表型筛选试验检测阴沟肠杆菌产β-内酰胺酶及耐药分析

目的:对近年耐三代头孢的阴沟肠杆菌进行β-内酰酶(主要是ESBLs与AmpC酶)监测以进行流行病学调查,同时作相关统计以指导实验室检测及临床用药。方法:收集来自各种标本对三代头孢耐药的阴沟肠杆菌45例表型筛选试验检测ESBLs与AmpC酶。结果:产ESBLs 42株,占93.33%,产AmpC酶8株,占17.78%,两种酶均产的有8株。结论:对三代头孢耐药的阴沟肠杆菌主要产ESBLs,体外实验对亚胺培南敏感率为97.66%,对其他抗菌药物敏感性差。     

147株阴沟肠杆菌AmpC酶及ESBLs的表型测定

目的 检测147株阴沟肠杆菌AmpC酶及ESBLs的表型测定,了解阴沟肠杆菌的耐药机制,以利于耐药性的控制与指导临床用药.方法 收集2004年1月至2006年6月广东省中医院的阴沟肠杆菌147株,用三维试验检测ESBLs 与AmpC酶.结果 147株阴沟肠杆菌中,产ESBLs 104株,占70.7%,产AmpC酶有36株,占24.5%,同时产2种酶的有3株,占2%,2种酶均不产的有4株,占2.7%.体外抗生素敏感试验显示,亚胺培南、头孢替坦、头孢吡肟、环丙沙星的耐药率分别为2.0%,61.2%,65.3%和89.1%,氨苄西林耐药率达到100%.结论 产ESBLs和AmpC酶是阴沟肠杆菌耐药的主要机制,阴沟肠杆菌主要产ESBLs,药物敏感试验表明亚胺培南敏感率最高(98.0%),头孢替坦次之(32.7%),而对其他抗菌药物敏感率较低.     

表型筛选方法检测阴沟肠杆菌AmpC酶

目的建立一种新的简便易行的Ampc酶的表型筛选方法并对其进行评价。方法采用表型筛选和三维试验对144株阴沟肠杆菌进行AmpC酶检测，对检测结果进行比较。结果144株阴沟肠杆菌表型筛选结果显示，高产AmpC酶的菌株共35株，占24．31％(35／144)；表型筛选与三维试验相比总符合率为89．58％(129／144)。结论表型筛选法检测AmpC酶方法简便，结果可靠，易于在临床实验室中推广应用。     

阴沟肠杆菌高产AmpC酶和ESBLs的检测及其耐药性研究

目的:了解本地区阴沟肠杆菌高产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的流行状况及其耐药性。方法:收集154株临床分离无重复阴沟肠杆菌,通过改良三维实验检测阴沟肠杆菌高产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),运用K-B琼脂扩散法进行药物敏感性试验。结果:在154株菌中,18.83%的菌株单产ESBLs,22.73%的菌株单产AmpC酶,5.19%的菌株同时产AmpC酶和ESBLs,53.25%的菌株AmpC酶和ESBLs均不产生。产不同类型β-内酰胺酶其耐药性有所不同。结论:本地区阴沟肠杆菌产AmpC酶和ESBLs的流行处于一个相对较高的水平。高产AmpC酶菌株对一、二、三代头孢菌素、头孢西丁、酶抑制剂复合制剂等高度耐药,对头孢吡肟敏感,而产ESBLs菌株对三代头孢菌素、头孢吡肟均不同程度耐药,而对各种酶抑制剂复合制剂保持较高的敏感性,因此,产Ampc酶及ES-BLs酶的细菌的耐药性不完全相同,产酶类型不同需选用不同类型的抗生素。     

肠杆菌产AmpC酶及ESBLs菌株的药敏谱分析

目的 观察分析临床分离的肠杆菌产AmpC、ESBLs酶的情况.方法 通过冻融法获得酶粗提物,然后作三维试验,从狭缝与抑菌环交界处是否出现扩大的长菌区域来判断试验的结果.结果 220株对第三代头孢菌素耐药或中介的肠杆菌中产AmpC酶株有48株(占21.8%),产ESBLs株有33株(占15.0%),产SSBL 13株(占5.9%).药敏谱分析亚安培南对肠杆菌的总敏感率为100.0%,而头孢吡肟对产AmpC酶的肠杆菌敏感性较好,头孢哌酮/舒巴坦对产ESBLs株敏感性较好.结论 AmpC及ESBLs酶已成为肠杆菌耐药的两大主要因素.提示临床开展细菌耐药性检测与监控是必要且重要的.     

产AmpC酶及或产超广谱β-内酰胺酶的阴沟肠杆菌的检测及耐药性研究

目的 了解阴沟肠杆菌产AmpC酶或同时产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的临床现状,检测阴沟肠杆菌对常用13种抗生素的耐药性,以指导临床合理选择抗生素.方法 采用三维实验确证产AmpC酶和产ESBLs菌株;用纸片扩散法进行耐药性检测.结果 分离出阴沟肠杆菌120株,AmpC酶菌株检出率为20.0%(24/120),ESBLs菌株检出率为25.0%(30/120),同时产AmpC酶和ESBLs即SSBL检出率为12.5%(15/120).阴沟肠杆菌SSBL菌株对左氧氟沙星、头孢吡肟和氨曲南的耐药率高于单产AmpC酶的菌株,差异具有统计学意义(P<0.05);SSBL菌株对亚胺培南、头孢西丁、环丙沙星的耐药率高于ESBLs菌株,差异有统计学意义(P<0.05);SSBL菌株对亚胺培南、头孢吡肟、头孢曲松、环丙沙星的耐药率高于不产AmpC酶及ESBLs即SSBL阴性的菌株,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 AmpC酶和ESBLs是导致阴沟肠杆菌对第3代头孢菌素耐药的重要原因,SSBL菌株的流行增强了此类菌株的耐药性,治疗阴沟肠杆菌感染时应以耐药检测结果为依据,可根据药敏结果考虑选用碳青酶烯类、喹诺酮类抗生素.     

产超广谱β-内酰胺酶AmpC细菌感染及耐药特性

[目的]了解医院内产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）和高产AmpC细菌感染和耐药特性。[方法]三维试验检测高产AmpC细菌、双纸片协同试验检测产ESBLs菌。Kirby—Bauer法测定药物敏感试验,回顾患者临床资料及使用抗生素情况。[结果]高产AmpC细菌在阴沟肠杆菌、肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌分别为12．8％（11／89）、4．1％（7／170）和2．6％（5／190）;产ESBLs菌分别为42．7％（38／89）,肺炎克雷伯菌31．7％（54／170）,大肠埃希菌27．3％（52／190）,其中同时产两种酶为6株。高产AmpC和产ESBLs菌对三代头孢菌素,氨曲南的耐药性明显高于非产酶菌,对泰能均敏感。前者对四代头孢敏感但对酶抑制剂耐药。高产AmpC和产ESBLs菌感染与使用三代头孢有关。[结论]高产AmpC和产ESBLs是临床G^-菌耐药的重要机制,其产生与使用三代头孢有关。     

肺炎克雷伯菌质粒介导的β-内酰胺酶的筛选及其耐药性检测

目的 了解对头孢类抗生素耐药的肺炎克冒伯菌(Kpn)中超广谱β-内酰胺酶(ESBL)和AmpC酶的分布及其对抗生素的敏感性，寻求检测肺炎克雷伯菌质粒β-内酰胺酶的最佳方法。方法 收集临床分离的肺炎克雷伯菌182株，采用双纸片协同试验和三维试验检测ESDL，表型筛选法和头孢西丁三维试验检测AmpC酶。结果 双纸片协同试验检测出产ESDL株78株，占42．85％(78／182)，三维试验显示产ESBL株82株，占45．05％(82／182)，两者相比总符合率为95．12％(78／82)。AmpC酶表型筛选法结果显示可疑产AmpC酶株9株，占4．9％(9／182)。三维试验显示产AmpC酶为7株，占3．8％(7／182)；同时产ESBL和AmpC酶菌株为2株，占1．1％(2／182)。产酶株对三代头孢高度耐药，对喹诺酮类、复方新诺明交叉耐药率也很高，对氨基糖苷类抗生素有一定敏感性，尚未发现亚胺培南耐药株。结论 双纸片协同试验为检测ESDL最常用方法，AmpC酶表型筛选法只可作为初步筛查．确证时采用三维试验。产ESDL和(或)AmpC酶的Kpn对多种抗生素耐药，需及时监测药敏结果。     

肺炎克雷伯菌产酶与耐药性分析

目的：了解医院肺炎克雷伯菌(KPn)临床株产去阻遏AmpC酶及超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况。方法：改良三维试验检测AmpC酶及ESBLs，K-B法检测细菌药物敏感试验。结果：医院237株KPn中产AmpC酶株16株(占6．75％)，产ESBLs有81株(占34．2％)，其中AmpC酶和ESBLs均阳性者有4株(占1．69％)。产ESBLs株对常用抗生素耐药率明显高于非产ESBLs株，但对亚胺培南全敏感。结论：医院KPn产酶株比率相当高，产ESBLs株对亚胺培南全敏感。     

产AmpC酶和ESBLs阴沟肠杆菌的临床分布与耐药性研究

目的：探究产AmpC酶和ESBLs阴沟肠杆菌的临床分布与耐药性。方法：选择感染患者150例分离阴沟肠杆菌150株（同患者均提取单菌株）,采取改良式三维试验方法和K-B方法,分析AmpC酶及ESBLs的检测的临床分布和药物的敏感性情况。结果：阴沟肠杆菌产ESBLs的检出41株（27.33%）,阴沟肠杆菌产AmpC酶检出16株（10.67%）,AmpC酶及ESBLs同时不产的检出77株（51.33%）,AmpC酶及ESBLs同时产检出16株（10.67%）;亚胺培南的敏感性最高,其耐药率为0%~6.3%。结论：临床需要合理应用相关抗菌药物,并要重视阴沟肠杆菌耐性监测。     

三种检测AmpC酶方法的比较

目的采用三维试验、表型筛选法及头孢西丁纸片药敏法(K-B法)同时检测肠道G-杆菌的AmpC酶,并加以比较,找出一种适合临床常规应用的检测AmpC酶的方法。方法用头孢硝噻吩法检测出97株β-内酰胺酶阳性的肠道G-杆菌作为试验待测菌,用头孢西丁药敏法、表型筛选法测定细菌耐药情况,以判断产AmpC酶的情况。用三维分析法测定细菌粗提物中的AmpC酶情况。结果97株肠道杆菌头孢西丁药敏法结果显示产AmpC酶共有36株,占37.1%(36/97),与三维试验比较总符合率为74.2%。表型筛选法产AmpC酶的菌株有15株,占15.5%(15/97),与三维试验比较总符合率为91.8%。结论表型筛选法与三维试验法比较差异无显著性。表型筛选法可以作为一种临床快速、简便、可靠的检测AmpC酶的方法。     

阴沟肠杆菌产AmpC酶和ESBLs的检测及药物敏感性分析

目的 了解阴沟肠杆菌的耐药特性及其产AmpCβ-内酰胺酶(AmpC酶)和产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况。方法 药敏实验和AmpC酶检测采用WalkAway-40全自动微生物分析仪,FSBLs俭测采用NCCLS纸片确证试验。结果 阴沟肠杆菌的标本来源主要为痰液、尿液、创口分泌物等,以烧伤科为多。ESBLs检出率为51．8％,AmpC酶检出率为53．2％。业胺培南敏感率为92．8％,其余抗生素敏感率均低于50％。结论 阴沟肠杆菌Ampc酶和ESBLs检出率较高,耐药性严苇,治疗应首选亚胺培南。     

AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶在阴沟肠杆菌中的表达及对其耐药性的影响

目的：研究AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶（ESBL）在阴沟肠杆菌中的流行情况及对其耐药性的影响。方法：琼脂稀释法测定最低抑菌浓度（MIC）,三维试验、等电聚焦电泳、接合试验及聚合酶链反应分析耐药菌的产酶情况。结果：106株阴沟肠杆菌中,单纯高产AmpC酶者、单纯产ESBL者、高产AmpC酶并产ESBL者分别占16.0％、10.4％、13.2％。CTX-M型和SHV型ESBL的检出率分别为17.0％（18/106）和6.6％（7/106）。碳青霉烯类抗生素对阴沟肠杆菌均有很好的抗菌活性(MIC90≤2цg/ml)。单纯高产AmpC酶菌对头孢吡肟、阿米卡星、庆大霉素和环丙沙星的敏感率均超过70％;单纯产ESBL菌对哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、环丙沙星和阿米卡星的敏感率均超过60％;高产AmpC酶并产ESBL菌对除碳青霉烯类外的其他抗生素的敏感率均低于25％。结论：CTX-M型ESBL已经在阴沟肠杆菌中流行。产ESBL和高产AmpC酶同样是导致阴沟肠杆菌对第3代头孢菌素耐药的重要原因。ESBL在高产AmpC酶菌株中的流行增强了此类菌株的耐药性。     

三维试验检测阴沟肠杆菌产β-内酰胺酶

本研究通过对阴沟肠杆菌产β-内酰胺酶（主要是ESBLs与AmpC酶）的监测,了解临床上耐三代头孢的阴沟肠杆菌耐药的主要原因及ESBLs与AmpC酶于此类耐药中出现频率（即其流行情况）,并同时统计这些耐药菌对其它抗生素的耐药情况,现报道如下。     

AmpC酶在主要肠杆菌科和非发酵菌中的携带率及耐药性

目的：调查主要肠杆菌科细菌和非发酵菌产AmpC酶和ESBLs的状况及对常用抗菌药物的耐药性，指导临床合理用药。方法：常规培养分离细菌，应用VTTEK微生物自动分析仪和API鉴定系统鉴定病原菌；药敏试验采用K-B纸片扩散法；AmpC酶检测采用三维试验法；ESBLs检测采用双纸片确认试验。结果：主要肠杆菌科细菌产AmpC酶和ESBLs的阳性率分别为18．9％，52．8％，其中以大肠杆菌、肺炎克雷伯、产酸克雷伯、阴沟肠杆菌为主，同时产2种酶的菌株占15．4％；绿脓杆菌产AmpC酶和ESBLs酶的阳性率分别为18．2%，，42．0％，同时产2种酶的菌株占13．6％；不动杆菌的产酶率均在8．0％以下,产酶菌的耐药率高于非产酶菌，除绿脓杆菌外，产AmpC酶菌株的耐药率高于产ESBLs菌株．主要肠杆菌科细菌对泰能(IMP)的敏感性为99．5%，而对舒普深(CPZ)的耐药率平均为13．8％；非发酵菌对IMP，马斯平(FEP)、CPZ的耐药率平均分别为20．4％，44．3％，18．6％.结论：主要肠杆菌科细菌的产酶率高于非发酵菌，产AmpC酶的菌株已近20．0%，应引起临床的高度重视；绿脓杆菌产ES-BLs的菌株也较高，也应该加强监控．对产酶菌引起感染的治疗应根据细菌药敏试验结果，合理选择有效的抗菌药物联合治疗；对重症感染患的治疗应根据药敏试验结果重点应用泰能或舒普深治疗。     

产AmpC酶的阴沟肠杆菌检测及其基因分析研究（摘要）

目的了解昆明地区阴沟肠杆菌的耐药现状及高产AmpC酶的表达对阴沟肠杆菌耐药性的影响．探讨昆明地区阴沟肠杆菌的耐药性与AmpC酶基因的关系．方法运用K—B法（纸片扩散）分析临床分离阴沟肠杆菌的耐药情况；采用头孢西丁三维试验、五种纸片表型筛选试验、氟氯西林双抑制剂扩散协同试验检测高产AmpC酶的表型表达；并通过聚合酶链反应（PCR）法检测结构基因ampC和调节基因ampD，对部分耐药菌株行DNA测序检测基因突变．[第一段]     

肠杆菌属细菌高产AmpC酶检测方法的比较研究

目的评价纸片耐药表型推断法和双纸片邻氯西林增效试验应用于临床实验室检测肠杆菌属细菌高产AmpC酶的可行性。方法采用头孢西丁三维试验、纸片耐药表型推断法和双纸片邻氯西林增效试验对104株临床分离的肠杆菌属细菌进行高产AmpC酶检测,以头孢西丁三维试验为标准,与后两种方法进行比较,计算两种方法的灵敏度和特异性。结果经头孢西丁三维试验检测,104株肠杆菌属细菌中高产AmpC酶有15株,其中阴沟肠杆菌11株,产气肠杆菌3株,河生肠杆菌1株,总检出率为14.4％。纸片耐药表型推断法的符合率为91.3％,灵敏度为86.7％,特异性为92．1％。双纸片邻氯西林增效试验的符合率95.1％,灵敏度为93.3％,特异性为95.5％。结论纸片耐药表型推断法和双纸片邻氯西林增效试验与三维试验相比有较高的符合率,且操作简便,适合在临床实验室检测肠杆菌属细菌高产AmpC酶中应用。     

由阴沟肠杆菌引起的感染分布及其耐药性变迁

目的：探讨由阴沟肠杆菌引起感染的临床分布、阴沟肠杆菌中超广谱β-内酰胺酶ESBLs和AmpC酶的携带率以及其耐药性变迁的趋势，为临床合理使用抗生素、有效控制感染提供流行病学依据。方法：采用全自动微生物分析仪Vitek—60进行细菌的鉴定，用K—B琼脂扩散法进行菌株的耐药性检测，并分别用纸片扩散法和表型筛选法检测其超广谱β-内酰胺酶ESBLs和AmpC酶。结果：本地区由阴沟肠杆菌引起的感染呈逐年递增趋势，感染的人群以中老年为主，感染部位主要见于呼吸道、伤口及泌尿道等。阴沟肠杆菌ESBLs的携带率由2000年的6．9％上升至2002年的10．8％，AmpC酶的携带率由2000年的25％上升至35％。药敏试验提示亚胺培南有较强的敏感性94％，依次为头孢吡肟65％、舒普深70．5％、丁胺卡那、喹诺酮类存在着交叉耐药。其他抗生素的耐药性均有不同程度的上升，其中头孢噻肟较为明显。结论：本地区存在高产AmpC酶的阴沟肠杆菌的流行；亚胺培南是治疗由阴沟肠杆菌引起的临床感染的首选药物，加强阴沟肠杆菌超广谱β-内酰胺酶ESBLs和AmpC酶的耐药性检测，对临床合理选择抗生素及控制耐药菌株的播散和流行，具有重要的指导意义。     

革兰阴性杆菌耐药与产AmpC酶的检测及其与耐药的关系分析

目的了解274株革兰阴性杆菌的耐药现状及产AmpC酶与耐药的关系分析。方法采用microscan walkaway-4．0鉴定274株革兰阴性杆菌的药敏情况,并用酶粗提物头孢西丁三维实验检测AmpC酶。结果32株细菌产AmpC酶(占11．7％),其中阴沟肠杆菌13株(占30．2％)、产气肠杆菌2株(占22．2％)、不动杆菌6株(占21．4％)。274株菌对IPM、AK、CIP、FEP、CN、SXT、CAZ、ATM、CRO、PIP的药物敏感率从高到低依次为：89．4％、78.8％、69．3％、55．5％、45．9％、39．1％、36．9％、31．4％、30．3％、18．2％。结论革兰阴性杆菌的耐药状况严重,检测AmpC酶有助于临床抗菌药物的选用。     

超广谱β-内酰胺酶、AmpC酶细菌下呼吸道感染调查、耐药性监测

目的了解我院呼吸内科病区下呼吸道标本中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、AmpC酶细菌检出及耐药情况,以指导临床医生合理使用抗生素.方法收集我院呼吸病房2000年1月～2002年1月期间,下呼吸道标本中分离出的肠杆茵科的细茵,用纸片扩散法检测细茵的耐药性,三维试验的方法检测ESBLs及AmpC酶.结果共分离201株肠杆茵科的细茵,产ESBLs细茵32株,占16%,产AmpC酶细茵19株,占9.5%,药敏结果显示产ESBLs及AmpC酶细茵对11种抗菌素的耐药率均高于非产ESBLs及AmpC细茵.结论呼吸病区下呼吸道标本小肺炎克雷伯杆茵ESBLs检出率最高,达13%,阴沟肠杆菌AmpC酶的检出率较高.亚胺培南头霉素以及酶抑制剂是对产ESBLs细菌较为有效的药物,对产AsmpC酶的细菌,亚胺培南、头孢吡肟效果较好,对于氨基糖苷、喹诺酮、磺胺类抗茵素多重耐药呈上升趋势.