紫杉醇对PLA801D细胞增殖及凋亡的影响

目的观察不同浓度紫杉醇（TXT）对人肺巨细胞癌高转移株（PLA801D）细胞的影响。方法应用MTT法及流式细胞术检测不同浓度TXT对PLA801D细胞作用后增殖抑制率、细胞周期及凋亡率。结果随作用时间的增加不同浓度TXT对PLA801D细胞增殖均有抑制作用，且呈时间-浓度量效依赖性。随着TXT浓度的增加PLA801D细胞周期亦有明显变化，凋亡率逐渐上升，用药组问比较差异显著（P〈0．05）。结论TXT对PLA801D细胞敏感，可抑制其增殖、改变细胞周期且诱导凋亡。     

氯丙嗪对肺癌高低转移株作用初探

目的：观察不同浓度氯丙嗪对人肺巨细胞癌高低转移株（PLA801D,PLA801C）的作用。方法：应用MTT法检测氯丙嗪对PLA801D,PLA801C的增殖抑制率,用药组设6个浓度,作用时间为24,48 h。结果：除4μg/mL浓度氯丙嗪对PLA801D,PLA801C增殖无明显影响外（P〉0.05）,其余各浓度对两种细胞的增殖均有抑制作用（P〈0.05）。氯丙嗪对PLA801D细胞的作用呈时间-剂量依赖效应;而4,8μg/mL的氯丙嗪对PLA801C细胞仅呈剂量依赖性。结论：在一定浓度范围内,氯丙嗪对PLA801D,PLA801C细胞增殖均有明显抑制作用。     

键合紫杉醇纳米胶束增强替莫唑胺抑制胶质瘤细胞的实验研究

目的在体外研究键合紫杉醇聚合纳米胶束联合替莫唑胺抑制C6胶质瘤的效果和作用机制。方法应用不同浓度的键合紫杉醇聚合胶束及替莫唑胺组合处理C6细胞,应用MTT法观察药物对细胞的增殖抑制作用,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,激光共聚焦显微镜检测caspase-3蛋白的表达。结果相对于键合紫杉醇纳米胶束和替莫唑胺药物分单独别作用,1．25～20μg／ml的键合紫杉醇聚合胶束＋替莫唑胺组可明显抑制C6胶质瘤细胞的增殖（P〈0．01）。且呈明显剂量依赖关系;流式细胞仪检测,键合紫杉醇聚合胶束＋替莫唑胺细胞凋亡率增高（P〈0．01）。激光共聚焦显微镜检测caspase-3蛋白表达。结果联合药物组与键合紫杉醇纳米胶束、替莫唑胺药物组比较,caspase-3表达明显增加（P〈0．01）,结论键合紫杉醇聚合胶束可提高替莫唑胺对C6胶质瘤细胞增殖抑制和诱导凋亡作用,且这种作用是通过上调caspase-3蛋白的表达,诱导凋亡实现的。     

三氧化二砷联合硼替佐米对K562细胞增殖和凋亡的影响及其机制的实验研究

本研究探讨三氧化二砷（As2O3）单独或联合硼替佐米（Bor）对髓系白血病细胞系K562细胞增殖、凋亡的影响及其可能的作用机制。不同浓度的As2O3、Bor处理细胞24、48h,采用MTT比色法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测单用As2O3、Bor及二者联用的细胞凋亡率及细胞周期的变化;免疫组织化学法分析各组核转录因子（NF-κB）的表达水平。结果表明,As2O3（0．1-0．8μmol／L）和Bor（5-50nmol／L）均能抑制K562细胞的增殖,且与作用时间和药物浓度有关,时间越长,浓度越大,抑制越明显（P〈0．05）;Bor和As2O3作用48h的IC50值分别为20nmol／L和0．6μmol／L。As2O3（0．5μmol／L）或Bor（10nmol／L）分别单独处理细胞24h,K562细胞凋亡增加,联合用药组的细胞凋亡率高于单药组（P〈0．01）。As2O3或Bor处理K562细胞6h时细胞周期分布显示：As2O3组细胞阻滞于G0／G1期,Bor组细胞阻滞于G2／M期。As2O3或Bor分别单独处理细胞24h,NF-κB表达阳性率及积分较对照组明显降低（P〈0．05）,联合用药组的NF-κB表达阳性率及积分较As2O3及Bor单用组均明显降低（P〈0．01）。结论：As2O3及Bor单药均可以直接抑制K562细胞增殖,促进凋亡,两药小剂量联合作用后,细胞增殖抑制及促凋亡作用较单药明显增强。细胞周期阻滞点的不同及NF-κB表达的下降可能是As2O3和Bor联用后协同作用的机制之一。     

SEA对PLA801D细胞体外生物学行为影响及相关机制

目的探讨葡萄球菌肠毒素A（stap-hylococcal enterotoxins,SEA）对人肺巨细胞癌株（PLA801D）细胞生长、增殖、凋亡等生物学行为的影响,为人肺癌的生物治疗提供实验依据。方法 MTT比色法检测不同浓度的SEA对PLA801D细胞的增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞周期进程的变化,透射电子显微镜检测PLA801D亚细胞水平改变。结果不同浓度的SEA对PLA801D细胞增殖抑制率分别为22.8%、33.7%和42.1%,与对照组相比差异显著。流式细胞仪结果显示G0/G1期细胞增多,S期细胞减少,G2/M期细胞相对增多,电子显微镜下见PLA801D细胞膜破裂,线粒体肿胀,可见凋亡小体改变。结论 SEA能显著抑制PLA801D细胞的增殖抑制率,抑制G1期向S期细胞转化进程,诱导PLA801D细胞凋亡及亚细胞结构改变。     

细胞色素C对阿糖胞苷诱导白血病细胞凋亡的影响

【目的】探讨细胞色素C（CytC）对小剂量阿糖胞苷（LD-Ara—C）诱导白血病细胞凋亡的影响。【方法】用HL-60白血病细胞株进行传代培养,MTT试验检测Ara—c和Cyt C不同药物浓度对白血病细胞增殖的影响,流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡。【结果】12μg／ml浓度以下的CytC具有促进HL-60细胞增殖的作用,不同浓度的CytC干预后HL-60细胞凋亡率均低于干预前（P〈0．01）。联合应用CytC和LD-Ara—C,HL-60细胞凋亡率明显高于单用LD-Ara—C组（P〈0．01）。【结论】外源性CytC在12μg／ml浓度以下时仅能促进白血病细胞增殖,联合应用CytC和LD-Ara—C可增强LD-Ara—C诱导白血病细胞凋亡的作用。     

蛋白酶体抑制剂硼替佐米联合柔红霉素对HL-60细胞的凋亡作用和Survivin mRNA表达的影响

目的：研究蛋白酶体抑制剂硼替佐米（Bor）单用或联合柔红霉素（DNR）对HL-60细胞凋亡和Survivin mRNA表达的影响。方法：将不同浓度Bor,DNR及两药联合组和对照组作用于HL-60细胞,采用MTT法测定细胞增殖活性,RT—PCR检测Survivin mRNA表达。结果：5nmol／L Bor作用24h对HL-60细胞有增殖抑制作用,并诱导其凋亡。随着浓度增加及其作用时间的延长可使细胞凋亡率明显增加,10nmol／LBor与1．0μmol／L DNR联合作用72h细胞凋亡率最高,与同剂量两药单独作用相比差异有显著性（P〈0．01）。RT—PCR检测结果表明：随着药物浓度的增加,Survivin mRNA的表达逐渐下降,10mmol／L Bor与1．0μmol／L DNR联合作用72h Survivin mRNA表达最低。结论：Bor能显著抑制HL-60细胞的增殖并诱导其凋亡,Bor联合DNR对HL-60细胞有协同作用,并能显著下调Survivin基因的表达,这可能是促使HL-60细胞凋亡的机制之一。     

地塞米松对紫杉醇诱导人卵巢癌细胞株SKOV-3细胞凋亡的影响

目的：探讨地塞米松预处理对紫杉醇诱导卵巢癌细胞凋亡的影响。方法：应用MTT比色法检测地塞米松对紫杉醇抑制细胞增殖的影响,TUNEL法形态学观察细胞凋亡,流式细胞仪PI单染测定地塞米松预处理对紫杉醇诱导人卵巢癌细胞株SKOV-3细胞凋亡及细胞周期的影响。结果：不同浓度地塞米松对紫杉醇抑制SKOV-3细胞增殖有不同程度的拮抗作用,TUNEL分析表明地塞米松预处理后能抑制紫杉醇诱导SKOV-3细胞凋亡,流式细胞仪PI单染法分析表明,用地塞米松预处理后再用紫杉醇组的细胞凋亡率为（5.55±0.53）%,而单用紫杉醇组细胞凋亡率为（13.90±1.62）%,地塞米松进行预处理组细胞凋亡率明显降低（P〈0.01）,且与细胞周期中G2/M期无关。结论：不同浓度地塞米松对紫杉醇抑制SKOV-3细胞增殖有不同程度的保护作用,地塞米松能够拮抗紫杉醇诱导人卵巢癌细胞株SKOV-3细胞凋亡,且与细胞周期中G2/M期无关。     

凋亡抑制基因survivin反义寡核苷酸联合bcl-2反义寡核苷酸诱导肺癌细胞株凋亡的实验观察

目的：探讨凋亡：抑制基因survivin反义寡核苷酸单用或联用bcl-2反义寡核苷酸对肺癌细胞株的作用，探讨其在抗癌方面的作用。方法：①实验于2002-08／2003-04在蚌埠医学院免疫学实验室完成。将对数生长期NCI—H446细胞分为6组：空白对照组，脂质体10mg／L组（仅加空脂质体），NSODN 500nmol／L组（该3组均为对照组），survivin反义寡核苷酸500nmol／L组，bcl-2反义寡核苷酸5μmol／L，survivin反义寡核苷酸500nmol／L＋bcl-2反义寡核苷酸5μmol／L组（分别在脂质体介导下转染不同寡核苷酸，48h后收取细胞进行以下检测）。②在脂质体介导下，以survivin的反义寡核苷酸作用于肺癌细胞株NCI-H446和SPC—A1，于72h用反转录聚合酶链反应检测survivin mRNA表达。凋亡指数：（静止期／DNA合成前期）占整个细胞周期的百分比；增殖指数=（DNA复制期＋合成后期／有丝分裂期）占整个细胞周期的百分比。②survivin反义寡核苷酸单独或联合bcl-2反义寡核苷酸作用NCI—H446后，用四甲基偶氮唑盐法检测细胞生长抑制率并计算两药相互作用指数，锥虫蓝拒染实验检测细胞死亡率。（3）计量资料差异性比较采用方差分析和q检验。结果：①两种肺癌细胞株皆表达survivin基因。survivin反义寡核苷酸作用细胞株后，出现生长抑制和细胞凋亡，细胞survivin mRNA明显下调，反义寡核苷酸500nmol／L作用72h后NCI—H446和SPC—A1细胞survivin mRNA抑制率分别达62．72％和67．43％。②四甲基偶氮唑盐法检测结果显示，survivin反义寡核苷酸和bcl-2反义寡核苷酸单独应用对NCI—H446细胞均有生长抑制作用；联合应用survivin反义寡核苷酸和bcl-2反义寡核苷酸的细胞生长抑制率为64．9％，优于单独应用（单用bcl-2反义寡核苷酸为34．2％）（P〈0．01），两药相互作用指数为0．708。锥虫蓝拒染实验显示，survivin反义寡核苷酸500nmol／L＋bcl-2反义寡核苷酸5μmol／L组细胞死亡率为62．1％，高于两药单用时的31．4％和41．4％。流式细胞仪检测凋亡显示，与各对照组相比，survivin反义寡核苷酸和bcl-2反义寡核苷酸均可诱导细胞凋亡，凋亡率分别为43．6％和30．7％，两者联用凋亡率提高到58．6％（p〈0．01）。结论：①survivin反义寡核苷酸能抑制肺癌细胞株survivin基因表达，并诱导细胞凋亡和抑制生长。②survivin反义寡核苷酸联合bcl-2反义寡核苷酸具有显著协同抗癌作用。     

汉防己甲素联合伊马替尼对K562／G01细胞诱导凋亡作用及其相关机制

本研究探讨伊马替尼（imatinib,IM）和汉防己甲素（tetrandrine,Tet）单用和联合应用对K562／G01细胞的凋亡诱导作用及其可能机制。应用M1fr法检测IM和Tet单用及联合用药对细胞增殖抑制的作用,用流式细胞术（FCM）检测细胞周期和凋亡率,用实时荧光定量PCR检测caspase-3、BCL-2mRNA的表达,应用Westernblot分析caspase-3、BCL-2蛋白的表达情况。结果表明,1．0μmol／LIM和／或1．5μmol／L Tet单用及联合作用于K562／G01细胞48h后,对细胞增殖的抑制率分别是（22．74±0．05）％、（20．34±0．57）％、（44．28±0．60）％,两药联合应用较单药抑制作用明显。流式细胞术检测显示,Tet作用后细胞向G,／s期转化;Tet1．5μmol／L、3μmol／L与1．0μmol／LIM联合应用48h的早期凋亡率分别为（7．81±0．16）％、（14．10±0．28）％,诱导凋亡作用比单药组明显增加。FQ—PCR和Westernblot检测均显示单独应用Tet和IM后caspase-3表达上调,BCL-2表达下调,联合用药组作用更显著。结论：单独应用Tet对K562／G01细胞有诱导凋亡的作用,两药联合应用具有明显的协同效应,且具有时间和剂量依赖性,其机制可能与上调caspase-3mRNA及其蛋白表达和下调BCL-2mRNA及其蛋白的表达有关。     

基于IRAK4/ERK/p38信号通路雷公藤红素对多发性骨髓瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨雷公藤红素对人多发性骨髓瘤细胞增殖和凋亡的影响,并揭示IRAK4/ERK/p38信号通路与雷公藤红素调控H929、ARP-1细胞增殖和凋亡的关系,探究雷公藤红素联合硼替佐米是否具有协同作用。方法:采用CCK-8法检测多发性骨髓瘤细胞株H929、ARP-1细胞经不同浓度雷公藤红素、硼替佐米以及二者联用后的细胞活力,并利用金氏公式判定协同药效。Annexin V/PI法检测H929细胞凋亡率和ARP-1细胞坏死率。蛋白免疫印迹法检测雷公藤红素对IRAK4/ERK/p38信号通路中关键蛋白和凋亡蛋白表达的影响。结果:雷公藤红素能够呈时间-浓度依赖性地显著抑制H929、ARP-1细胞的增殖(r=0.9018,0.9244),并诱导细胞的凋亡;与对照组比较,雷公藤红素能够明显上调H929、ARP-1细胞内PARP、cleaved caspase-3表达,下调p-IRAK4、p-ERK、p-p38表达。雷公藤红素、硼替佐米单用对H929、ARP-1细胞均有增殖抑制作用,而联合用药与单药相比,前者细胞存活率更低,凋亡率更高(P<0.05)。结论:雷公藤红素能抑制H929和ARP-1细...     

Parathyroid cell proliferation in normal and chronic renal failure rats. The effects of calcium, phosphate, and vitamin D.

Secondary hyperparathyroidism is characterized by an increase in parathyroid (PT) cell number, and parathyroid hormone (PTH) synthesis and secretion. It is still unknown as to what stimuli regulate PT cell proliferation and how they do this. We have studied rats with dietary-induced secondary hyper- and hypoparathyroidism, rats given 1,25-dihydroxyvitamin D3 (1,25(OH)2D3) and rats after 5/6 nephrectomy for the presence of PT cell proliferation and apoptosis. PT cell proliferation has been measured by staining for proliferating cell nuclear antigen (PCNA) and apoptosis by in situ detection of nuclear DNA fragmentation and correlated with serum biochemistry and PTH mRNA levels. A low calcium diet led to increased levels of PTH mRNA and a 10-fold increase in PT cell proliferation. A low phosphate diet led to decreased levels of PTH mRNA and the complete absence of PT cell proliferation. 1,25 (OH)2D3 (25 pmol/d x 3) led to a decrease in PTH mRNA levels and unlike the hypophosphatemic rats there was no decrease in cell proliferation. There were no cells undergoing apoptosis in any of the experimental conditions. The secondary hyperparathyroidism of 5/6 nephrectomized rats was characterized by an increase in PTH mRNA levels and PT cell proliferation which were both markedly decreased by a low phosphate diet. The number of PCNA positive cells was increased by a high phosphate diet. Therefore hypocalcemia, hyperphosphatemia and uremia lead to PT cell proliferation, and hypophosphatemia completely abolishes this effect. Injected 1,25 (OH)2D3 had no effect. These findings emphasize the importance of a normal phosphate and calcium in the prevention of PT cell hyperplasia.     

TIEG1对HL-60细胞凋亡及Bcl-2/Bax表达的影响

本研究旨在观察TIEG1对HL-60细胞凋亡及Bcl-2/Bax表达的影响。用不同浓度的TIEG1处理HL-60细胞,采用MTT法检测细胞生长抑制率。用12.03 ng/ml TIEG1处理HL-60细胞,以流式细胞术检测细胞凋亡,以RT-PCR方法检测Bcl-2及Bax的表达变化。结果表明,TIEG1对HL-60细胞具有增殖抑制作用,其抑制效应呈时间及剂量依赖性。TIEG1 12.03 ng/ml增殖抑制作用较为明显。在细胞凋亡过程中,Bax表达呈升高趋势,而Bcl-2呈下降趋势(P<0.05)。结论:TIEG1可以抑制HL-60细胞增殖,进而诱导其凋亡,且呈时间、剂量依赖性。在TIEG1诱导HL-60细胞凋亡的过程中,Bcl-2/Bax与TIEG1诱导HL-60细胞凋亡相关。     

雷公藤内酯醇对伊马替尼耐药的K562/G01细胞增殖抑制及诱导凋亡作用的研究

本研究旨在探讨雷公藤内酯醇对K562/G01细胞增殖抑制和诱导凋亡作用的影响及其可能的机制.MTT法检测伊马替尼、雷公藤内酯醇单药及联合用药对K562/G01增殖的影响;流式细胞术检测细胞周期、细胞凋亡率和P-gp蛋白表达的变化;Western blot分析P-gp蛋白的表达情况;实时荧光定量PCR检测BCR/ABL基因的表达.结果表明：雷公藤内酯醇能增强伊马替尼对K562/G01细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用;雷公藤内酯醇能将细胞阻滞在G1期,下调P-gp蛋白和BCR/ABL基因表达.结论：雷公藤内酯醇对K562/G01细胞有增殖抑制和诱导凋亡作用,其机制可能与细胞周期的G1期阻滞、降低P-gp蛋白表达和抑制BCR/ABL基因表达有关.     

熊果酸对人卵巢癌 SKOV3细胞增殖与凋亡的影响

【目的】探讨熊果酸(Ursolic acid,UA)对人卵巢癌 SKOV3细胞增殖与凋亡的影响。【方法】常规培养人卵巢癌 SKOV3细胞,应用 UA 浓度为5、10、20、40和80μmol/L 分别干预12 h、24 h 和48 h,采用 MTT 法检测细胞增殖;采用流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期变化,应用 Western blot 技术检测细胞周期相关蛋白 P21、CyclinD1的表达水平。【结果】与空白对照组(0μmol/L UA)比较,40和80μmol/L UA 分别作用 SKOV3细胞12 h、24 h 和48 h 后 OD 值均显著降低(P <0.05);10、20和40μmol/L UA 作用24 h 后 SKOV3细胞早期凋亡率、晚期凋亡率和 G0/G1期比率较对照组升高,20和40μmol/L UA 作用24 h 后 SKOV3细胞周期蛋白 Cyclin D1明显降低而 P21水平显著升高(P <0.05)。【结论】体外实验中,UA 可抑制人卵巢癌 SKOV3细胞增殖和促其凋亡,其机制可能与细胞周期蛋白 Cyclin D1表达降低和 P21表达升高有关。     

载顺铂聚乳酸静电纺丝膜对口腔鳞癌细胞的杀伤作用研究

目的 探讨载顺铂聚乳酸静电纺丝膜对口腔鳞癌CAL-27细胞的杀伤作用.方法 利用静电纺丝技术将顺铂（DDP）、聚乳酸（PLA）混合溶液制成载顺铂聚乳酸静电纺丝膜（DDP/PLA膜）.通过扫描电镜（SEM）观察DDP/PLA膜表观形态,紫外分光光度分析法测定PLA膜的降解速率,MTT法观察细胞的增殖活性.实验分为空白对照组,DDP组,PLA膜组,DDP/PLA膜组.结果 SEM可以观察到纳米纤维表面光滑、直径均匀;降解速率显示聚乳酸静电纺丝膜在第一天降解50％左右,以后降解缓慢,在第13天降解趋于完毕;细胞增殖活性结果显示：不含药物的纯膜对细胞基本无影响,不具有统计学意义（P＞0.05）;DDP组、DDP/PLA组抑制细胞增殖活性,有统计学差异（P＜0.05）;实验前3天DDP组作用效果好于DDP/PLA膜组,3天后DDP/PLA膜组作用效果优于DDP组,与DDP组相比,相同剂量的DDP/PLA组对细胞的杀伤作用时间延长.结论 DDP/PLA膜可以杀伤口腔鳞癌CAL-27细胞,3天后的作用效果优于DDP组;DDP/PLA膜具有缓释作用,作用时间较DDP组长.     

尿多酸肽联合亚砷酸对K562细胞凋亡及细胞增殖的影响

【目的】观察尿多酸肽（cDA-2）、亚砷酸、CDA_2与亚砷酸联合体外诱导慢性髓细胞白血病细胞（K562）株凋亡、抑制增殖的作用;探讨CDA-2与亚砷酸联合对诱导K562细胞凋亡及抑制增殖的协同作用。【方法】不同浓度的CDA-2、亚砷酸及二者联合处理K562细胞株,通过MTT比色法检测K562细胞细胞生长率,计算IC50值;应用倒置相差显微镜、A0荧光染色观察细胞凋亡及形态学变化;应用流式细胞术检测细胞凋亡。【结果】①MTT结果显示,在一定的范围内,K562细胞的生长率存在剂量及时间依赖性降低,CDA-2作用K562细胞24h、48h、72h的IC50值分别为75mg／L、59mg／L和37mg／L,亚砷酸作用K562细胞24h、48h、72h的IC50值分别为11．55μmol／L、6．14gmol／L及5．18μmol／L;②荧光染色结果显示,与未加药的对照组相比,二者单药均可促进细胞凋亡,二者联合后凋亡作用更加显著;③流式细胞术显示,cDA-262．5mg／L处理K562细胞24h早期凋亡细胞为（1．77±0．49）％,亚砷酸4umol／L处理K562细胞24h早期凋亡细胞为（1．33±0．58）％,而相同浓度的二者联合用药作用于K562细胞24h早期凋亡细胞为（11．03±0．7）％（P〈0．05）,按照预计效应公式得出,两药联合存在协同作用,且协同作用于24h,两药最低浓度联合时已开始,随着两药浓度的增加,协同作用逐渐增大。【结论】CDA-2、亚砷酸单药及二者联合均可抑制K562细胞株增殖并促进凋亡,二者具有协同作用。     

薏苡仁酯对结肠癌SW480增殖和凋亡的影响

目的观察薏苡仁酯对结肠癌SW480增殖和凋亡的影响。方法结肠癌SW480细胞分为4组,其中A组为对照组,B,C,D组分别在培养基中给予5,10,20mg／L薏苡仁酯处理。采用噻唑蓝比色法检测4组细胞生长情况,流式细胞术检测细胞周期和凋亡情况。结果作用24h后,B,C,D组的抑制率分别为16．43％,22．51％,31．24％,呈剂量依赖关系,与A组比较差异均有统计学意义（P〈O．05）;给药后24hD组细胞G0～G,期比例较A组增高,S期细胞比例较A组降低（P〈O．05）;D组24,48h凋亡率明显高于A组,差异有统计学意义（P（0．05）。结论薏苡仁酯可在体外直接抑制结肠癌细胞的增殖,诱导凋亡,在结肠癌中药防治中有一定作用。