通肾络胶囊对糖尿病肾病大鼠肾脏蛋白激酶C通路及细胞外基质成分的影响

目的：观察中药通肾络胶囊对糖尿病肾病（DN）大鼠模型肾脏葡萄糖转运蛋白-1（GLUT-1）、蛋白激酶C（PKC）、细胞外基质（ECM）表达的影响,探讨通肾络胶囊对DN大鼠肾脏保护作用的可能机制。方法：采用单侧肾脏切除并腹腔注射链脲佐菌素（STZ）的方法复制DN大鼠模型,随机分为假手术组、模型组、缬沙坦组、糖适平组、通肾络胶囊组。动态检测各组大鼠空腹血糖（FBG）、24h尿微量白蛋白（24h mALB）,末次给药后测定大鼠血浆糖化血红蛋白（HblAc）、透射电镜观察各组大鼠肾脏超微结构改变,应用流式细胞仪技术测定各组大鼠肾脏组织GLUT-1的表达,应用免疫组化技术及图像采集分析系统测定各组大鼠肾脏组织中PKC、Ⅳ型胶原（Ⅳ-C）、纤维连接蛋白（FN）、层粘连蛋白（LN）的表达。结果：通肾络胶囊可降低DN大鼠FBG、HblAc、24h mALB（P〈0.05或P〈0.01）的水平,减轻肾小球基底膜（GBM）增厚程度,降低GLUT-1的表达,降低PKC的表达（P〈0.01,P〈0.05）,减少ECM成分的表达（P〈0.05或P〈0.01）。结论：通肾络胶囊可能通过降低GLUT-1的表达,抑制PKC通路激活,减少ECM成分的表达从而发挥对DN大鼠肾脏的保护作用。     

通肾络胶囊对糖尿病肾病大鼠肾脏蛋白激酶C通路及细胞外基质成分的影响

目的:观察中药通肾络胶囊对糖尿病肾病(DN)大鼠模型肾脏葡萄糖转运蛋白-l(GLUT-l)、蛋白激酶C(PKC)、细胞外基质(ECM)表达的影响,探讨通肾络胶囊对DN大鼠肾脏保护作用的可能机制。方法:采用单侧肾脏切除并腹腔注射链脲佐菌素(STZ)的方法复制DN大鼠模型,随机分为假手术组、模型组、缬沙坦组、糖适平组、通肾络胶囊组。动态检测各组大鼠空腹血糖(FBG)、24h尿微量白蛋白(24h mALB),末次给药后测定大鼠血浆糖化血红蛋白(Hb lAc)、透射电镜观察各组大鼠肾脏超微结构改变,应用流式细胞仪技术测定各组大鼠肾脏组织GLUT-l的表达,应用免疫组化技术及图像采集分析系统测定各组大鼠肾脏组织中PKC、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、纤维连接蛋白(FN)、层粘连蛋白(LN)的表达。结果:通肾络胶囊可降低DN大鼠FBG、Hb lAc、24h mALB(P<0.05或P<0.01)的水平,减轻肾小球基底膜(GBM)增厚程度,降低GLUT-l的表达,降低PKC的表达(P<0.01,P<0.05),减少ECM成分的表达(P<0.05或P<0.01)。结论:通肾络胶囊可能通过降低GLUT-1的表达,抑制PKC通路激活,减少ECM成分的表达从而发挥对DN大鼠肾脏的保护作用。     

通肾络胶囊对糖尿病肾病大鼠肾脏葡萄糖转运蛋白-1、转化生长因子及细胞外基质成分的影响

目的:探讨通肾络胶囊对DN大鼠肾脏保护作用的机制。方法:采用单侧肾脏切除并腹腔注射链脲佐菌素(STZ)的方法复制DN大鼠模型,随机分为假手术组、模型组、缬沙坦组、糖适平组、通肾络胶囊组。动态检测各组大鼠空腹血糖(FBG)、24h尿微量白蛋白(24hmALB),末次给药后测定大鼠血浆糖化血红蛋白(HblAc)、透射电镜观察各组大鼠肾脏超微结构改变,应用流式细胞仪技术测定各组大鼠肾脏组织葡萄糖转运蛋白-1(GLUT-1)的表达,应用免疫组化技术及图像采集分析系统测定各组大鼠肾脏组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)及转化生长因子βⅡ型受体(TβRⅡ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、纤维连接蛋白(FN)、层粘连蛋白(LN)的表达。结果:通肾络胶囊可降低DN大鼠FBG、HblAc、24hmALB(P<0.05或P<0.01)的水平,减轻肾小球基底膜(GBM)增厚程度,降低GLUT-1的表达,降低TGF-β1、TβRⅡ的表达(P<0.05或P<0.01),减少细胞外基质ECM成分的表达(P<0.05或P<0.01)。结论:通肾络胶囊可能通过降低GLUT-1、TGF-β1和TβRⅡ的表达,直接和间接地减少了ECM成分的表达从而发挥对DN大鼠肾脏的保护作用。     

消渴康对糠尿病肾病大鼠肾脏基质金属蛋白酶9与蛋白酶组织抑制剂1表达的影响

目的：观察消渴康对糖尿病肾病大鼠肾脏基质金属蛋白酶9（ matrix metalloproteinase-9,MMP-9）与金属蛋白酶组织抑制剂1（tissue inhibitor of metalloproteinases-1,TIMP-1）表达的影响。方法 SD大鼠单侧肾切除后2周,一次性腹腔注射链脲佐菌素（ streptozotocin,STZ）,72小时后血糖浓度≥16.7 mmol/L,尿糖定性〉＋＋＋,确定糖尿病肾病造模成功,随机分为模型、氯沙坦和消渴康大、中、小剂量治疗组,分别灌胃12周后,免疫组化法检测各组糖尿病肾病大鼠肾脏 MMP-9与TIMP-1表达情况。结果消渴康小剂量治疗组极显著增加糖尿病肾病大鼠肾组织MMP-9表达（ P〈0．01）,消渴康中、小剂量治疗组极显著降低糖尿病肾病大鼠肾组织TIMP-1表达（P〈0．01）。结论消渴康对糖尿病肾病大鼠肾脏异常细胞外基质（ extracellu-lar matrix,ECM）堆积具有一定促降解作用。     

通肾络胶囊对糖尿病肾病大鼠肾脏转化生长因子-β1及其Ⅱ型受体表达的影响

目的:观察中药通肾络胶囊对糖尿病肾病(DN)模型大鼠肾脏转化生长因子-β1(TGF-β1)及转化生长因子βⅡ型受体(TβRⅡ)表达的影响,探讨通肾络胶囊对DN大鼠肾脏保护作用的可能机制。方法:采用单侧肾脏切除并腹腔注射链脲佐菌素(STZ)的方法复制DN大鼠模型。50只大鼠随机分为5组:假手术组、模型组、缬沙坦组、糖适平组、通肾络胶囊组,每组10只。动态检测各组大鼠空腹血糖(FBG)、24h尿微量白蛋白(24h mALB),末次给药后测定大鼠血浆糖化血红蛋白(HblAc),计算肌酐清除率(Ccr),透射电镜观察各组大鼠肾脏超微结构改变,应用免疫组化技术及图像采集分析系统测定各组大鼠肾脏组织中TGF-β1和TβRⅡ的表达。结果:通肾络胶囊可显著降低DN大鼠FBG、HblAc、24h mALB的水平,延缓Ccr的下降,减轻肾小球基底膜(GBM)增厚程度,降低TGF-β1、TβRⅡ的表达。结论:通肾络胶囊可能通过降低TGF-β1、TβRⅡ的表达调节ECM代谢从而发挥对DN大鼠肾脏的保护作用。     

保肾方Ⅱ号对糖尿病肾病大鼠肾组织中MMP-2和TIMP-2表达的影响

目的研究保肾方Ⅱ号对糖尿病肾病大鼠细胞外基质（ECM）的影响。方法以40只大鼠由链脲佐菌素（STZ）诱导造成糖尿病模型，3d后随机分为5组，于第16周检测各组大鼠的有关指标，于16周采用免疫组织化学法检测肾皮质基质金属蛋白酶．2（MMP-2）、基质金属蛋白酶组织抑制因子-2（TIMP-2）的表达情况。结果保肾方Ⅱ号大剂量组MMP-2与TIMP-2的表达高于保肾方Ⅱ号小剂量组、洛汀新对照组、空白模型对照组，低于正常组。结论保肾方Ⅱ号对糖尿病肾病大鼠肾功能具有保护作用，可降低血糖，可上调肾组织MMP-2、TIMP-2的表达，调节MMP-2／TIMP-2的比例失衡，促进ECM成分的降解，减缓糖尿病肾病肾小球纤维化的进程。     

加味消渴康对糖尿病肾病大鼠MMP-9和TIMP-1表达的影响

观察加味消渴康对糖尿病肾病大鼠肾组织MMP-9和TIMP-1表达的影响。方法：采用单侧肾切除加链脲佐茵素诱导的DN大鼠模型。实验随机分为正常组、模型组、氯沙坦组以及加味消渴康大、中、小三个剂量组并给予药物干预。各组大鼠于第12周末处死取出肾脏,运用免疫组化法观察肾组织MMP-9和TIMP-1的表达。结果：与正常组相比,模型组MMP-9表达减弱;TIMP—l表达增强。氯沙坦组、加味消渴康三个剂量组MMP-9表达较模型组增强,积分光密度值升高;TIMP-1表达减弱,积分光密度值降低,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：加味消渴康对DN大鼠MMP-9和TIMP-1表达有-定的调节作用。     

通心络对自发性2型糖尿病KK-Ay小鼠肾功能及肾组织MMP-9、TIMP-1表达的影响

目的：观察通心络对自发性2型糖尿病KK-Ay小鼠肾功能及肾组织降解酶系MMP-9、TIMP-1及细胞外基质成分FN、ColⅣ表达的影响,探讨通心络防治DN的作用机制。方法：采用自发性2型糖尿病KK-Ay小鼠建立糖尿病肾病模型、随机分为模型组、通心络组、西药组各16只,设立C57BL/6J小鼠16只为空白组,予通心络及缬沙坦干预12周后,测定空腹血糖（FPG）、24h尿微量白蛋白排泄率（UAER）,糖化血红蛋白（HbA1c）、血清尿素氮（BUN）、血清肌酐（SCr）含量,采用WesternBlot及Realtime-PCR方法检测基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）蛋白及基因表达水平,采用免疫荧光方法检测纤维连接蛋白（FN）、Ⅳ胶原（Col-Ⅳ）蛋白表达水平。结果：与空白组比较,模型组小鼠24hUAER、BUN、SCr、FPG、HbA1c均明显升高（P〈0.05）,肾组织TIMP-1、FN、ColⅣ表达明显升高、MMP-9表达明显降低（P〈0.05）;与模型组比较,经通心络及缬沙坦干预后FPG及HbA1c无明显变化（P〉0.05）,24hUAER、BUN、SCr显著降低,肾组织TIMP-1、FN、ColⅣ表达降低、MMP-9表达升高（P〈0.05）。结论：通心络可降低自发性2型糖尿病KK-Ay小鼠尿白蛋白、保护肾功能,调控降解酶系MMP-9/TIMP-1表达抑制细胞外基质沉积是其作用机制之一。     

保肾方Ⅱ号对糖尿病肾病大鼠肾组织中MMP-2和TIMP-2表达的影响

目的 研究保肾方Ⅱ号对糖尿病肾病大鼠细胞外基质(ECM)的影响.方法 以40只大鼠由链脲佐菌素(STZ)诱导造成糖尿病模型,3 d后随机分为5组,于第16周检测各组大鼠的有关指标,于16周采用免疫组织化学法检测肾皮质基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)的表达情况.结果 保肾方Ⅱ号大剂量组MMP-2与TIMP-2的表达高于保肾方Ⅱ号小剂量组、洛汀新对照组、空白模型对照组,低于正常组.结论 保肾方Ⅱ号对糖尿病肾病大鼠肾功能具有保护作用,可降低血糖,可上调肾组织MMP-2、TIMP-2的表达,调节MMP-2/TIMP-2的比例失衡,促进ECM成分的降解,减缓糖尿病肾病肾小球纤维化的进程.     

疏肝健脾汤对肝纤维化大鼠基质金属2、TIMP-2影响的研究

目的：通过对肝纤维化大鼠基质金属蛋白酶及其抑制剂表达的影响,探讨疏肝健脾汤防治肝纤维化的机制。方法：雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、秋水仙碱预防组、秋水仙碱治疗组、疏肝健脾汤预防组、疏肝健脾汤治疗组,用猪血清诱导免疫损伤性肝纤维化模型,给予疏肝健脾汤进行防治,采用免疫组化方法,观测基质金属蛋白酶（MMP-2）及其抑制因子（TIMP-2）在各组大鼠肝脏组织中的表达。结果：模型组MMP-2较正常组有显著性差异（P〈0.05）,疏肝健脾汤各组MMP-2的表达较模型组有所降低（P〈0.05）,但高于正常组（P〈0.05）,低于秋水仙碱组（P〈0.05）;TIMP-2在模型组表达高于正常组（P〈0.05）,疏肝健脾汤各组表达低于模型组、秋水仙碱组,均有显著统计学意义（P〈0.05）。结论：疏肝健脾汤明显抑制MMP-2、TIMP-2的表达,提示疏肝健脾汤能够调节基质金属蛋白酶及其抑制因子的表达,促进细胞外基质的降解,从而实现对肝纤维化的防治作用。     

糖肾灵联合替米沙坦治疗早期糖尿病肾病的临床研究

目的观察糖肾灵联合替米沙坦对早期糖尿病肾病（DN）的作用效果并研究其可能的机制.方法将81例早期DN患者随机分为对照组（40例）和治疗组（41例）,对照组为常规西药和替米沙坦治疗,治疗组在此基础上加用糖肾灵.比较两组症状改善、尿白蛋白排泄率（UAER）、尿组织转化生长因子β1（TGF-β1）、尿视黄醇结合蛋白（RBP）和尿β2微球蛋白（β2-MG）、空腹血糖（FBG）、血肌酐、血脂、血浆心钠肽（ANP）、血Ⅳ型胶原（Col-Ⅳ）和TGF-β1水平的改变.结果两组在治疗前各项指标差异无显著性;经过8周的治疗后,治疗组各种症状改善率明显高于对照组（P＜0.05或P＜0.01）;两组UAER、TC、TG、血Col-Ⅳ、血TGF-β1、尿RBP、尿β2-MG、尿TGF-β1和血压较治疗前均有明显下降（P＜0.05或P＜0.01）,UAER、TC、TG、血Col-Ⅳ、血TGF-β1、尿RBP、尿β2-MG、尿TGF-β1治疗组较对照组下降更明显（P＜0.05）;FBG、SCr、血压治疗组较对照组稍低,但差异无显著性（P＞0.05）;治疗后治疗组血ANP较治疗前明显降低（P＜0.01）.结论糖肾灵联合常规西药及替米沙坦治疗早期DN疗效比常规西药联用替米沙坦好,其机理可能与降低ANP、TGF-β1,改善脂质代谢和肾小管间质病变等有关.     

苦瓜提纯液对糖尿病肾病大鼠肾脏MMP-9、TIMP-1 mRNA表达的影响

目的探讨苦瓜对糖尿病肾病大鼠细胞外基质及基质金属蛋白酶9（MMP-9）、组织抑制剂1（TIMP-1）基因表达的影响。方法将60例Wistar雄性大鼠随机分为对照组、模型组、苦瓜组及洛汀新组，采用链脲佐菌素一次性腹腔内注射法诱导糖尿病模型，造模1、5周测定各组24h尿蛋白、肾功能及血糖，5周后取各组肾组织用RT—PCR技术检测MMP-9、TIMP-1的基因表达。结果模型组较对照组肾小球MMP-9、TIMP-1 mRNA表达增加，反映肾功能的各项生化指标水平升高。苦瓜组、洛汀新组较模型组MMP-9、TIMP-1 mRNA表达减少，肾功能有所改善。结论苦瓜对糖尿病大鼠肾结构功能具有保护作用，除降低血糖外，调节肾小球MMP-9、TIMP-1表达从而减轻肾小球细胞外基质沉积也可能是其作用途径之一。     

益气养阴化浊通络方对早期糖尿病肾病患者 TGF-β1,MMP-9,TIMP-1表达的影响

目的:探讨益气养阴化浊通络方对早期糖尿病肾病(DN)患者血清转化生长因子β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶-9 (MMP-9)、组织型金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)表达水平的影响.方法:63例早期DN患者随机分组,对照组(31例)采用DN常规治疗,治疗组(32例)在常规治疗基础上加用益气养阴化浊通络方,疗程3个月.采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定两组患者治疗前后血清TGF-β1,MMP-9,TIMP-1水平,同时观察β2-微球蛋白(β2-MG)、尿微量白蛋白排泄率(UAER)的变化.结果:与治疗前比较,两组患者治疗后TGF-β1,TIMP-1水平下降(P＜0.05,P＜0.01),MMP-9水平、MMP/TIMP-1比值升高(P ＜0.05,P＜0.01),β2-MG,UAER指标改善(P ＜0.05,P＜0.01).同时治疗组治疗后TGF-β1,MMP-9,TIMP-1及Ⅳ型胶原水平改善优于对照组(P＜0.05,P＜0.01).结论:益气养阴化浊通络方可能是通过改善血清TGF-β 1,MMP-9,TIMP-1水平而影响细胞外基质(ECM)代谢调控系统,延缓DN的进展.     

基于转录组测序技术探讨活血降糖饮干预糖尿病肾病的机制

目的:探讨活血降糖饮治疗糖尿病肾病的分子机制。方法:通过高脂饲料喂养加尾静脉注射链脉佐菌素(STZ)等建立糖尿病肾病大鼠模型,并将模型大鼠随机分为糖尿病肾病(DN)组、模型+双胍+中药组(DN+Met+ZY)、模型+双胍+卡托普利组(DN+Met+CP),给予相应药物进行灌胃治疗,并另设正常对照组,每组10只,干预16周后,观察各组大鼠空腹血糖(FBG)、血脂、血清尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、24 h尿总蛋白(24 h UTP)及尿微量清蛋白(24 h mALB)的变化。观察肾组织病理改变,并对各组肾组织进行RNA-seq测序。结果:与模型组比较,中药组和卡托普利组可以显著下调糖尿病肾病大鼠FBG、TC、TG、LDL-C、Scr、BUN、24 h UTP、24 h mALB等水平,而HDL-C无明显变化;与卡托普利组之间比较,中药组FBG、TC、TG、LDL-C明显下降,HDL-c、Scr、BUN、24 h UTP、24 h mALB均无明显差别。与模型组比较,中药组和卡托普利组均可以显著改善糖尿病肾病大鼠的肾脏病理学变化。转录组测序结果显示模型组对比正常组与中药组对比模型组转录本中基因总量接近,其中表达差异最明显的双向调控基因共筛选出10个;京都基因与基因组百科全书(KEGG)前20条显著富集通路分析显示模型组对比正常组与中药组对比模型组共同作用的信号通路有代谢相关通路及cAMP信号通路。结论:活血降糖饮联合二甲双胍能改善糖尿病肾病大鼠的糖脂代谢紊乱,减少尿白蛋白的排泄,改善肾功能和肾脏病理改变,延缓糖尿病肾病病情进展,其作用机制可能是通过Cftr、Pdk4、Angptl4、Hmgcs2等多靶点介导多通路实现的。     

黄芪甲甙对慢性心肌炎心肌纤维化的影响

目的 探讨中药黄芪的活性成分黄芪甲甙对慢性心肌炎心肌纤维化的影响及其相关机制.方法 80只Balb/c小鼠随机分为3组,分别为空白对照组（对照组,20只）、慢性心肌炎组（模型组,30只）和黄芪甲甙干预心肌炎组（干预组,30只）.模型组和干预组小鼠每月1次腹腔接种柯萨奇病毒B3（CVB3）,对照组腹腔注射等量病毒培养液.对照组和模型组小鼠每日以饮用水喂养,干预组小鼠以加有羧甲基纤维素钠助溶的黄芪甲甙饮用水（浓度300 mg/L）喂养.3个月后处死所有存活小鼠,小鼠心脏组织经苦味酸天狼星红染色后以自动图像分析系统计算胶原容积积分（CVF）,以Western blot方法检测各组小鼠心脏组织中转化生长因子β1（TGF-β1）、血小板衍生生长因子BB（PDGF-BB）、基质金属蛋白酶1（MMP-1）及其组织抑制物（TIMP-1）、MMP-13和MMP-14的表达情况.结果 黄芪甲甙干预后,与模型组比较,小鼠死亡率降低（53.3%、23.3%,χ^2=4.23,P＜0.05）、心脏CVF明显下降[模型组为（17.4±1.2）%、干预组为（8.6±0.9）%,χ^2=5.38,P＜0.05];与对照组比较,TGF-β1、MMP-1和TIMP-1表达减少而MMP-13和MMP-14的表达增多.结论 黄芪甲甙可以降低慢性心肌炎小鼠死亡率、减轻其心肌纤维化,其抗纤维化作用是通过抑制TGF-β1、促进MMP-13和MMP-14在心脏中的表达而实现.     

加味消渴康对糖尿病肾病大鼠肝组织细胞外基质相关调节因子表达的影响

目的基于中医＂肝肾同源＂理论,观察加味消渴康对糖尿病肾病大鼠肝组织转化生长因子β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）,Smad-4蛋白（drosophila mothers against decapentaplegic protein-4）,基质金属蛋白酶9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9）和金属蛋白酶组织抑制剂1（tissue inhibitor of metalloproteinases-1,TIMP-1）表达的影响。方法采用单侧肾切除加链脲佐菌素诱导的糖尿病肾病模型,将造模成功后的50只糖尿病肾病大鼠随机分为模型组、西药组和中药小、中、大剂量组,每组10只,另选取10只正常大鼠作为正常对照。其中西药组予氯沙坦（5.2 mg/kg·d）灌胃,中药组予加味消渴康灌胃（小、中、大剂量分别为13.125 g/kg·d,26.25 g/kg·d和52.5 g/kg·d）,正常组及模型组每日灌服2 ml蒸馏水,共灌胃12周。各组大鼠于第12周末处死取出肝脏,运用ELisa法观察大鼠肝组织TGFβ1、Smad-4、MMP-9和TIMP-1的表达。结果与正常组相比,各组大鼠肝中TGF-β1,Smad-4和TIMP-1表达明显升高,而MMP-9的表达明显降低,差异具有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）,中药治疗后,各组大鼠TGF-β1,Smad-4的表达与模型组相比明显降低,差异具有统计学意义（P〈0.01）,而TIMP-1和MMP-9的表达则分别具有降低和升高的趋势。结论加味消渴康对DN大鼠的肝损伤具有一定的保护作用。     

中药对肾小球硬化大鼠MMP-9、TIMP-1及TGF-β1mRNA表达的影响

目的 探讨肾络癥积中药复方对肾小球硬化大鼠细胞外基质降解调控系统MMP-9、TIMP-1及TGF-β1mRNA的影响.方法 采用切除单侧肾脏同时尾静脉注射阿霉素的方法,建立肾小球硬化大鼠模型,检测各组大鼠24小时尿蛋白定量,ELISA法检测基质金属蛋白酶(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制物(TIMP-1)的表达,计算M...