胃旁路术治疗2型糖尿病的作用机制

目的 探讨胃旁路术治疗2型糖尿病大鼠的作用机制.方法 将72只8周龄的GK大鼠按照随机数字表法分为手术组、假手术组、饮食控制组和对照组,每组18只.手术组大鼠施行胃旁路术,假手术组大鼠施行离断胃窦十二指肠原位吻合术,饮食控制组大鼠按15 g/d控制每只大鼠进食量,对照组大鼠自由进食.术前、术后第2、4、8周检测各组大鼠空腹、餐后血糖和胰高血糖素样肽-1(GLP-1).术后第2、4、8周检测各组大鼠餐后血糖和GLP-1后处死大鼠(每组6只),取出胰腺组织采用TUNEL法检测胰岛β细胞凋亡情况.采用t检验分析数据.结果 手术组大鼠术前空腹和餐后血糖分别为(16.2±0.8)mmol/L和(31.1±1.1)mmol/L,术后第4、8周逐渐降低为(9.2±0.6)mmol/L和(13.1±0.7)mmol/L、(9.7±0.7)mmol/L和(12.3±0.7)mmol/L,手术前后比较,差异有统计学意义(t=20.7、49.7,18.8、39.0,P<0.05).手术组大鼠术后第4、8周空腹和餐后血糖水平明显低于同时相点的假手术组、饮食控制组和对照组(t=27.7、-57.8,11.3、-59.9,-27.4、-48.2,-13.2、-52.7,-7.0、-24.9,-18.2、-56.4,P<0.05).手术组大鼠术前空腹和餐后GLP-1分别为(10.7±1.0)pmol/L和(42.5±1.2)pmol/L,术后第4、8周逐渐升高为(26.1±0.9)pmol/L和(90.7±1.7)pmol/L、(25.3±1.2)pmol/L和(90.4±2.0)pmol/L,手术前后比较,差异有统计学意义(t=-42.1、-92.4,-29.1、-72.7,P<0.05).手术组大鼠术后第4、8周空腹和餐后GLP-1水平明显高于同时相点的假手术组、饮食控制组和对照组(t=48.0、61.9,38.0、62.2,50.9、65.2,37.0、48.1,27.5、51.6,17.5,52.9,P<0.05).手术组大鼠胰岛随着术后时间的延长,凋亡细胞数逐渐减少,细胞凋亡率明显降低.手术组、假手术组、饮食控制组和对照组术后第4、8周细胞凋亡率分别为5.9%±0.7%、47.2%±1.0%、21.1%±1.2%、46.5%±1.4%和6.3%±1.1%、47.2%±1.0%、21.2%±1.2%、46.0%±1.4%,手术组细胞凋亡率较同时相点的假手术组、饮食控制组、对照组明显降低(t=-82.2、-67.0,-27.1、-22.4,-55.2、-54.6,P<0.05).结论 胃旁路手术后2型糖尿病大鼠血糖降低,GLP-1分泌明显增加,可以显著抑制胰岛β细胞凋亡.

Abstract：

Objective To investigate the mechanism of gastric bypass surgery in the treatment of type 2 diabetes mellitus in a rat model. Methods Seventy-two 8-week-old GK rats were randomly divided into operation group, sham operation group, diet control group and control group (18 rats in each group) according to the random number table. Rats in the operation group and the sham operation group received gastric bypass surgery and transection and reanastomosis of the gastrointestinal tract, respectively. The food intake was set as 15 g/d for each rat in the diet control group, while rats in the control group were fed ad libitum. The levels of fasting blood glucose ( FBG), postprandial blood glucose (PPBG) and glucagon-like peptide-1 (GLP-1) were detected before operation and at postoperative week 2, 4 and 8. The levels of PPBG and GLP-1 were detected at postoperative week 2, 4 and 8, then 6 rats of each group were sacrificed to detect the apoptosis of islet B cells using the TUNEL method. All data were analyzed using the t test. Results In the operation group, the preoperative levels of FBG and PPBG were (16.2±0.8)mmol/L and (31.1 ± 1. L)mmol/L, respectively, which were significantly higher than (9.2± 0.6) mmol/L and (13.1 ±0.7) mmol/L at 4 weeks after the operation, and (9. 7 ± 0. 7) mmol/L and (12. 3 ± 0.7) mmol/L at 8 weeks after the operation (t = 20. 7, 49. 7; 18. 8, 39. 0, P < 0.05 ). The levels of FBG and PPBG before the operation and at 4 and 8 weeks after the operation in the operation group were significantly lower than those in the sham operation group, diet control group and control group at corresponding time points (t = 27.7, -57.8; 11.3, -59.9; -27.4, -48.2; -13.2, -52.7; -7.0, -24.9; -18.2, -56.4, P<0.05). In the operation group, the levels of fasting GLP-1 and postprandial GLP-1 were ( 10. 7 ± 1. 0) pmol/L and (42.5 ±1.2)pmol/L, respectively, which were significantly lower than (26. 1 ±0.9)pmol/L and (90.7 ± 1.7)pmol/L at4 weeks after the operation, and (25.3 ± 1.2)pmol/L and (90.4 ±2.0)pmol/L at 8 weeks after the operation (t=42.1, -92.4; -29.1, -72.7, P <0.05). The levels of fasting GLP-1 and postprandial GLP-1 before the operation and at 4 and 8 weeks after the peration in the operation group were significantly higher than those in the sham operation group, diet control group and control group at corresponding time points (t = 48.0, 61.9; 38.0, 62.2; 50.9, 65.2; 37.0, 48. 1; 27.5, 51.6; 17.5, 52.9, P<0.05). The number of the apoptotic islet β cells in the operation group was decreased with time. The apoptosis rates in the operation group, sham operation group, diet control group and control group were 5.9%±0.7% , 47.2%± 1.0% , 21. 1%± 1. 2% , 46.5%±1.4% at 4 weeks after the operation, and 6.3%±1. 1% , 47.2%±1.0% , 21.2%±1.2% and 46.0% ± 1.4% at 8 weeks after the operation. The apoptosis rates in the operation group were significantly lower than those in the sham operation group, diet control group and control group at corresponding time points (t = -82. 2, - 67. 0; - 27. 1, - 22. 4; - 55. 2, - 54. 6, P < 0.05). Conclusion After gastric bypass surgery, the level of blood glucose reduces and the level of GLP-1 increases which significantly inhibit the apoptosis of islet B cells in rats with type 2 diabetes mellitus.     

达芬奇机器人手术系统与腹腔镜及开腹胃癌根治术腹腔冲洗液癌胚抗原和多巴脱羧酶的变化

目的 探讨达芬奇机器人手术系统、腹腔镜及开腹胃癌根治术腹腔冲洗液CEA和多巴脱羧酶（DDC）的变化.方法 回顾性分析2013年1月至2014年3月第三军医大学西南医院收治的126例行胃癌根治术患者的临床资料,其中行达芬奇机器人手术系统胃癌根治术、腹腔镜胃癌根治术、开腹胃癌根治术者各42例,设为机器人手术组、腹腔镜手术组和开腹手术组.收集患者手术前后腹腔冲洗液,采用ELISA法检测CEA和DDC浓度.计量资料采用配对t检验及方差分析,多重比较采用LSD法,计数资料采用x2检验及非参数检验.结果 机器人手术组、腹腔镜手术组和开腹手术组患者术前腹腔冲洗液中CEA浓度分别为（242±189） μg/L、（221±174） μg/L和（257±135） iμg/L,术后CEA浓度分别为（1 262 ±785） μg/L、（1 172 ±699） μg/L和（2 996±1 947） μg/L;3组患者术前腹腔冲洗液中DDC浓度分别为（8±5） μg/L、（7±4） μg/L和（8±6） μg/L,术后DDC浓度分别为（87±55） μg/L、（81 ±52） μg/L和（146±135） lμg/L.3组患者术前CEA与DDC浓度比较,差异无统计学意义（F =0.491,0.161,P＞0.05）;3组患者术后CEA与DDC浓度比较,差异有统计学意义（F =27.214,6.865,P＜0.05）.两两比较术后CEA与DDC浓度发现：开腹手术组较腹腔镜及机器人组明显升高（P＜0.05）,而腹腔镜手术组与机器人手术组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）.分析同种手术方式手术前后腹腔冲洗液中CEA和DDC浓度：3组术后CEA和DDC浓度均较术前显著增高,差异有统计学意义（t=-11.053、-11.700、-9.780,-10.261、-9.955、-6.969,P＜0.05）.结论 达芬奇机器人手术系统胃癌根治术与腹腔镜胃癌根治术比较,术后腹腔冲洗液中CEA和DDC浓度差异无统计学意义,但均明显低于开腹胃癌根治术,对于防止CEA和DDC介导的胃癌腹腔转移可能有一定作用.     

Roux-en-Y胃旁路术对2型糖尿病大鼠肝脏胆汁酸信号及糖异生的影响

目的探讨Roux-en-Y胃旁路术(RYGB)对2型糖尿病(T2DM)大鼠肝脏胆汁酸信号及糖异生的影响。方法将16只健康雄性Sprague-Dawley大鼠通过高脂饲料喂养并腹腔注射链脲佐菌素诱导T2DM,随机数字表法分为假手术组(n=8)和手术组(n=8)。手术组行RYGB术,假手术组在与手术组相同位置行胃肠横断并原位吻合。术前及术后第1、2、4、6、8周测各组摄食量和空腹血糖;术前、术后2、8周行口服葡萄糖耐量试验(OGTT)及胰岛素敏感试验(ITT);术后8周留取空腹血清检测总胆汁酸水平,留取肝脏组织用反转录聚合酶链反应检测法尼醇X受体(FXR)、小异二聚体伴侣(SHP)、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)和葡萄糖-6-磷酸酶(G6Pase)mRNA表达水平,应用SPSS 20.0软件进行统计分析,组间比较采用t检验。结果手术组术后第4、6、8周摄食量[(18±2)、(19±3)、(20±4)g/d]显著低于假手术组[(24±3)、(28±4)、(26±3)g/d],手术组术后第2、4、6、8周空腹血糖[(6.9±0.9)、(6.0±1.1)、(6.4±0.8)、(6.8±0.7)mmol/L]显著低于假手术组[(12.9±1.4)、(10.8±0.8)、(9.4±1.1)、(9.0±1.0)mmol/L],差异有统计学意义(t=4.707、5.091、3.394、9.209、9.982、6.239、5.098,P<0.05);术后2周,手术组OGTT、ITT曲线下面积[(898±118)、(428±85)mmol/(L·min)]显著低于假手术组[(1508±108)、(788±98)mmol/(L·min)],术后8周,手术组OGTT、ITT曲线下面积[(975±102)、(455±76)mmol/(L·min)]显著低于假手术组[(1575±96)、(775±86)mmol/(L·min)],差异有统计学意义(t=10.790、7.849、12.120、7.886,P<0.05);术后8周,手术组大鼠血清总胆汁酸[(105.17±14.81)μmol/L]显著高于假手术组[(68.87±10.81)μmol/L],差异有统计学意义(t=5.600,P<0.05);手术组与假手术组比较,肝脏FXR和SHP mRNA的表达显著上调(1.67±0.31比1.17±0.11、2.37±0.21比1.33±0.18),PEPCK和G6Pase mRNA的表达显著下调(0.77±0.12比1.15±0.14、0.87±0.08比1.05±0.10),差异有统计学意义(t=4.299、10.640、5.829、3.976,P<0.05)。结论RYGB术改善T2DM大鼠糖代谢的作用机制可能与术后肝脏胆汁酸信号上调进而抑制糖异生有关。     

胃旁路术对糖尿病大鼠胰岛β细胞凋亡的影响及其机制研究

目的 研究胃旁路手术对非肥胖2型糖尿病大鼠胰岛β细胞凋亡的影响及其机制.方法 将72只8周龄的GK大鼠随机分为手术组(O组,18只)、假手术组(S组,18只)、饮食控制组(F组,18只)和对照组(C组,18只),术前和术后1、2、4、8周检测比较空腹、餐后血糖、胰岛素和胰高血糖素样肽-1(GLP-1)水平.术后2、4、8周取血测餐后血糖后,分批随机处死大鼠,每批每组处死6只,大鼠处死后分离胰腺并取出待用.原位末端标记法检测胰岛β细胞凋亡;免疫组化方法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达.结果 O组术后第4周空腹血糖由术前的(16.2 ±0.8)mmol/L下降到(9.2±0.6)mmol/L,术后第8周血糖为(9.7±0.7)mmoL/L;术后第4周餐后血糖由术前的(31.1±1.1)mmoi/L降至(13.1±0.7)mmol/L,术后第8周为(12.3 ±0.7)mmol/L;术后第4周空腹血清胰岛素水平由术前的(28.0±1.2)mU/L升至(62.8±1.9)mU/L,术后第8周为(61.7±1.4)mU/L,术后第4、8周餐后血清胰岛素水平分别为(77.4±1.1)mU/L、(77.1±1.0)mU/L;术后第2周空腹GLP-1由术前的(10.7±1.0)pmol/L升至(13.5±0.8)pmol/L,至术后第4、8周分别为(26.1±0.9)pmol/L、(25.3±1.2)pmol/L;O组各测量值术后各时相点与术前比较差异均有统计学意义(P＜0.05),与其他组比较差异亦有统计学意义(P＜0.05).O组大鼠胰岛细胞凋亡率术后4周下降至(5.9 ±0.7)%,术后8周凋亡率为(6.3±1.1)%,差异有统计学意义(P＜0.05).O组Bcl-2蛋白表达术后2、4、8周表达量分别为31.3±1.5、35.7±1.0和35.8 ±0.8,明显高于同时间点的其他3组,差异有统计学意义(P＜0.05);Bax蛋白术后2、4、8周表达量分别为13.3±0.9、10.8 ±0.9和10.9±1.1,明显低于相同时间点的其他3组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 胃旁路手术可显著降低糖尿病大鼠血糖,促进GLP-1分泌,从而调节Bcl-2通路,显著抑制胰岛β细胞凋亡,保护胰岛B细胞.     

8％乳化异氟醚预处理对缺血／再灌注损伤大鼠肾脏氧化应激反应的影响

目的 观察8％乳化异氟醚（emulsified isoflurane,EI）预处理对缺血/再灌注损伤（ischemia/reperfusion injury,I/RI）大鼠肾脏氧化应激反应的影响.方法 健康雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠32只,右肾切除后采用随机数字表法分为4组（每组8只）：假手术组（Sham组,仅分离左侧肾蒂,不阻断肾血流）、肾脏I/RI组（夹闭左侧肾蒂45 min后恢复再灌注）、EI预处理组（静脉泵注8％ EI 4 ml·kg-1h-130 min,停药15 min后夹闭左侧肾蒂,余同I/RI组）、脂肪方乳剂（lipid emulsion,LE）预处理组（静脉泵注30％ LE 4 ml· kg-1·h-1 30 min,停药15 min后夹闭左侧肾蒂,余同I/RI组）.于肾脏再灌注3h时采集腹主动脉血测血清肌酐（creatinine,Cr）、尿素氮（blood urea nitrogen,BUN）;取肾组织测超氧化物歧化酶活性及丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量,光镜下观察肾脏病理学变化,并行肾小管Paller评分.采用黄嘌呤氧化酶法测定肾组织总超氧化物歧化酶活性,采用硫代巴比妥酸法测定肾组织MDA含量.结果 各组大鼠血清Cr、BUN、肾组织MDA含量及肾小管Paller评分：I/RI组[Cr（98±7） μmol/L,BUN（14.5±4.7） mmol/L,MDA（2.05±0.31） μmol/g,Paller（33.5±5.6）分]、EI组[Cr（62±6） μmol/L,BUN（9.3±2.3） mmol/L,MDA（1.61 ±0.28） μmol/g,Paller（18.5±4.5）分]、LE组[Cr（94±15） μmol/L,BUN（13.9±4.5） mmol/L,MDA（1.91±0.35） μmol/g,Paller（32.2±3.8）分]与Sham组[Cr（24±6）μmol/L,BUN（6.5±1.6） mmol/L,MDA（1.32±0.19） μmol/g,Paller（1.6±0.9）分]比较,显著升高（P＜0.05）;肾组织超氧化物歧化酶活性：I/RI组[（78±12）×10^3 U/g]、EI组[（97±7）×10^3 U/g]、LE组[（79±13）×10^3 U/g]与Sham组[（117±10）×10^3 U/g]比较,显著降低（P＜0.05）.分别与I/RI组和LE组比较,EI组血清Cr、BUN、肾组织MDA含量及肾小管Paller评分均降低（P＜0.05）,肾组织超氧化物歧化酶活性均升高（P＜0.05）.I/RI组和LE组上述各指标     

Roux—en—Y胃旁路术对2型糖尿病大鼠肾功能的影响

目的探讨Roux—en—Y胃旁路术对2型糖尿病大鼠肾功能的影响。方法采用高脂高糖饮食联合腹腔注射小剂量链脲佐菌素（streptozocin,STZ,35肛∥g）方法建立2型糖尿病大鼠模型。将造模成功的糖尿病SD大鼠分为3组：糖尿病组（8只）,假手术组（8只）,手术组（14只）;另取正常SD大鼠作为正常组（8只）。术前、术后8周检测大鼠空腹血糖,术前及术后4、8周测定血清BUN、Cr;术后8周取肾组织进行病理组织学观察,计算肾脏质量指数;免疫组织化学染色方法检测肾组织纤连蛋白、Ⅳ型胶原和TGF—B1的表达,采用Real—timePCR和Westernblot检测MMP-2、MMP-9mRNA和蛋白的表达。多组比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD检验。结果术后8周,糖尿病组大鼠血糖、BUN、Cr、肾脏质量指数分别为（15．9±1．6）mmol／L、（9．24-0．6）mmol／L、（44±4）~mol／L、（10．7±1．5）mg／g,手术组大鼠分别为（5．9±0．7）mmol／L、（6．64-0．4）mmol／L、（304-2）~mol／L、（8．6±0．6）mg／g,两组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。与正常组比较,糖尿病组、假手术组大鼠肾小球体积增大,系膜增生;手术组有明显改善。正常组大鼠肾脏皮质纤连蛋白、Ⅳ型胶原、TGF—B1免疫组织化学染色积分光密度值、MMP-2、MMP-9mRNA和蛋白的表达水平分别为664±23、864-5、524-6、1．00-4-0．04、644-4、1．004-0．20、48±5,糖尿病组大鼠分别为16654-44、7894-66、4594-35、0．52±0．13、514-6、0．364-0．05、384-4,假手术组大鼠分别为1701±55、7544-49、4254-42、0．544-0．19、484-5、0．434-0．09、394-4,手术组大鼠分别为11054-61、1954-11、1474-16、1．53±0．29、634-5、1．114-0．14、49-4-5,4组比较,差异均有统计学意义（F=1340．30,4982．50,2025．10,654．19,13．58,610．74,7．86,P〈0．05）。两两比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论Roux—eFl—Y胃旁路术可改善糖尿病大鼠肾功能,减少细胞外基质沉积,其作用机制可能与抑制TGF-β1表达和上调MMP-2、MMP-9mRNA和蛋白水平有关。     

罗格列酮对高糖环境中大鼠系膜细胞活性氧及单核细胞化学吸引蛋白质1的抑制作用

目的 观察罗格列酮对高糖培养基中大鼠系膜细胞活性氧（ROS）及单核细胞化学吸引蛋白质1（MCP-1）mRNA、蛋白表达的抑制作用,并探讨相关机制。 方法 将培养的大鼠系膜细胞分为以下6组：对照组（C组,普通MEM培养基,含5.6 mmol/L葡萄糖）、甘露醇组（M组,24.2 mmol/L甘露醇＋C组）、高糖组（H组,30 mmol/L高糖MEM培养基）、小剂量罗格列酮干预组（R1组,H组＋10 μmol/L罗格列酮）、大剂量罗格列酮干预组（R2组,H组＋20 μmol/L罗格列酮）、N-乙酰半胱氨酸（NAC）干预组（N组,H组＋5 mmol/L NAC）。采用激光共聚焦法检测ROS水平,分别采用RT-PCR和ELISA法检测MCP-1 mRNA及蛋白含量。 结果 C组和M组间ROS、MCP-1的表达差异无统计学意义,H组ROS水平较C组增高4.1倍（P < 0.01）,分别采用罗格列酮（20 μmol/L）和NAC干预后,ROS水平显著降低（P < 0.01）;罗格列酮（20 μmol/L）和NAC均可显著抑制高糖环境中MCP-1 mRNA的高表达（P < 0.01）。H组中MCP-1蛋白水平[（940.9±20.3） ng/L]显著高于C组[（403.0±8.1） ng/L]（P < 0.01）,而R2组和N组的MCP-1蛋白水平[（562.5±15.3） ng/L,（539.8±8.3） ng/L]显著低于H组（P < 0.01）。 结论 罗格列酮可通过减少ROS而降低高糖所诱导的MCP-1表达,而这可能是罗格列酮发挥直接肾脏保护作用的机制之一。     

甲状腺激素对脓毒症大鼠肠屏障功能的影响

目的探讨补充甲状腺激素对脓毒症大鼠肠屏障功能的影响。方法将22只雄性SD大鼠随机分成3组:假手术组、脓毒症组、三碘甲状腺原氨酸(T3)干预组。制作盲肠结扎打孔(CLP)的脓毒症模型,应用荧光光谱分析仪检测自肠腔进入门静脉的荧光标记葡聚糖(FITC-D)的浓度,用透射电镜观察黏膜细胞间隙FITC-D颗粒的量。结果CLP后21h,假手术组血游离T3(FT3)、游离甲状腺素(FT4)浓度分别为(3.44±1.40)pmol/L和(9.53±3.39)pmol/L,脓毒症组为(1.59±0.20)pmol/L和(3.41±2.14)pmol/L,明显低于假手术组(P<0.05),干预组FT3浓度为(3.40±1.65)pmol/L,明显高于脓毒症组(P<0.05)。假手术组门静脉FITC-D浓度(0.84±0.15)μg/ml,脓毒症组为(1.73±0.39)μg/ml,高于假手术组(P<0.01),T3干预组(1.16±0.26)μg/ml,明显低于脓毒症组(P<0.01)。电镜显示T3干预后的肠黏膜细胞间隙及毛细血管的FITC-D颗粒明显减少。结论外源性甲状腺激素可降低大鼠肠黏膜的通透性,对脓毒症时肠黏膜屏障功能具有保护作用。     

低分子右旋糖酐铁和蔗糖铁对慢性肾衰竭大鼠氧化应激的影响

目的 评价小剂量反复多次低分子右旋糖酐铁和蔗糖铁静脉用药后对慢性肾衰竭大鼠氧化应激的影响。 方法 以5/6肾大部切除术建立慢性肾衰竭大鼠模型。右肾切除术后第4周,将实验大鼠分为4组：低分子右旋糖酐铁（糖酐铁）组、蔗糖铁组、对照组、假手术组。观察6周,检测各组大鼠体内氧化应激、铁代谢等指标。 结果 糖酐铁组和蔗糖铁组大鼠血红蛋白明显高于对照组（P < 0.05）,而两铁剂组间差异无统计学意义。对照组大鼠的血清铁、血清铁蛋白、转铁蛋白饱和度显著低于假手术组（P < 0.05）;两铁剂组大鼠上述指标均显著高于对照组（P < 0.05）,而两铁剂组间差异无统计学意义。糖酐铁组和蔗糖铁组血浆晚期氧化蛋白产物（AOPP）显著高于对照组[（127.84±21.19） μmol/L、（134.21±29.38） μmol/L比 （81.83±19.93） μmol/L,P < 0.05],而两铁剂组间差异无统计学意义。两铁剂组大鼠血浆丙二醛（MDA）高于对照组,而蔗糖铁组高于糖酐铁组[（6.06±0.73） nmol/L比（4.99±0.80） nmol/L, P < 0.05]。糖酐铁组、蔗糖铁组和对照组大鼠血清超氧化物歧化酶（SOD）和总抗氧化能力（TAOC）差异无统计学意义。模型组大鼠血浆谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）水平显著低于假手术组（P < 0.05）,而蔗糖铁组显著低于糖酐铁组和对照组[（2123.11±74.78） nmol&#8226;ml-1&#8226;min-1比（2352.84±163.90） nmol&#8226;ml-1&#8226;min-1、（2310.23±125.99） nmol&#8226;ml-1&#8226;min-1,P < 0.05]。 结论 静脉补铁可部分纠正5/6肾大部切除肾衰竭大鼠的贫血,改善铁代谢指标。反复静脉小剂量补铁对慢性肾衰竭大鼠氧化应激状态有不良影响,而低分子右旋糖酐铁的不良影响低于蔗糖铁。     

Roux-en-Y胃旁路术对糖尿病大鼠肾脏的保护作用

目的 观察Roux-en-Y胃旁路术对糖尿病Goto-Kakizaki (GK)大鼠肾脏的保护作用.方法 18只GK大鼠随机等分为Roux-en-Y胃旁路手术组(RYGP组)、假RYGP组和对照组;观察手术前、手术后12周各组大鼠血清血栓素(TXB2)、6-酮-前列环素(6-kET-1o-PGF1a)、内皮素-1( ET-1)、尿素氮(sCr)、肌酐(BUN)和24h尿蛋白(24 h uPro)含量;手术后12周苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠肾脏病理变化.结果 手术前3组大鼠各检测指标差异无统计学意义(P＞0.05).与手术前比较,手术后12周,假RYGP组大鼠TXB2(66.31±6.13) ng/L比(101.42 ±9.70) ng/L、ET-1 (58.31±5.32) ng/L比(79.01±6.89) ng/L、sCr( 48.78±3.66) μmol/L比(70.33±6.21)μmol/L、BUN(5.41±0.68) mmol/L比(8.35±0.92) mmol/L和24h uPro (0.44±0.10) g/24 h比(0.86 ±0.17) g/24 h均显著升高,6-kET-1o-PGF1a(85.72±6.87) ng/L比(60.41±8.23) ng/L显著降低,差异均有统计学意义(P＜0.05);对照组与假RYGP组一样获得相似的结果;RYGP组大鼠各检测指标变化差异无统计学意义(P＞0.05).手术后12周,RYGP组与假RYGP组比较TXB2(72.31±7.56) ng/L比(101.42±9.70)ng/L、ET-1 (62.11±6.26) ng/L比(79.01 ±6.89)ng/L、sCr (54.36±4.12)μmol/L比(70.33±6.21)μmol/L、BUN( 5.71±0.86) mmol/L比(8.35±0.92) mmoL/L、24 h uPro(0.52 ±0.10) g/24 h比(0.86±0.17)g/24 h和6-kET-1o-PGF1a( 83.22±5.62) ng/L比(60.41±8.23) ng/L差异均有统计学意义(P＜0.05);RYGP组与对照组比较,各检测指标差异均有统计学意义(P＜0.05);假RYGP组、对照组血清TXB2与6-kET-1o-PGF1a呈显著负相关,与ET-1呈显著正相关(P＜0.05).手术后12周,假RYGP组和对照组大鼠肾脏有明显病理性损害;RYGP组大鼠肾脏病理变化不明显.结论 Roux-en-Y胃旁路术对GK大鼠肾脏具有保护作用.     

胃旁路术对2型糖尿病大鼠肝脏磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶mRNA表达的影响

目的研究胃旁路术对2型糖尿病Goto-Kakizaki（GK）大鼠降糖作用及肝脏磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（PEPCK）mRNA表达的影响。方法将30只12周龄的雄性GK大鼠分为手术组（胃旁路术,10只）、假手术饮食控制组（10只）及假手术空白对照组（10只）,术中取各组肝脏标本用于术后对照研究。观察手术前后空腹血糖、进食量及体质量变化情况。术后8周取各组肝脏标本,用实时荧光定量PCR（real-timePCR）检测各组肝脏手术前后PEPCKmRNA的表达变化。结果术后8周。手术组空腹血糖由术前（17．6±2．1）mmol／L下降至（7．5±0．9）mmol／L;胃旁路术后PEPCKmRNA的相对表达量由术前的1．08±0．38下降至O．41±0．10（P〈0．01）,与空白对照组（1．04±0．12）比较,差异具有统计学意义（P〈0．01）;饮食控制组PEPCKmRNA的表达量则由术前的1．15±0．16上升至术后8周的2．54±0．82（P〈0．01）;较手术组显著增高（P〈0．01）。结论胃旁路术降低2型糖尿病血糖的作用机制可能与降低PEPCKmRNA的表达有关。     

Roux-en-Y胃旁路术对2型糖尿病大鼠肝脏糖异生的影响

目的探讨Roux-en-Y胃旁路术对2型糖尿病大鼠肝脏糖异生的影响及意义。方法将40只GotoKakizaki（GK）大鼠按随机数字表法分为Rollx-en-Y胃旁路术组（A组,20只）和假手术组（B组,20只）。分别于术前及术后1、2、4周行口服葡萄糖耐量实验（OGYr）。并记录体质量。于术前及术后第4周测定两组大鼠糖化血红蛋白（HbAlc）水平。术后第4周处死大鼠获取肝脏组织,采用反转录聚合酶链反应和Westernblot技术检测肝脏组织葡萄糖6磷酸酶（G-6-P）、磷酸烯醇式丙酮酸激酶（PEPCK）的mRNA及蛋白相对表达量。结果术后1、2、4周,A组大鼠平均空腹血糖分别为6．5、4．9和4．7mmol／L,而B组分别为10-3、10．4和12．5mmol／L。两组比较差异均有统计学意义（均P〈0．05）;A组灌胃后2h血糖分别平均为8．3、6．4和5．5mmol／L,B组为21．4、23．8和24．7mmol／L,两组比较差异均有统计学意义（均P〈0．05）。A组术后第4周HbAlc为（6．8±1．0）％,低于B组的（7．9±0．8）％（P〈0．05）。A组术后4周肝脏G-6-P和PEPCK的mRNA相对表达较B组分别降低了21．0％和25．9％,蛋白表达水平也相应降低（均P〈0．05）。PAS染色示肝脏糖原沉积明显增多。结论Roux-en-Y胃旁路术后肝脏糖异生关键酶的mRNA相对表达和蛋白含量明显降低。肝脏糖异生减少．这可能是该术式的降糖机制之一。     

保留不同胃容量的Rou-en—Y胃旁路术对糖尿病大鼠降糖效果的比较

目的观察保留不同胃容量的Roux-en-Y胃旁路术（RYGBP）对糖尿病大鼠降糖效果的比较。方法36只雄性Got0,Kakizaki（GK）大鼠随机分3组,分别为全胃切除RYGBP、胃大部切除RYGBP和保留全胃RYGBP组,每组12只。检测术前及术后1、3、6、12和24周各组大鼠体质量、日均摄食量和空腹血糖水平,测定术前、术后12和24周各组糖化血红蛋白水平及口服葡萄糖后0、30、60、120和180min血糖值,描制血糖值随时间变化曲线,计算糖耐量曲线下面积（AUC）。结果与术前比较．术后1周各组摄食量和体质量显著减少（P〈O．01）,术后3周胃大部切除RYGBP组和保留全胃RYGBP组大鼠摄食量及体质量较术后1周明显增加（氏0．01）,而全胃切除RYGBP组大鼠摄食量及体质量较其余两组低（P〈O．05）。术后24周。3组大鼠空腹血糖分别为（7．3±1．5）、（7．5±2．0）和（8．3±1_3）mmol／L,均低于术前水平[（13．2±1．6）、（13．6±2．5）和（12．9±2．0）mmol／L,P〈0．01]。而3组间比较,差异无统计学意义（P〉O．05）;糖化血红蛋白则分别为（6-3±1．3）％、（6．4±．2．0）％和（7．0±1．3）％,均低于术前[（10．2±．2．6）％、（9．6±2．5）％和（9．9±2．0）％,P〈0．01],而3组间比较,差异无统计学意义（P〉O．05）：3组术后糖耐量试验和AUC变化趋势与之类似。结论RYGBP可有效控制血糖水平．其降糖效果与胃容积的大小无明显联系。     

全反式维甲酸在肠道缺血再灌注中的抗氧化作用

目的 探讨全反式维甲酸（ATRA）在肠道缺血再灌注中的抗氧化作用。方法根据随机数字表法将32只雄性SD大鼠分为假手术组、阻断组、DMSO组和ATRA组,每组8只。采用血管钳钳夹肠系膜上动脉60min后,使血液复流120rain的方法制备大鼠肠道缺血再灌注损伤模型。假手术组仅分离肠系膜上动脉不钳夹。ATRA组大鼠术前5d以15μg／gATRA每日灌胃1次,开腹前6h再予ATRA处理1次;DMSO组则在相同时间点给予等量的DMSO液灌胃处理;应用高效液相色谱法检测大鼠术前5h的血浆ATRA浓度。HE染色观察回肠黏膜病理形态学改变,对肠黏膜组织行Chiu氏评分;比色法测定血清二胺氧化酶（DAO）水平、回肠组织丙二醛（MDA）含量以及超氧化物歧化酶（SOD）活性;Westernblot检测回肠组织中锰超氧化物歧化酶（MnSOD）的蛋白表达量。组问比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD—t检验。结果ATRA组大鼠血浆ATRA浓度为（827±276）μg/L,高于假手术组、阻断组和DMSO组的（48±12）μg/L、（55±15）μg／L和（63±20）μg／L（t=11．242,11．138,11．013,P〈0．05）。假手术组大鼠回肠黏膜形态正常;阻断组和DMSO组大鼠回肠黏膜结构破坏严重;ATRA组大鼠回肠黏膜损伤程度明显减轻。阻断组、DMSO组和ATRA组大鼠回肠黏膜Chiu氏评分分别为（3．83±0．77）分、（3．92±0．87）分和（2．42±0．75）分,显著高于假手术组的（O．37±0．28）分（t=9．803,10．040,5．793,P〈0．05）,而ATRA组评分明显低于阻断组和DMSO组（t=4．009,4．247,P〈0．05）。阻断组、DMSO组和ATRA组大鼠血清DAO水平分别为（26．3±4．4）U／L、（25．1±4．3）U／L、（20．8±3．8）U／L,均显著高于假手术组的（14．2±1．9）U／L（t=6．493,5．835,3．534,P〈0．05）;但与阻断组及DMSO组比较,ATRA组血清DAO水平明显降低（t=2．959,2．301,P〈0．05）。阻断组、DMSO组和ATRA组大鼠回肠组织中MDA含量分别为（16．9±4．0）μmol／g、（16．0±3．5）μmol／g、（11．3±3．1）μmol／g,明显高于假手术组的（5．4±1．0）μmol／g（t=7．397,6．821,3．821,P〈0．05）;ATRA组显著低于阻断组和DMSO组（t=3．575,3．000,P〈0．05）。阻断组、DMSO组和ATRA组大鼠回肠组织的SOD活性分别为（108±22）U／mg、（98±19）U／rag和（181±38）U／mg,明显低于假手术组的（243±37）U／mg（t=8．939,9．647,4．106,P〈0．05）;ATRA组明显高于阻断组及DMSO组（t=4．833,5．541,P〈0．05）。阻断组和DMSO组大鼠回肠组织中MnSOD的蛋白相对表达量分别为0．36±0．08、0．28±0．07,显著低于假手术组的0．93±0．13（t=8．972,10．101,P〈0．05）;ATRA组为0．80±0．19,明显高于阻断组和DMSO组（t=6．948,8．077,P〈0．05）,但与假手术组比较,差异无统计学意义（t=2．024,P〉0．05）。结论ATRA预处理可以促进氧自由基清除剂MnSOD的表达,增加组织的抗氧化能力,对大鼠肠道缺血再灌注损伤具有保护作用。     

胰岛素对急性重症胆管炎脓毒症大鼠骨骼肌代谢的影响

目的 探讨胰岛素对大鼠急性重症胆管炎（ACST）脓毒症状态下泛素系统介导骨骼肌蛋白质分解的调理作用。方法 20只雄性SD大鼠按月龄、体重同窝饲养,随机分为假手术组（SO）、ACST脓毒症模型组（AS）、低剂量胰岛素ACST脓毒症模型组（LIAS,胰岛素给予量为2.4 mU·kg-1·min-1）、高剂量胰岛素ACST脓毒症模型组（HIAS,胰岛素给予量4.8 mU·kg-1·min-1）,每组5只。所有大鼠均行正常血糖钳夹模型制备,并通过调节25%葡萄糖的输注率（GIR）将血糖维持在5～6 mmol/L的稳态;只有当血糖超过11.9 mmol/L时才需加用胰岛素。采用高效液相-色谱分析法检测伸趾长肌内3-甲基组氨酸（3-MH）;RT-PCR法检测伸趾长肌内编码泛素、蛋白酶体C2亚基的mRNA表达变化。结果 AS组大鼠伸趾长肌内3-MH含量为（3.69±0.20）nmol/g,较SO组（2.07±0.13）nmol/g显著升高（P＜0.001）;且显著高于HIAS组（2.39±0.21）nmol/g（P＜0.001）和LIAS组（2.87±0.19）nmol/g（P＜0.001）。HIAS组大鼠伸趾长肌内3-MH含量较LIAS组显著降低（P＜0.001）。AS组大鼠伸趾长肌内泛素mRNA表达较SO组明显升高,其相对表达量增加了19.70倍。LIAS组泛素mRNA相对表达量为6.96（范围为4.17～11.67）、HIAS组相对表达量为1.89（范围为1.43～2.48）,与AS组比较均明显下降（P=0.028,0.009）。HIAS组泛素mRNA表达水平低于LIAS组（P=0.009）。AS组大鼠伸趾长肌内蛋白酶体C2亚基mRNA表达较SO组明显升高,其相对表达量增加了191.34倍。LIAS组蛋白酶体C2亚基mRNA相对表达量为31.12（15.74～61.39）、HIAS组蛋白酶体C2亚基mRNA相对表达量为7.67（4.08～14.50）,与AS组比较表达均明显下降（P值均为0.009）。HIAS组C2亚基mRNA表达水平低于LIAS组（P=0.009）。结论 急性重症胆管炎脓毒症状态下,胰岛素可抑制骨骼肌蛋白降解,该作用可能是在基因水平通过抑制泛素-蛋白酶体通路表达和活化而实现的。     

活体荧光显微镜技术在观察肝硬化门静脉高压大鼠肝脏微循环结构变化中的应用

目的探讨活体荧光显微镜技术观察肝硬化门静脉高压模型大鼠的肝脏微循环结构变化的应用效果。方法取雄性SD大鼠70只,将其中40只SD大鼠采用随机数字表法分为假手术组、胆总管结扎（BDL）模型2周组、BDL模型4周组及BDL模型6周组,每组10只,应用活体荧光显微镜技术观察大鼠肝脏微循环结构变化。将余下的30只sD大鼠于BDL模型建立4周后采用随机数字表法分为3组,动态观察给予生理盐水（生理盐水组）、内皮素-1（ET-1,ET-1组）、NO供体亚硝基半胱氨酸（GSNO,GSNO组）后BDL模型大鼠肝脏微循环的急性改变。组间比较采用单因素方差分析,组内比较采用配对样本t检验。结果BDL模型大鼠共死亡9只,存活率为85．0％（51／60）。假手术组大鼠全部存活。随着BDL造模时间延长,肝脏肝窦直径逐渐变小,BDL模型2周组、BDL模型4周组及BDL模型6周组肝窦直径分别为（13．6±1．0）μm、（8．8±0．7）μm和（8．0±0．5）μm,与假手术组的（17．4±1．0）μm比较,差异有统计学意义（t=5．86,18．24,15．57,P〈0．05）。随着BDL造模时间延长,肝窦开放数量逐渐减少,BDL模型2周组、BDL模型4周组及BDL模型6周组肝窦开放数量分别为（6．8±0．8）个／200μm、（4．3±1．8）个／200μm、（4．0±1．2）个／200μm,与假手术组的（8．8±0．5）／200μm比较,差异有统计学意义（t=3．25,2．77,2．12,P〈0．05）。注射生理盐水15min后,生理盐水组肝窦直径为（7．2±1．2）μm,与注射前的（6．9±0．5）Dm比较,差异无统计学意义（t=0．89,P〉0．05）;肝窦开放数量为（6．8±1．4）＋／200μm,与注射前的（6．6±0．4）个／200μm比较,差异无统计学意义（t=1．12,P〉0．05）。注射ET-115min后,ET-1组肝窦直径为（5．4±0．5）μm,与注射前的（7．9±0．6）μm比较,差异有统计学意义（t=7．39,P〈0．05）;肝窦开放数量为（5．4±1．8）＋／200μm,与注射前的（5．8±1．2）个／200μm比较,差异无统计学意义（t=0．84,P〉0．05）。注射GSNO15rain后,GSNO组肝窦直径为（11．4±1．3）μm,与注射前的（7．5±1．7）μm比较,差异有统计学意义（t=5．95,P〈0．05）;肝窦开放数量为（6．4±1．6）＋／200μm,与注射前的（5．6±0．8）个／200μm比较,差异无统计学意义（t=0．54,P〉0．05）。结论活体荧光显微镜技术可以通过观察肝脏微循环结构变化在一定程度上评价肝纤维化的程度,并且能够通过动态捕捉肝窦直径和肝窦开放数量在药物作用影响下发生的改变。     

改良胆胰转流术对Goto-Kakizaki大鼠血糖的影响

目的 观察改良胆胰转流术对非肥胖性2型糖尿病模型鼠(GK大鼠)的降糖作用.方法将16只GK大鼠随机分为A、B组,分别对A组行改良胆胰转流术,对B组行假手术.检测术前1周及术后第1、8周两组大鼠体质量、空腹血糖、随机血糖、糖耐量.结果 术后早期A组大鼠体质量由术前的(373.100±9.859)g降至(343.260±12.399)g,与B组比较,差异有统计学意义.术后第8周A组大鼠随机血糖降至( 10.500±1.509) mmol/L,明显低于B组的(19.480±1.281) mmol/L,A组大鼠糖耐量明显优于B组.结论 改良胆胰转流术能改善GK大鼠糖耐量,胆胰液在外科手术治疗2型糖尿病的机制中可能起重要作用.     

大鼠十二指肠空肠旷置术的实验研究

目的探讨大鼠十二指肠空肠旷置术的安全性及效果,明确其对2型糖尿病(type2 diabetes mellitus,T2DM)的治疗意义。方法取40只8周SD大鼠,随机分为糖尿病组(T组,n=20)和普通组(N组,n=20),均予高脂饮食。T2DM大鼠模型建立后,各组再分为两组:糖尿病手术组(To组)和糖尿病对照组(Tc组),正常手术组(No组)和正常对照组(Nc组),分别行DJB手术和假手术对照,每组10只。术后观察和记录各组存活率,术后8周手术探查大鼠腹腔观察其吻合情况。分别于术前、术后1、2、4、8周检测并比较各组大鼠空腹血糖和胰岛素水平。结果四组所有40只大鼠均施行手术,术后8周时To组存活率为80%,No组存活率为80%。术后8周处死大鼠并手术探查,见吻合口均连接紧密,无渗漏、出血,吻合口未见梗阻堵塞。To组血糖从术前的(22.71±5.26)mmol/L下降到术后8周的(4.05±2.39)mmol/L(P0.05),且接近No组手术前后的血糖值。胰岛素从术前的(11.61±0.51)mU/L下降到(6.35±3.38)mU/L(P0.05),且与术前No组的胰岛素值相近。与Tc组比较,To组术后各时点血糖均有降低,但在术后2、4和8周时血糖下降有统计学意义(P0.05);To组术后各时点胰岛素较Tc组均有降低,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论 DJB手术肠肠吻合简便易操作,吻合口可形成严密瘢痕愈合,安全易行。术后可有效降低T2DM大鼠血糖,改善血中胰岛素水平。