CpG寡聚脱氧核苷酸在肿瘤免疫治疗中的应用进展

CpG寡聚脱氧核苷酸(oligodeoxynucleotide,ODN)具有激活机体免疫系统的作用.CpG ODN能够直接诱导浆细胞样树突状细胞(plasmacytoid dendritic cell,pDC)的活化和成熟,促进Th1型细胞因子的分泌和B细胞分化成浆细胞.CpG ODN作为肿瘤疫苗的佐剂已应用于多个临床试验中.单独应用CpG ODN具有抗肿瘤作用,联合其他抗肿瘤治疗(如单克隆抗体、化学治疗、放射治疗和细胞因子等)具有协同抗肿瘤作用.虽然在应用CpG ODN治疗ⅢB~Ⅳ期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的Ⅲ期临床试验中,与标准化疗方案相比没有延长患者的中位生存期并发生较严重的不良反应,但是在其他临床试验中CpG ODN具有明确的抗肿瘤作用.CpG ODN在抗肿瘤治疗中的有效性和安全性方面还需要进一步的临床试验证实.     

CpG ODN诱导树突状细胞的免疫调节机制

含有未甲基化CpG基序的寡核苷酸(CpG ODN)可通过诱导树突状细胞(DC),有效地提呈抗原,增加共刺激分子的表达,引起先天免疫应答和获得性免疫应答,发挥抗肿瘤作用.     

CpG寡核苷酸在肿瘤治疗中的应用研究进展

肿瘤的免疫治疗可以追溯至19世纪后期,当时纽约的一个外科医师William Coley就已开始运用细菌的提取物治疗肿瘤。进入20世纪后,手术、放疗和化疗成为治疗肿瘤的三大手段,肿瘤的免疫治疗却没有得到很好的发展应用。近年来,随着免疫学的迅猛发展,免疫疗法治疗肿瘤引起了人们更多的重视。最近几年,CpG ODN成为肿瘤免疫治疗领域的一个研究热点。研究表明,CpG ODN具有很强的免疫刺激作用,多项动物实验和临床试验证实其具有一定的抗肿瘤作用。     

CpG抗肿瘤作用及其免疫活性的研究进展

 胞嘧啶与鸟嘌呤二核苷酸序列（CpG ODN）是一段以非甲基化胞嘧啶与鸟嘌呤（CpG）为核心的碱基序列,能够激活体内的多种免疫细胞,发生免疫应答,抵抗疾病。调节CpG的结构,化学修饰可提高CpG的生物活性, 提高CpG作为免疫佐剂和放疗、化疗增敏剂治疗肿瘤的效果。     

CpG ODN诱导树突状细胞抗肿瘤作用的研究进展

 CpG ODN是含有CpG基序的脱氧寡核苷酸,它具有强大的免疫调节作用,能够激活自然杀伤（NK）细胞、单核／巨噬细胞、树突状细胞（DC）、B细胞和T细胞等多种免疫细胞,诱导并增强非特异性及特异性免疫应答;同时还可以诱导产生Th1型免疫反应,下调Th2型反应,调控免疫应答类型。DC是目前发现的功能最强的专职抗原提呈细胞,在抗原加工提呈、抗原识别及T细胞激活中发挥重要作用,对多种肿瘤细胞具有杀伤作用。近年来,以DC为基础的肿瘤免疫治疗日益受到人们的重视。现就近年CpG ODN与DC免疫治疗肿瘤的研究进展作一综述。     

CpG-ODN可增强痘苗病毒修饰的癌溶物的抗肿瘤效果

研究CpG联合非复制重组痘苗病毒在肿瘤免疫治疗中的效果。方法 :构建非复制重组痘苗病毒v△ 11β75 ,联合应用免疫刺激寡核苷酸和重组痘苗病毒v△ 11β75进行肿瘤免疫治疗。 结果 :重组痘苗病毒v△ 11β75在人源 143细胞中的不能正常繁殖 ,Southern blot证实痘苗病毒天坛株HindⅢC ,K片段间基因的缺失。在Wistar大鼠的Walker′s肿瘤模型中 ,联合应用CpG ODN和非复制痘苗病毒修饰的WRC2 5 6细胞裂解物进行免疫治疗 ,可以延长荷瘤鼠的生存期 ,肿瘤生长速度降低。结论 :CpG ODN可以增强非复制痘苗病毒修饰的肿瘤细胞裂解物的抗肿瘤治疗效果 ,为肿瘤免疫治疗提供了一种新的途径。     

CpG ODN对急性粒-单核细胞白血病荷瘤小鼠免疫治疗作用研究

目的:探讨两种CpG ODN序列对急性粒-单核细胞白血病荷瘤小鼠模型的免疫治疗作用。方法:通过注射WEHI-3细胞构建急性粒-单核细胞白血病荷瘤小鼠模型，分别皮下注射PBS无菌缓冲液、CpG 1826、CpG Seq14，观察治疗后各组小鼠的一般状况、生存时间、瘤结节生长、病理切片等，综合评价两种CpG ODN的治疗效果。结果:皮下接种1×106个WEHI-3细胞，成功建立急性粒-单核细胞白血病荷瘤小鼠模型。肿瘤组平均生存时间20.87天，CpG 1826组 32.60天，CpG Seq14组 28.35天，两种CpG治疗组小鼠平均存活时间明显较肿瘤组长，P＜0.05；实验初期，肿瘤组及两CpG治疗组小鼠较正常组小鼠体重增长明显，终末期体重明显下降；肿瘤组小鼠瘤结节较同期两CpG治疗组小鼠大，且增长速度快；肿瘤组小鼠肝脏、脾脏、肿瘤组织中均可见广泛瘤细胞浸润，CpG 治疗组肝脏、脾脏中瘤细胞浸润明显减少，脾脏白髓区明显较对照组扩大，小鼠免疫功能增强，减少了肿瘤细胞的器官浸润；两实验组小鼠注射CpG部位均未见红肿、硬结、坏死等不良反应。结论:CpG 1826、CpG Seq14直接用于急性粒-单核细胞白血病荷瘤小鼠模型的免疫治疗，均可增强小鼠抗肿瘤作用，延长生存时间，且无明显毒副作用。     

趋化因子SLC和免疫佐剂CpG-ODN联合应用对小鼠移植黑素瘤的疗效

目的：探讨次级淋巴组织趋化因子（seccondary lymphoid tissue chemokine, SLC）和CpG寡聚脱氧核苷酸（CpG oligodeoxynucleotide, CpGODN）联合应用对小鼠移植黑素瘤的治疗效果及其可能机制。方法：制备SLCFc融合蛋白,体外检测SLCFc对小鼠淋巴细胞的趋化效应。建立小鼠黑素瘤移植模型,随机分生理盐水对照组、CpGODN组、SLCFc组以及SLCFc+CpGODN组共4组。观察治疗后各组小鼠肿瘤的生长情况,流式细胞术检测移植瘤组织中淋巴细胞的种类和浸润情况。结果：成功制备SLCFc蛋白,SLCFc对小鼠淋巴细胞具有剂量依赖性（0.03、0.3和3 μg/L）趋化作用。瘤内注射SLCFc和(或)CpGODN明显抑制肿瘤的生长,联合治疗组瘤体明显小于对照组（P<0.01）,并且小鼠存活时间也明显延长。联合治疗组瘤体内CD4+、CD8+T淋巴细胞和CD11c+树突状细胞较对照组显著增多（P<0.05,P<0.01）,并且其肿瘤引流淋巴结也明显增大。结论：SLC和CpGODN联合应用对小鼠移植黑素瘤有抑制作用,其机制与趋化CD4+T、CD8+T细胞和促进DCs增殖有关。     

CpG ODN107增强人脑胶质瘤细胞放射敏感性的研究

目的探讨CpG ODN107增加人脑胶质瘤细胞(CHG-5)放射敏感性的作用及可能机制。方法用不同浓度CpG ODN107处理CHG-5细胞,然后经放射线照射,MTT法检测细胞的增殖情况,体外培养集落形成率与细胞划痕法观察细胞的集落形成和迁移能力,ELISA法检测细胞TNF-α的分泌水平。结果CpG ODN107抑制CHG-5细胞的增殖,并呈量效关系。CpG ODN107(10μg/mL)联合放射线照射,抑制CHG-5细胞的增殖作用最强(0.52±0.76)。CpG ODN107(10μg/mL)同样能抑制CHG-5细胞增殖和迁移,并且增加了TNF-α的分泌,在联合照射后作用更加显著(193±0.58)pg/mL。结论CpG ODN107对CHG-5有明显的放射增敏作用,其机制可能与CpG ODN107增强肿瘤细胞TNF-α的分泌有关。     

免疫佐剂研发和临床转化的现状与发展趋势

免疫佐剂是能增强或改变抗原特异性免疫应答从而辅助疫苗发挥作用的制剂。大多数人体自发性肿瘤的免疫原性较弱,而免疫佐剂具有增强肿瘤抗原免疫原性、促进抗原提呈以及诱导机体产生抗肿瘤免疫应答等特性,这对提高肿瘤生物治疗效果具有重要意义。根据功能与机制的不同,可将佐剂分为免疫调节分子类、抗原递送系统类、免疫调节与抗原递送联合类三大类型。目前已有铝盐、乳剂、病毒颗粒、霍乱肠毒素和CpG ODN等佐剂获得批准用于人类疫苗或进入临床试验阶段,但由于安全问题、不良反应等限制因素及新型现代疫苗迅猛发展的需要,研发能与疫苗安全高效配伍应用的新型佐剂成为免疫临床转化研究的热点之一。本文归纳了免疫佐剂特性及其相关作用机制,介绍了免疫佐剂研究与临床转化的现状及新进展,讨论了该领域面临的挑战和可能的发展趋势。