂Genistein完全逆转;(3)单独注射Aβ_(31-35)使海马神经元STAT3 mRNA表达下调、p38MAPK和PI3K mRNA表达增加,联合给予Rattin则阻止了STAT3 mRNA的下调,但对p38MAPK和PI3K mRNA表达没有影响;(4) Rattin预处理抑制了Aβ_(31-35)诱发的细胞内[Ca~(2+)]升高,此效应可被JAK抑制剂AG490所阻断。结论:Rattin能够有效减轻Aβ_(31-35)引起的海马theta节律压抑和剂量依赖性拮抗Aβ_(31-35)所致的细胞毒性。这些神经保护作用与Rattin对JAK/STAT3信号转导途径的激活以及细胞内Ca2+稳态的维持有关。     

大豆肽减轻β-淀粉样蛋白肽诱导的小鼠原代海马神经元损伤

目的:研究大豆肽对β-淀粉样蛋白肽(Aβ)诱导的海马神经元损伤是否具有保护作用.方法:分离胚胎18.5 d C57BL/6小鼠海马原代神经元,培养7d后用10 μmol/L的Aβ25-35处理,制作神经元损伤模型;随后分别在神经元培养基中加入0.1％、0.5％和1.0％的大豆肽,处理48 h后,利用MTT法检测大豆肽对...     

体外神经元培养中Aβ1～40诱导cyclin A的异常表达

阿尔茨海默病（AD）是一种进行性神经退行性疾病,以严重记忆减退和认知障碍为主要临床表现。AD主要病理表现是细胞外的老年斑形成,细胞内的神经纤维缠结的出现,以及神经细胞和突触数量的减少。近年来在探索AD发病机制和病理改变的过程中,发现AD病人脑内的神经元中出现细胞周期相关蛋白（cyclin A、cyclin B1等）的异常表达,且异常表达的细胞周期相关蛋白可能与AD神经元的病理改变有关联。为此,我们在体外培养神经细胞时,加入Aβ1-40多肽片段,进行细胞周期相关蛋白和神经细胞损伤的分析。     

大豆肽减轻β-淀粉样蛋白肽诱导的小鼠原代海马神经元损伤

目的：研究大豆肽对β- 淀粉样蛋白肽（ Aβ）诱导的海马神经元损伤是否具有保护作用。方法： 分离胚胎 18.5 d C57BL/6 小鼠海马原代神经元,培养7 d 后用10 μmol/L 的Aβ25-35 处理,制作神经元损伤模型;随后分别在 神经元培养基中加入0.1%、0.5% 和1.0% 的大豆肽,处理48 h 后,利用MTT法检测大豆肽对海马神经细胞活力的 影响,DAPI 染色检测神经细胞凋亡形态变化;免疫印迹检测神经细胞凋亡蛋白表达的变化;免疫荧光染色法检测 原代神经元中微管蛋白β-Ⅲ-tubulin 及微管相关蛋白MAP2的变化。结果：大豆肽提高了Aβ25-35 所致神经损伤模型 中海马神经元的细胞活力,大豆肽降低了Aβ25-35 所致神经损伤模型中海马神经元的凋亡,减轻了细胞骨架的损伤。 结论：大豆肽对Aβ 诱导的神经细胞凋亡及细胞骨架损伤具有明显的抑制作用。     

NS398对Aβ肽损伤原代培养海马神经元的影响

目的:探讨Cox-2抑制剂NS398对损伤神经元的保护作用。方法:将原代培养的SD大鼠海马神经元随机分为空白对照组、Aβ肽细胞模型组和NS398实验组。以10μmol/L Aβ25-35制作原代培养海马神经元损伤模型,以四氮唑溴盐(MTT)比色法检测细胞存活率,免疫细胞化学法检测Cox-2、Caspase-3的表达。结果:Aβ25-35细胞模型组神经元形态变化明显,细胞存活率明显下降,Cox-2和Caspase-3表达增强,与空白组比较有显著差异(P<0.01)。NS398使神经元细胞存活率明显提高并使Cox-2和Caspase-3表达减弱,与Aβ肽模型组比较具有显著性差异(P<0.01)。结论:Aβ25-35导致Cox-2和Caspase-3的表达增强,并使SD大鼠原代培养海马神经元变性、死亡。NS398可能通过抑制Cox-2和Caspase-3的表达保护原代培养海马神经元。     

Aβ1-40诱导神经元凋亡过程中大鼠海马抗氧酶活性的变化

目的探讨β-淀粉样蛋白（Ap）通过氧化应激引起的细胞凋亡过程中，脑组织内抗氧酶活性的改变方式；并且通过过氧化氢酶（CAT）活性的变化，探讨过氧化物酶体在邯引起的氧化应激过程中的作用。方法将A口注射到大鼠海马，诱导细胞凋亡，在第3天和第7天观察超氧化物歧化酶（SOD）和CAT的活性变化。结果铜锌超氧化物歧化酶（CuZn-SOD）和CAT的活性明显低于对照组，但其mRNA的表达各组之间没有差异；从第3天到第7天。总SOD的活性没有改变，但伴随着CAT和CuZn-SOD活性的恢复，丙二醛（MDA）的含量减少，大鼠的学习、记忆能力有所恢复。结论抗氧化酶活性的降低并非mRNA转录水平下降，可能是酶蛋白被活性氧（ROS）氧化所致；CAT发挥了比总SOD更为重要的抗氧化作用；过氧化物酶体在AD引起的氧化应激过程中发挥了抗氧化作用。     

β-淀粉样蛋白25-35对培养的大鼠隔区神经元存活和生长的影响

目的：探讨β－淀粉样蛋白对隔区神经元的作用。方法：采用神经细胞培养技术、ＭＴＴ法、免疫细胞化学及图像分析技术,观察“老化”及正常的β－淀粉样蛋白２５－３５片段对隔区神经元存活、生长及胆碱能神经元胞体中胆碱乙酰转移酶活性的影响。结果：“老化”的β－淀粉样蛋白２０ｕｍｏｌ／Ｌ组的隔区神经元光密度值及突起长度比对照组,１０ｕｍｏｌ／Ｌ组及未“老化”的２０ｕｍｏｌ／Ｌ组均明显;胆碱能神经元的突起长度及胞体     

Alzheimer病与血管性痴呆患者脑脊液中β-淀粉样蛋白1-42水平的对照研究

目的 :探讨脑脊液 (CSF)中β -淀粉样蛋白1-42 (β -amyloidprotein1-42 ,Aβ1-42 )的水平对Alzheimer病 (AD)的诊断价值 ,寻找AD理想的生物学标志。方法 :将符合美国国立神经病、语言障碍和卒中研究所 -老年性痴呆及相关性疾病协会 (NINCDS -ADRDA)的”很可能AD”标准的 2 2例AD患者 ,同时将 2 0例血管性痴呆 (vasculardementia ,VD)和 2 1例正常对照 (normalcontrol,NC)纳入研究。用酶联免疫吸附法 (ELISA)分别检测AD组、VD组和NC组CSF中的Aβ1-42 水平。同时评定 :AD、VD组患者的简易智能量表 (MMSE)、HACHINSKI缺血量表及临床痴呆量表 (CDR)等参数。结果 :三组CSF中Aβ1-42 平均浓度 (x±s) (pg/ml)如下 :AD组 343.94± 16 5 .87;VD组 4 6 6 .6 5± 2 2 2 .4 6 ;NC组 4 80 .4 0± 2 17.16 ,AD组明显低于NC组 (P <0 .0 5 ) ;虽然AD组低于VD组、VD组低于NC组 ,但差异均无显著性(P >0 .0 5 ) ;AD组CSF中Aβ1-42 浓度与CDR、MMSE评分明显相关 (P <0 .0 5 )。结论 :Alzheimer病患者CSF中Aβ1-42浓度降低是其重要的实验室表现 ,可以作为AD的辅助的诊断指标     

β淀粉样蛋白1-42对大鼠海马神经元树突棘的影响

目的:研究β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)对于原代培养的大鼠海马神经元树突棘形态和数量的影响.方法:将原代培养的新生大鼠海马神经元随机分为对照组(control)和Aβ1.42处理组(Aβ1-42),用浓度为500 nmol/L的Aβ1-42处理细胞,应用免疫荧光染色检测树突棘上大脑发育调节蛋白(drebrin)的...     

β-淀粉样蛋白在Alzheimer病中的神经毒性

文综述了β淀粉样蛋白多肽(βamyloid peptide,Aβ)在老年性痴呆症(Alzheimer's disease,AD)中的毒性作用。Aβ是老年斑形成的始动因子,也是老年斑核中的核心成分;Aβ沉积所形成的神经炎性斑,即老年斑是AD脑内特征性病理变化之一;Aβ本身也可形成自由基损伤神经元;Aβ引起的细胞凋亡在AD病神经元丢失中起着重要作用;Aβ可作用于胆碱能神经元末梢,通过抑制胆碱的摄取而减少乙酰胆碱合成,减少海马和皮质脑片释放乙酰胆碱。总之,Aβ是通过多个环节引发神经毒性作用的。     

β-淀粉样蛋白对神经元膜流动性的影响

目的：研究Aβ对神经元膜流动性的影响，探索Aβ的神经毒性机制。方法：制备急性分离的新生SD大鼠海马和皮层神经元细胞悬液，采用显微准弹性激光散射技术和荧光偏振技术。结果：采用显微准弹性激光散射技术发现Aβ25-35作用5min和35min后均降低海马和皮层神经元ACF的衰减速率及频移线宽Г，而采用荧光偏振技术发现Aβ25-35作用5min和35min后虽然有升高海马和皮层神经元荧光各向异性的趋势，但无统计学意义。结论：提示Aβ可降低神经元膜流动性，显微准弹性激光散射技术比荧光偏振技术更敏感。     

Aβ1-40诱导神经元凋亡过程中大鼠海马抗氧酶活性的变化

目的探讨β-淀粉样蛋白(Aβ)通过氧化应激引起的细胞凋亡过程中,脑组织内抗氧酶活性的改变方式;并且通过过氧化氢酶(CAT)活性的变化,探讨过氧化物酶体在Aβ引起的氧化应激过程中的作用.方法将Aβ注射到大鼠海马,诱导细胞凋亡,在第3天和第7天观察超氧化物歧化酶(sOD)和CAT的活性变化.结果铜锌超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)和CAT的活性明显低于对照组,但其mRNA的表达各组之间没有差异;从第3天到第7天,总SOD的活性没有改变,但伴随着CAT和CuZn-SOD活性的恢复,丙二醛(MDA)的含量减少,大鼠的学习、记忆能力有所恢复.结论抗氧化酶活性的降低并非mRNA转录水平下降,可能是酶蛋白被活性氧(ROS)氧化所致;CAT发挥了比总SOD更为重要的抗氧化作用;过氧化物酶体在Aβ引起的氧化应激过程中发挥了抗氧化作用.     

Alzheimer病中β淀粉样蛋白的毒性作用

Alzheimer病(AD)是老年痴呆最主要和最常见的类型,β淀粉样蛋白(β Amyloid,Aβ)在其发生、发展过程中起关键作用,它通过多种途径和机制触发和诱导了神经元的变性,阐明这些作用对于AD的治疗具有重要意义.     

神经节苷脂GM1促进Alzheimer病长β-淀粉样蛋白(βA4_(42))分泌以及干扰β-淀粉样蛋白前体(APP)代谢

与短β┐淀粉样蛋白（βＡ４４０）比较，长β┐淀粉样蛋白（βＡ４４２）在Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病老年斑生成中具有更重要的作用。本研究发现神经节苷脂ＧＭ１同时促进人类β┐淀粉样蛋白前体基因转染细胞βＡ４４０和βＡ４４２分泌，这种促进作用不具有突出的选择性。此外，本研究亦证明ＧＭ１干扰β┐淀粉样蛋白前体细胞内代谢并抑制其分泌片断的跨膜释放，β┐淀粉样蛋白前体的代谢异常也有利于βＡ４的生成。以上结果进一步提供了ＧＭ１有可能参与Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病脑病理变化的实验证据。     

淀粉样蛋白β异常表达对骨代谢的影响

背景:淀粉样蛋白β在人体组织中广泛存在,它的异常表达与阿尔茨海默症、骨质疏松等多种慢性炎症性疾病密切相关.研究表明淀粉样蛋白β在人椎骨和股骨中沉积并引起骨质破坏,但关于淀粉样蛋白β低表达对骨代谢的影响尚不清楚.目的:探讨淀粉样蛋白过表达及低表达对小鼠骨代谢的影响.方法:纳入12月龄淀粉样蛋白β过表达的APPswe+/+...     

火绒草对2型糖尿病大鼠海马神经元Aβ_(1-42)蛋白表达和形态学的影响

目的:观察火绒草水提取物对2型糖尿病(T2DM)大鼠海马区Aβ1-42蛋白表达和形态学的影响。方法:健康雄性Wistar大鼠30只,随机均分为对照组、T2DM组和火绒草组。血糖仪检测大鼠空腹血糖,免疫组化法检测海马CA1区,CA3区,DG区Aβ1-42蛋白的表达,尼氏染色检测海马神经元数量和形态学的变化。结果:T2DM组与对照组比较,空腹血糖明显升高(P0.01),海马CA1区,CA3区,DG区Aβ1-42蛋白表达较明显增多,海马区神经元数、细胞浆尼氏小体数量减少;火绒草组与T2DM组比较,空腹血糖明显降低(P0.01),海马区CA1区,CA3区,DG区Aβ1-42蛋白表达明显减少,海马区神经元损伤程度明显减轻,神经元、尼氏小体数量增多。结论:火绒草能降低T2DM大鼠血糖,减少海马区Aβ1-42蛋白表达,对T2DM大鼠神经元损伤有保护作用。     

绞股蓝对海马注射Aβ1-40大鼠脑内细胞周期蛋白表达和钙稳态变化的影响

目的：探讨绞股蓝对海马注射Aβ₁-40大鼠脑内细胞周期蛋白异常表达和钙稳态变化的影响。方法： 动物随机分为绞股蓝组、模型组、对照组。运用淀粉样β蛋白双侧海马注射,模拟阿尔茨海默病脑内Aβ对神经系统的损害。Y型迷宫测试大鼠学习记忆能力,免疫组织化学染色和积分吸光度分析检测细胞周期蛋白A、B₁(cyclin A、cyclin B₁)，Fura-2/AM-荧光法测定海马细胞内Ca2＋含量；并对绞股蓝组大鼠给予绞股蓝皂苷灌胃，观察其对AD大鼠上述各项指标变化的影响。结果： Aβ₁-40海马注射大鼠学习记忆能力明显低于对照组(P＜0.05)，脑内细胞周期蛋白A、B₁蛋白水平明显高于对照组，海马神经元内Ca2＋含量显著高于对照组；而给予绞股蓝在一定程度上能改善大鼠学习记忆能力，降低cyclin A、cyclin B₁蛋白和Ca2＋含量的水平(P＜0.05)。结论：绞股蓝对Aβ引起的动物学习记忆能力减退、海马神经元内异常表达细胞周期蛋白和钙稳态失衡有一定的逆转作用。     

淀粉样蛋白对大鼠海马神经元驱动蛋白超家族基因表达的影响

目的:探讨淀粉样蛋白脑室注射对大鼠皮层与海马神经元驱动蛋白超家族(KIF)基因表达的影响。方法:脑室定向注射淀粉样蛋白复制大鼠阿尔兹海默病动物模型,水迷宫实验验证大鼠记忆损伤程度。RT-PCR方法检测大鼠皮层与海马ChAT、KIF1A、KIF2、KIF3A、KIF4与KIF5A基因的表达。结果:水迷宫实验与ChAT表达检测证实动物模型复制成功。RT-PCR结果表明淀粉样蛋白造成大鼠皮层与海马KIF基因表达的普遍上升。结论:淀粉样蛋白造成的皮层与海马胆碱能神经元损伤很可能是通过其兴奋性毒性作用实现的。     

睾酮对β-淀粉样蛋白1-42寡聚体联合去势大鼠海马内突触素表达的影响

目的 :研究睾酮对β-淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)寡聚体CA1区注射联合去势大鼠脑内突触素表达的影响。方法 :双侧海马CA1区注射Aβ1-42寡聚体同时去势建立动物模型。动物分为空白对照组、模型组、氟他胺组、睾酮组及氟他胺+睾酮组。采用H-E染色法检测海马锥体细胞数量。采用免疫组织化学法及免疫印迹检测各组大鼠脑内突触素的表达量。结果:锥体细胞数量和突触素表达量在睾酮组和空白对照组比较高,两组间差异无统计学意义,但睾酮组与其他各组间差异有统计学意义。睾酮组,氟他胺+睾酮组的锥体细胞数量和突触素表达量均高于模型组。结论 :睾酮可以通过雄激素受体途径增加锥体细胞的生存率,可以增加突触素在模型动物海马中的表达。     

β淀粉样蛋白对大鼠学习记忆功能及tau蛋白异常磷酸化的影响

为了探讨β淀粉样蛋白对大鼠学习记忆功能和tau蛋白异常磷酸化的影响,本文在海马注射Aβ25-35建立阿尔茨海黙病(AD)大鼠模型的基础上,通过行为学检测、HE染色、免疫组化和免疫蛋白印迹技术对动物的学习能力、组织的病理改变和tau(pS202)、tau(pT231)和tau-5的表达情况进行了分析。在行为学检测中,Aβ注射组大鼠在穿梭箱实验中的主动回避次数和被动回避次数减少,失败次数增多,而在Morris水迷宫测试中的逃避潜伏期和游泳距离延长。HE染色显示Aβ注射组大鼠海马CA1、CA3、齿状回的神经细胞数目减少;而免疫组化和免疫印迹结果显示注射组tau(pS202)阳性细胞明显增加,tau(pS202)、tau(pT231)和tau-5蛋白表达增加。以上结果提示海马内注射Aβ25-35可引起大鼠学习记忆功能下降,可能与神经细胞减少,tau蛋白异常磷酸化增多有关。