儿童恶性肿瘤患者骨髓涂片人微小病毒B19—DNA的检测

目的：用巢式聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测儿童恶性肿瘤患者骨髓涂片人微小病毒Ｂ１９－ＤＮＡ，以了解此类患儿Ｂ１９感染状况。方法：收集住院期间７１例患有恶性肿瘤疾病的患儿骨髓标本，其中急或慢性白血病５９例，恶性淋巴瘤１２例，对照组非血液系统疾病的患儿骨髓标本２６例行病例对照研究。     

结缔组织病患儿B19病毒感染的意义

目的：研究我国小儿常见结缔组织病患B19病毒感染的状况及其临床意义。方法：用巢式PCR法对95例小儿常见结缔组织病患进行B19－DNA检测，对其中50例患同时进行B19主要衣壳蛋白抗IgM(B19-VP2-IgM）检测。结果：病例组95例，B19－DNA阳性34例（36％），健康对照组50例，B19－DNA阳性2例（4％）；病例组B19－DNA阳性率与对照组相比有显差异（P＜0．01）。病例组B19－VP2－IgM检测50例，阳性11例（22％），健康对照组B19－VP2－IgM均为阴性；B19－VP2－IgM阳性率与对照组相比有显差异（P＜0．01）。5种疾病间B19－DNA及B19－VP2－IgM阳性率无显差异（P＞0．05）。50例患B19－DNA，B19－VP2－IgM同时检测结果：10例B19－DNA，B19－VP2－IgM均阳性，1例仅B19－VP2－IgM阳性，7例仅B19－DNA阳性。病例组B19阳性率为37％（35／95）。结论：我国结缔组织疾病患儿有较高的B19感染率。B19与小儿结缔组织病密切相关，可能是导致这些疾病的主要病原体之一。     

儿童细小病毒B19感染的诊断方法

目的：评价巢式PCR，ELISA，间接免疫荧光法(IIF)诊断B19感染的价值．方法：用ELISA及巢式PCR对129例小儿血液病和结缔组织病患血清进行B19-IgM，DNA检测；用IIF及巢式PCR对50例血液病患骨髓进行B19抗原及DNA检测．结果：病例组129例，血清B19-DNA阳性41例，阳性率31．8％；IgM阳性28例，阳性率21．7％；B19-DNA及IgM同时阳性26例，仅IgM阳性2例，B19感染率为33．3％．对照组50例，B19-DNA阳性率2％，IgM阳性率0％，B19感染率为2％．血液病患50例骨髓B19-DNA阳性17例，阳性率34％；抗原阳性8例，阳性率16％．与巢式PCR相比，ELISA法的灵敏度为63．4％，特异度为97．7％，符合率为86．8％，阳性预告值为( PV)为92．8％，阴性预告值(-PV)为85．1％；IIF法的灵敏度为47．0％，特异度为100％，符合率为82．0％， PV为100％，-PV为78．6％．结论：ELISA及IIF敏感性低于巢式PCR，诊断B19感染时最好同时检测B19-DNA和IgM或抗原．     

EBV—DNA检测在血液肿瘤性疾病中的应用价值

目的：研究探讨EB病毒（EBV）感染与恶性血液病的关系。方法：应用PCR法检测38例血液肿瘤性疾病患儿骨髓细胞EBV－DNA，结果：38例患儿骨髓EBV－DNA阳性检出率71％（27／38），5例恶性淋巴瘤患儿均为阳性，急性白血病，骨髓增生紊乱综合征，再生障碍性贫血，特发性血小板减少性紫癜患儿阳性率较高，其余病例均为阴性，对照组10例非血液病发热患儿仅1例阳性，结论：EBV感染与血液肿瘤性疾病的发生，发展及预后关系密切，EBF感染可促使表恶化或转为难治性，同时对伴有不明原因发热的患儿除考虑肿瘤性发热外，亦应警惕因免疫功能异常导致的EBV易感因素，尽早动态作EBV－DNA检测，及时合理治疗，由于病人免疫力低下，对EBV病毒的免疫应答功能降低，抗体反应法作EBV常造成假阴性结果。本方法简便，快速，特异，敏感，具有重要的临床应用价值。     

类风湿关节炎患者B19病毒感染及细胞因子变化

目的：了解国内类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA)，幼年类风湿关节炎（juvenile rheumatoid arthritis,JRA)患人细小病毒B19（B19）的感染情况及其细胞因子（CK）IL－6，IL－8，sIL-2R和TNF－α水平的变化。方法：采用巢式PCR技术和丧心ELISA法对23例RA及30例JRA患血清（BS），4例JRA，6例骨性关节炎（OA）和9例半月板损伤（MT）关节液（SF）进行B19－DNA和IL－6，IL－8，sIL-2R,TNF-α等CK水平的检测。结果：（1）23例RA，30例JRA患BS B19－DNA均12例阳性，阳性率分别为52．1％和40．0％，与对照组比较差异显（P＜0．05）；（2＿4例JRA患SF中，3例B19－DNA阳性，6例OA和9例MT患均阴性；（3）23例RA，30例JRA患BS中，IL－6,SIL-2R水平与对照组相差非常显（P＜0．05）；（4）23例RA，30例JRA患B19－DNA阳性组与阴性组4种CK比较均无显差异（P＞0．05）；（5）SF标本中，4例JRA患的sIL-2R与其他两组有显差异（P＜0．01）。结果：（1）国内RA，JRA患有较高B19感染率，提示B19感染与RA，JRA密切相关；（2）IL－6 ,sIL-2R与RA，JRA活动性有关，是类风湿活动性的主要指标；（3）sIL-2R可能是参与JRA关节局部病理损伤最主要的CK之一；（4）BS中CK水平的变化与是否感染B19无关，即B19并非是导致RA，JRA的唯一因素。     

88例恶性淋巴瘤预后相关资料分析

目的：了解恶性淋巴瘤（ML）发病、病理及免疫分型特点，探讨基因分型在诊断中的作用。方法：通过标准链菌素生物素－过氧化物酶标记物法（SABC法）对病理标本进行免疫分型，PCR检测病理及骨髓标本IgH（FR2A，3A）和TCR（β，γ）基因重排，同时对临床及病理资料进行多因素分析。结果：（1）ML非霍奇金淋巴瘤（NHL）较霍奇金淋巴瘤（HL）发病率高，发病率随年龄增长而递增，60岁以上发病者占38．6％；其平均生存时间明显低于60岁以下者。（2）B－NHL发病率为68．6％，T－NHL为28．6％；B－NHL的3年生存率高于T－NHL。（3）低度恶性NHL占42％，中、高度恶性占58％；低度恶性组平均生存时间较中、高度恶性组长，但统计学上差异无显著性。生存期分析显示I－Ⅱ期NHL预后明显优于Ⅲ－Ⅳ期。（4）PCR检测病理及骨髓标本的IgH和TCR重排，B－NHL FR2A的阳性率分别为66.7%及56．2％；FR3A阳性率分别为90．4％及81．2％；T－NHL中TCRβ、γ阳性率分别为91．7％及75．0％；病理标本的阳性率略高于骨髓，T、B分型与免疫分型相符。结论：年龄，T、B分型和临床分期是影响NHL预后的重要因素；分子生物学检测作为辅助手段可以肯定免疫分型结果并补充其不足，骨髓及外周血检测除协助分型外可用于肿瘤微小残留病的监测。     

痰简易处理法结合巢式PCR在检测结核杆菌中的应用

作者对106例结核性痰标本采用简易处理法（TET煮沸法）后，再用聚合酶链反应（PCR）检测，阳性率（44．3％）与酚／氯仿抽提法（46．2％）相近（X2＝0．076，P＞0．05），巢式PCR（nested－PCR）阳性率（72．6％）则显著高于PCR（X2＝17．485，P＜0．01），这种差异在涂片和培养均阴性的标本中尤为明显。巢式PCR扩增人结核菌DNA，其敏感性（50fg）为PCR的100倍，但不影响其特异性。21例非结核性痰标本经PCR和巢式PCR检测均为阴性。因而我们认为，TET煮沸法作为痰PCR前处理简易有效，对含菌量较小的标本有必要结合巢式PCR，以提高结核杆菌阳性诊断率。     

骨髓增生异常综合征患儿骨髓人细小病毒B19感染对巨核系祖细胞增殖的影响祆

目的研究骨髓增生异常综合征（MDS）患儿人细小病毒B19（HPVB19）骨髓感染及对巨核系祖细胞增殖的影响。方法对61例MDS患儿骨髓进行HPVB19DNA检测，体外培养巨核细胞集落形成单位祖细胞（CFU-MK）。结果MDS患儿HPVB19骨髓感染组CFU-MK形成较非感染组及对照组明显下降（均P〈0．05）。血小板计数MDSHPVB19骨髓感染组低于非感染组，差异有显著性意义（P〈0．05）。结论HPVB19感染骨髓导致CFU—MK形成减少可能是MDS患儿外周血小板减少的原因之一。     

人类微小病毒B19感染与大肠癌的关系

目的探讨人类微小病毒B19感染与大肠癌的关系。方法收集160例临床已确诊的肠癌病人及120例健康体检者血液标本，采用聚合酶链式反应（PCR）技术进行B19DNA检测。结果160例肠癌病人血标本中，B19DNA阳性为15例（9.38％）；120例健康体检者中B19DNA阳性为1例（0．83％）。差异有显著意义（P〈0．01）。结论肠癌病人微小病毒感染率明显高于健康人群。     

儿童恶性肿瘤与人细小病毒B19DNA的关系探讨

【目的】对儿童恶性肿瘤患者人细小病毒B19DNA的感染状态及其与儿童恶性肿瘤的关系进行探讨。【方法】应用巢式聚合酶链反应(Nest-PCR)技术对97例儿童恶性肿瘤及对照组40例非肿瘤患儿的血标本进行B19DNA检测。【结果】(1)肿瘤组B19DNA阳性率28.9%,与对照组2.50%相比,有显著性差异(P<0.01)。(2)儿童血液系统肿瘤B19DNA阳性率33.8%,其它恶性肿瘤阳性率15.4%,二者比较无显著性差异(P>0.05)。(3)儿童白血病B19DNA阳性率33.9%,恶性淋巴瘤阳性率33.3%,二者有显著性差异(P>0.05)。(4)4例恶性肿瘤患儿化疗前B19DNA阴性,化疗期间检出了B19DNA。(5)B19DNA阳性的恶性肿瘤患儿贫血发生率71.4%,阴性患儿贫血发生率37.7%,二者比较差异非常显著(P<0.01)。【结论】(1)近1/3的恶性肿瘤患儿存在B19感染。(2)儿童血液系统肿瘤更易发生B19感染。(3)B19病毒是导致恶性肿瘤患儿发生慢性贫血和骨髓增生受抑的重要病毒病因之一。(4)B19病毒与儿童恶性肿瘤密切相关。     

淋巴组织增生性疾病组织中检测细小病毒B19的意义

目的;探讨人细小病毒Ｂ１９（ＨＰＶＢ１９）与增生性淋巴组织疾病的相关性。方法：慢性淋巴结炎伴反应性增生４２例,恶性淋疾病的相关性,方法：慢性淋巴结炎伴反应性增４２例,恶性淋巴瘤２９例,结核性淋巴结炎１５例,采用巢式ＰＣＲ技术扩增８６例石包埋活检淋巴结组织Ｂ１９－ＤＮＡ。结果：检出Ｂ１９ＤＮＡ１８例,阳性率为２０．９％,其中慢性淋为检出１５例,阳性率３５．７％;恶性淋巴瘤检出３例,阳民生率为１０．３     

人细小病毒B19感染与再生障碍性贫血的关系

探讨人细小病毒Ｂ１９（Ｂ１９）感染与再生障碍性贫轿的关系。方法应用巢式聚合酶链反应技术检测６０例ＡＡ患者血清中Ｂ１９－ＤＮＡ。结果：Ｂ１９－ＤＮＡ阳性１６例，与正常对照组楷较有非常显著性差异；但儿童对照组比较有非常显著差异；但儿童与成人及急性与慢性ＡＡ间，无显著性差异。结论：Ｂ１９感染与ＡＡ的发生有关。可能是引起人类ＡＡ物的重要病因。     

特发性血小板减少性紫癜患儿血清微小病毒检测

目的 :探讨人微小病毒B19(HPVB19)感染与儿童特发性血小板减少性紫癜 (ITP)发病的关系。方法 :采用聚合酶链反应 (PCR)技术对 4 8例ITP患儿和 32例健康儿童的血清标本进行HPVB19-DNA检测 ,并用酶联免疫法 (ELISA)检测血小板相关抗体。结果 :4 8例ITP患儿血清中HPVB19-DNA阳性率 37.5 % (18/48) ,32例健康儿童HPVB19-DNA均为阴性 ,2组间差异有统计学意义 (P <0 .0 0 5 ) ;ITP组中急性型与慢性型之间HPVB19阳性率差异有统计学意义 (P <0 .0 1) ;病毒感染阳性患儿的血小板相关抗体明显高于病毒感染阴性患儿 ,差异有统计学意义(P <0 .0 1)。结论 :ITP患儿血清中HPVB19-DNA阳性率高 ,尤其是急性型 ;HPVB19感染可导致血小板相关抗体升高而致血小板减少     

人细小病毒B19感染与小儿川崎病的关系

目的: 探讨人细小病毒B19感染与小儿川崎病的关系.方法: 用巢式PCR法对46例川崎病患儿进行B19-DNA检测,用ELISA法对其中的30例患儿进行B19-VP2-IgM检测.结果: 病例组46例,B19-DNA阳性14例(30%),对照组50例B19-DNA阳性2例,两组间差异显著(P<0.01).病例组B19-VP2-IgM阳性7/30例,对照组50例均阴性.两组间差异极显著(P<0.01).30例川崎病患者中B19-DNA,B19-VP2-IgM均阳性6例;1例仅B19-VP2-IgM阳性;4例仅B19-DNA阳性;B19-DNA和B19-VP2-IgM 同时阴性19例,B19-DNA和B19-VP2-IgM 一致率为83.3%,有一致性(P<0.01).B19阳性与阴性川崎病患儿在性别、年龄、常见临床表现、预后等方面无差别.结论: 我国川崎病患儿B19病毒感染率较高可能是导致川崎病的主要病原体之一.     

巢式PCR检测儿童血液病细小病毒B19感染的研究

目的 了解儿童血液病人细小病毒Ｂ１９（ＨＰＶＢ１９）感染的史及其关系。方法 应用巢式聚合酶链反应检测９０例儿童血液病患者「其中再生障碍性盆血（ＡＡ）４０例,特发性血小板减少性紫癜（ＩＴＰ）２４例,急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）１８例,难治性贫血（ＲＡ）８例」血清或骨 ＨＰＶ Ｂ１９－ＤＮＡ,并以３０例健康儿童为对照组。结果 病例组ＨＰＶ Ｂ１９－ＤＮＡ的总阳性检出率为２８．９％（２６／９０）,其中Ａ     

急性特发性血小板减少性紫癜与人细小病毒B19感染的关系

[目的]探讨儿童急性特发性血小板减少性紫癜(ITP)与人细小病毒B 19(HPVB 19)感染的关系.[方法]采用PCR方法对41例急性ITP患儿及40名健康儿童进行HPVB 19-DNA检测.[结果]41例急性ITP患儿中HPVB 19-DNA阳性者为16例,40例健康儿童中HPVB 19-DNA阳性者为4例,急性ITP患儿中HPVB 19-DNA阳性者明显多见于健康儿童.[结论]儿童急性ITP可能与HPVB 19感染有相关性.     

B19病毒对先天性心脏病先天感染的探证及电镜观察

目的 证实部分先天性心脏病（CHD）患者心肌组织中微小病毒B19系先天感染所致,并观察CHD心肌组织超微结构变化。方法 采用ELISA,PCR,原位杂交（ISH）及透射电镜等技术,对42例CHD患者及对照组22例风湿性心瓣膜病患者的外周血,活检心肌组织分别进行B19－VP2－Ig M,B19-DNA的检测,并用透射电镜对心肌细胞的超微结构进行观察。结果（1）CHD组中B19－VP2－IgM阳性3例（7％）,对照组中阳性1例（5％）,两组间无显著差异（P＞0．05）,（2）CHD组中B19－DNA阳性8例（19％）,与对照组均阴性相比有显著性差异（P＜0．01）,且与8例心肌B19－DNA阳性标本配对的血中B19－VP2－IgM的均阴性。（3）ISH显示B19DNA定位于心肌细胞核内,电镜超微结构观察细胞胞质,核内均未见23nm病毒样颗粒,也无细胞器的损害。结论 B19病毒对先天性心脏病的感染系先天性感染所致,病毒基因可能整合于宿主细胞核内。     

人微小病毒B19感染与胃十二指肠疾病的相关性

目的探讨人微小病毒B19感染与胃十二指肠疾病之间的相关性。方法收集139例幽门螺杆菌感染的胃十二指肠疾病患者血液,其中慢性浅表性胃炎65例,消化性溃疡74例;同时收集128例健康体检人群血液作为对照,利用聚合酶链反应法检测两组样本中人微小病毒B19 DNA阳性率。结果 139例胃十二指肠疾病患者中,B19 DNA阳性率为10.07%(14/139),而128例健康体检标本中,B19 DNA阳性率为1.56%(2/128),两组之间差异有统计学意义(P0.01)。比较消化性溃疡组和慢性浅表性胃炎组中B19病毒感染率,结果显示消化性溃疡组病毒阳性率高于慢性浅表性胃炎组(12.16%vs 7.69%),两者与对照组比较差异有统计学意义,但两者间相互比较差异无统计学意义(P0.05)。结论微小病毒B19存在于胃十二指肠疾病患者的血液中,可能与人胃十二指肠疾病的发展密切相关。     

小儿血液系统疾病人细小病毒B_(19)感染的研究

目的:探讨我国西北地区血液系统疾病患儿人细小病毒B19(HPV B19)感染情况及两者的相关性。方法:对特发性血小板减少性紫癜、再生障碍性贫血和白血病患儿的外周血分别采用PCR方法检测HPV B19-DNA和ELISA方法检测HPV B19-IgG。结果:特发性血小板减少性紫癜患儿HPV B19-IgG阳性率为43.08%(28/65),白血病患儿HPV B19-IgG阳性率为41.07%(46/112),病例组较对照组比较有极显著性差异(P<0.01);再生障碍性贫血患儿HPV B19-IgG阳性率为21.43%(6/28),病例组较对照组比较有显著性差异(P<0.05)。65例特发性血小板减少性紫癜患儿HPV B19-DNA阳性率为40.00%(26/65);28例再生障碍性贫血患儿HPV B19-DNA阳性率为21.43%(6/28);112例白血病患儿HPV B19-DNA阳性率为27.68%(31/112);对照组HPV B19-DNA检测均为阴性。结论:HPV B19感染与我国西北地区部分血液系统疾病患儿发病相关。