大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎中一氧化氮的变化

目的　观察外周和中枢一氧化氮 (NO)在大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎 (EAE)中的动态变化 ,探讨EAE大鼠发病的相关生物学机制。方法　 采用免疫组化法和硝酸还原酶法 ,观察豚鼠全脊髓匀浆诱导的Wistar大鼠EAE的过程中 ,脊髓内表达iNOS胶质细胞与外周NO代谢物NO 2 和NO 3的变化。 结果　 对照组脊髓内未发现表达iNOS阳性细胞 ,表达iNOS的CNS胶质细胞可能是小胶质细胞 ,而且它的变化与EAE大鼠的病情一致 ,评分 2分和 3分EAE大鼠脊髓表达iNOS的小胶质细胞比评分 1分大鼠明显增多 (P <0 .0 1) ,恢复期EAE大鼠表达iNOS的小胶质细胞明显减少 (P <0 .0 1)。EAE大鼠外周血清NO值随症状程度加重而升高 ,但在EAE恢复期时仍保持较高水平。未发病大鼠血清NO值明显增高 ,与对照组之间具有显著性差异 (P <0 .0 1)。 结论　 小胶质细胞产生的NO可能在急性期EAE大鼠的发病中起重要作用     

一氧化氮合酶抑制剂对脊髓损伤后运动功能的影响

目的观察诱导型和神经型一氧化氮合酶(iNOS,nNOS)抑制剂对大鼠脊髓损伤(SCI)后运动功能的影响和机理。方法大鼠脊髓压迫伤后分别给予iNOS和nNOS抑制剂—氨基胍(AG)和7-硝基吲唑(7-NI)进行治疗,24h后用分光光度法测定组织中一氧化氮(NO)含量和一氧化氮合酶(NOS)活性,72h后用流式细胞仪检测神经细胞凋亡情况,4周后用电生理和动物行为学等指标评价运动功能的恢复情况。结果AG和7-NI均可以抑制组织中的NO含量,并使NOS活性下降,同时降低神经细胞的凋亡比率,对运动功能的恢复前者优于后者。结论脊髓损伤后应用NOS抑制剂可以使伤后运动功能得到改善,AG的作用似乎更明显,提示iNOS活性变化可能对脊髓损伤的恢复更具决定作用。     

脊髓中参与痛觉调制的物质及其研究进展

脊髓在痛觉的形成及其调制中起着重要的作用,脊髓中参与痛觉调制的活性物质十分复杂,其中有些具有促痛或镇痛作用,还有一些具有双向的调节作用。本文对脊髓尤其是脊髓背角内痛信号传递过程中所参与的活性物质及受体、作用途经、及其研究进展作了综述。一些具有镇痛作用的物质及其衍生物,是临床麻醉及治疗中常用的辅助药。如果能抑制促痛物质、或者促进镇痛物质的产生,将在炎症及病理性疼痛的治疗,以及在脊髓水平的麻醉中具有十分重要的意义。     

人参对脊髓损伤大鼠MDA、SOD、NO含量的影响及意义

目的探讨人参对脊髓损伤后脊髓组织中MDA、SOD、NO含量的影响及意义。方法将72只成年雄性Wistar大鼠随机分成3组,每组24只。SCI损伤组:做SCI手术,不进行治疗;人参治疗组:SCI后,立即服用人参超微粉碎颗粒;假手术组:只打开椎板,暴露脊髓,不造成SCI。每组根据取材时间进一步分为术后0.5 h、2 h、4 h、6 h 4小组,每小组6只,测定脊髓损伤处MDA、SOD、NO含量。结果 SCI损伤组与治疗组MDA、SOD及NO含量术后0.5 h组未见差异,而术后2 h、4 h和6 h组显示治疗组对脊髓损伤后MDA升高有明显抑制作用,而对SOD含量降低有显著的回升作用,NO含量偏低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论人参在脊髓损伤后能够有效并及早的保护脊髓组织,减轻脊髓继发性损伤。     

嗅鞘细胞移植治疗中枢神经系统损伤的理论研究及临床应用

进行中枢神经系统损伤修复的候选胶质细胞包括嗅鞘细胞、少突胶质前体细胞和许旺细胞。少突胶质前体细胞很难获得大量移植用供体细胞,许旺细胞很难穿透胶质瘢痕,从应用方面均不如嗅鞘细胞。离体培养中嗅鞘细胞极强的可塑性可能会使嗅鞘细胞适时改变自身形态,以适应体内复杂的微环境,有利于神经再生。嗅鞘细胞移植后对脊髓后根损伤后再生有一定作用,其作用大小可能与嗅鞘移植物的成分有关,细胞制备技术和混合细胞移植能影响嗅鞘细胞移植物的效果。虽然胎脑的免疫原性很低,但合理应用免疫抑制剂会使嗅鞘细胞的移植效果有所改观。嗅鞘细胞除了重建损伤通路外,还可能通过轴突发芽、在非突触部位释放单胺类物质、改善病变部位环境并帮助附近的残余神经纤维保存功能和活性等机制对中枢神经的功能发生作用。嗅鞘细胞的细胞生物学和移植后行为学的深入研究都会加快人们对脊髓损伤的理解,并对脊髓损伤的修复治疗产生重要的理论指导意义。     

一氧化氮生物作用的研究进展

NO是一种普通的气体物质,但却具有广泛而独特的生物作用,如舒张血管、细胞毒性、抑制血小板粘聚、参与神经内泌活动,介导Glu的神经传递,发挥神经递质功能及加重脑缺血损害等。兹将NO的生理及病理作用的实验和临床研究近况加以综述介绍。     

脊髓损伤基因治疗的研究现状和进展

脊髓损伤造成的脊髓组织结构的损害可分为原发性损害和继发性损害.细胞原发性死亡在损伤当时即已发生,由于撕、扯、拉、压等机械力量直接作用于脊髓,使神经元、神经胶质细胞和血管组织结构遭受即时不可逆的死亡.在原发性损伤发生后数分钟内,序贯生化瀑布反应激发,包括水肿、炎症反应、局部缺血、谷氨酸受体过度激活、脂质过氧化作用、钙离子超载、细胞因子及凋亡学说、自由基损伤与脂质过氧化反应、一氧化氮/一氧化氮合酶(NO/NOS)神经毒性作用、内源性阿片肽介导下,一些在原发性脊髓损伤后还存活的神经元和神经胶质细胞死亡,造成为继发性脊髓损伤.目前治疗脊髓损伤的策略有两种:一是在损伤急性期通过减轻或消除继发性病理反应,保护残存的轴突和神经元不再遭受二次损伤,包括给予甲泼尼龙、钙通道拮抗剂、纳洛酮等药物,或予局部低温保护、人工高压灌流等;二是在损伤慢性期促进神经组织的再生和修复,包括手术治疗、高压氧治疗、细胞移植、基因治疗等.现对脊髓损伤基因治疗的研究进展进行综述.     

脊髓P物质介导的神经免疫调节在实验性变态反应性神经炎发病中的作用

从牛坐骨神经提取碱性髓鞘蛋白（ＭＢＰ）免疫豚鼠建立实验性变态反应性神经炎（ＥＡＮ）的动物模型，研究脊髓Ｐ物质（ＳＰ）在ＥＡＮ发病中的作用，结果显示：预先用辣椒素耗竭豚鼠脊髓后角及初级感觉神经元中的ＳＰ，ＥＡＮ动物的细胞及体液免疫功能增强、发病加重；而在ＥＡＮ发病的高峰期，脊髓后角及背根神经节中的ＳＰ含量明显升高。提示脊髓后角及初级感觉神经元中的ＳＰ对细胞和体液免疫反应有抑制作用，参与ＥＡＮ发病过程，而发病高峰期脊髓后角及初级感觉神经元中的ＳＰ水平增高，可能反馈性地抑制自身免疫反应，使之不致于过强，起自身保护作用。     

帕金森病炎症/免疫异常细胞模型的建立

目的 观察小胶质细胞激活后形态和功能的变化。以探讨活化的小胶质细胞对多巴胺能神经元产生损伤作用的可能机制。阐明帕金森病发病的免疫机制。方法 建立原代小胶质细胞培养。筛选和鉴定的方法，以细菌细胞壁脂多糖为工具药激活小胶质细胞，通过免疫组化，MTT，ELISA等方法观察小胶质细胞形态，数量和功能的文化。结果 LPS激活的小胶质细胞体积增大，OX-42表达上调，释放一氧化氮（NitricOxide,NO)，合成超氧阴离子（O2）及分泌细胞因子TNF-α量显著增多，而细胞数量无明显改变。结论 激活的小胶质细胞对多巴胺能神经元的损伤作用。可能与释放NO，O2^-及细胞因子TNF-α等细胞毒性物质有关。     

脊髓P物质介导的神经免疫调节在实验性变态反应性神经炎发病…

从牛有神经提取碱性髓鞘蛋白（ＭＢＰ）免疫豚鼠建立实验性变态反应性神经炎（ＥＡＮ）的动物模型，研究脊髓Ｐ物质（ＳＰ）在ＥＡＮ发病中的作用，结果显示：预先用辣椒素耗竭豚鼠脊髓后角及初级感觉神经抑中的ＳＰ，ＥＡＮ动物的细胞信体液免疫功能增强、发病加重；而在ＥＡＮ发病的高峰期，脊髓后角及背根神经节中的ＳＰ含量明显升高，提示脊髓后角及初级感觉神经元中的ＳＰ对细胞和体液免疫反应有抑制作用，参与ＥＡＮ发病过程，     

脊髓缺血再灌注损伤时血清及脊髓组织一氧化氮水平的动态变化及意义

目的 观察一氧化氮(NO)在脊髓缺血再灌注损伤(SCIRI)时血清及脊髓组织中的变化,探讨其在SCIRI中的意义. 方法 采用Zivin法建立家兔SCIRI模型,动态观察NO在血清和脊髓组织中的表达. 结果 血清NO在缺血再灌注(IRI)组缺血末期明显上升,IRI后2 h达到峰值,与缺血前比较差异有统计学意义(P<0.05),IRI后6 h、12 h明显降低,与缺血前及Sham组比较差异有统计学意义(P<0.05);脊髓组织中NO在缺血末期明显升高并达到峰值,缺血再灌注后2h、6 h逐渐下降,与Sham组比较差异有统计学意义(P<0.05),缺血再灌注后12 h下降到Sham组水平. 结论 NO在SCIRI后血清和脊髓组织中表达增高,可能在SCIRI病理过程神经元损伤与修复中发挥一定作用.     

NO在CNS中的表达及NOS抑制剂的应用

NO有着广泛而独特的生物作用,既能舒张血管、抗血小板和白细胞的粘聚,又具有细胞毒性作用,还能充当一种新型信息分子发挥递质功能。最初被作为一种血管调节物质所认识,当时命名为内皮源性松弛因子(endothelium—derived re-laxing factor,EDRF)。1987年Pakner等证明,由血管内皮细胞释放的NO可解释EDRF的生物学作用,并认为两者是等同的。     

神经干细胞条件培养液对脊髓神经组织细胞生长的作用

目的 探讨不同浓度神经干细胞条件培养液对体外培养脊髓组织中不同细胞成分生长的影响.方法 从胚胎脑组织中分离、培养神经干细胞;从胚胎脊髓中分离脊髓神经组织成分.采用免疫组织化学方法对分离培养的神经干细胞及培养的脊髓神经细胞进行染色鉴定.将脊髓神经组织细胞悬液置于不同浓度的神经干细胞条件培养液中培养.分析不同浓度的干细胞条件培养液对不同细胞成分生长的影响.结果 与对照组比较,30%及50%浓度的神经干细胞条件培养液明显促进人脊髓神经元的生长,而其它浓度条件液对胶质细胞生长作用较强.结论 人胚胎神经干细胞条件培养液对体外培养的脊髓神经元或胶质细胞促生长作用的差异与其浓度有关.     

GDNF对培养脊髓运动神经元的影响

目的　研究不同浓度胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)对大鼠胚胎脊髓运动神经元生长活性的作用。方法　取大鼠胚胎脊髓腹侧组织进行原代体外分离培养 ,从细胞形态学及应用MTT法观察GDNF对大鼠脊髓运动神经元的影响。结果　GDNF能明显促进体外培养的大鼠脊髓运动神经元存活及突起的生长 ,并且有剂量依赖的趋势。结论　不同浓度GDNF对体外培养大鼠胚胎脊髓运动神经元有不同程度的促生长作用。     

脊髓P物质在大鼠佐剂型关节炎发病中的作用

为探讨脊髓背角Ｐ物质（ＳＰ）在自身免疫性疾病发病中的作用，本实验以大鼠佐剂型关节炎（ＡＡ）为动物模型，观察免疫反应高峰期ＡＡ大鼠的病情、体内细胞免疫功能及中枢神经系统（ＣＮＳ）部分区域ＳＰ含量的变化。结果发现，脊髓蛛网膜下腔注射（ｉｔｈ）辣椒素（Ｃａｐ）耗竭脊髓背角ＳＰ后，ＡＡ病情ｂｕ重，免疫反应高峰期细胞免疫功能亢进，提示脊髓背角ＳＰ可能负向调节机体的免疫反应，从而具有一定的自身保护作用。     

依达拉奉对脊髓缺血再灌注损伤后自由基及Oaspase-3表达的影响

目的探讨自由基清除剂依达拉奉对脊髓缺血再灌注损伤后自由基及Caspase-3蛋白表达的影响。方法采用腹主动脉夹闭法将3（）只家兔制作成脊髓缺血再灌注损伤模型,并随机分为2组,用腹腔注射法给予依达拉奉组注射依达拉奉,空白对照组注射生理盐水,共14d,检测家兔血清自由基（MDA、SOD、NO）水平的变化,采用病理及免疫组织化学方法评估脊髓损伤的病理变化以及Caspase-3表达情况,治疗结束后采用Jacobs法对家兔后肢运动功能评分。结果治疗后依达拉奉组家兔血清MDA、SOD、NO水平显著低于对照组,脊髓病理学也进一证实依达拉奉组脊髓损伤程度较对照组轻微,且损伤节段脊髓组织Caspase-3蛋白的表达水平明显低于对照组,依达拉奉组家兔双下肢Jacobs评分也明显高于对照组。结论依达拉奉能明显降低脊髓损伤后自由基水平,抑制Caspase-3蛋白的表达,可能对脊髓缺血再灌注损伤有保护性作用。     

脑脊液内细胞移植治疗脊髓损伤

经脑脊液进行细胞移植治疗脊髓损伤具有较大的临床应用前景.有关研究显示,经脑脊液进行的细胞移植方法安全、方便,对病人的损伤小,适用于治疗中枢神经系统多发疾病.但是经脑脊液移植的细胞能否促进中枢神经系统轴突再生和脊髓神经功能修复仍存在争议,其作用机制、移植时间以及移植细胞种类方面还需要进一步研究.本文对经脑脊液细胞移植方法用于治疗脊髓损伤进行综述,探讨此方法对脊髓损伤后中枢神经系统内轴突再生及功能修复的促进作用.     

嗅鞘细胞移植修复大鼠脊髓损伤的组织病理学变化☆

背景：对于脊髓损伤,目前临床尚无有效的治疗对策,近年来嗅鞘细胞移植对脊髓损伤修复取得了一定的进展。 目的：观察嗅鞘细胞移植在缓解损伤脊髓的病理反应和超微结构变化,及其在发生发展中的作用。 方法：60只大鼠随机分为空白组,模型组,嗅鞘胞移植组和DF12组,每组15只。空白组：仅切开T10全椎板及T9,T11部分椎板,对脊髓未作其他处理,明胶海绵轻柔压迫止血;模型组：仅切断脊髓,未作特殊处理;嗅鞘细胞移植组和DF12组：切断脊髓后用微量注射器分别注射嗅鞘细胞和DF12培养液,随后缝合切口。脊髓损伤后1,3,7,14,28,42,56 d每组麻醉2只受检大鼠,取材做光镜观察和电镜观察。 结果与结论：单纯脊髓横切损伤后,发生了出血、水肿、变性、坏死以及囊腔形成,胶质细胞增生和神经纤维再生。嗅鞘细胞移植后,明显减轻了神经元和神经纤维的坏死变性程度,减轻病理反应,并能对损伤神经元实施保护;防止了胶质细胞过度增生形成瘢痕屏障,明显增加了再生神经纤维的数量。提示嗅鞘细胞移植对损伤脊髓具有减轻病理反应和促进修复的作用。     

嗅鞘细胞培养液对海仁藻酸损伤脊髓神经元一氧化氮产生的影响

目的研究嗅鞘细胞培养液(OECCM)对海仁藻酸(KA)损伤后原代培养脊髓神经元的作用,进一步探讨其保护的作用机理。方法采用原代细胞培养法,分别培养了胚胎小鼠脊髓神经元和成年大鼠的嗅神经鞘细胞(OECs),收集OECCM。通过给予KA建立体外的损伤模型,KA分别作用6,8,12h后,加入OECCM继续培养24￣36h。然后进行抗神经元型一氧化氮合酶(ncNOS)免疫细胞化学染色,观察细胞ncNOS表达情况,并对各组ncNOS阳性神经元数目进行统计,同时运用四唑盐(MTT)比色法检测神经细胞活性;最后对不同组的一氧化氮合酶(NOS)阳性细胞染色情况、阳性细胞数目和细胞活性进行比较。结果KA作用后,一氧化氮(NO)都出现异常表达,但与实验组(OECCM干预组)相比,OECCM处理组NO表达水平明显低于单纯KA损伤组。OECCM处理组NOS阳性细胞数目(6h组,34.3±5.25;8h组,40.6±3.68),明显低于对照组(6h组,42.3±3.48;8h组,54.5±6.30)(P<0.01),在KA损伤12h时,两组NOS阳性细胞数(52.3±5.23vs61.32±6.45)(P<0.05);而细胞活性(6h,0.372±0.034;8h,0.312±0.026)明显高于对照组(6h,0.283±0.041;8h,0.219±0.033)(P<0.01),12h时两组细胞活性没有明显差异(0.199±0.012vs0.202±0.032)(P>0.05)。结论OECCM中可能含有一些保护脊髓神经元免遭KA损伤的因子,这些因子可能在参与抑制NOS异常表达起了重要作用。     

嗅鞘细胞移植脊髓损伤大鼠后Semaphorin3A的表达

脊髓损伤后损伤区Semaphorin3A(Sema3A)表达明显升高,嗅鞘细胞移植对此会有何影响？实验发现单纯脊髓横切损伤后,会出现脊髓出血、水肿、变性、坏死,囊腔形成,胶质细胞增生和神经纤维再生等病理反应。嗅鞘细胞移植后,脊髓的上述病理反应明显减轻,损伤区神经元和神经纤维的坏死程度下降,损伤区Sema3A表达降低。证实嗅鞘细胞移植可通过降低Sema3A表达对损伤脊髓神经元起保护作用。