肺炎链球菌粘附肺Ⅱ型上皮细胞触发宿主细胞酪氨酸蛋白磷酸化

目的 探讨细胞内信号传导与肺炎球菌侵袭、致病的关系,在体外研究Ⅱ型肺炎链球菌粘附肺Ⅱ型上皮细胞（A549）是否能触发细胞内酪氨酸蛋白激酶（TPK）信号传导途径 ,以及触发该信号传导可能的细菌亚组分。方法 用FTTC荧光标记肺炎链球菌,在体外观察肺炎链球菌粘附肺Ⅱ型上皮细胞的粘附动力学特征;用免疫组织化学和ELISA方法观察完整细菌触发的细胞内酪氨酸蛋白磷酸化,用各种因素预处理肺炎链球菌后,观察触发细胞内酪氨酸蛋白磷酸化可能的细菌亚组分。结果 证实了上述粘附过程存在剂量依赖和时间的依赖关系,而且是特异的过程;细菌粘附使细胞内酪氨酸磷酸化由细菌表面蛋白质介导。结论 肺炎链球菌粘附肺Ⅱ型上皮细胞能触发细胞内信号传导,且细菌表面蛋白质在触发胞内酪氨酸蛋白磷酸化传导中起着重要作用。     

Ⅱ型肺上皮细胞钠通道的研究进展

Ⅱ型肺上皮细胞膜上的阳离子通道主要是阿米诺利敏感性钠通道 ,它可表达α rENaC ,β rENaC和γ rENaC三个亚基。这些离子通道至少可以分为钙激活的钠离子选择性通道和钙不敏感的高度钠离子选择性通道 ,对阿米诺利具有高度的亲和性。通道的表达和活动受激素、氧分压和一些内源性物质等因素的影响。钠通道的正常功能活动对肺的正常功能活动具有重要作用。     

吸烟对大鼠肺和肺泡Ⅱ型上皮细胞间粘附分子1表达的检测

为了解吸烟肺组织和肺泡Ⅱ型上皮细胞细胞间粘附分子 1(ＩＣＡＭ 1)ｍＲＮＡ的表达 ,我们通过对不同时间吸烟大鼠肺组织和肺泡Ⅱ型上皮细胞ＩＣＡＭ 1蛋白质水平和ｍＲＮＡ水平测定来探讨吸烟致慢性阻塞性肺疾病 (ＣＯＰＤ)发病的可能途径。2 40只大鼠放入按许三林设计的大鼠被动吸烟装置内 (中华结核和呼吸杂志 1999,7:417 419)每天燃香烟 10支使大鼠形成被动吸烟模型。在吸烟 1、2、3、4、5、6月后及正常喂养的对照组大鼠杀死解剖 ,肺泡Ⅱ型上皮细胞分离、纯化和培养并留取肺组织 ,应用免疫组织化学染色、原位杂交和逆转录聚合酶链反应 (…     

地塞米松抑制哮喘大鼠模型肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤

支气管哮喘(简称哮喘)作为整个气道和肺组织病变性疾病已逐渐被认识[1]。研究表明,哮喘急性发作时存在肺泡Ⅱ型上皮细胞(alveolar typeⅡcell,AT-Ⅱ)结构和功能的改变。本研究通过建立哮喘大鼠模型并检测AT-Ⅱ细胞的损伤来探讨其可能的发生机制及地塞米松的影响。1材料与方法1·1动物分组与模型复制:清洁级雄性Wistar大鼠42只,体重220~250 g,随机均分为正常对照组、哮喘组和地塞米松组,采用卵白蛋白制备哮喘大鼠模型。地塞米松组于首次抗原激发前24 h和每次抗原激发前1 h给予地塞米松1 mg/kg腹腔注射,正常对照组用生理盐水代替卵白蛋白。1…     

高氧致早产鼠BPD模型肺泡Ⅱ型上皮细胞形态与功能的变化

目的探讨高浓度氧致早产鼠支气管肺发育不良(BPD)形态与功能的动态变化规律.方法采用光镜、透射电镜及RT-PCR技术考察高氧致早产鼠BPD模型肺泡Ⅱ型上皮细胞形态学及SPA、SPB、 AQP5 mRNA表达动态变化.结果 1.吸氧7d出现肺泡化障碍,至21d正常肺泡结构基本消失;2.吸氧 1d,AECⅡ线粒体肿胀;3d板层小体排空;7d微绒毛减少,细胞核异染质增加.14d上述变化明显加重,线粒体嵴断裂,融解,伴有气血屏障明显增厚;至21d时细胞核固缩、融解,线粒体、板层小体、微绒毛消失,肺间质有大量纤维组织增生.3.SPA、SPB mRNA水平吸氧初期降低,随着吸氧时间的延长逐渐升高;4.实验组AQP5mRNA水平明显低于对照组.结论吸入高氧可引起肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)损伤,继而导致肺泡化障碍及AECⅡ分泌及转化功能变化.     

肺Ⅱ型细胞超微结构及其在急性低氧时的改变

本以模拟海拔5000米高度为低氧模型，采用常规电镜技术，分别观察正常成年大鼠肺Ⅱ型细胞超微结构及其在急性低氧8小时和22小时时的变化。结果表明：正常肺Ⅱ型细胞存在着亮、中、暗和过渡型暗四种类型的多泡体。低氧8小时和22小时时，两组一致表现为暗多泡体数量和百分比下降，而过渡型暗多泡体百分比明显升高。说明在急性低氧时，暗多泡体加快向板层体过渡。提示板层体由多泡体转变形成。     

维甲酸下调高氧暴露下胎鼠肺成纤维细胞及Ⅱ型肺泡上皮细胞MMP-2表达

目的探讨维甲酸(RA)对高氧暴露下胎鼠肺成纤维细胞(LFs)和肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)基质金属蛋白酶-2 (MMP -2 )表达的影响及调控。方法原代培养胎鼠肺LFs及AECⅡ,待其生长至亚汇合状态时,随机分为:空气组、空气+RA组、高氧组和高氧+RA组。于培养2、6、12、2 4和4 8(AECⅡ)或72h(LFs)时,采用半定量RT- PCR方法检测MMP 2和TIMP 2mRNA表达,应用Westernblot检测p38和磷酸化p38(p p38)蛋白表达水平。结果(1)与空气组比较,高氧可促进胎鼠LFs、AECⅡMMP 2mRNA和胎鼠LFsp p38表达(P <0 . 0 1或P <0. 0 5 ) ;(2 )RA能部分下调高氧诱导的胎鼠LFs、AECⅡMMP 2mRNA高表达和明显降低胎鼠LFsp p38表达;(3)高氧、RA对胎鼠LFs、AECⅡTIMP -2mRNA和胎鼠LFsp38蛋白表达无明显影响;(4)胎鼠LFsp p38与MMP 2mRNA表达呈显著性正相关(r =0. 76 7,P <0. 0 1,n =18)。结论高氧可促进胎鼠LFs、AECⅡMMP 2mRNA表达;p38通路参与高氧状态下胎鼠LFsMMP -2表达调控;RA可在转录后水平调节p38的活性状态从而实现对MMP-2的表达调控。     

细胞自噬在大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞低氧/复氧损伤中的作用

目的 探讨细胞自噬在大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECⅡ)低氧/复氧(H/R)中的作用.方法 将大鼠AECⅡ分为对照组(C)、低氧/复氧组(H/R)、DMSO溶剂组(HD)、自噬激动剂组(Rap)和自噬抑制剂组(3-MA).CCK-8法检测细胞活力;反转录RT-PCR检测自噬相关蛋白mRNA表达水平;Western blot...     

肺炎克雷伯杆菌分泌因子及活菌诱导人肺上皮细胞表达分泌IL-8的研究

目的 :探讨肺炎克雷伯杆菌 (Klebsiellapneumoniae ,Kp)分泌因子及活菌诱导肺上皮细胞株表达和分泌IL 8的状况。方法 :用临床分离株Kp0 3 1 1 6、Kp0 3 1 83的细菌培养上清或活菌刺激肺上皮细胞株A5 49和SPC A 1 ,酶联免疫吸附实验 (ELISA)检测细胞IL 8表达量。结果 :①两株Kp培养上清分别刺激A5 49或SPC A 1后 ,IL 8表达量均有显著增高 (P <0 .0 1 ) ,且随上清刺激浓度增加而上升。②两株Kp及DH5 (活菌分别与SPC A 1共孵育 2h ,用庆大霉素杀死胞外菌 ,继续孵育 2 4h后两株Kp诱导细胞IL 8表达量均显著高于DH5α(P <0 .0 1 ) ,且随细菌数 /细胞数比例增大而上升。结论 :Kp分泌因子及活菌都能够诱导肺上皮细胞IL 8表达 ,而活菌上调IL 8的效应较培育上清分泌因子更显著 ,提示肺上皮细胞在Kp感染刺激的肺部炎症反应中起重要作用。     

N-乙酰基-丝氨酰-天门冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸对人肺泡Ⅱ型上皮细胞向肌成纤维细胞转化的调节作用

目的:探讨N-乙酰基-丝氨酰-天门冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸(Ac-SDKP)是否通过对转化生长因子-β1(TGF-β1)介导的ROCK/SRF/α-SMA信号转导通路活化的调节,阻抑肺泡Ⅱ型上皮细胞向间质细胞转化,即上皮-间质转化(EMT),进而发挥其抗(矽)肺纤维化的作用.方法:培养人A549肺泡Ⅱ型上皮细胞株,免疫细胞化学显色检测角蛋白、波形蛋白及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;免疫印迹检测E-钙黏蛋白(E-cad)、波形蛋白及Rho相关卷曲蛋白激酶(ROCK)、血清反应因子(SRF)、α-SMA及Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达;Real-Time PCR检测ROCK、SRF、α-SMA的表达情况.结果:在TGF-β1的诱导下,上皮细胞向肌成纤维细胞的形态改变,伴随着上皮标志物角蛋白、E-cad降低,而间质细胞标志物波形蛋白增高,α-SMA表达并增多.与对照组相比,TGF-β1诱导刺激组ROCK、SRF、α-SMA蛋白和基因表达水平上调,Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达上调.给予ROCK阻滞剂Y-27632、Ac-SDKP干预后,ROCK、SRF、α-SMA及Ⅰ型、Ⅲ型胶原表达显著降低.结论:Ac-SDKP通过阻断TGF-β1介导的ROCK/SRF/α-SMA信号转导通路,阻抑肺泡Ⅱ型上皮细胞向肌成纤维细胞的转化及胶原的合成,进而发挥其抗(矽)肺纤维化的作用.