口腔扁平苔藓患者外周血Th1/Th2型细胞因子表达及意义

目的：了解口腔扁平苔藓（oral lichen planus,OLP）患者外周血中 Th1、Th2 型细胞因子表达水平,探讨 Th1/Th2 平衡在 OLP 发病中的作用及意义。方法：采用流式细胞术（cytometric bead array,CBA）检测 51例 OLP 患者（网纹型 23 例,充血糜烂型 28 例）Th1 型细胞因子（TNF-α、 IFN-γ、IL-2）及 Th2 型细胞因子（IL-4、IL-6、IL-10）表达水平,并分析其与 OLP 临床特征相关性。结果：①OLP 患者血清中 Th2 型细胞因子的IL-6 与 IL-10 的表达水平明显高于正常对照组（P＜0.05）,但 Th1 型细胞因子 TNF-α、IFN-γ、IL-2 及 Th2 型细胞因子 IL-4 表达水平与正常组差异无统计学意义（P ＞0.05）;②Th2 型细胞因子 IL-6 的表达水平与 OLP 临床类型、临床体征、临床症状均成正相关,IL-10 的表达水平与 OLP 临床类型、临床体征均成正相关（相关系数0.285～0.364;P＜0.05）。结论：OLP 患者外周血中 Th1 型细胞因子的表达水平与正常对照组Th1 型细胞因子表达水平差异无明显改变,而Th2 型细胞因子升高,表现为 Th2 占优势的免疫应答;Th2 型细胞因子 IL-6、IL-10 表达与 OLP 患者病情严重程度呈正相关,对OLP 免疫治疗有一定指导意义。     

系统性红斑狼疮合并冠状动脉性心脏病患者Th1／Th2失衡的研究

目的：探讨系统性红斑狼疮（SLE）合并冠状动脉性心脏病（简称冠心病）患者的 Th1／Th2是否存在失衡状况。方法收集 SLE 患者（SLE 组）、SLE 合并冠心病患者（合并组）及健康对照者（对照组）外周血,real-time PCR 法检测外周血 Th1／Th2细胞转录因子 T-bet／GATA-3的表达;流式细胞术检测 Th1／Th2细胞内 IFN-γ及 IL-4水平;酶联免疫吸附法（ELISA）检测患者外周血清中 IFN-γ及 IL-4水平并与对照组比较。结果 SLE 组患者外周血 Th1细胞转录因子 T-bet 表达水平、CD4＋ T 细胞内 IFN-γ分泌水平及血清 IFN-γ水平均明显低于对照组（P＜0．05）。合并组患者外周血 Th1细胞转录因子 T-bet 表达水平、CD4＋ T 细胞内 IFN-γ分泌水平及血清 IFN-γ水平均明显高于 SLE 组患者及对照组（P＜0．05）;合并组患者外周血 Th2细胞转录因子 GATA-3表达水平、CD4＋ T 细胞胞内 IL-4分泌水平及血清 IL-4水平均明显低于 SLE 组患者及对照组（ P ＜0．05）。结论 SLE合并冠心病患者存在 Th1优势活化的 Th1／Th2失衡状态,这种失衡状态可能与疾病的发生发展有关。     

系统性红斑狼疮患者Th1/Th2细胞因子的研究

目的检测系统性红斑狼疮(SLE)患者外周白细胞介素-4(IL-4),白细胞介素-10(IL-10)、干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-2(IL-2)水平,探讨SLE患者的发病与Th1/Th2优势活化状态之间的关系。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定35例SLE患者和15名健康志愿者PBMC培养上清IL-4、IL-10、IL-2、IFN-γ水平。结果活动期SLE患者IL-4、IL-10水平明显高于非活动期、正常对照组,差异有显著性(P<0.01)。活动期SLE患者IL-2水平明显低于非活动期、正常对照组,差异有显著性(P<0.01)。IFN-γ水平3组间差异无显著性(P>0.05)。结论Th2型细胞因子介导的免疫应答在活动期SLE的发病机制中占主导地位。活动期SLE患者存在分泌型Th1细胞因子的细胞活化减弱。     

卡莫氟对强直性脊柱炎Th1/Th2类细胞因子表达影响的研究

目的：观察卡莫氟(1-hexylcarbamoyl-5-fluorouracil,HCFU) 和柳氮磺胺吡啶(sulfalazine,SSZ)治疗强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis, AS)后体内Th1/Th2类细胞因子的变化。方法：19例AS患者随机分为2组，分别给予HCFU(9例)和SSZ （10例），RT-PCR检测其治疗前后外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)中细胞因子γ-干扰素（IFN-γ）、白细胞介素-2（IL-2）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-6（IL-6）mRNA片段的表达。结果:HCFU治疗后AS患者PBMC中IFN-γ、TNF-α mRNA的表达率分别为33.33%、44.44%，与治疗前相比差异有统计学意义（P＜0.05），IL-2、IL-4及IL-6 mRNA的表达差异无统计学意义。SSZ治疗后AS患者PBMC中IFN-γ mRNA的阳性表达率为70%,半定量结果显示，治疗后PBMC中IFN-γ mRNA的表达水平明显降低（P＜0.05)。80% AS患者在治疗后PBMC中IL 4 mRNA呈阳性表达，较治疗前21.05%明显升高（P＜0.05）。IL-2、IL-6和TNF-α mRNA的表达无明显变化（P＞0.05）。结论：HCFU能使TNF-α mRNA表达降低，促进AS患者的免疫应答从Th1型向Th2型转变，小剂量即可使病情缓解。SSZ未发现对TNF-α mRNA表达有明显影响，可促使AS患者的免疫应答从Th1型向Th2型转变。     

反复自然流产患者外周血中Th1/Th2型细胞因子的表达及其意义

目的:分析反复自然流产(RSA)患者血清中Th1/Th2型细胞因子水平的变化,探讨其在RSA发病中的意义.方法:采用酶联免疫吸附法检测56例RSA患者血清中Th1(IL-2、TNF-α、IFN-γ)/Th2(IL-10)型细胞因子水平,同时以正常健康早孕组64例作为对照.结果:RSA组血清中IL-2、TNF-α、IFN-γ的水平显著高于对照组(均P＜0.05),而IL-10水平显著低于对照组(P＜0.05).结论:RSA患者血清中Th1与Th2间平衡的改变可能是导致RSA的重要原因之一.     

SOCS3诱导反复自然流产患者蜕膜及绒毛组织Th1/Th2转换的作用

[目的]探讨细胞因子信号转导负调控因子(SOCS3)诱导反复自然流产(RSA)患者蜕膜及绒毛组织Th1/Th2转换的作用.[方法]采用ELISA方法检测27例RSA患者蜕膜及绒毛组织Th1细胞因子(IL-2、IFN-γ)和Th2细胞因子(IL-4、IL-10)的表达水平,采用流式细胞仪检测蜕膜及绒毛组织中Th1和Th2细胞水平及其比率,采用western-blot方法检测蜕膜及绒毛组织SOCS3蛋白表达水平,同时与30例正常妊娠行人工流产者比较.[结果]RSA组患者蜕膜及绒毛组织中IL-2、IFN-γ表达水平明显高于对照组(P＜0.05),而RSA组患者蜕膜及绒毛组织中IL-4、IL-10表达水平明显低于正常对照组(P＜ 0.05);RSA组患者蜕膜及绒毛组织中Th1细胞水平及Th1/Th2比率明显高于对照组(P＜0.05),而Th2细胞水平明显低于对照组(P＜ 0.05);RSA组患者蜕膜及绒毛组织中SOCS3蛋白表达水平明显低于对照组(P＜0.05).[结论]RSA患者蜕膜及绒毛组织中SOCS3蛋白表达过低可诱导Th1/Th2失衡,使得Th1细胞介导的免疫损伤作用占主导地位,最终导致RSA发生.     

复发性生殖器疱疹患者外周血CD4+细胞内细胞因子的表达

目的通过检测复发性生殖器疱疹(RGH)患者发病期及静止期外周血CD4+细胞IFN-γ,IL-2,TNF-α,IL-4等细胞因子的表达情况,探讨CD4+细胞内细胞因子水平与RGH的发病关系.方法利用流式细胞分析法对33例RGH发病期患者,16例静止期患者,15例健康志愿者外周血CD4+细胞表达的IFN-γ,IL-2,TNF-α,IL-4细胞因子进行检测.结果RGH患者发病期Th1细胞因子(IFN-γ,IL-2,TNF-α)的表达较正常人群组明显下降(P＜O.05),Th2细胞因子(IL-4)表达较正常组显著升高(P＜0.01).Th1与Th2细胞因子水平与RGH患者年复发次数有明显的相关性(P＜0.05).结论RGH患者发病期存在显著的细胞免疫功能低下,Th1与Th2细胞因子平衡失调是RGH反复发作的重要原因.     

慢性心衰患者 Th1与 Th2型细胞及 Treg细胞的表达

目的探讨Th1、Th2型细胞及Treg细胞在慢性心衰发病中的作用机制。方法采用RT-PCR技术检测62例慢性心衰患者和42例正常人外周血单个核细胞中T—bet、GATA-3及Foxp3mRNA的表达水平;ELISA法检测血浆中Th1／Th2型细胞因子IFN-γ／IL-4水平。结果慢性心衰患者T-bet表达水平高于正常对照组,GATA-3及Foxp3表达水平低于正常对照组（均P〈0．05）。慢性心衰组患者血浆中IFN-γ水平及IFN-γ／IL-4高于对照组（均P〈0．01）。结论慢性心衰患者T-bet／GATA-3及IFN-γ／IL-4升高,Foxp3降低,提示Th1细胞亚群表达升高,Th2型细胞及CD4＋、CD25＋调节性T细胞减少,细胞免疫异常可能参与慢性心衰的发病机制。     

Th细胞相关细胞因子水平与老年湿疹患者病理特征的系统分析

目的 观察辅助性T细胞1(Th1)、辅助性T细胞2(Th2)、辅助性T细胞17(Th17)在老年湿疹患者血清中的表达,探讨血清细胞因子水平与湿疹的病理特征的相关性。方法收集在本科确诊为老年湿疹患者60例的临床资料,并选取健康对照组40例。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中Th的特征细胞因子γ-干扰素(INF-γ)、白介素-4(IL-4)及白介素-17A(IL-17A)的表达水平,分别比较Th细胞相关因子在急慢性,或泛发和局限型湿疹中的差异。结果与健康对照组相比,老年湿疹患者血清IFN-γ、IL-4、IL-17A显著升高(t=10.570,10.874,14.611;均P＜0.001)。其中老年急性湿疹患者血清IFN-γ、IL-4及IL-17A显著高于慢性期(t=3.787,3.815,5.338;均P＜0.001);泛发型患者血清IFN-γ、IL-4及IL-17A明显高于局限型(t=2.458,2.139,3.019;均P＜0.05)。结论血清IFN-γ、IL-4及IL-17A参与老年湿疹的进展与预后,并且Th细胞相关因子表达的不同可作为反映临床类型的指标。     

调节Th1／Th2平衡对脑胶质瘤细胞增殖的影响

目的研究外源性细胞因子调节Th1/Th2平衡对脑胶质瘤细胞增殖的影响.方法分别将IFN-γ+IL-4单抗或IL-4+IFN-γ单抗与脑胶质瘤细胞共同孵育,半定量RT-PCR方法观察Th1/Th2类细胞因子基因表达的变化,并用MTT方法检测其对脑胶质瘤细胞生长情况的影响.结果脑胶质瘤细胞Th2类细胞因子的表达明显强于Th1类(P＜0.01),IFN-γ+IL-4单抗可以增强IFN-γ的表达,抑制脑胶质瘤细胞的增殖并呈剂量依赖性关系(P＜0.01);IL-4+IFN-γ单抗则使Th2类细胞因子的表达有所增强,促进脑胶质瘤细胞的增殖,也呈剂量依赖性关系(P＜0.01).结论 外源性的细胞因子或细胞因子单抗可以调节Th1/Th2平衡,逆转Th2优势,影响脑胶质瘤细胞的生长.     

Association analysis of cytokine polymorphisms and plasma level in Northern Chinese Han patients with paroxysmal nocturnal hemoglobinuria

Background  While the incidence of paroxysmal nocturnal hemoglobinuria (PNH) is relatively high in Northern China, the exact mechanism of the disease remains unknown. Immunoregulatory cytokine polymorphisms can directly regulate the expression levels of cytokines, which play a crucial role in many diseases. The purpose of this study was to study cytokine gene single nucleotide polymorphisms (SNPs) and the correlated cytokine expression levels in relationship to the PNH pathogenesis.

Methods  Peripheral blood samples were collected from 30 PNH patients and 40 healthy donors; all of the samples were collected from the Han people of Northern China. Eight SNP loci in five cytokine genes, including tumor necrosis factor-alpha (TNF-α), interferon-gamma (IFN-γ), transforming growth factor-beta (TGF-β), interleukin-6 (IL-6), and IL-10, and aplastic anemia (AA) were assessed. TNF-a, TGF-b, IFN-g, IL-6, and IL-10 were analyzed by sequence-specific primer polymerase chain reaction (PCR-SSP). The plasma protein levels of TNF-a, TGF-b, and IFN-g were assessed by an ELISA.

Results  The PNH patients had a lower frequency of the TC/GG genotype of the TGF-b gene (P <0.01) and a higher frequency of the C allele in the TGF-b gene (+10) compared to the controls (P <0.05). The predominant genotype of the +874 locus of the IFN-g gene was TA in the PNH patients, while that in the predominant genotype was AA in the control group and was statistically significant (P <0.001). The frequency of the T allele in the IFN-g gene was dramatically higher in the PNH patients than in the controls (P <0.05). The PNH patients had a reduced frequency of the GC and CC genotypes, as well as the C allele at locus –174 of the IL-6 gene compared to the controls (P <0.01). In addition, the plasma concentrations of TNF-a, TGF-b, and IFN-g were significantly higher in the PNH group compared to the control group (P <0.01).

Conclusions  Expression levels of the TNF-a, TGF-b, and IFN-g cytokines play an important role in PNH. The GC and CC genotypes, as well as the C allele of the IL-6 gene may protect the Han people of Northern China against PNH. Additionally, the TC/GG genotype of the TGF-b gene may be the protective allele. In contrast, the TA genotype and the T allele for the IFN-g gene, as well as the C allele of TGF-b may be susceptible to PNH. However, SNPs in the TNF-a and IL-10 genes did not correlate with PNH development. Alternatively, the increased plasma concentrations of TNF-a, TGF-b, and IFN-g in PNH patients may also be related to PNH development.

     

慢性乙型肝炎用干扰素治疗的Th1/Th2应答

目的　探讨干扰素α的疗效是否与调节Th1/Th2细胞因子的表达有关 ,并以此作为预测干扰素α疗效指标的可能性。方法　采用双抗体夹心法和逆转录PCR方法 ,对应用干扰素治疗的 2 3例慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞中Th1/Th2细胞因子的表达水平进行动态检测。结果　与正常对照组比较 ,慢性乙肝患者外周血淋巴细胞培养上清液中的IFN γ水平较低 ,但无明显差异 ;IL 4水平则升高 ,差异有显著性。其外周血淋巴细胞中的mRNA表达水平亦如此。与治疗前比较 ,干扰素α治疗后 3和 6个月 ,在完全应答的患者中 ,IL 4水平下降 ;而IFN γ水平在 6个月时升高 ,差异均有显著性。结论　 (1)慢性乙肝患者的外周血淋巴细胞中细胞因子表达可能以Th2类占优势。 (2 )慢性乙型肝炎患者的外周血淋巴细胞中Th1/Th2细胞因子的表达水平与干扰素α的疗效密切相关。 (3)通过检测Th1/Th2细胞因子的变化 ,可以预测患者对干扰素α治疗的反应 ,对及时判断干扰素α治疗效果有一定作用。     

初发SLE患者Th1/Th2及其调控因子基因的研究

目的：探讨未经药物治疗初发狼疮病人Th1/Th2细胞亚群分布及其调控细胞因子基因表达的差异。方法：运用三色荧光标记流式细胞术检测35例初发狼疮病人细胞亚群分布，并以10例正常人作对照；ABI 7700real-time PCR法同时检测38例病人和28例正常人IL－10、IL－12P40、IL18mPNA表达水平的差异。结果：1、初发狼疮病人Th1较正常人明显减低（P＜0．05），但Th1/Th2无显著性改变。2、与正常组相比，SLE组病人IL－12P35、IL－12P40、IL－18mRNA及其受体表达较正常人明显降低（P均＜0．05）；3、面部红斑组病人Th1/Th2、IL－12P35较正常组降低（P均＜0．05）；4、RNP阳性组病人IL－12P40较正常组升高，IL－12P35、IL－18较正常组降低（P均＜0．05）；5、有关节炎较无关节炎患者IL－18RmRNA表达升高（P＜0．05）。结论：SLE是一种以Th1细胞下降，Th2细胞相对占优势的自身免疫性疾病，源于诱导向Th1细胞分化的一系列细胞因子及其受体减少和细胞因子间失衡所致。     

子痫前期患者外周血单个核细胞分泌Th1、Th2型细胞因子功能变化研究

目的研究子痫前期患者外周血单个核细胞分泌Th1/Th2细胞因子功能变化.方法子痫前期患者29例,正常妊娠妇女15例,分离外周血单个核细胞,体外培养72小时,ELISA方法检测培养上清液中Th1型细胞因子IL-2、IFN-γ及Th2型细胞因子IL-4、IL-10水平.结果子痫前期组PBMC培养上清液中,Th1型细胞因子IL-2、IFN-γ水平(259.4±90.5)pg/mL,(452.0±122.6)=pg/mL与正常妊娠组(140.3±73.2)pg/mL,(307.5±106.4)pg/mL相比,显著升高,分别为P＜0.01,P＜0.05;Th2型细胞因子IL-4、IL-10水平(28.8±7.7)pg/mL,(178.9±98.6)pg/mL与正常妊娠组(41.9±11.4)pg/mL,(316.1±284.6)pg/mL相比,显著下降,分别为P＜0.01,P＜0.05.结论子痫前期患者外周血单个核细胞分泌Th1型细胞因子功能增强,分泌Th2型细胞因子功能减弱.     

吡喹酮治疗脑囊虫病患者血清中Th1/Th2细胞因子的变化及临床意义

目的探讨脑囊虫病患者经吡喹酮治疗后,机体免疫应答的状态和对病程转归影响。方法35例脑囊虫病患者经吡喹酮治疗6个月后,对血清中IL-2、INF-γ、IL-5、IL-10、TNF-α、IL-12进行检测。结果治疗6个月后,Th1型细胞因子IL-2、IFN-γ、IL-12明显升高(P<0.01),Th2型细胞因子IL-5和IL-10在患者中检出率明显下降(P<0.01),TNF-α水平较治疗前显著下降(P<0.05)。治疗组对药物反应良好的患者,IL-2、IFN-γ、IL-12明显高于对药物反应不良者。结论脑囊虫病患者治疗后Th2型细胞因子反应减弱,而Th1型细胞因子反应增强,机体的保护性免疫应答已经开始恢复。     

清营解表合剂对流感病毒感染小鼠肺组织不同时相Th1/Th2细胞因子漂移的影响

目的：观察清营解表合剂对流感病毒感染小鼠Th1/Th2免疫平衡的影响。方法：以流感病毒亚洲甲型鼠肺适应株（A/PR/8/H1N1）感染小鼠为模型,采用SABC免疫组织化学法动态观察清营解表合剂干预治疗后肺部Thl型细胞因子γ-干扰素（IFN-γ）和Th2型细胞因子白介素-4（IL-4）的表达水平及IFN-γ/IL-4比值的变化。结果：感染模型组IFN-γ表达第6,9,12天较正常空白组下降。药物干预后,清营解表合剂组IFN-γ表达逐渐升高,第6,9,12天较感染模型组升高差异显著。感染模型组IL-4表达各时间点均高于正常空白组,在第6天达峰值;药物干预后,清营解表合剂组不同时间表达较感染模型组均下降,第6,9天下降显著,有统计学意义。病毒感染后,模型组较正常组IFN-γ/IL-4的比值在各时间点均降低,Th1/Th2平衡向Th2方向飘移;药物干预后,第6,9,12天清营解表合剂组较模型组IFN-γ/IL-4的比值升高有统计学意义,Thl/Th2平衡飘移得到纠正。结论：清营解表合剂可促进流感病毒感染小鼠Thl细胞因子表达,抑制Th2细胞因子的表达而提高免疫功能,调节机体的抗感染免疫平衡。     

急性化脓性扁桃体炎证候层次与Th1/Th2漂移相关性研究

目的研究急性化脓性扁桃体炎患者不同证候层次外周血Th1/Th2漂移变化。方法通过流式细胞检测技术,对急性化脓性扁桃体炎患者卫分证、气分证、营分证和正常人外周血Th1/Th2细胞进行检测,采用ELISA法测定血清细胞因子IL-4和IFN-γ水平,并比较IFN-γ/IL-4比值。结果与正常对照组比较,急性化脓性扁桃体炎卫分证组Th1、IFN-γ、Th1/Th2、IFN-γ/IL-4比值显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);气分证组Th1、Th2、IFN-γ、IL-4明显升高,差异有统计学意义(P<0.05~0.01);营分证组Th1、Th2、IFN-γ、IL-4继续明显升高,Th1/Th2比值却明显降低,差异有统计学意义(P<0.05~0.01)。与卫分证组比较,气分证组Th1、Th2、IFN-γ、IL-4显著升高,Th1/Th2、IFN-γ/IL-4比值明显降低,差异有统计学意义(P<0.05~0.01);营分证组Th2、IL-4继续明显升高,Th1/Th2、IFN-γ/IL-4比值明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。与气分证组比较,营分证组Th1、IFN-γ水平、Th1/Th2、IFN-γ/IL-4比值显著降低,Th2、IL-4显著升高,差异有统计学意义(P<0.05~0.01)。结论急性化脓性扁桃体炎卫分证、气分证、营分证证候层次变化与Th1/Th2漂移存在相关性。