人体皮肤枪弹创局部组织中5－HT的免疫组化研究

用免疫组化ＰＡＰ法观察人体皮肤生前枪弹创标本４０例、死后３０例损伤局部５－ＨＴ的变化，发现生前枪弹创局部５－ＨＴ主要分布于创缘、皮肤乳头层、皮下疏松结缔组织及皮肤附件周围结缔组织内，皮肤网状层结缔组织内５－ＨＴ分布较少；死后８分钟内形成的枪弹创改变与生前相同。免疫组化ＰＡＰ法亦证实人体皮肤肥大细胞颗粒内不含５－ＨＴ，表明用免疫组化ＰＡＰ法观察损伤局部５－ＨＴ的变化对生前死后损伤的鉴别有重要价值，并为前人生化方法测定结果提供了形态学依据。甲苯胺蓝染色，发现生前枪弹刨距创缘０～４．０ｍｍ区域内肥大细胞脱颗粒率均＞５０％，与死后枪弹创标本比较有显著差异，故可认为肥大细胞脱颗粒率变化可为生前死后损伤鉴别依据之一。     

人体皮肤枪弹创局部组织中5—HT的免疫组化研究

用免疫组化ＰＡＰ法观察人体皮肤生前枪弹标本４０例，死后３０例损伤局部５－ＨＴ的变化，发现生前枪弹创局部５－ＨＴ主要分布于他缘，皮肤乳头层，皮下疏松结缔组织及皮肤附件周转结缔组织内，皮肤网状层结缔组织内５－ＨＴ分布较少；死后８分钟内形成的枪弹创改变与生前相同。     

PAP、双桥PAP和ABC法敏感性及操作方法的比较

作者应用四种抗血清,在不同孵育条件下比较PAP、双桥PAP及ABC法的敏感性。双桥PAP法为一实用、敏感的免疫组化法。探讨了提高免疫组化染色强度的操作步骤:用延长第一抗体孵育时间(过夜),抗体稀释度提高5～10倍,第二、三步骤用提高孵育温度(37℃)来缩短孵育时间,可获得满意的染色效果。     

消化酶、固定剂对石蜡包埋肝组织DPC和FN—PAP法染色的影响

本文作者对不同固定剂和消化酶对石蜡包埋肝组织desmin阳性细胞(DPC)和纤维联接蛋白(FN)PAP法染色的影响进行了比较研究。所试固定剂中,除Carnoy液外,其它皆需酶消化。对FN染色以缓冲福尔马林或4％多聚甲醛固定、0.2％胃蛋白酶消化2 h为宜。DPC染色以缓冲福尔马林或4％多聚甲醛固定、胃蛋白酶与胰蛋白酶双重消化各45 min最为理想。结果提示石蜡包埋组织PAP法染色显示细胞内外抗原时应注意选择适宜的固定剂和消化酶。     

免疫组化LSAB法应用中关键环节的处理

免疫组化ＬＳＡＢ法应用中关键环节的处理吴洪娟郭文君刘雨清魏志新（潍坊医学院病理学教研室潍坊２６１０４２）ＬＳＡＢ法（Ｌａｂｅｌｅｄｓｔｒｐｔａｖｉｄｉｎｂｉｏｔｉｎｍｅｔｈｏｄ）是目前最理想的快速、高敏感的免疫组化染色法，其敏感性比ＡＢＣ法（Ａ－ｖｉ...     

PAP1基因在胆囊癌中表达的研究

目的探讨PAP1基因在胆囊的对照组织,癌组织及癌旁组织中的表达情况,研究其与胆囊癌发生发展的关系。方法应用实时荧光定量PCR方法检测各组织中PAP1基因的表达情况。结果对照组中PAP1基因的表达明显低于癌组和癌旁组（P〈0.05）;癌组织中PAP1基因的表达明显高于癌旁组织（P〈0.05）。结论 PAP1基因在胆囊癌中高表达,转录翻译生成的类甲基转化酶9可能导致胆囊癌中DNA高度甲基化,从而促进胆囊癌的发生发展。     

免疫组化Envision法CD34染色在不同病变胃粘膜、组织中价值研究

目的探讨用免疫组化Envision法显示CD34在不同病变胃粘膜组织中的价值研究。方法 取临床病理标本,分慢性胃炎56例、慢性萎缩性胃炎50例、肠化生59例、不典型增生61例;无淋巴结转移胃癌组织55例,有淋巴结转移胃癌组织57例。用免疫组织化学Envision法显示各组CD34表达情况,用高倍显微镜观察微血管形态结构并测量微血管密度。结果显微镜下CD34染色阳性呈棕黄色,背景清晰;常表现为分支状、窦隙状、芽孢状、椭圆形、圆形及不规则形等。不同病变胃粘膜组织CD34表现不一,按微血管密度计算:慢性胃炎组为13.17±10.12;慢性萎缩性胃炎组为11.32±7.20;肠化生组为13.19±8.77;不典型增生组为16.58±10.49;无淋巴转移胃癌组为26.72±10.84;有淋巴转移胃癌组为27.69±10.21。微血管密度(MVD)在慢性胃炎组、萎缩性胃炎组、肠化生组组间无差异(>0.05);萎缩性胃炎组、肠化生组、不典型增生组组间无差异(>0.05);慢性胃炎组与不典型增生组有差异(<0.05);慢性胃炎、萎缩性胃炎、肠化生、不典型增生各组与无淋巴转移胃癌组织、有淋巴转移胃癌组织组组间均有显著差异(...     

鼻咽癌中FN、LN和Col.IV的免疫组化研究

本文采有免疫组化方法用纤维连接蛋白（fibronectin,FN),层粘连蛋白（laminin,LN),和Ⅳ型胶原（collagenIV,Col,IV)抗体对54例鼻咽癌及1例鼻咽鳞状上皮瘤的基底膜进行了研究。结果显示鼻咽鳞状上皮瘤中的基底膜呈连续线状,而鼻咽癌的癌巢周围基底膜通常是不完整的,呈断续甚至消失的改变。高分化鳞癌显示连续线状基膜,偶有中断。低分化腺癌则显示断续不完整的基膜,大圆型细胞癌,低分化鳞癌部分显示连续线状基膜,偶有中断,未分化癌的基膜显示断线和消失的改变,癌瘤中基底膜的分布情况与癌实质类型,间质结构以及间质中淋巴细胞,浆细胞数量,嗜银纤维分布类型有关。     

高速小口径步枪弹致防弹衣后猪背部钝性损伤特点

目的 研究某型高速小口径步枪弹(简称某步枪弹)致复合防弹衣保护下的长白猪背部钝性损伤的特点及力学机制.方法 17头长白猪随机数字表法分为实验组(n=9)、对照组(n=5)和压力测定组(n=3).实验组采用复合防弹衣(陶瓷防弹板+超高分子量聚乙烯)防护猪背部,以某步枪弹瞄准背部T8椎体射击防弹衣,观察射击前、后猪心率、动脉血压和血氧饱和度,检测脑电、心电;射击后6h活杀解剖,观察猪病理损伤特点.对照组除射击无弹头的等量弹药的空包弹外,余处理同实验组.压力测定组仅测定某步枪弹射击猪背部时局部压力.结果 实验组、压力测定组防弹衣均未击穿,步枪弹命中防弹衣瞬间,防弹衣后局部肌肉组织压力升高明显,猪心率、动脉收缩压、心电与对照组相比无明显变化,防弹衣后脊髓呈钝挫伤病理改变,心内膜、肺脏、肝脏、肾、脾脏轻度出血.结论某型高速小口径步枪弹击中猪背部复合防弹衣时,防弹衣虽未击穿,但防弹衣后脊髓及胸腹腔脏器组织存在不同程度钝性损伤,这可能与防弹衣快速变形造成的背部钝性撞击,局部压力升高有关.     

氟伐他汀对高糖腹透液诱导人腹膜间皮细胞纤维连接蛋白表达的影响

目的:探讨氟伐他汀(fluvastatin,Flu)对高糖腹透液(high-glucose peritoneal dialysate,HGPDS)诱导人腹膜间皮细胞(human peritoneal mesothelial cells,HPMCs)纤维连接蛋白(fibronectin,FN)表达的影响?方法:体外培养HPMCs,同步化24 h后,分为正常对照组?HGPDS组?HGPDS+Flu组?单纯氟伐他汀组?DMSO对照组,各组分别刺激不同时间后,噻唑蓝(MTT)检测各组细胞的活力,RT-PCR检测FN的mRNA表达,ELISA法检测上清液FN蛋白表达的变化?结果:与正常对照组比较,HGPDS明显抑制细胞活力,HGPDS联合Flu共同培养24?36 h,细胞活力有所恢复,其中,1 × 10-6 mol/L Flu作用24 h,细胞活力改善差异有统计学意义(P < 0.05);与正常对照组比较,HGPDS明显增加人腹膜间皮细胞FN mRNA及蛋白表达(P < 0.05),并呈时间依赖性,其中FN mRNA于6 h达高峰,FN蛋白于24 h达高峰?Flu 可抑制HGPDS诱导的FN的高表达(P < 0.05),并呈浓度依赖性?结论:HGPDS诱导体外培养人腹膜间皮细胞FN表达增加,此作用可被Flu 抑制?     

肝癌组织中巨噬细胞和自然杀伤细胞的免疫组化研究

目的：探讨巨噬细胞（MФ）、肝自然杀伤（NK）细胞在原发性肝细胞癌（HCC）及肝硬化组织中的数量、分布规律及其与患者预后的关系，为HCC患者临床预测提供新思路。方法：应用免疫组化S-P法检测60例HCC，62例单纯性肝硬化，23例正常肝组织MФ标记物CD68和NK细胞标记物CD57的表达，并分析阳性细胞数量与临床各参数的关系。结果：①各组MФ平均数从高到低为依次为癌旁组织、肝硬化、正常肝、HCC（P〈0．05）；NK细胞平均数从高到低依次为HCC、癌旁组织、正常肝、肝硬化（P〈0．05）。②HCC中MФ细胞数量随分化程度降低而减少（P〈0．05）；NK细胞数量与组织学分级无明显关系。③HCC和癌旁组织中MФ细胞分布与临床TNM分期无关；HCC中NK细胞随着临床分期的发展有下降的趋势（P〈0．05）。④癌组织中15个月内有转移组的MФ细胞数少于无转移组（P〈0．05）；15个月内转移复发组癌和癌旁组织的NK细胞计数均明显少于无转移复发组（P〈0．01）。⑤在癌组织中MФ、NK细胞数呈线性正相关（r=0．344，P〈0．05）。结论：有转移瘤发生的HCC患者MФ和NK细胞数量明显少于无转移组；MФ数量与HCC分化程度密切相关；MФ和NK细胞计数可能是反映机体抗肿瘤免疫状态和生物学行为以及判断患者预后的重要指标。     

朱砂肾脏毒性的分解研究

目的 研究朱砂中与血液中汞离子浓度以及肾脏毒性相关的成分,为朱砂的减毒炮制以及在临床上的科学用药提供重要的理论依据.方法 应用偏微分原理,运用化学、毒理学、药动学以及细胞学的研究方法,对朱砂中与其毒性相关的成分进行均一背景下的分解研究,从中找出与朱砂肾脏毒性相关的主要成分.结果 整体实验研究表明,朱砂中共存成分改变了汞在血液以及体液中的化学位,从而改变离子通道的通透性,有利于汞离子通过离子通道而被吸收以及在肾脏中分布;朱砂中的肾脏毒性成分并非仅来源于硫化汞或汞本身,其他共存成分对朱砂毒性的影响也是不可忽视.结论 改进朱砂的炮制方法,在朱砂的炮制过程中,尽量除去硝酸根、氯离子、镁离子等不必要的共存离子,减小水飞朱砂的毒性,可提高临床用药的安全性和制剂的安全性.     

RSK2通过调控人皮肤成纤维细胞的增殖与迁移促进皮肤创面修复

目的：探究RSK2对皮肤创面修复的影响及其可能机制。方法：采用Western blot与免疫荧光染色实验检测皮肤创伤组织中RSK2的表达差异。通过人原代真皮成纤维细胞（HDF）划痕实验、CCK-8增殖实验及Western blot实验,在细胞水平探究RSK2抑制剂Bix 02565对HDF的作用。通过HE染色、Masson染色与免疫荧光染色,在体内水平观察RSK2抑制剂对皮肤创面修复的影响。结果：Western blot及免疫荧光实验结果显示皮肤创伤并不影响皮肤成纤维细胞中RSK2总蛋白的表达,而在体外水平上利用Bix 02565抑制RSK2的活性可显著抑制成纤维细胞的增殖与迁移,抑制G1/S-特异性周期蛋白-D1（Cyclin D1）与纤维粘连蛋白（Fibronectin）的表达,在动物水平RSK2抑制剂可抑制成纤维细胞的增殖细胞核抗原（PCNA）与胶原纤维生成,抑制血小板-内皮细胞黏附分子（CD31）的表达,阻滞血管的新生,延缓小鼠皮肤创面修复速率。结论：RSK2可通过促进成纤维细胞的增殖与迁移、血管新生,进而促进皮肤创面修复。     

重组人生长激素在严重烧伤治疗中的应用

目的观察重组人生长激素对严重烧伤患者创面愈合、蛋白质代谢及预后的作用.方法严重烧伤患者36例,随机分成治疗组和对照组各18例,两组患者具有可比性.治疗组患者自术后第1天开始加用重组人生长激素(rhGH)0.2 U/(kg*d),疗程2周,对照组未用rhGH,其它治疗方法基本相同.比较两组患者一般情况、创面愈合及蛋白质代谢情况.结果与对照组相比,rhGH治疗组患者一般情况良好、体重下降减少、供皮区和植皮区创面愈合提前、伤后14 d后血浆蛋白水平明显升高(P<0.05).结论 rhGH能促进蛋白质合成、缩短创面愈合时间,从而提高大面积严重烧伤患者治愈率.     

弹拨牵拉复位法治疗梨状肌综合征疗效观察

目的观察弹拨牵拉复位法治疗梨状肌综合征的疗效。方法将60例梨状肌综合征患者随机分成两组,治疗组30仍运用弹拨牵拉复位法,对照组30例运用传统的温针灸疗法,一个疗程后观察疗效。结果治疗组治愈24例,好转5例,贞效l例,治愈率为80％,总有效率为96．7％;对照组治愈15例,好转10例,无效5例,治愈率为50％,总有效率为83．3％。结论弹拨牵拉复位法是治疗梨状肌综合征的较好方法。,     

不同方式脑缺血再灌注对大鼠海马损伤的实验研究

目的　探讨不同方式脑缺血再灌注对大鼠海马组织损伤程度的影响。方法　大鼠 2 8只随机分组后用动物离心机制作大鼠脑缺血再灌注模型 ,应用卒中指数和神经症状评分、组织学及电镜技术 ,观察±Gz交替和单纯 +Gz对大鼠海马组织的损伤。结果　±Gz组及单纯 +Gz组大鼠在暴露后不同时间 ,卒中指数和神经症状评分均较对照组显著增高 (P <0 .0 5 ) ;光镜观察CA1区变性锥体细胞数 ,±Gz组和单纯 +Gz组显著增多 ,与对照组比较具有非常显著性差异 (P <0 .0 1) ;电镜观察±Gz组与单纯 +Gz组暴露后 6 .0h和2 4 .0h可见大鼠海马CA1区部分神经元及血管出现程度不等的损伤。结论　两种方式的脑缺血再灌注均可造成海马组织较为严重的损伤。     

静态法与动态法测定药物水中溶解度的探讨

目的比较采用静态法与动态法对药物水中平衡溶解度测定结果的影响。方法静态法：超声1 h、25℃水浴恒温24 h,25℃气浴振荡24 h,25℃水浴恒温放置7 d及16 d;动态法：超声1 h、25℃气浴振荡24 h,25℃气浴振荡24 h,25℃水浴搅拌24 h,分别测定布洛芬、盐酸小檗碱、葛根素、对乙酰氨基酚在水中的溶解度。结果 25℃条件下采用静态法及动态法测得药物在水中的平衡溶解度如下：布洛芬为0.067～0.078 mg/mL（RSD11.94%～22.18%）和0.063～0.078 mg/mL（RSD3.2%～7.8%）;盐酸小檗碱为7.072～8.230 mg/mL（RSD3.4%～14.5%）和7.654～9.771 mg/mL（RSD2.2%～5.0%）,葛根素为7.305～9.479 mg/mL（RSD7.5%～14.5%）和6.057～8.046 mg/mL（RSD2.5%～6.8%）;对乙酰氨基酚为8.708～9.771 mg/mL（RSD3.2%～13.6%）和8.965～10.932 mg/mL（RSD1.5%～6.6%）。结论 4种药物在水中的平衡溶解度以动态法重现性较好,其中采用水浴搅拌24 h测得的结果重现性最好,最低RSD值为1.5%;而采用超声与恒温气浴振荡结合法,除溶解度特别小的药物造成误差较大外,基本能满足大部分药物溶解度测定的要求（RSD〈2.5%）,而且,相对于水浴搅拌,该法处理样品量大,可广泛应用。