猕猴组织工程化周围神经移植物的实验研究

目的 评价利用化学萃取法获得的神经支架制备猕猴组织工程化周围神经移植物修复40mm尺神经缺损的效果。方法 共使用成年猕猴9只，随机取其中的6只，培养自体雪旺细胞，应用已经制备好的去细胞神经为支架材料构建组织工程化周围神经移植体修复猕猴尺神经的40mm缺损。实验分实验组，空白组，正常对照组3组。术后5个月通过形态学，肌电检测和免疫组织化学方法观察。结果 3组均未发现猕猴双手有糜烂或溃疡形成，猕猴小鱼际肌群的饱满度和弹性于术前无明显差别。实验组与正常对照组间小鱼际肌群的运动动作电位潜伏期．最大振幅及再生神经纤维的数目差异均无统计学意义（P〉0．05）。但在实验组与空白组间的差异有统计学意义（P〈0．05）。结论 用自体源雪旺细胞微注入去细胞同种异体神经支架构建的组织工程化神经移植物修复猕猴40mm的尺神经缺损，可取得与自体神经移植相似的效果。     

用去细胞同种异体神经构建猕猴组织工程化神经的实验研究

目的评价用自体源骨髓间充质干细胞(MSCs)或许旺细胞(SCs)作种子细胞,与去细胞同种异体神经构建的组织工程化外周神经修复猕猴尺神经4cm缺损的实验效果,为临床研究提供资料。方法分别用4种移植物桥接猕猴4cm尺神经缺损。A组:种植自体MSCs的去细胞同种异体神经;B组:种植自体SCs的去细胞同种异体神经;C组:去细胞同种异体神经;D组:自体神经移植。通过功能学、神经电生理学及组织学指标评价各组修复神经缺损的效果。结果A、B组术后6个月能引起小鱼际肌群产生复合动作电位的潜伏期、复合动作电位的最大振幅、神经传导速度和再生的神经纤维数目与自体神经移植组相比无统计学意义(P>0.05);但A、B、C、D组分别与C组相比,差异有统计学意义(P>0.05)。结论用自体源SCs或MSCs作种子细胞,与去细胞同种异体神经构建的组织工程化外周神经修复猕猴4cm尺神经缺损,均能取得与自体神经移植相近的效果。     

组织工程化人工神经修复周围神经缺损的实验研究

目的　研究雪旺细胞和生物降解支架材料复合后构建成的组织工程化人工神经修复神经缺损的效果。方法　将雪旺细胞制成 1× 1 0 8/ml的ECM (extracellularmatrix,ECM)凝胶 ,与PLA无纺纤维布复合培养 7d ,置入PLA中空纤维管中 ,构建成组织工程化人工神经。建立大鼠坐骨神经缺损 1 0mm的动物模型 ,A组为人工神经组 ;B组为雪旺细胞复合ECM凝胶组 ;C组为单纯ECM凝胶组 ;D组为自体神经移植组。术后 8周、1 2周 ,行神经电生理和组织学检测评价疗效。结果　术后 1 2周A组的再生神经纤维已越过远端缝合口 ,有髓神经纤维数和神经纤维密度稍差于D组 ,但再生神经组织的面积显著高于后者 ;A、D组的髓鞘厚度和dLAT、NCV、AMP、AREA均无显著差别 ,但明显高于B、C组。结论　雪旺细胞、ECM凝胶和PLA多孔材料与PLA中空纤维管组合后构建成的组织工程化人工神经 ,修复周围神经缺损的效果接近于自体神经移植     

组织工程化人工神经实验研究

目的：研究组织工程化人工神经修复大鼠2.5cm长坐骨神经缺损的效果。方法：21只2月龄Lewis 1w雌性大鼠随机分成三个神经移植组,每组7只。A组：种植同源雪旺细胞并具有内部支架结构的胶原神经管,即组织工程化人工神经。B组：无雪旺细胞但具有内部支架结构的胶原神经管。C组：自体神经移植体。术后六个月,进行系列神经电生理监测,神经肌肉组织学观察,S－100和神经微丝蛋白（Neurofilament）免疫组化染色,轴突计数等检查。结果：在A组和C组移植神经上均能诱发出波幅明显的神经肌肉复合动作电位（CMAP）,再生轴突已通过移植神经全长,远端肌肉轻度萎缩。而B组中没有或仅记录到极小波幅的CMAP,移植神经远端结缔纤维组织增生,再生轴突罕见,所支配肌肉明显萎缩。结论：初步结果显示：组织工程化人工神经可用来修复大鼠长段神经缺损。     

组织工程化骨修复猕猴长段骨缺损的实验研究

目的 探讨用生物衍生骨材料和骨髓基质干细胞(MSCs)复合后构成的组织工程化骨对异体猕猴长段骨缺损的修复作用。方法 于猕猴胫骨结节抽取MSCs并使诱导分化为成骨样细胞，用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记，培养后与人源生物衍生骨材料体外复合构成组织工程化骨，植入15只异体猕猴修复桡骨2．5cm长段骨缺损作为实验组；用单纯生物衍生骨材料修复对侧同样骨缺损作为对照组；另取2只猕猴双侧桡骨同样部位和大小骨缺损旷置作为空白组。术后1、2、3、6和12周时各处死3只动物取材，空白组12周取材，行大体观察、组织学和免疫组织化学检测。结果 实验组和对照组术后1、2和3周移植物周围组织反应较明显，6周后明显减轻，12周时基本消失。实验组标记成骨样细胞于术后6周仍存在，术后12周基本消失；骨缺损部位骨样组织、软骨、编织骨和板层骨出现时间均较对照组早，且骨愈合时间提前3～6周。实验组骨缺损以多点方式直接成骨，对照组则从两端以“爬行替代”方式成骨。空白组术后12周骨缺损均无愈合。结论 生物衍生骨材料和MSCs复合构建的组织工程化骨异体植入修复猕猴长段骨缺损可超越骨段移植的“爬行替代”过程，使骨缺损能较快愈合。生物衍生骨材料和同种异体MSCs复合组织工程化骨可作为构建骨组织工程的一种较好选择方式。     

组织工程化人工神经实验研究

目的 研究组织工程化人工神经修复大鼠2.5cm长坐骨神经缺损的效果。方法 21只2月龄Lewis lw雌性大鼠随机分成三个神经移植组,每组7只。A组:种植同源雪旺细胞并具有内部支架结构的胶原神经管,即组织工程化人工神经。B组:无雪旺细胞但具有内部支架结构的胶原神经管。C组:自体神经移植组。术后六个月,进行系列神经电生理监测,神经肌肉组织学观察,S-100和神经微丝蛋白(Neurofilament)免疫组化染色,轴突计数等检查。结果 在A组和C组移植神经上均能诱发出波幅明显的神经肌肉复合动作电位(CMAP),再生轴突已通过移植神经全长,远端肌肉轻度萎缩。而B组中没有或仅记录到极小波幅的CMAP,移植神经远端结缔纤维组织增生,再生轴突罕见,所支配肌肉明显萎缩。结论 初步结果显示:组织工程化人工神经可用来修复大鼠长段神经缺损。     

微囊化SD大鼠周围神经组织移植促进周围神经再生的实验研究

目的 采用微囊化组织研究技术，研究微囊化神经组织移植对周围神经再生的影响。方法 将12只SD大鼠随机分为实验组和空白组。切断SD大鼠左侧坐骨神经并行显微缝合，实验组8只，加入制备好的微囊化同种异体周围神经颗粒无血清培养液30μl，约含微囊颗拉300个；空白组4只，加入不合微囊颗粒的无血清培养液30μl。术后4周取材做组织形态学检查。结果 实验组周围神经再生明显优于空白组。结论 微囊化周围神经移植有促进周围神经再生的作用。     

小肠黏膜下层复合雪旺细胞构建组织工程化人工神经修复周围神经缺损的研究

目的小肠黏膜下层（small intestinal submucosa，SIS）复合雪旺细胞构建组织工程化人工神经并探讨其修复周围神经缺损的效果。方法SD大鼠60只随机分成三组，每组20只。构建右侧坐骨神经14mm缺损，A组：单纯SIS修复组；B组：复合雪旺细胞的SIS修复组；C组：自体神经移植对照组。术后不同时间段通过大体观察、电生理检测、组织学、透射电镜、图像分析、逆行示踪和小腿三头肌称重等方法分析评价修复效果。结果术后16周，B组移植段与近远段神经外观相似，未有神经瘤形成。组织学和透射电镜检查见B组再生神经组织可顺利通过缺损区，再生神经纤维排列整齐呈束状，含有大量的有髓神经纤维，与C组相似。电生理检测见第16周B组神经传导速度和复合动作电位的波幅均较第12周有所提高，与C组相比差异无统计学意义。真蓝逆行示踪证实B组和C组再生神经轴突轴浆运输功能恢复良好。图像分析证实B组再生神经组织面积百分比、有髓神经纤维密度和髓鞘厚度与C组相比差异无统计学意义，优于A组。B组和C组患侧小腿三头肌肌肉重量和恢复率均优于A组，C组优于B组，且差异有统计学意义。结论SIS复合雪旺细胞构建组织工程化人工神经能有效修复大鼠长距离坐骨神经缺损，有望成为自体神经的替代材料应用于周围神经缺损的修复。     

周围神经端侧吻合后神经再生的研究

目的研究周围神经端侧吻合后远端神经的再生及其临床应用价值。方法选用３７只Ｗｉｓｔａｒ大鼠，分成Ａ、Ｂ两组。Ａ组：切断腓神经，在邻近的胫神经干外膜上开一１ｍｍ小窗，将腓神经远端吻合到胫神经干侧方开窗处。Ｂ组：切断腓神经后，在胫神经干和远侧腓神经干外膜上各开一小窗，取对侧相应的腓神经以端侧吻合的方式桥接于胫、腓神经干两窗之间。两组分别于术后４、８、１２周取材，作神经组织学、电镜及图像分析仪检测：（１）神经再生的数量和质量；（２）定性定量观察神经再生情况；（３）再生神经的数目、密度及截面积。结果直接端侧吻合或神经桥接移植的端侧吻合，均可使神经再生，且再生纤维的质量与端端吻合组（对照组）无显著性差异（Ｐ＞０．０５）；对被吻合神经－胫神经的功能亦无影响。结论神经端侧吻合可作为神经损伤后一种新的修复方法     

人工组织神经移植物辅加神经生长因子修复大鼠坐骨神经缺损

目的 探索壳聚糖与聚乙醇酸联合制成的人工组织神经移植物辅加神经生长因子（NGF）修复大鼠外周神经缺损的可能性。方法 壳聚糖套管和聚乙醇酸纤维制备成人工组织神经移植物并辅加NGF，修复大鼠的坐骨神经10mm缺失。术后24周，进行足迹试验，电生理学测试，形态学观察。用自体神经，硅胶管以及壳聚糖套管与聚乙醇酸纤维等分别作为对照组，结果 术后24周内，实验动物均未出现明显炎症及排斥反应。实验组的各检测指标均优于除自体神经组外的各对照。结论 壳聚糖和聚乙醇酸与外周神经组织有良好的生物相容性；辅加NGF的人工组织神经移植物对修复缺损的神经具有良好的桥梁作用和促神经生长作用。     

几丁糖/聚乙烯醇神经导管修复猕猴周围神经缺损的实验研究

目的探讨应用几丁糖/聚乙烯醇神经导管修复猕猴周围神经缺损的效果。方法成年猕猴12只,雄性5只,雌性7只,体重3.26～5.35 kg。实验动物随机分成A、B、C 3组,制备左侧桡神经2 cm缺损模型,分别用几丁糖/聚乙烯醇神经导管移植、神经切除旷置和自体神经逆行原位移植处理。实验动物右侧为正常对照。术后8个月,行大体观察、组织学观测及电生理检测评价神经再生效果。结果术后8个月,A组再生神经通过神经导管长入神经缺损的远侧端,再生神经粘连较轻;B组未见再生神经通过神经缺损断端;C组移植神经与周围组织粘连较重。A、C组可检测出肌电图表现,B组未检测到。A、C组间波幅差异无统计学意义(P>0.05),但均不及正常对照侧,差异有统计学意义(P<0.05);C组潜伏期和神经传导速度优于A组,但均不及正常对照侧,差异均有统计学意义(P<0.05)。有髓神经纤维密度:A、C组较正常对照侧小,差异有统计学意义(P<0.05);A、C组间差异无统计学意义(P>0.05)。有髓神经纤维直径和髓鞘厚度:C组优于A组,但均不及正常对照侧,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论几丁糖/聚乙烯醇神经导管具有促进猕猴神经轴突再生的作用,有望成为自体神经替代材料应用于周围神经缺损修复。     

螺旋式改良神经端侧缝合法修复周围神经损伤的实验研究

目的 对治疗周围神经损伤的常规端侧缝合方法进行螺旋式改良端侧缝合实验研究,观察神经再生修复效果,为周围神经损伤的治疗提供效果更好的修复方法.方法 选用60只健康SD大鼠,采用右侧腓总神经修复模型.术中根据手术方法的不同,随机分为A、B、C三组,每组20只.每组将右侧腓总神经在其坐骨神经分出后3mm处局部封闭,利刀切断.A组神经远断端切成90°断面,行腓总神经端端缝合;B组神经远断端切成45°斜面,同时供体神经干外束膜开窗行端侧缝合;C组神经远断端切成10°斜面,供体神经干外束膜开窗,以螺旋式改良端侧缝合法进行神经束膜及外膜缝合.术后第8周分别对各组大鼠进行组织学、肌湿重、神经电生理检测,有髓神经纤维计数及神经示踪法观察.结果 螺旋式改良缝合组(C组)观察指标均优于常规端侧缝合组(B组)(P＜0.05),与端端缝合组(A组)比较差异无统计学意义(P＞0.05).螺旋式改良端侧缝合法对促进神经纤维的再生明显优于常规端侧缝合法.结论 神经断端采用螺旋式改良缝合后,神经再生良好;螺旋式改良缝合法较常规端侧缝合法能获得更有效的神经再生;长入远端的神经纤维多少与受端缝合接触面积大小有关.当临床遇动力神经缺乏时,采用神经螺旋式改良端侧缝合法可获得更好的修复效果.     

异体硬脊膜桥接周围神经缺损的实验研究

探讨异体硬脊膜修复周围神经缺损的可行性。方法：采用狗的异体硬脊膜桥接缺损２ｃｍ的狗腓总神经，对照组仅切取２ｃｍ神经而不作处理。在术后不同时间段作大体观察、神经电生理检测、光镜利电镜检查。结果：再生神经纤维在管腔内呈纵行整齐排列Ｔ偕窬宋峤岣弧＝崧郏菏5验结果证实异体硬脊膜能成功地引导周围神经再生。     

雪旺氏细胞植入硬脊膜管修复周围神经缺损的实验研究

本文报道两组10mm大鼠坐骨神经缺损,分别用含雪旺氏细胞和不含雪旺氏细胞的硬脊膜管桥接修复,术后2、4个月行光镜、电镜、神经电生理和计算机图像分析检测,证实植入雪旺氏细胞者,再生神经生长及成熟较早,肢体功能恢复较快,雪旺氏细胞和硬脊膜管结合,对周围神经再生有更大的促进作用。     

不同断面神经束组吻合对周围神经再生影响的实验研究

目的 观察不同断面神经束组吻合对大鼠坐骨神经再生的影响。方法 将32只SD大鼠随机分为四组，各组大鼠均切断双侧坐骨神经后立即在显微镜下左侧施行不同断面神经束组吻合(实验侧)；右侧行同一断面神经束组吻合(对照侧)。分别于第2、4、6、8周检测两侧坐骨神经运动诱发电位的潜伏期、波幅和有髓神经纤维数。结果 各指标经统计学处理，术后第2周，实验侧和对照侧之间差异无统计学意义，术后第4、6、8周实验侧各项指标优于对照侧。结论 不同断面神经束组吻合在神经恢复后期有加速神经再生作用，优于同一断面神经束组吻合。     

预变神经段修复神经缺损的实验研究

目的探讨不同预变时间组移植神经对神经再生的影响。方法以ＳＤ大鼠的不同预变时间组的尺神经作为移植神经，修复其正中神经的缺损。实验侧按移植神经预变时间的不同分为０、１、２、３、４、８周共６组，每组６只ＳＤ大鼠。移植后１２周，检测实验侧趾屈肌群的张力、最大收缩力、再生神经的形态及神经轴突的截面积。结果用预变１周的尺神经修复正中神经后，其趾屈肌群的张力及最大收缩力的恢复率达到正常对照组的８１．１％及８５．９％。显微镜下观察，预变１周组和其它各时间组相比，其再生的神经轴突最多，发育最成熟。结论用预变１周的神经段修复神经缺损，其神经再生能力最佳